体内药物分析终极复习资料

1.体内药物分析定义。P1

研究药物及其代谢物在生物体内数量和质量变化规律的方法学科,获得药物在体内吸收、分布、代谢排泄等各种动力参数，药物与大分子的相互作用，代谢产物、代谢途径等信息，对药物评价，为临床合理用药、研发新药等提供科学依据。

2.影响血药浓度的因素（理解）。P3-5

（1）机体因素：包括生理、病理、遗传因素

（2）药物因素：包括剂型因素、药物相互作用

（3）（3）其他因素：大气污染、食品、烟、酒、茶等

药物进入体内后，血液循环为药物体内转运的枢纽。大多数药物只有达到作用部位和受体部位，并达到一定的浓度后，才产生一定的药理作用。多数药物的血药浓度与药理效应呈平行关系，部分药物的血药浓度与药效无明显相关关系。

3.体内药物分析的生物样本及分析对象。P8

生物样本：凡是体液所到之处，如血液、尿液、唾液、毛发、各种器官、组织、呼出气体等都是取样对象，还包括细胞悬液，微粒体孵育液、器官灌流液等体外试验中的各种生物介质。分析对象：母体药物、代谢产物、必要的内源性物质或与之相关的其他药物。

4.体内药物分析的特点

（1）干扰杂质多

（2）被测浓度低

（3）供试样品量少

（4）待测物的易变性

（5）要求较快提供结果

（6）要有一定的仪器设备

（7）工作量大

5.生物样品选择的基本原则。常用的生物样品及其应用特点。P19

选择原则：

（1）必须能反映浓度与药效的关系

（2）易于获得

（3）便于处理

（4）根据不同目的要求选取

常用生物样品及应用特点：

血液优点：较好体现药物浓度与治疗的关系

缺点：（1）损伤性取样，取样量有限制

（2）需要专业人员操作

尿液优点：（1）非损伤性取样

（2）药物浓度高

（3）收集方便

缺点：（1）浓度变化大，与血药浓度相关性差

（2）：不易采集，保存

（3）：肾功能不全、婴儿不宜用此法

唾液优点：（1）非损伤性取样

（2）含蛋白浓度低，易处理

（3）C S/C P较恒定时，可代替血样进行TDM及药物动力学研究

缺点：（1）适用药少

（2）取样量变化大

毛发优点：（1）取样方便，可重复取样

（2）通过测某特定代谢物区别滥用药、临床药

（3）可获得长期用药信息

缺点：（1）预处理繁杂，干扰多

（2）分析对象含量低，需精密仪器

6.血液样品的采集和制备.P21

采集：

通常用一次性针头插入静脉血管内抽取，取下针头，转移到相应容器，不能用力推压以免血细胞破裂

制备：

（1）血浆：多以肝素作抗凝剂，取适量于离心管，旋转使均匀分布于管壁，倾去多余液体，干燥试管；然后加入血样，离心后取上层黄色液体即可，其量约为全血的50%

（2）血清：等血样中血块凝结，在室温25°下凝结速度较慢，可在37°水浴加快血清析出，离心后取上清液即可，其量约为全血的40%

（3）全血：在血样中加入含有抗凝剂的试管，轻轻混匀即可。

6.生物样品的储存。P23-24

（1）冷冻储存

（2）加稳定剂（酶抑制剂、抗氧剂）

（3）加防腐剂或调节pH

8.去除蛋白的方法及原理，各种常用的蛋白沉淀剂及其效果。P27-28

蛋白质沉淀法：

（1）生成不溶性盐沉淀，低于蛋白质等电点的pH时，酸根与带正电荷的蛋白质形成不溶性盐沉淀；高于蛋白质等电点pH时，金属离子与蛋白质中带负电荷的羧基形成不溶性盐沉淀。

（2）盐析和脱水：

与水混溶的有机溶剂可以与蛋白质争夺水化膜，并使水的介电常数减少，从而影响蛋白质的解离程度及所带电荷数量，增加蛋白质颗粒间的引力使蛋白质沉淀。

组织的酶消化法：

蛋白水解酶可在温和条件下有效水解生物蛋白，将与蛋白质结合的药物释放出来

9.常用的缀合物水解方法有哪些？P28

（1）酸水解

（2）酶水解

（3）溶剂解

10.什么样品需要进行有机破坏处理？P29

微量元素多数以结合的形式存在于有机物中，在分析和测定这些元素时，需将这些元素从有机物中游离出来，或者将有机物破坏后测定，根据被测的性质，选则合适的有机物破坏法，使样品中绝大部分有机物破坏。某些元素在破坏有机物的过程中无丝毫损失，又能在破坏有机物后测定是何物干扰。

11.游离药物与结合药物分析的方法有哪些？其原理是什么？P29-30

平衡透析法、超滤法、超离心法、凝胶过滤法

前两法原理：利用半透膜只允许小分子药物通过，而不允许大分子药物通过的原理使游离性与结合性药物分离

12.液液提取法的原理、影响因素及提取技术。P30-33

原理：药物与干扰成分在互不相容的两相溶剂中的分配系数不同，选择性地提取生物基质中的药物

影响因素：水相pH。提取溶剂种类、离子强度

提取技术：通常在戴塞的试管中进行，多半进行一次提取，用酸碱回提时也只是一次，不考虑提取尽药物

13.液固提取法的原理，固相萃取的主要步骤，及固相萃取的影响因素。P33-35

原理：将样品液通过合适的固相小柱，利用药物与杂质对固相小柱亲和力的差别，用适当溶剂冲洗、洗脱，使药物得到净化

步骤：（1）固相柱选择（2）固相柱处理（3）样品液上样（4）分离净化（5）待测物洗脱提取率、选择性的影响因素：（1）流速（2）样品装载量（3）固相柱使用要求（4）样品上柱前的处理

14.提取溶剂的蒸发方法。P36

抽真空挥发或直接通入气体使溶剂挥发

15.柱切换技术的原理。见PPT

是一种在线固相分离技术：

选用一个3～5cm长的短柱，用低溶剂强度的预处理流动相使生物样品净化，富集

切换阀后，分析流动相将组分带入分析柱分离测定

测定结束后仪器自动恢复开始状态，准备下次进样

16.微透析技术的定义。P45

（MD）是一种膜分离技术，利用膜透析原理，对细胞液进行流动性连续采样，在不破坏生物体内环境的情况下，直接插到生物活体内采样进行原位测定。

17.基本概念P51-52

生物介质：指一种生物来源的物质，能够以可重复方式采集和处理。

标准物质：用于制备标准样品和QC样品的待测物的参比标准，结构上可以是物质本身、其游离碱、酸、盐、酯。

标准样品：在空白介质中家人已知量待测物标准物质制成的样品，用于建立标准曲线，计算