果蝇作为一种重要的模式生物在遗传学与基因组学的研究及发展中发挥了无可替代的作用果蝇实验对于培养高等学

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掌握果蝇的杂交技术,以果蝇为实验材料,体 验分离、自由组合、伴性遗传和连锁互换规律 的遗传学分析过程,学会分析方法。
熟练掌握果蝇唾腺的剥制及唾腺染色体标本的 制作方法,熟悉果蝇唾腺染色体的形态特征。
黑腹果蝇
(Drosophila melanogaster)
——最著名的模式生物
果蝇科:全世界3000多种 中国约800多种
200 2 13 — 17 — — 1 适量
米粉饲料
100 2 10 — — 8 8 1 适量
香蕉饲料
50 1.6 — 50 — — — 0.5-1 适量
(2)玉米粉培养基配置方法
i)取应加水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解, 再加糖,煮沸溶解;
ii)取另一半水混和玉米粉,加热,调成糊状; iii)将上述两者充分混匀,煮沸(以上操作都要搅拌,
体积小 繁殖力强 世代周期短 容易饲养 染色体数目少,巨大的唾腺染色体 突变体多,P-element,…… 遗传背景清楚(基因组测序完成)
一、野生果蝇采集与生活史观察
观察作业: 写出详细的果蝇生活史观察日记
野生果蝇采集:
取洁净敞口容器,放 入适量果皮(葡萄皮 最佳,取皮前用清水 稍稍冲洗),置户外 阴凉处数天,见有小 小的金黄色虫子(果 蝇)在其内飞翔,即 可用透气的材料覆盖 容器口。 采集完成
四、果蝇的杂交与管理
为确保杂交彻底,雌蝇必须选用处女蝇。 雌蝇羽化后的8小时内,尚未充分成熟,不会
交配。此时收集的雌蝇是处女蝇。
1、处女蝇的收集
每隔6-8小时,选雌蝇 根据黑色消化道识别
根据蛹,不具性梳的个体
处女蝇可以隔离培养一周
2、其他相关操作
杂交时把所需品系的雄蝇直接放到处女蝇培养 瓶中(共5对),贴上标签,注明两亲本的基因 型及交配日期。
眼色
白眼(white) w
红眼/野生型 +
刚毛形状 焦刚毛, sn3
直刚毛/野生型 +
表型特征 基因所在染色体
体乌木色

体灰色/金黄色

双翅短小与尾端等长 Ⅹ
双翅长过尾端

翅极小,仅残迹

复眼白色

复眼红色

刚毛弯曲烧焦状

刚毛尖直

黑檀体(e)突变体
三隐性(w m sn3) 突变体
果蝇突变体观察
分子遗传学分析 P-转座子分析
数量遗传学分析 毒理遗传学分析 发育遗传学分析
体重/体长/刚毛数量的遗传力估算 Muller-5 检验 Bit./Ant. 分析
进化遗传学分析 正常翅-残翅基因的自然选择
江苏地区野生果蝇的适合度比较
Baidu Nhomakorabea……
……
【实验目的】
熟悉果蝇的形态特征、生活史及各种突变性状, 学会野生果蝇的采集与实验果蝇的饲养管理。
二、黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)
的雌雄鉴别和突变体观察
Fem Mal 体形 腹部条纹数 尾端形状 尾端条纹 外生殖器形状 性梳
黑腹果蝇突变体观察
性状分类 名称及代号
体色
黑檀体(ebony) e
灰体/野生型 +
翅形
短翅(miniature)m 长翅/野生型 +
残翅(vestigial) vg
果蝇大实验
果蝇作为一种重要的 模式生物,在遗传 学与基因组学的研 究及发展中发挥了 无可替代的作用。
果蝇实验,对于培养 高等学校和中等学 校学生的遗传学实 验技能,具有十分 重要的意义。
【实验内容】
经典遗传学分析 分离/组合/连锁/伴性/基因定位
染色体遗传学分析 唾腺染色体制备与观察/ 各地果蝇核型分析
7~8天后清空亲本,待F1成蝇羽化后逐日观察、 计数对应表型个体数(可靠的计数及观察是培 养开始的20天以内,再晚可能有F2了)。
若须继续实验、观察F2,可从F1内挑出雌雄蝇 5-10对另瓶培养。
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) 的伴性与非伴性、连锁与 非连锁遗传分析
Drosophila melanogaster 的分类地位:
Class: Insecta
Subclass : Pterygota
Order:
Diptera
Family:
Drosophilidae
Genus:
Drosophila
Species: melanogaster
Drosophila melanogaster 特点:
目的: 通过一个杂交实验(历时一个月)同时进行: 一对等位基因分离分析 两对非等位基因自由组合分析 两对非等位基因连锁交换分析 基因伴性遗传分析 三点测交与基因定位分析

果蝇杂交实验的综合实验设计
如何在给定的果蝇突变类型中完成上述实验? 关键是哪一步?
怎样选择……?
示范:果蝇麻醉、观察示范及注意事项;
果蝇杂交操作及注意事项
要求:
各组自行繁殖本组实验所需的杂交亲本;
注意处女蝇的搜集;
将果蝇杂交瓶各自带回宿舍,观察交配行为;
投入亲本杂交后隔一周弃去亲本;
对照实验教材模板,详细记录每代实验结果 (逐日统计的F1、F2子代表型及数目);
写出详细的生活史观察日记;
最后完成全部(5个)实验报告。
以免沉积物烧焦) ; iv)将所得培养基分装入指形管或培养瓶(厚度2
cm),勿沾染管口/瓶口. 加塞、包扎,高压灭菌。 Ⅴ)稍冷后取出,直立、冷却。在洁净空间打开瓶
塞,用酒精棉球擦干管壁/瓶壁上的冷凝水滴,加入 适量丙酸及酵母粉,即可投入果蝇进行饲养。
2、果蝇的麻醉处理
对果蝇的观察与检查,均在其麻醉昏迷状态进行。 1)将果蝇转移到洁净干燥的麻醉瓶中。向麻醉瓶的棉
塞底部滴加乙醚2~3滴,迅速塞上棉塞。待果蝇全部 麻醉昏迷后,即倒出至白瓷板/白纸上进行观察。 2)果蝇的麻醉程度视实验要求而定:对仍需培养的果 蝇,以轻度麻醉、不使死亡(翅膀外展45 )为宜。迅 速将选定的果蝇移入侧翻的培养瓶中,待其自然苏醒后, 再将瓶扶正。 3)检查完毕,应将不再需要的果蝇倒入死蝇收集瓶中。
三、黑腹果蝇的饲养及管理
1、黑腹果蝇的“培养基”配置 果蝇以酵母菌为食。凡能培养酵母菌的基
质,都可用作果蝇的“培养基” 。常用的 有玉米粉培养基、米粉培养基、香蕉培养 基等。配方如下页表:
(1)果蝇培养基的几种配方
玉米粉饲料
水(ml) 琼脂(g) 食糖(g) 香蕉浆(g) 玉米粉(g) 米粉(g) 麸皮(g) 丙酸(ml) 酵母粉(g)
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