维生素药物的分析
维生素类药物分析(SYSH)
返 回9
第一节 维生素A
维生素A包括有维生素A1（视黄醇）、去 氢维生素A（维生素A2 ）和去水维生素A（ 维生素A3）等，其中维生素A1活性最高，
2020/11/14
10
一、结构和性质
R:
2020/11/14
-H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
11
2020/11/14
25
（2）波长的选择： ① 1
VitA的max（328nm） ② 2 3
分别在1的两侧各选一点
2020/11/14
26
第一法 等波长差法
32 8 31 6 34 0 328
A 3校 2 8 3 . 5 正 2 A 2 3 2 A 3 8 1 A 3 6 4
测定对象 VitA醋酸酯
结构分析
CH3
CH3
CH3 CH3
环己烯
2020/11/14
共轭多 烯侧链
CH3 CH2OR
多异构体 UV 易被氧化
12
1、为一个具有共轭多烯侧链的环己烯 ❖ （1）具有UV吸收
❖ （2）存在多种立体异构化合物 ❖ （3）易发生脱氢、脱水、聚合反应
2020/11/14
13
2、不稳定性
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化 剂 环氧化物 [ O]VViittAA酸 醛
2020/11/14
31
2020/11/14
32
中国药典收载方法
第一法（维生素A醋酸酯的测定） 将维生素A溶于环己烷，在规定波长测定吸
收度，计算吸收度比值（A/A328 ）
2020/11/14
33
数据处理
如果λmax在326-329nm之间，且A/A328比值未 超过规定值的±0.02，可直接按下式计算含 量：
维生素类药物分析
维生素类药物分析
发射波长435nm
第27页
对照液 + NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇 S
+ NaOH + 异丁醇
d
供试液 + NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇 A
+ NaOH + 异丁醇
b
VitB1%
Ab Sd
W对 W样
稀释度 稀释度
100%
维生素类药物分析
第28页
（3）特点 ①灵敏度高，线性范围宽 ②代谢产物不干扰，适合用于体液分析
VitA SbCl3 蓝色 紫红
CHCl3
4、溶解性 不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等
维生素类药物分析
第8页
二、判别试验
1、三氯化锑反应
维生素A在饱和无水三氯化锑无醇 氯仿溶液中展现不稳定蓝色，再变为紫 红色。
VitA SbCl3 蓝色 紫红
CHCl3
维生素类药物分析
第9页
反应条件：
① 要求无水，如存在水可能产生氯化 氧锑（ SbOCl ）。
2、UV分光光度法（药典用于测定片剂、注 射剂）
（1）原理：维生素B1分子中含有共轭双键结 构，含有紫外吸收特征，可在其最大吸收波 长下测定吸收度，依据取样量计算含量。
（2）方法
维生素类药物分析
第26页
（三）硫色素荧光法
（1） 原理
VitB
铁氰化钾
NaOH
硫色素
异丁醇 荧光
（2）方法与计算 激发波长365nm
维生素类药物分析
第48页
一、结构与性质
(一)结构
维生素D2为9，10-开环麦角甾5，7，10(19)， 22-四烯3β-醇，又名骨化醇或麦角骨化醇。
药物分析维生素类药物的分析
在方法验证的基础上，可构建维生素类药物分析的评价指 标体系，包括定量限、检测限、回收率、重复性、稳定性 等指标，以全面评价分析方法的性能。
持续改进方向和目标设定
持续改进方向
针对维生素类药物分析过程中存在的问题和 不足，可进一步改进样品前处理方法、优化 分析条件、提高检测灵敏度等，以不断提高 分析结果的准确性和可靠性。
数据处理和结果表达技巧分享
数据处理
对HPLC和UV-Vis法得到的数据进行整理、归纳和统计 分析，包括峰面积、保留时间、浓度等参数的计算和 处理。
结果表达
将分析结果以图表形式呈现，如色谱图、标准曲线图、 含量分布图等，使结果更加直观、易于理解。同时，对 分析结果进行解释和说明，提出改进意见和建议。
在选择维生素类药物的标准品时，应确保其 纯度高、稳定性好，且具有代表性。同时， 应关注标准品的来源和溯源性。
使用注意事项
在使用标准品时，需按照规定的条件进行保 存和使用，避免污染和降解。此外，应定期 对标准品进行复验和更新。
检测方法验证及评价指标体系构建
要点一
检测方法验证
要点二
评价指标体系构建
为确保维生素类药物分析方法的准确性和可靠性，需进行 方法学验证，包括专属性、线性、范围、准确度、精密度 等指标的考察。
质量控制体系建立及实施情况介绍
质量控制体系
为确保维生素类药物分析结果的准确性和可靠性，需建立全面的质量控制体系，包括样 品采集、前处理、分析测试、数据处理等各个环节。
实施情况
目前，质量控制体系已在多个实验室得到广泛应用，有效提高了维生素类药物分析的准 确性和一致性。
标准品选择与使用注意事项
标准品选择
通过对该维生素类药物的定性、定量分析，评估其质量 稳定性和一致性，为药物研发、生产和监管提供科学依 据。
维生素类药物的分析方法
（3）维生素A在光照下产生的无活性的聚合物：鲸醇。 （4）维生素A的异构体等： 以上这些杂质在 310nm~340nm 的波长范围内有吸收， 所以干扰维生素A的测定。
12
5. 合成的维生素A和天然鱼肝油中的维生素A均为酯式
维生素A，如供试品中干扰测定的杂质较少，能符合下 列第一法测定的规定时，可用溶剂溶解供试品后直接 进行测定，否则应按第二法，经皂化提取除去干扰后 测定。
pH不同的溶液，在247nm处分别测定差示吸收值
（ΔA）。以浓度C为横坐标，以差示吸收值ΔA为纵坐 标绘制标准曲线。
30
样品的测定 取本品20片，精密称定，研细。精密称取适量粉末，
（2）反应介质需无水 （3）温度对呈色强度的影响很大 （ 4）本反应并非维生素 A专属，在相同条件下，某些有关物质均与
三氯化锑显蓝色，干扰测定，常使测定结果偏高。
（ 5 ）三氯化锑试剂有强的腐蚀性，易损坏皮肤和仪器，使用时应 严加注意。
15
（三）高效液相色谱法
采用RP-HPLC法同时测定人血清中维生素 A和维生素E的含量。 根据不同病理生理状态下人血清中维生素A、E的浓度，寻求弄清 与某些疾病的关系，为临床治疗学、营养学等研究提供参考。 1. 仪器与色谱条件 色 谱 柱 为 C18 ； 流 动 相 为 甲 醇 - 水 （ 96:4 ） ； 流 速 为 1.2ml/min。内标物为维生素A醋酸酯。 2. 分析用样品液 对照品：维生素A，维生素E，维生素A醋酸酯
维生素类药物的分析方法：
生物法 微生物法 化学法 物理化学法
2
第一节
维生素A的分析
维生素A 包括
药物分析 第09章 维生素类药物的分析
ChP 片剂、注射剂
g/100ml
E11c%m = 421 A = ECL
（每片）相当于标示量的%=
E 1 1c % A m 10W 0稀 1 释 平 标 度 均 示 1 片 量 0% 0
g
稀释倍数 稀1释度
规格 g/片
（三） 硅钨酸重量法
1、 重量法特点
准确度高 灵敏度低 操作繁琐 设备简单
（三） 其他反应
S元素反应
V iN t B a N O P a H A b S c P b
HA N O3 g N AO g 白 C N H N lH H OO
K 2 HH + 4 g I淡[黄 B ]H 2H4g
I 2 H + K I 红 [B 色 ]H I2 I
硅 H 钨 + 酸白
色[B]2SiO2OH2
12WO 34H2O
苦 H +酮 酸 白 色 扇 形
橙红色
强氧化剂
H3C
CH3 O
O O
H3C HO
HNO3
CH3 O
CH3
CH3 C16H33
生育酚
CH3 C16H33
生育红（橙红色）
（二） 三氯化铁－联吡啶反应
VitE
K△OH
生育酚
Fe 3
[O]
对 生育醌
Fe 2 联吡啶 红色
H3C
CH3 O
CH3 C16H33
2×337.27
3479.22
换 算 2 因 M V数 i1t B 233 .27 70.19 M 沉淀34.2729
3、 测定方法
药物分析-14维生素类药物的分析
§14 维生素类药物的分析·脂溶性维生素：VitA、D2、D3、E、K1等·水溶性维生素：VitB族（B1、B2、B6、B12）、VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺一、维生素A中国药典收载的维生素A是指人工合成的维生素A醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液。
（一）结构与性质1.具有一个共轭多烯侧链的环己烯·具有UV吸收·存在多种立体异构化合物2.不稳定性（1）易发生脱氢、脱水、聚合反应·脱氢维生素A（A2），脱水维生素A（A3）效价低于维生素A ·鲸醇（维生素A醇的二聚体）无生物活性（2）共轭多烯侧链易被氧化维生素A应凉暗处保存，充氮气或加抗氧剂★3.与三氯化锑发生呈色反应4.溶解性不溶于水，乙醇中微溶；易溶于有机溶剂和植物油等（二）鉴别试验1.三氯化锑反应条件: 无水（SbCl3水解），无醇（和碳正离子作用使其电荷消失）。
2.UV法（BP2003）VitA有一个吸收峰，盐酸催化下加热30s生成脱水VitA，有三个吸收峰，且红移（向长波长位移）。
3.TLC法·BP 对照品法（供试品与不同VitA酯类），显色剂：三氯化锑·USP 规定斑点颜色和Rf值，显色剂：磷钼酸（氧化剂）12（三）含量测定 ★1.三点校正法 （1）原理①杂质的吸收在310~340nm 波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；②物质对光的吸收具有加和性。
（2）波长的选择λ1为VitA 的λmax ；λ2、λ3为分别在λ1的两侧各选一点 ①等波长差法——VitA 醋酸酯nm 12340316328=∆λλλλ，、、)2(52.3340316328328A A A A --=（校正）②等吸收比法——VitA 醇33431032576A A A == 334310325325260.4555.2815.6A A A A --=（校正）（3）测定方法①直接测定法（等波长差法）——高纯度维生素A 醋酸酯 Ⅰ核对λmax/329~326max 328改用造化法与规定值比较求否是−→−−→−∈A A nm i λ Ⅱ计算吸收度比及比值差规定吸光度比值-328/A A iⅢ判断差值是否超过±0.02，确定用A 或A 校正%15%3)3%%,15(]%3,%3[32802.032832832802.0计算用改用皂化法＜或＞计算用计算用、计算无超过（校正）（校正）有超过A f f A f A f f A −−−−→−→-+→--∈→+-∈→−−−−→−±±)2(52.3340316328328A A A A --=（校正）%100328328328⨯-=A A A f （校正）Ⅳ求（样品）%11cm E lc AE cm ⨯=)%(%11（样品）·注意：（纯品）（样品）%11%11cm cm E E ≠，c 为混合样品的浓度。
维生素分析报告(优选3篇)
维生素分析报告第1篇全球维生素行业的竞争格局经过前几年重大的整合，集中度已较高。
维生素产品种类齐全、生产厂家众多、整体产销量较高的中国，与德国巴斯夫、荷兰帝斯曼这两大维生素巨头构成了世界维生素的三大制造方。
我国维生素行业十余年来发展迅速，长期困扰维生素E、维生素A、维生素H等主要维生素产品的技术均取得突破性进展，中国已成为能生产全部维生素种类的少数国家之一。
但是，中国维生素行业目前还处于多家共同占据个别品种优势地位的格局，并没有任何一家中国企业能单独在大类维生素上成为主流，且只有浙江医药、新和成等少数企业具有3种以上维生素的生产能力，其余大部分企业只能提供单一维生素产品。
维生素分析报告第2篇维生素定义：维生素（Vitamin）又称为维他命，是人和动物为维持正常的生理功能而必须从食物中获得的一类微量有机物质，在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。
维生素在体内既不参与构成人体细胞，也不为人体提供能量，但如果长期缺乏某种维生素，就会引起生理机能障碍而发生某种疾病。
维生素分类根据物理性质分类：维生素可分为水溶性维生素和脂溶性维生素两大类，水溶性维生素易溶于水而不易溶于非极性有机溶剂，吸收后体内储存很少；脂溶性维生素易溶于极性有机溶剂而不易溶于水，可随脂肪为人体吸收并在体内储积。
人体一共需要13种维生素，其中包括4种脂溶性维生素（维生素A、D、E、K）和9种水溶性维生素（属于维生素B族的8种维生素、维生素C）。
根据获取方式分类：维生素可分为天然制品和化学合成品。
由于天然维生素受原料和提取技术的限制，产量低、价格高，因此化学合成居主导地位，占维生素总产量的80 %左右。
维生素具有外源性、微量性、调节性、特异性四个特点。
外源性是指人体自身不可能合成，需要通过日常的饮食来加以补充；微量性，是指它人体所需量虽然很少，但是它却可以发挥非常巨大作用；调节性，是指维生素必需可以调节人体新陈代谢或能量转变；特异性，是指如果人体或动物机体缺乏了某种维生素后，将呈现特有的病态，如：缺乏维生素A，可患夜盲症，缺为生素D，可患佝偻病（幼年），老年人，易增加患骨质疏松的几率。
典型药物分析—维生素及制剂的质量分析(药物分析课件)
H 5 C﹡ OH
O
4﹡
1
O
内酯结构
共轭 酸性强
3 2
HO
OH
烯二醇结构
酸性弱
维生素C
主要性质
溶解性 酸性 旋光性 还原性
L-抗坏血酸
L-去氢抗坏血酸
(有生物活性)
L-二酮古罗 糖酸
无生物活性
VitC
鉴别
1.与AgNO3反应
AgNO VitC Ag 黑（银镜）
2.与2,6-二氯靛酚反应
2，6 二氯靛酚 VitC无色
Vit E
2.三氯化铁反应
H3C HO
CH3 O
CH3 C16H33
[Fe3+] H3C
O
CH3
CH3 O
OH
CH3 C16H33
CH3
Vit E
三、杂质检查
1.酸度 CH3
2.生育酚
CH3COO
CH3 O
CH3
CH3 无水乙醇 CH3
C16H33
H2SO4 回流
HO
CH3 O
CH3
CH3 C16H33
流动相→A: buffer(0.05M KH2PO4,0.2% 三乙胺,pH6.0):ACN =(97:3) B: MeOH
梯度洗脱程序→(0min)A:B(90:10)→ (20min)A:B(60:40) →
(30min)A:B(90:10)
流速→1.0ml/min
检测波长→210nm 100
80
加盐酸溶液（ 9→1000）约 70ml，振摇15分 钟，使维生素B1 溶解，加盐酸（ 9→1000）稀释 至刻度，摇匀
用干燥滤纸滤过 ，精密量取续滤 液5ml，置另一 100ml量瓶中， 再加盐酸溶液（ 9→1000）稀释
第九章维生素类药物分析
1、具紫外吸收 2、易氧化变质 3、能与三氯化锑呈色 4、水中不溶。
第一节 维生素A的分析
二、鉴别试验
1. 三氯化锑反应
VA 蓝色 → 紫红色 CHCl
SbCl3
3
2. 紫外吸收光谱
VA的无水乙醇溶液在328nm有最大吸收。 3、TLC
第一节 维生素A的分析
例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷—乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：SbCl3T.S. Rf： VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA棕榈酸酯 0.75
第一节 维生素A的分析
A300 A316 A328 A340 A360 ：0.354 ：0.561 ：0.628 ：0.523 ：0.216
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
Ai A 328
：0.555 ：0.907 ：1.000 ：0.811 ：0.299
换算因数
IU / g （纯品）
1% E1cm （纯品）
1IU=0.344g全反式维生素A醋酸酯 1g的维生素A醋酸酯就相当于
1,000,000 2,907 ,000 IU 0.344
% 1530（环己烷、 维生素A醋酸酯 E1cm
328 ）
第一节 维生素A的分析
2907000 换算因子 1900 1530
H3C N N NH2 CH2 N+ S CH2CH2OH
. Cl-.HCl
CH3
1、水中溶解 2、具紫外吸收 3、碱性中可被氧化 4、两个杂环与生物碱沉淀试剂反应
第二节 维生素B的分析
二、鉴别试验： 1、硫色素反应：
维生素B1 铁氰化钾 硫色素
药物分析课件维生素类药物的分析
生理作用
探讨维生素在维持人体正常功能中的重要作用， 以及补充维生素的好处。
过量症
讨论过量维生素摄入的潜在风险和对人体的不良 影响。
维生素类药物及其检测方法
1
水溶性维生素
维生素B1
使用法拉第反应法和HPLC法来分析维生素B1的含量。
维生素B2
应用荧光法和UV分光光度法测定维生素B2的浓度。
维生素B6
药物分析课件维生素类药 物的分析
通过本课件，我们将详细介绍维生素的概述、分类和药物分析方法，以及常 见问题和案例分析。欢迎来到维生素类药物的精彩世界！
维生素概述
定义及分类
解释维生素的定义和根据化学结构分类的方式， 以及它们在人体内的作用。
缺乏症
介绍维生素Байду номын сангаас乏症的症状并阐述如何通过补充维 生素预防和治疗。
使用滴定法和高效液相色谱法进行维生素B6的定量分析。
2
脂溶性维生素
维生素A
通过饱和点法和高效液相色谱法来检测和分析维生素A的含量。
维生素D
运用放射免疫分析法和高效液相色谱法测定维生素D的含量。
维生素E
利用紫外光谱法和高效液相色谱法对维生素E进行定量分析。
维生素K
使用光度法和类肝素血凝法来检测维生素K的浓度。
常见问题及案例分析
1 使用注意事项
2 滥用及危害
3 案例分析与解决方案
提醒使用维生素类药物时 需要注意的事项，如剂量、 途径和副作用。
阐述维生素类药物滥用的 危害和对人体的潜在风险， 以及怎样正确合理地使用。
分享一些关于维生素类药 物的典型案例，并提供解 决方案和建议。
第十三章维生素药物的分析
（2）第二法（等吸收比法）：使 ＝ ＝6/7 。中国药典规定，测定维生素A醇时，λl＝325nm，λ2＝310nm，λ3＝334nm。
4．测定方法：维生素A测定法有“第一法”和“第二法”两种方法（中国药典2000年版）。
维生素C还可还原碱性酒石酸酮、高锰酸钾等氧化剂，使这些试剂褪色，产生沉淀或显色，从而用于鉴别。
2．紫外吸收光谱法：
三、含量测定
碘量法（重点）。中国药典即用直接碘量法，测定维生素C及其片剂、注射液的含量。
1．原理：维生素C具有还原性，可被不同氧化剂定量氧化，可用氧化还原法测定含量。
2．方法：维生素C原料的含量测定取本品约0.2g→精密称定→加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解→加淀粉指示液1ml→立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定→显蓝色并在30秒钟内不褪。
第三节维生素B1的分析
一、结构和性质
1．结构维生素B1又称盐酸硫胺，是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵化合物的盐酸盐。
2．性质
（1）溶解性（2）杂环上氮原子的性质（3）紫外吸收特性
（4）硫色素反应（5）氯化物的特性
二、鉴别试验
1．硫色素反应（重点）维生素B1在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或异丁醇等）中，显蓝色荧光。该反应为维生素Bl的特有反应。
2．紫外分光光度法
中国药典（2000年版）收载的维生素B1片和注射液，均采用本法测定含量。
3．硅钨酸重量法
（1）原理：维生素B1在酸性溶液中，能与硅钨酸定量地生成组成恒定的硅钨酸盐沉淀，根据沉淀的重量和供试品的称取量即可计算维生素B1的含量。沉淀的组成为（C12H17ClN4OS）2·SiO2（OH）2·12WO3·4H2O，其分子量为3479.22，维生素B1的分子量为337.27。
药物分析课件 第六章 维生素类药物的分析-4
皂化法（等吸收比法）： 测定维生素A醇，规定1＝325 nm，
2＝310 nm，3＝334 nm。
A325(校正) = 6.815A325 – 2.555A310 – 4.620A334
最大吸收波长是否在323~327之间
是
否
A300/A325是否 超过0.73
否 计算A325（校正），计算d值 d值是否在± 3.0%以内
天然维生素主要为全反式维生素A （生理活性最高）。
CH3
CH3
CH3 CH2OR
CH3 CH3
R= H = COCH3 = -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
ChP中维生素A指全反式维 生素A1醋酸酯。
CH2OH
维生素A2 （去氢维生素A）
CH2
维生素A3
（去水维生素A）
（二）紫外吸收法
BP
VitA 无水乙醇—盐酸（100:1） Sol1
Sol1 水浴加热30s
测λmax（326nm）
冷却
Sol2
测λmax 348，367，389nm
332nm处有拐点
CH3
CH3
CH3 CH2OR
CH3 CH3
VitA1
无水乙醇—盐酸 水浴加热30s （100:1）
CH2
去水VitA （VitA3 ）
标示量%
维生素A效价(IU/g) × 内容物平均丸重
=
× 100%
标示量(IU/丸)
VitAD胶丸中VitA的含量测定
精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量 差异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物 0.2399g 至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻 度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一20 ml量 瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己 烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并 在下列波长处测得吸收度为:
药物分析维生素类药物的分析
1g维生素Ａ醇相当于：
国际单位IU=0.344微克维生素Ａ醋酸酯； IU＝0.300微克维生素Ａ醇 换算：1g维生素Ａ醋酸酯相当于：
VA1: VA2:(去氢VA) VA3:(去水VA)
注意:在水中三氯化锑水解,必须在绝对无水中进行!
2、紫外吸收光谱 VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。
含量测定
测定波长
吸光度
吸光度比值
吸光度比值差
计算值
规定值
300
0.555
316
0.907
(326)
328
1.000
(329)
340
0.811
360
0.299
紫外UV（中国药典） VB1片：方法与片剂含量测定相同(246nm)
01
VB1注射液：与液剂相同。（246nm)
02
9.3 维生素C的分析 化学结构
D(-)-异抗坏血酸 L(+)-异抗坏血酸 L(+)-抗坏血酸 D(-)-抗坏血酸 具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是 L（+）-抗坏血酸
四、含量测定
1、铈量法（中国药典）
原理：VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄→灰紫 ，需作空白试验。
3、高效液相色谱法
日本药局方（JP13）
气相色谱法：Chp2005
Hale Waihona Puke 测定数据如下表，求：维生素A的标示百分含量。
由此可知，应该用测得的328nm处的吸收度计算。
添加标题
01
02
03
04
药物分析第十四章维生素类药物的分析
04
0
3%
3%
f
第一节 维生素A的分析
01
02
高效液相色谱法
流动相：正己烷－异丙醇（997︰3） 检测波长：325nm 系统适用性实验考察分离度 ——是否能将维生素A醋酸酯顺式和反式分开
第一节 维生素A的分析
01
02
λmax 618nm～620nm
标准曲线法
三氯化锑比色法
第一节 维生素A的分析
异维生素Aa
323
21%
6－顺
异维生素Ab
324
24%
2，6－顺
天然维生素A主要是反式
可用于鉴别和含量测定
01
与三氯化锑呈色:三氯甲烷+三氯化锑=不稳定的蓝色
02
CHCl3
第一节 维生素A的分析
鉴别实验
Vit A
SbCl3
CHCl3(无水无醇)
蓝色
紫红色
（一）Carr-Price反应
第一节 维生素A的分析
05
三氯化锑比色法
06
小结
Vitamins
Contents
01.
C
单击此处添加文本具体内容
02.
D
单击此处添加文本具体内容
03.
E
单击此处添加文本具体内容
第一节 维生素B1的分析
维生素B1广泛分布于米糠、麦麸和酵母中，具有维持糖代谢及神经传导与消化的正常功能。主要用于治疗维生素B1缺乏症、多发性神经炎及胃肠疾病。
第十四章 维生素类药物的分析
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，请尽量言简意赅的阐述观点。
概 述
维生素维持正常生理功能所必需的、微量营养物质，人体不能合成维生素。必须从外界食物中摄取。
维生素类药物分析
A3（ 2校 5 ） 正 A32510% 0 (P) A325
最大吸收波长是否在323～327之间
是 A300/A325是否≤ 0.73
否 色谱法纯化
是
否
A325校正A325100%
A325
A325校正 = 6.815A325-2.555A310-
A 325校正4.260A334 A 325
A 325校正
A3 2 8
A300/A325 ≤ 0.73
超
否
A A3（ 28校正 A3） 2810% 0
A3 2 8
32 8
±3% 之间：A328
-15%～-3%： A328校正
A325校 A正 325A325100% 色法谱 ±3% 之间：A325
<-15%或>+3%:皂化
<-3%或>+3%: A325校
法A328校正
＊相关物质—结构相似,维生素A最大吸收波长 附近也有吸收，对测定有影响。
＊Morton和Stubbs等人在1946年提出了三 点
校正法。
相关物质的吸收
＊a. 维生素A的衍生物（A2、A3） ＊ b. 维生素A的氧化产物 ＊ c. 合成时的中间体
＊ d. 鲸醇：维生素A醇的二聚体， 无生物活性
＊ e. 维生素A异构体 ＊ f. 稀释用油
练习题：维生素A醋酸酯胶丸的含量测定 已知：平均胶丸重为0.0815g 维生素A的标示量为10000IU/丸 取 样 ： 0.1279g→100ml ， 从 中 取 出 2ml →
25ml.
求：维生素A醋酸酯的标示百分含量。
首先计算吸收度比值和吸收度比值差。由结果 知，需计算校正吸收度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
网上辅导7（第13-15章）第十三章维生素药物的分析第一节维生素A的分析一、结构与性质维生素A的结构为具有共轭多烯侧链的环己烯，故具有许多立体异构体。
1．溶解性维生素A不溶于水，易溶于有机溶剂。
2．不稳定性维生素A结构中含有共轭多烯醇侧链，所以性质活泼，不稳定。
易被氧化剂氧化，易被紫外光裂解。
3．紫外吸收特性维生素A结构中有多个共轭不饱和键，在紫外光区有强吸收，可用于鉴别和含量测定。
4．与三氯化锑呈色维生素A在氯仿溶液中与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。
二、鉴别试验维生素A的鉴别可用三氯化锑反应、紫外分光光度法和薄层色谱法等。
三、含量测定（一）紫外分光光度法（重点、难点）1．三点校正法的建立：维生素A在325~328nm的波长范围内具有最大吸收，可用于含量测定。
但维生素A原料中常混有其他杂质，干扰维生素A的测定。
为消除非维生素A物质引起的无关吸收所引入的测定误差，以求得维生素A的真实含量，建立了三点校正法。
即在规定条件下用校正公式计算吸收度A max（校正）后，再进行计算。
可消除无关吸收，测得维生素A的真实含量。
2．测定原理本法是在三个波长处测得吸收度，根据校正公式计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本法称为“三点校正法”。
其原理主要基于以下两点：（1）杂质的无关吸收在310~340nm的波长范围内几乎呈一条直线，且随波长的增大吸收度下降。
（2）物质对光吸收呈加和性的原理。
即在某一样品的吸收曲线上，各波长处的吸收度是维生素A与杂质吸收度的代数和，因而吸收曲线也是二者吸收的叠加。
3．波长选择三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处（即λ1）；其它两点选择在λ1的两侧各选一点（λ2和λ3）。
（1）第一法（等波长差法）：使λ3－λl＝λl－λ2。
中国药典规定，测定维生素A醋酸酯时，λl＝328nm，λ2=316nm，λ3＝340nm，Δλ=12nm。
（2）第二法（等吸收比法）：使2λA ＝3λA ＝6/71λA 。
中国药典规定，测定维生素A 醇时，λl ＝325nm ，λ2＝310nm ，λ3＝334nm 。
4．测定方法：维生素A 测定法有“第一法”和“第二法”两种方法（中国药典2000年版）。
（1）第一法（直接测定法，适用于纯度高的维生素A 醋酸酯）（2）第二法（皂化法，适用于维生素A 醇）第一法（直接测定法，适用于纯度高的维生素A 醋酸酯）（1）测定方法：供试品适量→精密称定→环己烷溶解→定量稀释制成每1ml 中含9~15单位的溶液→照分光光度法→测定其吸收峰的波长→分别在300、316、328、340和360nm 波长处测定吸收度（如不在326~329nm 之间，则改用第二法测定）→计算各波长处的吸收度与波长328nm 处吸收度的比值和波长328nm 处的%1cm 1E 值。
（2）含量计算：每1g 供试品中含有的维生素A 的单位= %1cm 1E （328nm ）×1900（3）校正步骤： ① 如果吸收峰波长在326~329nm 之间，且所测得各波长比值不超过表13-2中规定的±0.02，则用A 328（实测）计算。
② 如果吸收峰波长在326~329nm 之间，但所测得的各波长吸收度比值超过表13-2中规定值的±0.02，应按下式求出校正后的吸收度，并计算校正吸收度与实测吸收度的差值对实测吸收度的百分率（简称差值百分率）。
A 328（校正）=3.52（2A 328-A 316-A 340）③ 如差值百分率在-3.0 %~ +3.0 %之间，则不用校正吸收度，仍以实测吸收度计算含量。
④ 如差值百分率在-15%~ -3 %之间，则以校正吸收度计算含量。
⑤ 如差值百分率＜-15%或＞+3 %，则供试品须按第二法测定。
（4）生物效价和换算因数：1g 维生素A 醋酸酯相当的单位数是：100328%1cm 1⨯⨯=L C A E %A A A 100328328328⨯-=（实测）（实测）（校正）差值百分率∵ 维生素A 醋酸酯的吸收系数为1530∴ 换算因数应用示例：中国药典收载的维生素A 胶丸、维生素AD 胶丸和维生素AD 滴剂等均采用本法测定含量。
维生素AD 胶丸的测定：精密称取维生素AD 胶丸装量差异项下的内容物重0.1287g （每丸内容物的平均装量0.07985g ，标示量每丸含维生素A 10 000单位），置10ml 烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml 量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml ，置另一50ml 量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。
以环己烷为空白，测得最大吸收波长为328nm ，并分别于300、316、328、340和360nm 的波长处测得吸收度如下，求胶丸中维生素A 占标示量的百分含量？波长（nm ）300 316 328 340 360 测得吸收度（A ）0.374 0.592 0.663 0.553 0.228 解：（1）计算各波长处的吸收度与328nm 波长处的吸收度比值，并与规定比值比较。
波长（nm ）300 316 328 340 360 吸收度比值（A i /A 328）0.5640.893 1.000 0.834 0.344 规定比值0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 比值之差 +0.009 -0.014 0 +0.023 +0.045 其中，比值A 360/A 328与规定比值之差为+0.045，超过规定的（±0.02）限度，故需计算校正吸收度。
（2）计算校正吸收度，并与实测值比较A 328（校正）＝3.52（2A 328－A 316－A 340）＝3.52（2×0.663－0.592－0.553）＝0.63792.3100663.0663.0637.0100(328)实测(328)校正(328-=⨯-=⨯-实测）A A AIUIU g g 2907000/344.01000000=μμ190015302907000)/纯品效价（维生素%1烷)，328(cm 1==E g IU A nm 己环因校正吸收度与实测值之差已超过实测值的-3.0%，故应以A 328（校正）计算含量。
（3）计算供试品的吸收系数%1cm 1E （328nm ）值式中A 328（实测）为未经校正的、在328nm 的波长处测得的吸收度；m s 为取样量；D 为稀释体积。
（4）计算供试品中维生素A 效价（IU/g ）及占标示量的百分含量供试品中维生素A 效价练习题：同学自己做以下两题（1）紫外分光光度法测定维生素A 醋酸酯胶丸含量，取内容物39.1mg ，加环己烷溶解并稀释至100ml ，在下列波长下测得吸收度为：波长（nm ）300 316 328 340 360 测得吸收度（A ） 0.390 0.607 0.671 0.550 0.224 已知胶丸内容物平均重量为0.08736g ，其标示量为每丸3000IU 。
试求占标示量的百分含量?（94.9%）（2）维生素A 醋酸酯胶丸的含量测定，取内容物W ，加环己烷溶解并稀释至10ml 。
摇匀，精密量取0.1ml ，再加环己烷稀释至10ml ，使其浓度为9~15IU/ml 。
已知内容物平均重量为80.0mg ，其标示量为每丸10 000IU 。
试计算取样量（W ）的范围是多少？（72~120mg ）第二节 维生素E 的分析一、结构和性质1．结构 维生素E 为苯并二氢吡喃醇的衍生物，苯环上有一个乙酰化的酚羟基。
具有α、β、γ和δ等多种异构体，其中以α-异构体的生理活性最强。
2．性质（1）外观性状和溶解性（2）紫外吸收特性（3）易水解、氧化 维生素E 苯环上有乙酰化的酚羟基，在酸性或碱性溶液中加热，可87.611250/1287.0100637.0/100)nm 328(s )校正(3281%1cm =⨯==D m A E )g /IU (553 117190087.611900)nm 328(%1cm 1=⨯=⨯=E %87.93%1000001007985.0553 117%100)丸/IU (标示量)丸/g ( 每丸内容物平均装量)IU/g (维生素A效价%标示量=⨯⨯=⨯⨯=水解生成游离生育酚，故常作为特殊杂质进行检查。
游离生育酚在有氧或其它氧化剂存在时，则进一步氧化生成有色的醌型化合物，尤其在碱性条件下，氧化反应更易发生。
二、鉴别试验（重点）1．硝酸氧化显色维生素E在酸性条件下，水解生成生育酚，可被硝酸氧化成生育红而显橙红色。
2．三氯化铁-联吡啶反应在碱性条件下，维生素E水解生成游离生育酚，生育酚经乙醚提取后，被Fe3＋氧化生成对生育醌；同时Fe3＋被还原为Fe2＋，后者与联吡啶络合成红色配离子。
三、检查中国药典（2000年版）采用硫酸铈滴定法检查制备过程中未酯化的生育酚。
游离生育酚具有还原性，可与硫酸铈定量发生氧化还原反应。
故在一定条件下，以消耗硫酸铈滴定液的体积数为限量指标，即可控制游离生育酚的限量。
四、含量测定维生素E的含量测定方法很多。
利用其水解产物生育酚的还原性，可用铈量法测定；或将铁（Ⅲ）还原为铁（Ⅱ）后，再与不同试剂生成配位化合物进行比色测定。
近年来，中国药典、USP、BP等国家药典多采用气相色谱法。
第三节维生素B1的分析一、结构和性质1．结构维生素B1又称盐酸硫胺，是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵化合物的盐酸盐。
2．性质（1）溶解性（2）杂环上氮原子的性质（3）紫外吸收特性（4）硫色素反应（5）氯化物的特性二、鉴别试验1．硫色素反应（重点）维生素B1在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化生成硫色素。
硫色素溶于正丁醇（或异丁醇等）中，显蓝色荧光。
该反应为维生素B l的特有反应。
2．氯化物反应维生素B1的水溶液显氯化物反应。
三、含量测定维生素B1及其制剂常用的含量测定方法有：非水溶液滴定法、紫外分光光度法、硅钨酸重量法和硫色素荧光法等。
中国药典采用非水溶液滴定法测定原料药，而其片剂和注射液，采用紫外分光光度法测定。
1．非水溶液滴定法原理：维生素B 1分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺（嘧啶环）和季铵（噻唑环）基团，在非水溶液中，醋酸汞存在下，均可与高氯酸作用。
反应的摩尔比为1:2。
2．紫外分光光度法中国药典（2000年版）收载的维生素B 1片和注射液，均采用本法测定含量。
3．硅钨酸重量法（1）原理：维生素B 1在酸性溶液中，能与硅钨酸定量地生成组成恒定的硅钨酸盐沉淀，根据沉淀的重量和供试品的称取量即可计算维生素B 1的含量。
沉淀的组成为 （C 12H 17ClN 4OS ）2·SiO 2（OH ）2·12WO 3·4H 2O ，其分子量为3479.22，维生素B 1的分子量为337.27。