烟草科学研究

烟草科学研究法

外源植物生长调节物质对烟草根中烟碱含量和烟碱合成酶活性变化

的生理效应

刘华山，韩锦峰，等植物生理学通讯第41卷第3期，2005年6月

河南农业大学农学院，郑州大学生物工程系，武汉烟草(集团)有限公司

1 研究目的：实验从烟草中合成烟碱的酶活性、烟碱含量与叶面喷施外源生长调节物质之间的关系方面进行了探讨，以期能为抑制或减少烟叶中烟碱的积累，提高烟叶品质和可用性提供参考。

2 研究方法：实验材料为烟草品种K326，烟苗长至60d时打顶，并进行如下处理：不打顶不加生长调节物质，打顶不加生长调节物质，打顶喷施20mg/L IA A、5 mg/LA B A、5 mg/L6-BA 和30 mg/LGA 3。于处理后1、10、20、30d时测定根系内3种酶(ODC、PMT、MPO)活性及烟碱含量，取烟株自下而上第12片叶测定烟碱含量。

3 主要结果：打顶能显著提高根中与烟碱合成有关的3种关键酶的活性，打顶的比不打顶的烟草根中鸟氨酸脱羧酶(ODC)、腐胺-N-甲基转移酶(PMT)和N-甲基腐胺氧化酶(MPO)活性升高，烟叶中烟碱含量剧增；打顶喷施ABA和6-BA烟叶中烟碱含量升高，喷施IAA和GA的下降，IAA的效果更明显。

4 评价：本试验设计对比鲜明，数据很具体详细，让读者很容易看出和比较出不同，从而得出相应的结论。但喷施的生长调节物质没有设置其他的浓度梯度，试验中所设计的浓度梯度太少。并且酶的活性易受外界条件（如温度、湿度等）的影响，若换成测定三种酶的基因表达量结果会更准确。

茉莉酸处理烤烟打顶诱导烟碱合成调控相关蛋白质的筛选

王茂，刘卫群等烟草科技 2007,28（1）：21-24

河南农业大学烟草学院，河南农业大学生命科学学院

1 研究目的：为研究特异蛋白质对烟碱生物合成调控的分子机制，探索打顶促进烟株体内烟碱合成的调控机制以及茉莉酸(JA)信号途径在其中的作用，用JA处理模拟烟草打顶，采用差异蛋白质组学技术对烤烟根尖组织细胞蛋白质组进行分析鉴定了一些差异蛋白质点。

2 研究方法：烟草品种为K326，移栽后60 d时打顶及茉莉酸处理，不打顶作为对照。处理24 h后于根尖组织

3 cm提取蛋白质，3次重复。用双向凝胶电泳定量定性分析根尖组织蛋白质样品，包括斑点检测、斑点匹配、数据分析和输出。分别筛选明显差异、3次重复稳定的蛋白质斑点进行2-DE/MS肽指纹图谱分析，2-DE/MS肽指纹图谱使用Mascot软件搜索NCBInr数据库的Green Plants。

3 主要结果：2-DE图谱经ImageMaster 2DPlatinum软件识别结果显示，约有500个蛋白质点被清楚分离。通过比较发现，打顶和JA处理后表达上调的蛋白质分别有13和26个，其中有3个共同蛋白质点；表达下调的分别有5和6个，其中有3个共同蛋白质点；特异表达点分别有8和5个，其中有4个共同蛋白质点。将其中8个差异点采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行了肽质量指纹图谱分析鉴定。其中4个蛋白质点在JA处理和打顶处理中的变化是相同的，表明这些蛋白质点可能受到茉莉酸信号途径的调控，同时又是刺激烟碱合成的重要因子。

4 评价：差异蛋白质组学是近年来新发展的生物科学技术，而烟碱的生物合成调

控过程是非常复杂的，通过茉莉酸处理模拟打顶，筛选出了几种与烟碱合成密切相关的蛋白质点，本研究有助于探索打顶促进烟碱生物合成调控的分子机制，但关于蛋白质在调控烟碱生物合成过程中的具体作用仍没有阐明，需进一步的研究。

喷施外源植物生长调节物质对白肋烟烟碱含量及其合成关键酶活性

的影响

梁思威杨锦鹏，等华中农业大学学报 2013年9月第32卷第5期

华中农业大学微量元素研究中心，北省烟草科研所

1 研究目的：采用盆栽试验，研究白肋烟打顶后喷施外源植物生长调节物质YCL2和Z5对烟碱含量及其合成关键酶(鸟氨酸脱羧酶和精氨酸脱羧酶)的活性以及总氮、总糖、氯和钾含量的影响为YCL2和Z5的推广应用提供理论依据。

2 研究方法：试验于2010年在湖北省恩施土家族苗族自治州崔坝镇白肋烟试验站采用大棚盆栽的方法进行，供试品种为白肋烟鄂烟1号，2种外源植物生长调节物质为YCL2和Z5。试验设3个处理：喷施外源植物生长调节物质YCL2 (IAA + SA )；喷施外源植物生长调节物质Z5(IAA + SA + NAA)；喷施清水(CK)。外源植物生长调节物质施用的质量浓度组成为SA 400mg/L，IAA 10 mg/L，NAA 10 mg/L。具体方法为白肋烟初花期打顶4h后，每株施用约250mL外源植物生长调节物质，同时喷施等量清水作对照(CK)。每个处理设3个重复，每个重复20盆，共60盆，各盆随机排列，管理一致。分别于打顶前(0d，即实施打顶喷施药剂的当天)、打顶喷施后第1、8 、15、22 天取烟叶样品，共5次分析烟碱、总氮、总糖等指标。在采集叶片样品的同时取根样，剪取直径≤1mm 的幼嫩根系，超低温保存，用于测定鸟氨酸脱羧酶和精氨酸脱羧酶。

3 主要结果：白肋烟打顶后喷施YCL2和Z5能够显著降低白肋烟叶片烟碱的含量，其中喷施YCL2使上部叶片烟碱含量降低20.47%，喷施Z5使上、中部叶片烟碱含量分别降低34.36%和32.38%；喷施YCL2和Z5 能显著降低合成烟碱关键酶（鸟氨酸脱羧酶和精氨酸脱羧酶）的活性。喷施YCL2和Z5对烟叶重要品质指标（总氮、总糖、氯和钾）的含量没有显著影响。结果说明，喷施外源植物生长调节物质YCL2和Z5 能显著降低烟叶烟碱含量，但不影响烟叶品质，在烟叶生产调控烟碱含量上具有较大的推广应用价值。

4 评价：本试验中IAA、NAA和SA是植物内源激素，一方面由于用量比较少；另一方面由于这类物质作为信号物质起作用快而且容易分解不会因为残留对环境造成影响。因此2种外源植物生长调节物质降低烟草烟碱含量有很好的推广应用前景。但试验中只做了盆栽试验，烟叶生长的各种条件都处于最佳状态，但并未做大田生产试验，若想应用于生产实践，还需进一步的大田试验才能推广。

利用15N示踪法研究土壤氮对烤烟氮素累积和烟碱合成的影响

习向银，晁逢春，等植物营养与肥料学报 2008，14(6)：1232-1236

西南大学资源环境学院,中国种子集团公司, 中国农业大学植物营养系

1 研究目的：以烤烟K326为试验材料，在大田条件下，利用15N示踪法，研究了土壤氮对烤烟氮素累积和烟碱合成的影响，以期为烟叶的优质生产管理提供依据。

2 研究方法：烟苗于2002年5月13日移栽。试验地面积为50m2并随机分为4个重复的采样小区。在每个小区随机选16株，其氮素以14NH415NO3作基肥，K15NO3