实验三细胞凝集反应

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细胞凝集反应实验报告 山东大学

细胞凝集反应实验报告 山东大学

科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应细胞凝集反应【实验目的】1.了解细胞膜的表面结构;2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理;3.学习研究细胞凝集反应的方法。

【实验原理】1.凝集素凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖转移结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。

常用的为植物凝集素,通常一起被提取的植物命名,如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等,凝集素是他们的总称。

在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(又称为糖萼)。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接,在细胞间形成“桥”,从而引起细胞凝集。

凝集素引起的血细胞凝集,其细胞膜结构没有发生变化,与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同;另外,凝集素能与不同的糖蛋白特异结合,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集,但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,因此,Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。

人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理,识别和研究不同类型膜结构的生物学特征,以及进行血型鉴定。

ABO血型鉴定主要用于临床输血,在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体;不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。

另外,凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。

如:植物凝集素可抑制受精;芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性,减少HIV感染者的病毒载量;细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关,凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测,有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。

2.细胞凝集细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。

细胞凝集胞实验报告

细胞凝集胞实验报告

实验1.血细胞凝集Lab1.Blood cell agglutination摘要:细胞凝集指的是细胞与细胞之间通过某种凝集素的作用而相互粘连在一起的现象,最终形成大的细胞团块。

而凝集素由于可使细胞凝集而成为一种重要实验和临床试剂。

本次实验就是通过进行对兔血细胞的凝集操作,观察细胞凝集现象,并掌握凝集素促进细胞凝集的实验原理和操作方法。

关键词:细胞凝集、凝集素前言:凝集素是一类能专一识别糖并与之非共价可逆结合的非酶非抗体蛋白质。

凝集素是指从各种植物、无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红细胞,故名凝集素。

凝集素按来源可分为植物凝集素、动物凝集素和微生物凝集素三大类;植物凝集素分为7个家族:豆科凝集素、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、2型核糖体失活蛋白、木菠萝素家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素;动物凝集素按分子结构分为C-型凝集素、S-型凝集素、P-型凝集素、I-型凝集素等。

在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出的寡糖链,形成细胞外被(又称为糖萼)。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接,在细胞间形成“桥”,从而引起细胞凝集。

其反应机制如下图:凝集素在生化、医学等方面有广泛的应用:1.凝集素在实验室中经常被用来分离、纯化蛋白质植物凝集素的功能是结合细胞表面上的糖蛋白,动物凝集素的功能包括结合可溶性的细胞外或细胞内糖蛋白。

凝集素在实验室中经常用来分离、纯化糖蛋白。

这是由于植物凝集素能专一性地、非共价地可逆结合糖蛋白中不同类型的糖链结构,所以首先分别用凝集素亲和层析方法分离富集正常细胞和癌细胞的细胞裂解液中的糖蛋白,从细胞裂解物中高通量的分离出N-糖苷键型糖蛋白之后,再利用双向凝胶电泳技术对于被凝集素吸附的糖蛋白进行分离,最后利用质谱技术进行鉴定。

2.凝集素介导细胞与细胞、细胞与基质的粘附选凝素是一类Ca2+依赖的、能与特异糖基识别并结合的细胞粘附分子,主要介导白细胞与血管内皮细胞或血小板的识别和粘附。

细胞凝集反应实验报告

细胞凝集反应实验报告

细胞生物学实验报告一.实验名称:细胞凝集反应二.实验原理:细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被.目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。

凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。

常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等,凝集素是它们的总称。

凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,它们具有的某些“亲合”特性,能被免疫细胞化学技术方法所应用。

血型鉴别实验,也是凝集反应的一种。

三.实验用品:土豆块茎显微镜,粗天平,载玻片,滴管2支,离心管2支PBS缓冲液:称取NaCl7.2g,Na2HPO41。

48g,KH2PO40。

43g,加蒸馏水,定容至1000ml,调pH值到7.2.4。

2%的红细胞四.实验步骤:1.称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

2.以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),加生理盐水3ml,在1000r/min,离心5min,重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。

3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。

4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴,置双凹片右孔内,充分混匀,做对照实验。

凝集反应实验报告

凝集反应实验报告

凝集反应实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过观察凝集反应的过程和结果,了解凝集反应的基本原理和特点,掌握凝集反应的实验方法和技巧。

二、实验原理。

凝集反应是指在特定条件下,抗原与抗体结合形成凝集物质的现象。

凝集反应的原理是抗原与抗体结合后形成免疫复合物,使得溶液中的颗粒物质凝聚成大颗粒,从而导致溶液浑浊或沉淀。

凝集反应是免疫学中常用的实验方法,也是许多免疫学检测方法的基础。

三、实验材料和方法。

1. 实验材料,抗原溶液、抗体溶液、生理盐水、试管、移液器、离心管等。

2. 实验方法:(1)取一定量的抗原溶液和抗体溶液分别加入不同的试管中;(2)将试管摇匀,使抗原和抗体充分混合;(3)观察试管中是否出现凝集物质,并记录下实验结果。

四、实验结果与分析。

经过实验观察,我们发现在抗原与抗体混合后,部分试管中出现了凝集物质,而另一部分试管中则未出现凝集物质。

这说明凝集反应的产生是由于抗原与抗体之间的特异性结合所致。

当抗原与抗体结合后,免疫复合物的形成导致了溶液中颗粒物质的凝聚,从而产生了凝集反应。

五、实验总结。

通过本次实验,我们对凝集反应的原理和特点有了更深入的了解。

凝集反应是一种重要的免疫学现象,它在许多免疫学检测方法中起着关键作用。

掌握凝集反应的实验方法和技巧,对于进一步开展免疫学研究具有重要意义。

六、实验注意事项。

1. 实验操作时要注意实验材料的保存和使用方法,避免污染和损坏;2. 实验过程中要严格按照实验方法进行操作,避免实验结果的偏差;3. 实验后要及时清洗和消毒实验器具,保持实验环境的整洁和卫生。

七、参考文献。

1. 张三,李四. 免疫学实验技术. 北京,科学出版社,2005.2. 王五,赵六. 免疫学实验指南. 上海,上海科学技术出版社,2008.以上就是本次凝集反应实验的实验报告,希望能对大家有所帮助。

凝集实验的实验报告

凝集实验的实验报告

一、实验目的1. 掌握凝集实验的基本原理和方法;2. 熟悉凝集实验的操作步骤;3. 通过实验,了解凝集反应在临床诊断中的应用。

二、实验原理凝集实验是一种基于抗原与抗体特异性结合的免疫学检测方法。

当抗原与相应抗体在适当条件下结合时,可形成肉眼可见的凝集现象。

凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应两种。

直接凝集反应是指颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体在体外直接结合而出现的凝集反应。

间接凝集反应是指将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面,然后与相应的抗体结合,出现凝集现象。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:显微镜、玻片、试管、移液器、离心机、恒温水浴箱等;2. 试剂:抗原、抗体、生理盐水、0.85%NaCl溶液、抗凝剂、玻片洗涤液等。

四、实验步骤1. 直接凝集实验(1)取清洁玻片,用生理盐水滴加在玻片上;(2)用移液器取抗原,滴加在生理盐水滴中,混合均匀;(3)用移液器取抗体,滴加在抗原滴中,混合均匀;(4)观察凝集现象,记录结果。

2. 间接凝集实验(1)取清洁试管,加入适量的抗凝剂;(2)加入已知浓度的抗原,混匀;(3)用移液器取抗体,滴加在抗原溶液中,混匀;(4)加入与抗体结合的颗粒性载体,混匀;(5)观察凝集现象,记录结果。

五、实验结果与分析1. 直接凝集实验结果:观察到的凝集现象为红细胞或细菌在玻片上形成明显的团块。

2. 间接凝集实验结果:观察到的凝集现象为颗粒性载体在试管中形成明显的团块。

六、实验总结本次实验通过直接凝集和间接凝集实验,验证了凝集反应在免疫学检测中的应用。

实验结果表明,凝集反应可以有效地检测抗原与抗体之间的特异性结合。

在实际应用中,凝集实验可以用于病原微生物的鉴定、血型鉴定、血清学诊断等领域。

七、注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染;2. 实验试剂和仪器需保持清洁,避免污染;3. 观察凝集现象时,注意光线、角度等因素的影响;4. 实验结果记录准确,便于分析。

细胞反应凝集实验报告

细胞反应凝集实验报告

一、实验目的1. 了解细胞凝集反应的基本原理。

2. 掌握细胞凝集反应的实验操作方法。

3. 观察和分析细胞凝集现象。

二、实验原理细胞凝集反应是指细胞在特定条件下,由于细胞膜表面分子间的相互作用,导致细胞相互聚集的现象。

凝集反应在医学、生物学等领域具有重要的应用价值,如血型鉴定、病原体检测等。

本实验采用凝集素作为凝集剂,通过观察红细胞凝集现象,了解细胞凝集反应的基本原理。

三、实验材料与用品1. 试剂:红细胞悬液、PBS缓冲溶液、0.9%氯化钠溶液、不同浓度的凝集素溶液、蒸馏水。

2. 仪器:离心机、移液器、试管、显微镜等。

四、实验步骤1. 准备红细胞悬液:将一定量的红细胞加入适量的生理盐水中,混匀后离心,弃去上清液,加入适量PBS缓冲溶液重悬细胞。

2. 设置实验组:取3支试管,分别加入等量的红细胞悬液。

3. 加入凝集素:在第一支试管中加入一定量的低浓度凝集素溶液,第二支试管中加入等量的中浓度凝集素溶液,第三支试管中加入等量的高浓度凝集素溶液。

4. 观察细胞凝集现象:静置一段时间后,观察各试管中红细胞的凝集情况,记录结果。

5. 加入蒸馏水:取3支新的试管,分别加入等量的红细胞悬液。

6. 加入凝集素与抑制剂:在第一支试管中加入一定量的凝集素溶液和适量的抑制剂,第二支试管中加入等量的凝集素溶液和双倍量的抑制剂,第三支试管中加入等量的凝集素溶液和三倍量的抑制剂。

7. 观察细胞凝集现象:静置一段时间后,观察各试管中红细胞的凝集情况,记录结果。

五、实验结果与分析1. 实验组:随着凝集素浓度的增加,红细胞凝集现象逐渐明显。

低浓度凝集素溶液中红细胞凝集较少,中浓度凝集素溶液中红细胞凝集较多,高浓度凝集素溶液中红细胞几乎全部凝集。

2. 抑制剂组:在加入抑制剂后,红细胞凝集现象明显减弱。

当抑制剂浓度为凝集素浓度的1倍时,红细胞凝集现象减弱;当抑制剂浓度为凝集素浓度的2倍时,红细胞凝集现象进一步减弱;当抑制剂浓度为凝集素浓度的3倍时,红细胞几乎不发生凝集。

凝集试验实验报告

凝集试验实验报告

凝集试验实验报告凝集试验实验报告引言:凝集试验是一种常用的实验方法,用于检测血液凝集性的指标。

本次实验旨在通过凝集试验的操作和观察,了解血液凝集性的变化规律,并探讨其与人体健康状况的关系。

实验材料与方法:1. 实验材料:- 血液样本:采集自20名健康人士的静脉血样本。

- 凝集试验试剂:包括抗凝剂、红细胞凝集试剂等。

- 试验仪器:包括离心机、显微镜等。

2. 实验方法:- 步骤一:采集血液样本,并在离心机中离心10分钟,得到血浆。

- 步骤二:将血浆分成多个试管,并加入不同浓度的红细胞凝集试剂。

- 步骤三:观察试管中红细胞的凝集情况,记录下凝集程度。

- 步骤四:重复实验,得到多组数据,进行数据统计与分析。

实验结果与讨论:通过实验观察,我们得到了一系列关于血液凝集性的数据。

在红细胞凝集试剂浓度逐渐增加的情况下,我们观察到了血浆中红细胞的凝集现象。

随着试剂浓度的增加,红细胞凝集的程度也逐渐加强。

这表明,红细胞凝集性与试剂浓度呈正相关关系。

进一步分析数据,我们发现不同个体之间的血液凝集性存在差异。

有些人的血浆中红细胞凝集较为明显,而有些人则几乎没有凝集现象。

这可能与个体的生理状况、遗传因素等有关。

然而,本次实验的样本量较小,无法得出明确的结论。

未来的研究可以考虑扩大样本量,进一步探究血液凝集性与个体差异之间的关系。

此外,我们还观察到了血浆中红细胞凝集的时间变化规律。

在试剂加入后的最初几分钟,红细胞凝集的程度逐渐增加。

然而,随着时间的推移,凝集程度逐渐趋于稳定。

这可能是由于试剂与血浆中的某些成分发生反应,导致红细胞凝集的过程达到平衡。

这一发现为凝集试验的操作提供了一定的时间窗口,使实验操作更加灵活和方便。

结论:通过本次实验,我们了解了凝集试验的操作方法,并观察到了血液凝集性的变化规律。

血液凝集性与试剂浓度、个体差异以及时间等因素密切相关。

然而,本次实验仅为初步探索,还有许多问题有待进一步研究。

凝集试验作为一种常用的实验方法,在医学研究和临床诊断中具有重要的应用价值,未来的研究可以进一步深入探究血液凝集性与人体健康状况之间的关系,为疾病预防和治疗提供更多的参考依据。

细胞凝集反应 实验报告

细胞凝集反应 实验报告

姓名董朔晖系年级生命科学院2011级学号201100230164 科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应日期2012.2.23实验一:细胞凝集反应一、实验目的1、了解细胞的表面结构。

2、掌握细胞凝集的原理。

3、掌握细胞凝集实验的操作方法。

4、掌握普通光学显微镜的使用方法。

二、实验材料1、实验材料家兔(或2%家兔红细胞悬液)、土豆块茎(或由土豆块茎制作的可溶性土豆凝集素粗提取液)、PBS缓冲溶液(磷酸缓冲溶液)、柠檬酸钠溶液、0.9%的氯化钠溶液(生理盐水)2、实验器材5ml注射器、酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管三、实验原理1、在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(糖萼)。

目前认为,细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。

2、凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,即糖蛋白,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的作用,从而凝集细胞。

凝集素引起的细胞凝集,其细胞膜结构没有发生改变。

与血液凝固中发生的复杂生化反应完全不同。

3、竞争性抑制实验:凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞凝集。

四、实验步骤1、2%家兔红细胞悬液制备:以无菌方法抽取家兔耳缘静脉血液1ml (5ml注射器中先吸取3ml柠檬酸钠溶液),用0.9%的氯化钠溶液洗5次,3000r/s离心5min,最后按沉淀的红细胞体积用0.9%的氯化钠溶液配成2%的红细胞悬液。

2、土豆凝集素制备:称取去皮土豆块茎2g,切成薄片,加10mlPBS 缓冲液,浸泡2h,浸出粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

3、细胞凝集反应:双凹片土左侧滴土豆凝集素1滴,2%家兔红细胞悬液1滴;右侧滴PBS缓冲液1滴,2%家兔红细胞悬液1滴。

在双凹片上混匀,摇动。

4、低倍镜下观察。

五、实验结果1、实验结论2、实验照片①、肉眼观察实验组对照组加入土豆凝集素的红细胞5min 加入土豆凝集素的红细胞5min加入土豆凝集素的红细胞10min 加入土豆凝集素的红细胞10min ②、低倍镜观察(10×4)实验组对照组加入土豆凝集素的红细胞10min 加入土豆凝集素的红细胞10min六、实验反思1、在使用双凹片的过程中因操作不熟练,经常造成两个孔中的液体混合。

实验三----ABO血型鉴定

实验三----ABO血型鉴定

实验三ABO血型鉴定一、实验目的1、学习鉴别血型的方法2、观察红细胞凝集现象二、实验原理血型是指红细胞的血型,是根据存在于红细胞膜外表面的特异性抗原来确定的,这种抗原是由遗传基因决定的。

血清中的抗体可与红细胞膜上的不同抗原结合,产生凝集反应,最后发生红细胞的溶解。

ABO血型系统根据受试者红细胞上是否含有凝集原和凝集原的种类,将血型分为A, B, O及AB型。

ABO血型鉴定是将受试者红细胞分别加入到标准A型血清、标准B型血清中进行鉴定。

三、实验材料一次性采血针、消毒牙签、玻璃棒、标准抗A血清、标准抗B血清、75%酒精、酒精棉球、载玻片四、实验步骤1、将载玻片洗干净,擦干,不能留有水分,以防溶血。

2、在载玻片上滴上抗A血清、抗B血清。

旁边放置两个消毒牙签。

3、用酒精棉球消毒无名指,等酒精挥发后,用采血针采血,将血液分别滴入血清中,再用牙签混合,室温下静置10~15分钟,观察凝集现象。

五、试验结果1、只在抗A血清中有凝集反应,则血型为A型;2、只在抗B血清中有凝集反应,则血型为B型;3、在抗A及抗B血清中均有凝集反应,则血型为AB型;4、在抗A及抗B血清中均无凝集反应,则血型为O型。

3、通过活动,使学生养成博览群书的好习惯。

B比率分析法和比较分析法不能测算出各因素的影响程度。

√C采用约当产量比例法,分配原材料费用与分配加工费用所用的完工率都是一致的。

XC采用直接分配法分配辅助生产费用时,应考虑各辅助生产车间之间相互提供产品或劳务的情况。

错C产品的实际生产成本包括废品损失和停工损失。

√C成本报表是对外报告的会计报表。

×C成本分析的首要程序是发现问题、分析原因。

×C成本会计的对象是指成本核算。

×C成本计算的辅助方法一般应与基本方法结合使用而不单独使用。

√C成本计算方法中的最基本的方法是分步法。

XD当车间生产多种产品时,“废品损失”、“停工损失”的借方余额,月末均直接记入该产品的产品成本中。

实验三细胞凝集反应

实验三细胞凝集反应

2.间接凝集反应
将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无 关的、一定大小的颗粒状载体的表面,然后与相应 抗体(或抗原)作用。在有电介质存在的适宜条件 下,即可发生凝集,称为间接凝集反应。用做载体 的微球可用天然的微粒性物质,如人(O型)和动 物(绵羊、家兔等)的红细胞、活性炭颗粒或硅酸 铝颗粒等;也可用人工合成或天然高分子材料制成, 如聚苯乙烯胶乳微球等。由于载体颗粒增大了可溶 性抗原的反应面积,当颗粒上的抗原与微量抗体结 合后,就足以出现肉眼可见的反应,敏感性比直接 凝集反应高得多。
② 用1.5ml的离心管取血液1ml,2000rpm 离心5min,用移液器轻轻吸取上清去除; 加入1ml生理盐水清洗红细胞,2000rpm离 心5min,重复洗2—3次(注:从离心机内 拿出离心管时切勿震荡,不要倾倒离心管 倒上清,以免红细胞流出。清洗红细胞时 用移液器缓缓抽打,防止红细胞破裂)。
③ 在小试剂瓶中加入9.8ml生理盐水,用移 液器吸取200μl血红细胞加入小试剂瓶中, 混匀,即是2%的红细胞悬液,贴上标签备 用(注:吸取红细胞加入试剂瓶时可吸取 生理盐水清洗几次吸头,使得红细胞全部 在悬液中)。
凝集反应现象 用移液器吸取红细胞悬液,在三片载玻片 上各滴一滴,其中一片加一滴土豆凝集素, 一片再加一滴PBS缓冲液,充分混匀,另 外一片只有红细胞悬液做空白对照,盖上 盖玻片,待干后于显微镜下观察血细胞凝 集现象(注:红细胞悬液放置一段时间会 发生沉降,取用之前应当轻轻摇匀)。
鸡 血 红 细 胞 非 哺 乳 类
( )
凝血
图2 左图为红细胞未发生凝集,右图为加入土豆凝集 素红细胞发生凝集 如图左所示,显微镜下观察到红细胞是分散的;加 入土豆凝集素后红细胞就发生凝集,由于许多的红 细胞凝集,重叠一起使得颜色变得更深。

免疫学凝集反应实验报告

免疫学凝集反应实验报告

免疫学凝集反应实验报告一、实验目的本实验旨在通过免疫学凝集反应实验,了解抗原-抗体反应的基本原理,掌握凝集反应的方法和技巧。

二、实验原理1. 抗原-抗体反应抗原是指能够诱导机体产生特异性免疫反应的物质,通常是蛋白质、多糖或脂质等大分子化合物。

当抗原进入机体后,会刺激机体产生相应的抗体,抗体与抗原结合形成复合物,从而发挥免疫作用。

2. 凝集反应凝集反应是指在特定条件下,由于抗原与抗体结合形成可见的凝集现象。

这种现象可以用于检测血清中是否存在某种特定的抗体或抗原。

三、实验步骤1. 制备试剂将所需试剂按比例配制好,并进行必要的消毒处理。

2. 样品处理将待测样品进行必要的处理,如离心、稀释等。

3. 加入试剂将样品加入已经配制好的试剂中,并混匀。

4. 观察结果观察混合液是否出现凝集现象,并记录结果。

四、实验注意事项1. 实验过程中应严格按照操作规程进行,避免操作失误。

2. 试剂的配制和消毒处理应注意卫生和安全。

3. 样品处理时应注意离心速度和时间,避免对样品造成损伤。

4. 操作时应注意洁净卫生,避免污染试剂和样品。

五、实验结果分析通过本次实验,我们成功地观察到了抗原-抗体反应产生的凝集现象。

根据观察结果,我们可以判断待测样品中是否存在特定的抗体或抗原。

此外,在实验过程中我们也掌握了凝集反应的方法和技巧,并了解了抗原-抗体反应的基本原理。

六、实验结论通过本次免疫学凝集反应实验,我们深入了解了抗原-抗体反应的基本原理,并掌握了凝集反应的方法和技巧。

这对于我们今后在医学、生物学等领域开展相关研究具有重要意义。

植物凝集素对红细胞的凝集反应

植物凝集素对红细胞的凝集反应

六、思考和讨论:
未溶血 溶血
植物材料马铃薯和韭菜的凝集效率差异:可用凝集细胞占总 细胞的比率、细胞产生凝集反应所需要时间作为比较依据。
下一次实验内容
“实验4 细胞骨架(微丝)的观察”
根据附录10和量得的溶液体积(韭菜研磨过滤后的溶液): (1)能否计算出达到60%硫酸铵饱和度时硫酸铵的质量(g)? (2)硫酸铵有60%饱和度提高到80%饱和度时又当如何计算?
注:硫酸铵应当一边 溶解,一边搅拌,直 至完全溶解,杜绝把 硫酸铵全部一下子都 加入溶液中。
四、实验操作 3. 细胞膜的渗透性
二、实验原理
细胞膜的渗透性
( 1 ) 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障 ,是一种半透膜,使细胞具有相对稳定的内环境,同时在细 胞与环境之间的物质运输、能量交换及信息传递过程中也起 着重要作用。
( 2 ) 将红细胞放入低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内 ,可以使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,由不透明的红 细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这种现象成为溶血 (hemolysis)。 ( 3 ) 由于溶质透入速度不同,溶血时间也不同,因此,发 生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度 的指标。
实验(三)植物凝集素对红细胞的 凝集反应与细胞膜的渗透性
一、实验目的 (1)了解细胞发生凝集反应的原理; (2)了解凝集素的生物学功能; (3)了解溶血现象及其发生机制。 (4)了解细胞膜的渗透性及各类物质进入
细胞的速度。
二、实验原理
植物凝集素 1. 植物凝集素最早发现于1888年,Stillmark在蓖麻籽萃取物中发 现了一种细胞凝集因子,它具有凝集红细胞、淋巴细胞、纤维细 胞等作用。 2. 凝集素(lectin)是一类具有特异糖结合活性的蛋白,具有一个 或多个可以与单糖或寡糖特异可逆结合的非催化结构域,能识别 糖蛋白和糖脂中,特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构,即细 胞膜表面的糖基。 3. 一种凝集素具有只对某一种特异性糖基专一性结合的能力,通 过与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”,从而使多个细 胞聚集成团块状,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞发生凝集。

细胞凝集反应实验报告.doc

细胞凝集反应实验报告.doc

细胞凝集反应实验报告.doc一、实验目的1. 学习细胞凝集反应的原理。

2. 了解细胞凝集反应在临床上的应用。

3. 掌握细胞凝集反应实验的操作方法。

二、实验原理细胞凝集反应是一种反应类型,指的是在一定条件下,由于细胞表面特异性抗原与相应的抗体作用而发生的细胞凝集现象。

细胞凝集反应可以用于检查人体中的免疫球蛋白水平和相关抗体。

在实验中,将悬浮的红细胞或细胞制备与抗体反应,出现凝集反应。

如果一定量以上的抗体和抗原完全结合,会出现凝集现象。

三、实验材料1. 抗D血清2. D型血样本3. 生理盐水4. 干净玻璃杯5. 长度游程法(gel card)四、实验步骤1. 用生理盐水洗净一只净化的碗形玻璃杯,待玻璃杯干后添加一滴抗D血清。

2. 取一滴D型血样本,在玻璃杯中滴入,使用棉签进行混合,保持1-2分钟。

3. 将金属片向右移置顶端,放置长度游程法中,等待5分钟。

4. 取下金属片,用水龙头用水冲洗一下杯子,然后轻晃地使用放置良久来确定观测结果。

五、实验结果实验结果显示,抗D血清与D型血样本发生了凝集反应,证明D型血中含有D抗原。

六、实验结果分析细胞凝集反应是指特异性抗原与相应抗体作用而发生的细胞凝集现象,其过程即是抗体-抗原复合物形成的过程。

在实验中,我们用D型血样本制备、加入抗D血清,如果出现凝集,就表明血样本中包含D抗原。

所以,这项实验可用于D型血型检测,具有较高的准确性和敏感性。

七、实验注意事项1. 实验中使用的玻璃器皿要干净,以免干扰结果。

2. 棉签和金属片一定要干净,以保证实验的准确性。

3. 实验时需要严格遵守生物安全操作规范,以避免因操作不当而引发的感染。

八、实验心得通过这次实验,我学习并熟悉了细胞凝集反应的基本原理和实验操作方法,并了解了其在临床上的应用。

通过自己亲身操作,我发现在实验过程中,加入的抗原和抗体浓度、反应时间等因素都会影响到实验结果,需要仔细掌握并操作。

同时,在实验中,我们也应严格遵守实验操作安全规范,以确保实验的准确性和安全性。

凝集反应的实验报告

凝集反应的实验报告

凝集反应的实验报告凝集反应的实验报告一、引言凝集反应是一种常见的化学反应,其在生活中有着广泛的应用。

本实验旨在通过观察凝集反应的现象和机理,深入了解其原理和应用。

二、实验目的1. 观察凝集反应的现象;2. 探究凝集反应的机理;3. 分析凝集反应的应用。

三、实验材料和方法1. 实验材料:- 3% 的聚丙烯酰胺溶液;- 0.1% 的铁(III)氯化物溶液;- 蒸馏水。

2. 实验方法:1) 取一定量的聚丙烯酰胺溶液倒入试管中;2) 分别向试管中滴加适量的铁(III)氯化物溶液;3) 观察凝集反应的现象,并记录下实验结果。

四、实验结果在实验过程中,我们观察到了以下现象:1. 随着铁(III)氯化物溶液的滴加,聚丙烯酰胺溶液逐渐发生凝集;2. 凝集物的颜色由无色逐渐变为深蓝色;3. 凝集物的体积逐渐增大。

五、实验分析1. 凝集反应的机理凝集反应是指溶液中的物质在加入适量的某种试剂后,形成固体颗粒或胶体物质的过程。

在本实验中,聚丙烯酰胺溶液中的聚合物链通过铁(III)离子的作用,发生交联反应,形成大分子凝胶。

这种凝胶的形成是由于聚合物链之间的相互作用力增强,导致分子聚集形成团簇。

2. 凝集反应的应用凝集反应在生活中有着广泛的应用。

以下是几个常见的应用领域:- 污水处理:凝集反应可以用于污水处理中的絮凝作用,通过添加适量的凝集剂,可以使悬浮在水中的微小颗粒聚集成大颗粒,从而便于沉淀和过滤。

- 药物制剂:凝集反应可以用于药物制剂中的胶体稳定剂,通过添加适量的胶体稳定剂,可以防止药物颗粒的凝聚和沉淀,保持药物的分散性和稳定性。

- 石油开采:凝集反应可以用于石油开采中的油水分离,通过添加适量的凝集剂,可以使石油中的微小油滴凝聚成大滴,从而便于分离和提取。

六、实验总结通过本次实验,我们深入了解了凝集反应的现象和机理,并分析了其在生活中的应用。

凝集反应作为一种常见的化学反应,具有重要的实际意义和应用价值。

通过进一步的研究和探索,我们可以更好地利用凝集反应的特性,应用于环境治理、药物制剂和石油开采等领域,为人类的生活和发展做出更大的贡献。

凝集反应实验报告

凝集反应实验报告

一、实验目的1. 了解凝集反应的基本原理及类型。

2. 掌握凝集反应实验的操作方法。

3. 学会观察和分析凝集反应现象。

二、实验原理凝集反应是指颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与相应特异性抗体结合,在适量电解质存在的条件下,形成肉眼可见的凝集现象。

凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应。

直接凝集反应:颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象。

例如,玻片凝集试验、试管凝集试验等。

间接凝集反应:将可溶性抗原吸附于红细胞表面,形成致敏红细胞,再与相应抗体结合,出现凝集现象。

例如,间接血球凝集试验等。

三、实验材料与用品1. 试剂:生理盐水、抗血清、抗原、致敏红细胞等。

2. 仪器:试管、试管架、吸管、滴管、显微镜等。

四、实验步骤1. 玻片凝集试验(1)取两片洁净的玻片,分别标上“抗原”和“对照”。

(2)在“抗原”玻片上滴加生理盐水1滴,在“对照”玻片上滴加抗血清1滴。

(3)用滴管分别吸取抗原和抗血清,涂于相应的玻片上。

(4)轻摇玻片,静置数分钟,观察结果。

2. 试管凝集试验(1)取两支试管,分别标上“抗原”和“对照”。

(2)在“抗原”试管中加入生理盐水1ml,在“对照”试管中加入抗血清1ml。

(3)用滴管分别吸取抗原和抗血清,加入相应的试管中。

(4)用试管架固定试管,轻轻摇匀,观察结果。

3. 间接血球凝集试验(1)取三支试管,分别标上“抗原”、“抗体”和“对照”。

(2)在“抗原”试管中加入生理盐水1ml,在“抗体”试管中加入抗血清1ml,在“对照”试管中加入生理盐水1ml。

(3)用滴管分别吸取抗原、抗体和生理盐水,加入相应的试管中。

(4)用试管架固定试管,轻轻摇匀,观察结果。

五、实验结果与分析1. 玻片凝集试验观察玻片上的凝集现象,若出现肉眼可见的凝集物,则为阳性反应;若无凝集现象,则为阴性反应。

2. 试管凝集试验观察试管中的凝集现象,若出现肉眼可见的凝集物,则为阳性反应;若无凝集现象,则为阴性反应。

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2、显微镜下观察实验结果
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未凝血
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( )
乳鸡 类血
红 细 胞 非 哺
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凝血
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图2 左图为红细胞未发生凝集,右图为加入土豆凝集
素红细胞发生凝集
如图左所示,显微镜下观察到红细胞是分散的;加
入土豆凝集素后红细胞就发生凝集,由于许多的红
细胞凝集,重叠一起使得颜色变得更深。
2、2%鸡血红细胞的制备 ① 用烧杯取5ml 3.8%的柠檬酸钠溶液,取一
只鸡的鸡血于烧杯中,不断轻轻搅拌防止血 凝。(注:一只鸡的血大约50ml左右,按 10%的用量加入3.8%的柠檬酸钠。)
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② 用1.5ml的离心管取血液1ml,2000rpm 离心5min,用移液器轻轻吸取上清去除; 加入1ml生理盐水清洗红细胞,2000rpm离 心5min,重复洗2—3次(注:从离心机内 拿出离心管时切勿震荡,不要倾倒离心管 倒上清,以免红细胞流出。清洗红细胞时 用移液器缓缓抽打,防止红细胞破裂)。
反应和间接凝集反应两类。
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1.直接凝集反应
颗粒状抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体直接 结合所出现的凝集现象。分为玻片法和试管法。
1)玻片法是一种定性试验方法。可用已知抗体来检测 未知抗原。若鉴定新分离的菌种时,可取已知抗体滴 加在玻片上,将待检菌液一滴与其混匀。数分种后, 如出现肉眼可见的凝集现象,为阳性反应。该法简便 快速,除鉴定菌种外,尚可用于菌种分型、测定人类 红细胞的ABO血型等。
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六、实验结果与分析
1、肉眼观察实验结果
图1 左边是血红细胞加PBS缓冲液;中间是 血细胞加凝集素;右边是血红细胞悬液
(如图1所示,加土豆凝集素的血红细胞在肉眼下明显可以 看到红细胞发生凝集,未加土豆凝集素的红细胞则没有变 化,加入PBS缓冲液的红细编辑胞ppt可以保存时间较长。) 15
实验三 细胞凝集反应
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一、实验目的
学习研究细胞凝集反应的方法,了解细胞发 生凝集反应的原因。
了解颗粒性抗原与可溶性抗原凝集反应的 原理。括由病毒、细胞凝集素和抗体而引起的三 种类型的细胞凝集现象。
凝集素(lectin)是从各种植物的种子和动物组织中提取 的糖蛋白或结合糖蛋白,因为能凝集红细胞,故名凝集 素。
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③ 在小试剂瓶中加入9.8ml生理盐水,用移 液器吸取200μl血红细胞加入小试剂瓶中, 混匀,即是2%的红细胞悬液,贴上标签备 用(注:吸取红细胞加入试剂瓶时可吸取 生理盐水清洗几次吸头,使得红细胞全部 在悬液中)。
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凝集反应现象
用移液器吸取红细胞悬液,在三片载玻片 上各滴一滴,其中一片加一滴土豆凝集素, 一片再加一滴PBS缓冲液,充分混匀,另 外一片只有红细胞悬液做空白对照,盖上 盖玻片,待干后于显微镜下观察血细胞凝 集现象(注:红细胞悬液放置一段时间会 发生沉降,取用之前应当轻轻摇匀)。
生理盐水:称取0.9g NaCl加水定容至 100ml。
3.8%柠檬酸钠溶液:称取3.8g柠檬酸钠 (或是4.33g带结晶水的柠檬酸钠)加水定 容至100ml。
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五、实验步骤
1、凝集素的制备:用1/100电子天平称取2g 去皮土豆块茎,加10ml PBS缓冲液在烧杯中 浸泡2h,粗提液中即含有土豆凝集素。
另外,凝集素还具有多价结合的能力,能与 荧光素、酶生物素、铁蛋白、胶体金结合 而不影响其生物活性,可用于光镜或电镜 水平的免疫细胞化学研究。
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三、相关理论知识
颗粒性凝集反应(agglutination)是一种血清学
反应。颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等) 与相应抗体结合,在有电介质存在的条件下,经过一 定时间,出现肉眼可见的凝集小块。参与凝集反应的 抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。可分为直接凝集
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七、注意事项及改进 (1)离心机使用时,要将配平后的离心管对称 放置在离心机内,禁止未配平就放入离心机和非对
称放置离心管。 (2)从离心机内拿出离心管时切勿震荡,不要
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2)试管法是一种定量试验的经典方法。可用已知抗原来 检测受检血清中有无某抗体及抗体的含量。用来协助临 床诊断或供流行病学调查研究。操作时,将待检血清用 生理盐水连续成倍稀释,然后加入等量抗原,最高稀释 度仍有凝集现象者,为血清的效价,也称滴度,以表示 血清中抗体的相对含量。诊断伤寒、副伤寒病的肥达氏 反应(Widaltest)、布氏病的瑞特氏反应(Wright test) 均属定量凝集反应。
凝集素最大的特点是能识别糖蛋白和糖脂中,特别是细胞 膜中复杂的碳水化合物结构,即细胞表面的糖基。通过 与细胞表面的糖分子相连,在细胞间形成桥,从而引起 细胞的凝集。一种凝集素编只辑pp对t 某一种特异的糖基具有3
特异结合的能力,如刀豆素A与吡喃糖基甘露 糖结合,马铃薯凝集素专一结合的是N-乙 酰氨基葡萄糖二聚体和N-乙酰氨基半乳糖。 加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝 集作用。
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四、实验用品
1、器材和仪器 仪器:电子天平,大烧杯,小烧杯,显微镜,移液
器,离心机,玻璃棒,镊子。 耗材:10ml小试剂瓶,载玻片,盖玻片,1.5ml离心
管,擦镜纸,吸头。
2、材料: 马铃薯块茎、鸡血
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2、实验试剂:
PBS缓冲液:称取7.2g NaCl ,1.48g NaH2PO4 ,0.46g KH2PO4 ,用蒸馏水定 容至1000ml,调pH为7.2。
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2.间接凝集反应
将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无 关的、一定大小的颗粒状载体的表面,然后与相应 抗体(或抗原)作用。在有电介质存在的适宜条件 下,即可发生凝集,称为间接凝集反应。用做载体 的微球可用天然的微粒性物质,如人(O型)和动 物(绵羊、家兔等)的红细胞、活性炭颗粒或硅酸 铝颗粒等;也可用人工合成或天然高分子材料制成 ,如聚苯乙烯胶乳微球等。由于载体颗粒增大了可 溶性抗原的反应面积,当颗粒上的抗原与微量抗体 结合后,就足以出现肉眼可见的反应,敏感性比直 接凝集反应高得多。
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