QBHHS JC006-2013 发酵豆粕中小肽的检测办法(三氯乙酸法)

1原理

利用三氯乙酸作蛋白质沉淀剂，将发酵大豆蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀，并将其中的短链小肽用酸溶解出来，经过滤、离心、消化、蒸馏，测定其蛋白质含量，并以其占样品粗蛋白质的百分数来表示含量。本方法是参照中华人民共和国轻工行业标准大豆肽粉标准(QB/T 2653-2004)基础上修订而来。

2

试剂及仪器2.1

100ml 烧杯；2.2

10ml，50ml 移液管；2.3

干过滤装置；2.4

半微量法或全量法粗蛋白质测定的试剂和装置；2.5

15％三氯乙酸溶液；2.64000r/min 的离心机。

3操作步骤

准确称取样品6g 于100mL 烧杯中，准确加入15%三氯乙酸溶液50mL，混合均匀，静置5min，以中速定性滤纸干过滤，弃去少许初始滤液，将滤液转移至离心管，在4000r/min 下离心10min，准确移取其上清液10mL 于消化管中，按半微量法（消化后定容至100mL，准确移取其中10mL 进行蒸馏）或全量法粗蛋白质测定方法测定其粗蛋白质含量。同时做空白试验、测定样品的粗蛋白质的含量。

4结果与计算

小肽%（半微量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%

小肽%（全量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100%

式中：

V1-----------------馏出液消耗盐酸标准液的体积，ml；V0-----------------空白试验消耗盐酸标准液的体积，ml；检测技术规范与标准方法

编号：QB/HHS JC006-2013修订：第1版第1次修改发酵豆粕中小肽的测定方法

（三氯乙酸法）起草：赵丽霞审核：刘永垒

批准：

执行日期：2013年6月15日

C------------------盐酸的摩尔浓度，mol/l；

6.25×0.014--------蛋白质转换系数；

m-----------------称取样品质量，ｇ；

cp-----------------样品的粗蛋白质含量，%。

5重复性

5.1每个试样的两个平行样间允许相对偏差为其算术平均值的10%，以其算术平均值上报结果；

5.2所得的结果是指小肽占粗蛋白质的百分含量。

6备注

因其中含有无机氮，测得结果应减去无机氮。