空气中细菌含量的检测
空气中微生物的检测
2011.11.21
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一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、结果计算 五、结果评价
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一、实验目的和意义
掌握检测和计数空气中微生物的基本方法
掌握无菌操作技术和微生物实验的基本操 作
学习对室内空气进行初步的微生物学评价
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实验意义
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三、实验步骤
1.自然沉降法 配制琼脂培养基（已做） ↓
培养皿暴露空气中5min/10min ↓
37℃温箱培养24h ↓
计数和结果评价
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采样布点原则 a. 根据室内面积进行对角线或者梅花式均匀布点，
小于50m2的房间应设3个点，50～100m2设3～5个 ；100m2以上至少5个点 b. 采样高度 和人呼吸高度一致（1.2～1.5m） c. 采样点应避开风口，离墙壁距离应大于0.5m,采样 时关闭门窗，减少人员走动
空气中细菌总数常作为室内空气质量和空 气受到微生物性污染程度的指标。
用于医院、公共场所等空气质量的评价
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二、实验原理
1：自然沉降法（沉降平板法）
根据空气中携有微生物气溶胶粒子在地心引力的 作用下，以垂直的自然方式沉降到琼脂培养基上， 经过24h，37℃温箱培养计算出菌落数。
特点：此法简单方便，但稳定性差，直径1～5μm 的粒子在5min中内沉降距离有限，使小粒子采集 率较低。
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各种粒径大小的菌落易沉降的部位及意义
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特点 a. 采集粒谱范围广，一般在0.2～20μm以上； b. 采样效率高，逃逸少 c. 微生物存活率高
空气中细菌含量的检测
空气中细菌含量的检测
空气中细菌含量的检测有两种方法即：空气采样器法和平板暴露法。
（一）空气采样器法
用空气微生物采样器，在鸡舍内四周和中央采样，采样1或2分钟，然后将琼脂平板置于37℃温箱中培养24小时，观察并计数平板的菌落，求出5个采样点的平均菌落数。
计算公式为：
（二）平板暴露法
将普通琼脂平板或血液琼脂平板，水平地放在鸡舍内四角和中央各1个，将平皿盖打开，扣放在平皿底的底边，根据鸡舍内的污染程度，暴露10~20分钟，然后盖好平皿，将平皿放在37℃温箱中培养24小时，观察并计数平板上的菌落数，求出5个平板中的平均菌落数，据测试，5分钟内在100平方厘米面积上降落的细菌数，相当于10升空气中所含的细菌数，因此，可按下列公式计算：
A=平板面积（平方厘米）
T=平板暴露于空气中的时间（分）
N=平均菌落数
（三）鸡舍空气中细菌允许量
一般认为：在有鸡的情况下，鸡舍每立方米空气中微生物（细菌和霉菌）不应高于25~30万个，笼养雏鸡每立方米空气中微生物总数不应超过13万个，其中大肠杆菌群不应超过1900个。
否则，可引起临床大肠杆菌病，必须采取预防措施。
用菌落计数器检测空气中细菌的方法
1 对象与方法1.1 监测对象电子阅览室2个、学生食堂3个、教室6个、学生宿舍10个(其中女生宿舍5个、男生宿舍5个)、学生实验室4个。
1.2 采样点设置按照《室内空气质量标准》(GB/T18883 2002)[3]的要求进行。
每个监测目标设置5个采样点,即室内墙角对角线交点为一采样点,该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。
采样高度为1.5 m.采样点应远离墙壁l m 以上,并避开空调、门窗等空气流通处。
1.3 空气样品采集与细菌培养采用自然沉降法采集样品。
采样时,将营养琼脂平板置于采样点,打开皿盖,于空气中暴露5 min,盖上皿盖,翻转平板,经37℃、24 h培养后,计数每块平板上生长的菌落数,求出全部采样点的平均菌落数。
根据奥梅梁斯基公式计算空气细菌总数。
细菌总数(cfu/m3)= 50 000N/AT,式中:A:平板面积(cm2);T:平板暴露时间(min);N:平均菌落数(cfu/平皿)。
1.4 评价标准依据我国《室内空气质量标准》,室内空气菌落总数≤2 500 cfu/cm3 为合格,超过以上结果为不合格。
1.5 统计分析数据用表示,采用SPSS 13.0软件进行分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 校园不同场所空气中细菌浓度检测对校园内共25个不同功能区进行采样分析,除了有一间学生宿舍细菌数超标外,其余各检测点的合格率均为100%(表1)。
表1 校园不同场所空气中细菌浓度检测结果2.2 学生宿舍空气中细菌浓度检测共检测10间学生宿舍,其中男生宿舍5间,女生宿舍5间。
两者空气中细菌浓度无统计学意义(P>0.05),但男生宿舍的菌落均数高于女生宿舍,且有1间男生宿舍空气中细菌浓度明显超标,达到3 065.207 cfu/m3(表2)。
表2 学生宿舍空气中细菌浓度检测3 讨论空气中微生物含量是衡量室内空气质量的一个重要指标。
世界卫生组织认为,空气中细菌浓度为700～l 800 cfu/m3时,有发生空气感染的明显危险因素,当≤180 cfu/m3时,就安全得多[4]。
公共场所空气中细菌总数检验方法
公共场所空气中细菌总数检验方法1 定义撞击法（impacting method）是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流，使用悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37°、48h培养后，计算出每m3空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。
自然沉降法（natural sinking method）是指直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露15分钟，经37°、48h培养后计数生长的细菌菌落数的采样测定方法。
2 仪器和设备2.1高压蒸汽灭菌器。
2.2干热灭菌器。
2.3恒温培养箱。
2.4冰箱。
2.5平皿（直径9cm）。
2.6制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。
2.7撞击式空气微生物采样器。
3培养基3.1营养琼脂培养基3.1.1成分；蛋白胨牛肉浸膏10g氯化钠3g琼脂15～20g蒸馏水1000ml3.1.2制法将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min高压灭菌。
用自然沉降法测定时，倾注约15ml于灭菌平皿内，制成营养琼脂平板。
撞击法参照采样器使用说明制备营养琼脂平板。
4操作步骤4.1撞击法4.1.1选择有代表性的位置设置采样点。
将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。
4.1.2样品采完后，将带核辐射营养琼脂平板置36±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每m3空气中的菌落数，以CFU/m3报告结果。
4.1.3选择撞击式空气微生物采样器的基本要求。
（a）对空气中细菌捕获率达95%。
（b）操作简单，携带方便，性能稳定，便于消毒。
4.2自然沉降法4.2.1设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点。
通常设置5个采样点，即室内墙角对角线交点为1采样点，该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。
采样高度为1.2～1.5m。
空气微生物的检测和卫生标准
空气微生物的检测和卫生标准
首先，空气微生物的检测方法包括空气采样和培养方法。
空气采样可以通过空气采样器或生物气溶胶采样器进行，然后将采样得到的空气中微生物在培养基上培养，以便观察和计数。
另一种方法是使用现代分子生物学技术，如聚合酶链反应（PCR）或测序技术，来检测和鉴定空气中微生物的种类和数量。
其次，卫生标准针对不同场所和环境可能有所不同。
例如，在医疗保健环境中，空气中的微生物水平需要符合卫生部门或相关行业标准，以确保医院或诊所的空气质量符合卫生要求。
食品加工和制药行业也有严格的卫生标准，以确保生产过程中空气中的微生物不会对产品质量造成影响。
此外，空气微生物的卫生标准还与室内空气质量相关。
一般来说，室内空气中的微生物水平应该低于一定的标准，以确保居住或工作环境的空气质量符合健康要求。
这需要定期对室内空气进行检测，并采取必要的控制措施，如通风、空气过滤等，以维持空气质量。
综上所述，空气微生物的检测和卫生标准涉及到多个方面，包
括检测方法、行业标准以及室内空气质量要求。
通过科学的检测方法和严格的卫生标准，可以有效控制空气中微生物的水平，保障人体健康和生产环境的卫生安全。
室内空气 微生物 细菌 标准
室内空气微生物细菌标准室内空气是人们每天都会接触到的环境之一。
然而，室内空气中的微生物和细菌却是我们很容易忽视的部分。
微生物和细菌是极小的生物体，可以悬浮在空气中，进入我们的呼吸系统。
室内空气中的微生物和细菌对我们的健康有着重要的影响，因此有必要制定相应的标准来保证室内空气质量。
室内空气中的微生物包括细菌、真菌、酵母、病毒等。
其中，细菌是最主要的一类微生物。
它们可以通过气溶胶的形式存在于空气中，并且能够传播疾病。
细菌在室内空气中的浓度会受到多种因素的影响，如室内人员的数量、通风状况、湿度等。
室内空气中的微生物和细菌质量标准可以通过测定微生物总数、特定微生物的数量、细菌的种类和含量等方面来进行评估和监测。
为了保证室内空气中微生物和细菌的质量符合标准，一般会采取以下措施:首先，定期检测室内空气中微生物和细菌的数量和种类。
这可以通过采集室内空气样品，并送实验室进行分析来实现。
检测结果可以帮助我们了解室内空气的微生物污染程度，并根据检测结果采取相应的措施进行处理。
其次，保持良好的室内卫生和通风。
室内环境的清洁度对微生物和细菌的生长和繁殖有着重要的影响。
定期打扫室内，清除灰尘和垃圾，可以有效减少微生物的数量和种类。
同时，保持良好的通风也能够将室内污染物排出，减少微生物和细菌的传播。
此外，室内空气中微生物和细菌的质量也可以通过室内装修材料的选择进行控制。
一些装修材料，如墙纸、地毯等，容易滋生细菌和真菌。
因此，在选择装修材料时，应选择对室内空气质量友好的材料，尽量减少室内微生物和细菌的滋生。
室内空气中微生物和细菌的标准是根据国家和国际相关标准制定的。
这些标准一般包括微生物总数、特定微生物的数量、细菌的种类和含量等方面的要求。
根据这些标准，可以评估和监测室内空气中微生物和细菌的质量，并采取相应的措施进行管理和治理。
总之，室内空气中微生物和细菌的标准是保证室内空气质量的重要措施之一。
通过定期检测、保持良好的室内卫生和通风、选择对室内空气质量友好的装修材料等方式，可以控制室内空气中微生物和细菌的质量，保障居民的健康。
空气落菌检测方法
空气落菌检测方法空气中的微生物落菌检测是判断环境是否洁净、食品是否受污染等领域中常用的一种方法。
空气中的微生物主要包括细菌、真菌和病毒等，这些微生物在特定环境中落下来并滋生繁殖，可能对人类健康产生潜在的风险。
因此，空气落菌检测在医院、食品加工厂和实验室等场所广泛应用。
一、空气中微生物落菌检测的目的1.评估环境卫生状况：了解特定环境中的微生物污染水平，评估环境的卫生状况。
2.监测食品加工过程中的污染：监测食品加工车间、工作台面和设备表面等区域的微生物污染情况，确保食品加工的卫生安全。
3.控制室内空气质量：监测办公室、实验室以及医院病房等场所的空气中微生物落菌数量，保障工作和生活环境的洁净。
4.检测空气传播疾病的传播风险：通过监测空气中病原体的存在和浓度，判断疾病在空气中的传播风险。
二、空气中微生物落菌检测的方法1.落菌皿法：这是最常用的方法之一，也是最经典的方法。
将含有培养基的琼脂平面培养基装于无菌落菌皿中，暴露在待测空气环境中，一定时间后，将落菌皿送入恒温箱培养。
培养一段时间后，可以观察到落在培养基上的微生物形成的菌落。
2.空气采样器法：通过使用专用的采样器采集空气中的微生物颗粒，然后将采样器上的微生物颗粒转移到含有培养基的培养皿上，再进行培养。
这种方法比较准确，可以获得更高的检测灵敏度。
3.空气质量监测仪器法：这种方法通过使用空气质量监测仪器，例如空气微生物光敏仪，可以直接计量空气中的微生物颗粒数量。
这种方法快速、精确，并且可以实时监测。
三、空气中微生物落菌检测的操作流程1.空气采样前，需要准备好培养基，根据要检测的微生物类型选择相应的培养基。
并且需要在实验室内进行培养基的质量控制，确保无菌。
2.根据所用的空气采样方法，准备相应的采样器和采样器具。
同时，对采样器进行必要的消毒和灭菌处理，避免交叉污染。
3.在待测区域中选择合适的位置进行采样。
一般有指定的采样点，例如食品加工厂的工作台面、医院病房的空气出风口等。
空气中微生物检测
四、结果计算
1.自然沉降法
根据奥梅梁斯基建议，面积为100cm2的平板培养基，暴露 于空气中5min，于37℃温箱培养24h后所生长的菌落数相 当于10L空气中的细菌数
空气中细菌数（cfu/m 3） =1000×[(100/A) ×(5/t) ×(1/10)] ×N
两种方法比较
1. 沉降法测定的菌落总数要多，在实验条件下比撞击法多 24.6％。
2. 小颗粒含菌粒子在空气中稳定，不易沉降或者漂浮，撞 击法比沉降法更易采集到小粒子。
3. 沉降法结果不稳定，容易受采样条件的影响。
影响因素
1. 温室外的细菌带入室内， 也会将地面、墙壁的含菌粒子扬起。
时关闭门窗，减少人员走动
2.撞击法 调整采样器高度为呼吸带高度于1.2～1.5m
↓ 将平皿依次放入圆盘，固定并做好标记
↓ 接通电源，开打电源开关，调整流量到28.3L/min
↓
采样5min/10min后，取出平皿，经过24h，37℃培养，计数
分组： 4个同学一组，分别采用自然沉降法和 Anderson采样器，采样时间设为5min和 10min，比较两种采样方法的结果。
娱乐场所的卫生标准：空气≤4000cfu/m3 幼托机构室内卫生标准：空气细菌菌落数应≤2500cfu/cm3
（沉降法）
医院消毒卫生标准（GB 15982－1995）
1.对两种方法结果的比较？ 2.根据Anderson采样器的实验结果，计算空气
中微生物大小分布：以各级的菌落数占六 级总菌落数的百分比表示。
用于医院、公共场所等空气质量的评价
二、实验原理
1：自然沉降法（沉降平板法） 根据空气中携有微生物气溶胶粒子在地心引力的
空气中细菌含量的检测
平皿沉降法：采样时将普通琼脂培养基或血琼脂培养基5个，分别置于室内同一平面五个不同的点（室内四个角及中央），打开皿盖，让平皿暴露15～30min后盖好平皿盖，置于37℃温箱中培养，次日观察平皿菌落，计数五个平皿生长菌落数，根据5min内100cm2培养基中降落细菌数相当于10L空气中所含细菌数而计算1m3空气中的细菌数。
计算公式为：细菌数（CFU）/ m3＝N×100/A×5/T×1000/10＝50000N/AT
注：A：平板面积（cm2）；
T：平板暴露时间（min）；
N：平板平均菌落数（CFU）；
摘于医学检验专业2003年版《微生物检验学》
1，培养基的配制
称取10g蛋白胨、3g牛肉浸膏、5g氯化钠、20g琼脂，充分混合后，加入到1000毫升蒸馏水中，用盐酸和氢氧化钠调节溶液的ph值为7.4-7.6，过滤除去沉淀后，分装在5个250毫升三角烧瓶中，放入高压蒸汽灭菌锅中，在121摄氏度下灭菌15分钟。
取出后置于暗处备用。
2.制作平皿
加热使测定所用的培养基融化，待冷至50-60摄氏度时，倾入培养皿，每皿注入15-20毫升，一共制作5块。
盖上皿盖
3细菌含量的测定
（1）利用微生物在空气中能随尘粒下沉的原理，将盛有培养基的平皿平放，移去平皿盖，在空气中暴露五分钟，培养皿距离地面1米，距离墙壁最近不可小于30cm,
室中中央及周角各放一平皿。
（2）培养：放入37摄氏度恒温箱中培养24小时。
车间空气细菌含量检测标准
车间空气细菌含量检测标准微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第 1页共7 页第次修改一、适用范围：本标准规定了出口食品车间的工艺卫生及成品微生物的标准及检验方法。
本标准适用于实罐一、三车间、面食车间工艺卫生，公司所有产品的成品微生物检验及生产用水的水质检验。
二、术语：1、工艺卫生：指食品加工工艺过程中卫生指标控制情况，一般包括操作者的手、操作案台，直接接触食品的工器具、空气落菌、半成品、车间用水等的微生物卫生情况。
2、内包装材料：直接接触食品的包装材料，包括塑料袋，塑料片等。
3、菌落总数：指食品检样经过处理，在一定条件下培养后﹙如培养基成分、培养温度和时间、PH、需氧性质等﹚，所得1ml(g)检样中所含菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
4、大肠菌群：指一群能发酵乳糖、产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
三、卫生标准：物品项目单位细菌总数大肠菌群备注操作台、工器具个/100cm2 ≤1.0×104＜50 生加工区不得检出熟加工区操作者手个/只掌面≤1.0×104＜50 生加工区不得检出熟加工区空气落菌个/平板≤50 / 生加工区≤30 / 熟加工区内包装材料个/100cm2 ≤2.0×102不得检出微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第2 页共 7 页第次修改半成品个/g （ml）≤5.0×105≤1.0×103生加工区≤1.0×105不得检出熟加工区成品按各种产品成品标准四、检验方法：（一）工艺卫生：生产正常进行时，每周检验一次。
1、车间工艺卫生检验大肠菌群的检验方法：1.1培养基：大肠菌群菌落计数培养基。
1.1.1成份：蛋白胨10克氯化钠5克磷酸氢二钾（K2HPO4）2克或K2HPO43H2O 2.62克乳糖10克去氧胆酸钠1克琼脂15克柠檬酸铁铵2克中性红0.033克或0.0412克（国产）蒸馏水1000ml1.1.2制法：蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾加入蒸馏水加热溶解，并用10%碳酸钠溶液调PH7.3-7.5，加琼脂溶化再加柠檬酸铁铵、去氧胆酸钠溶解后，补充消耗水份，用250ml三角瓶分装。
车间空气细菌含量检测标准
车间空气细菌含量检测标准微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第 1页共7 页第次修改一、适用范围：本标准规定了出口食品车间的工艺卫生及成品微生物的标准及检验方法。
本标准适用于实罐一、三车间、面食车间工艺卫生，公司所有产品的成品微生物检验及生产用水的水质检验。
二、术语：1、工艺卫生：指食品加工工艺过程中卫生指标控制情况，一般包括操作者的手、操作案台，直接接触食品的工器具、空气落菌、半成品、车间用水等的微生物卫生情况。
2、内包装材料：直接接触食品的包装材料，包括塑料袋，塑料片等。
3、菌落总数：指食品检样经过处理，在一定条件下培养后﹙如培养基成分、培养温度和时间、PH、需氧性质等﹚，所得1ml(g)检样中所含菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
4、大肠菌群：指一群能发酵乳糖、产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
三、卫生标准：物品项目单位细菌总数大肠菌群备注操作台、工器具个/100cm2 ≤1.0×104＜50 生加工区不得检出熟加工区操作者手个/只掌面≤1.0×104＜50 生加工区不得检出熟加工区空气落菌个/平板≤50 / 生加工区≤30 / 熟加工区内包装材料个/100cm2 ≤2.0×102不得检出微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第2 页共 7 页第次修改半成品个/g （ml）≤5.0×105≤1.0×103生加工区≤1.0×105不得检出熟加工区成品按各种产品成品标准四、检验方法：（一）工艺卫生：生产正常进行时，每周检验一次。
1、车间工艺卫生检验大肠菌群的检验方法：1.1培养基：大肠菌群菌落计数培养基。
1.1.1成份：蛋白胨10克氯化钠5克磷酸氢二钾（K2HPO4）2克或K2HPO43H2O 2.62克乳糖10克去氧胆酸钠1克琼脂15克柠檬酸铁铵2克中性红0.033克或0.0412克（国产）蒸馏水1000ml1.1.2制法：蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾加入蒸馏水加热溶解，并用10%碳酸钠溶液调PH7.3-7.5，加琼脂溶化再加柠檬酸铁铵、去氧胆酸钠溶解后，补充消耗水份，用250ml三角瓶分装。
车间空气细菌含量检测标准
车间空气细菌含量检测标准微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第1 页共7 页第次修改一、适用范围：本标准规定了出口食品车间的工艺卫生及成品微生物的标准及检验方法。
本标准适用于实罐一、三车间、面食车间工艺卫生，公司所有产品的成品微生物检验及生产用水的水质检验。
二、术语：1、工艺卫生：指食品加工工艺过程中卫生指标控制情况，一般包括操作者的手、操作案台，直接接触食品的工器具、空气落菌、半成品、车间用水等的微生物卫生情况。
2、内包装材料：直接接触食品的包装材料，包括塑料袋，塑料片等。
3、菌落总数：指食品检样经过处理，在一定条件下培养后﹙如培养基成分、培养温度和时间、PH、需氧性质等﹚，所得1ml(g) 检样中所含菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
4、大肠菌群：指一群能发酵乳糖、产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
三、卫生标准：物品项目单位细菌总数大肠菌群备注操作台、工器具个/100cm2≤1.0 ×104< 50生加工区不得检出熟加工区操作者手个/只掌面≤1.0 ×104<50生加工区不得检出熟加工区空气落菌个/ 平板≤50/生加工区≤30/熟加工区内包装材料个/100cm2≤2.0 ×102不得检出微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0共7 页次修改工艺卫生：生产正常进行时，每周检验一次。
1、车间工艺卫生检验大肠菌群的检验方法： 1.1 培养基： 大肠菌群菌落计数培养基。
1.1.1 成份：蛋白胨 10 克氯化钠 5 克磷酸氢二钾（ K2HPO4）2 克 或 K2HPO43H2O 2.62克 乳糖 10 克 去氧胆酸钠 1 克 琼脂 15 克 柠檬酸铁铵 2 克中性红 0.033 克或 0.0412 克（国产） 蒸馏水 1000ml1.1.2 制法： 蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾加入蒸馏水加热溶解，并用 10%碳酸钠溶液调 PH7.3-7.5 ，加琼脂溶化再加柠檬酸铁铵、去氧胆酸钠溶解后，补充消耗水份，用 250ml 三角瓶分装。
车间空气细菌含量检测标准
车间空气细菌含量检测标准微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第 1页共7 页第次修改一、适用范围：本标准规定了出口食品车间的工艺卫生及成品微生物的标准及检验方法。
本标准适用于实罐一、三车间、面食车间工艺卫生，公司所有产品的成品微生物检验及生产用水的水质检验。
二、术语：1、工艺卫生：指食品加工工艺过程中卫生指标控制情况，一般包括操作者的手、操作案台，直接接触食品的工器具、空气落菌、半成品、车间用水等的微生物卫生情况。
2、内包装材料：直接接触食品的包装材料，包括塑料袋，塑料片等。
3、菌落总数：指食品检样经过处理，在一定条件下培养后﹙如培养基成分、培养温度和时间、PH、需氧性质等﹚，所得1ml(g)检样中所含菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
4、大肠菌群：指一群能发酵乳糖、产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
三、卫生标准：物品项目单位细菌总数大肠菌群备注操作台、工器具个/100cm2 ≤×104＜50 生加工区不得检出熟加工区操作者手个/只掌面≤×104＜50 生加工区不得检出熟加工区空气落菌个/平板≤50 / 生加工区≤30 / 熟加工区内包装材料个/100cm2 ≤×102不得检出微生物检验标准编号：ⅢA-03-8008-0第2 页共 7 页第次修改半成品个/g（ml）≤×105≤×103生加工区≤×105不得检出熟加工区成品按各种产品成品标准四、检验方法：（一）工艺卫生：生产正常进行时，每周检验一次。
1、车间工艺卫生检验大肠菌群的检验方法：培养基：大肠菌群菌落计数培养基。
成份：蛋白胨10克氯化钠5克磷酸氢二钾（K2HPO4）2克或K2HPO43H2O 克乳糖10克去氧胆酸钠1克琼脂15克柠檬酸铁铵2克中性红克或克（国产）蒸馏水1000ml制法：蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾加入蒸馏水加热溶解，并用10%碳酸钠溶液调，加琼脂溶化再加柠檬酸铁铵、去氧胆酸钠溶解后，补充消耗水份，用250ml三角瓶分装。
空气培养细菌总数的卫生学标准
空气培养细菌总数的卫生学标准
空气中的细菌总数是衡量空气卫生状况的重要指标之一。
空气中的细菌数量过
多可能会对人体健康造成影响，因此对空气中细菌总数的卫生学标准有着严格的要求。
首先，根据卫生学标准，空气中细菌总数的测定方法应当符合相关的规范和标准。
通常采用的方法是空气采样后在培养基上进行培养，然后通过计数方法来测定细菌总数。
这一过程需要严格控制培养条件和操作流程，以确保测定结果的准确性和可靠性。
其次，根据卫生学标准，空气中细菌总数的限定值应当符合相关的卫生标准。
一般来说，不同场所对空气中细菌总数的要求也有所不同。
例如，医疗机构、食品加工场所等对空气中细菌总数的要求更为严格，而一般办公场所、居住区域对空气中细菌总数的要求相对较低。
这些限定值的制定应当考虑到不同场所的特点和实际需求，以保障人们的健康和安全。
此外，根据卫生学标准，空气中细菌总数的监测和管理应当符合相关的规范和
要求。
定期对空气中细菌总数进行监测，及时发现和处理空气污染问题，是保障空气卫生的重要手段。
同时，对空气中细菌总数的管理也需要建立健全的制度和措施，加强对空气质量的管理和控制。
总的来说，空气培养细菌总数的卫生学标准是保障空气卫生的重要依据，对空
气中细菌总数的测定、限定值的制定以及监测和管理都有着严格的要求。
只有严格遵守这些标准和要求，才能有效保障人们的健康和安全。
因此，各相关单位和个人都应当重视空气培养细菌总数的卫生学标准，加强对空气质量的管理和控制，共同营造一个清洁、卫生的空气环境。
公共场所空气中细菌的测定(沉降法)
（1）将营养琼脂培养皿置于采样点距地面1.2-1.5米高度， 将培养皿揭开，暴露于空气中5分钟，盖上皿盖，将平皿倒 置，置于37摄氏度恒温培养箱中培养24小时。
（2）计数营养琼脂培养基表面上ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ生长的菌落数。
菌落的形态特点
❖ 细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透 明、易挑取、质地均匀。
❖ 菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致。
实验安排
❖ 分组：按照学号平均分成8组 ❖ 采用地点：
1-2组 图书馆阅览室 3-4组 校医院大厅 5-6组 第一餐厅1楼 7-8组 公交车站501公交车 ❖ 实验记录方法：个人计数结果、小组平均结果 ❖ 实验结果：与国家相应标准比较
预防医学实验 公共场所空气中细菌的测定（沉降法）
公共场所卫生标准
➢ 公共场所卫生标准 GB9663~9673—1996、 GB16153~1996 国家技术监督局和卫生部
➢ 公共场所卫生监测技术规范 GB/T 17220— 1998 卫生部
➢ 公共场所卫生标准检验方法 GB/T 18204.1~18204.30--2000
部分公共场所国家标准（细菌数）
❖ 图书馆阅览室：≤75个／皿 ❖ 医院候诊室：≤40个／皿 ❖ 公共交通工具： ≤40个／皿 ❖ 餐厅： ≤40个／皿
注意事项
❖ 培养皿要标记：学号或姓名（皿盖） ❖ 采样点的分布要均匀，不少于4个点，每个点
至少采集2-3样本。 ❖ 采样高度：1.2-1.5米 ❖ 采样结束是要倒置平皿 ❖ 实验结果要有图片（拍照） ❖ 实验报告要有讨论
公共场所环境质量调查常选用指标
❖ 温度 ❖ 相对湿度 ❖ 风速 ❖ CO2 ❖ CO
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平皿沉降法：采样时将普通琼脂培养基或血琼脂培养基5个，分别置于室内同一平面五个不同的点（室内四个角及中央），打开皿盖，让平皿暴露15～30min后盖好平皿盖，置于37℃温箱中培养，次日观察平皿菌落，计数五个平皿生长菌落数，根据5min内100cm2培养基中降落细菌数相当于10L空气中所含细菌数而计算1m3空气中的细菌数。
计算公式为：细菌数（CFU）/ m3＝N×100/A×5/T×1000/10＝50000N/AT
注：A：平板面积（cm2）；
T：平板暴露时间（min）；
N：平板平均菌落数（CFU）；
摘于医学检验专业2003年版《微生物检验学》
1，培养基的配制
称取10g蛋白胨、3g牛肉浸膏、5g氯化钠、20g琼脂，充分混合后，加入到1000毫升蒸馏水中，用盐酸和氢氧化钠调节溶液的ph值为7.4-7.6，过滤除去沉淀后，分装在5个250毫升三角烧瓶中，放入高压蒸汽灭菌锅中，在121摄氏度下灭菌15分钟。
取出后置于暗处备用。
2.制作平皿
加热使测定所用的培养基融化，待冷至50-60摄氏度时，倾入培养皿，每皿注入15-20毫升，一共制作5块。
盖上皿盖
3细菌含量的测定
（1）利用微生物在空气中能随尘粒下沉的原理，将盛有培养基的平皿平放，移去平皿盖，在空气中暴露五分钟，培养皿距离地面1米，距离墙壁最近不可小于30cm,
室中中央及周角各放一平皿。
（2）培养：放入37摄氏度恒温箱中培养24小时。