果蝇杂交实验报告

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果蝇杂交实验报告

实验日期:2012年9月28日

-2012年10月20日

小组编号:周五5组

小组成员:白坦蹊陈朱媛呼波王启明

【摘要】

实验利用果蝇,这一常用的遗传学模式生物,进行杂交实验,验证了基因的分离定律、自由组合定律、伴性遗传、基因连锁交换等遗传学规律。报告对实验数据进行了卡方检验,对三隐性状中的基因遗传距离进行了计算,证明实验数据基本符合假设的。

【实验原理】

一、遗传定律

1.基因分离定律

一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性,在配子形成时,按原样分离到不同的配子中去,理论上配子分离比是1∶1,F2代基因型分离比是1∶2∶1,若显性完全,F2代表型分离比是3∶1 。

控制体色性状的突变基因位于2号常染色体,正常体色对黑体完全显性,用正常体色果蝇与黑体果蝇交配,得到F1代都是正常体色,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离,出现两种表现型。

2.基因自由组合定律

不同相对性状的等位基因在配子形成过程中,等位基因间的分离和组合是互不干扰,各自独立分配到配子中去,它们所决定的两对相对性状在F2代是自由组合的,在杂种第二代表型分离比就呈9∶3∶3∶1。

控制体色性状的突变基因位于2号常染色体,正常体色对黑体完全显性,控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼对白眼完全显性,用黑体红眼果蝇(♀)与正常体色白眼果蝇(♂)交配,得到F1代都是正常体色,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离,出现四种表现型。

3.伴性遗传

位于性染色体上的基因,其传递方式与位于常染色体上的基因不同,它的传递方式与雌雄性别有关,因此称为伴性遗传。

果蝇的性染色体有X和Y两种,雌蝇为XX,雄蝇为XY。红眼与白眼是一对相对性状,控制该对性状的基因(W)位于X染色体上,且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。

当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时,F1代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼,F2代雌性果蝇都是红眼,雄性果蝇红眼和白眼的比例为1∶1;当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时,F1代雌性果蝇为红眼,而雄性果蝇为白眼,此现象又称为绞花式遗传,F2代雌性果蝇的红眼与白眼比例为1∶1,雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1∶1 。

4.连锁与交换定律

连锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起而遗传的现象;互换是指同源染色体的非姊妹染色单体之间的对应片段的交换,从而引起相应基因间的交换与重组。同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体基因之间可以发生一定频度的交换,因此在子代中将发现一定频度的重组型,但一般比亲组型少得多。

5.基因定位

基因定位就是确定基因在染色体上的位置,确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序,而它们之间的距离是用交换值来表示的。只要准确地估算出交换值,并确定基因在染色体上的相对位置就可以把它们标志在染色体上,绘制成图。

6.三点测交

三点测交是基因定位最常用的方法,它是通过一次杂交和一次用隐性亲本测交,同时确定三对基因在染色体上的位置。

二、果蝇的生活史与雌雄辨认

1.果蝇的生活史

果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段(图1)。

卵:卵白色,长椭圆形,长约0.5mm,在背面的前端伸出一对触丝,它能使卵附着在柔软的食物上,不至于深陷到食物中去。

幼虫:幼虫从卵中孵化出来后,经过两次蜕皮到第三龄期,体长可达4~5mm。

在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部,并且有一黑点即口器;稍后有一对半透明的唾腺,每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸,然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。

蛹:幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上,渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,这就显示即将羽化了。

成虫:刚羽化出的果蝇,身体狭长,翅还没有展开,身体较白嫩,此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的,没有多大区别。不久,蝇体变为粗短椭圆形,双翅展开,体色加深,如野生型果蝇的体色成为灰褐色。

图 1 果蝇的生活史

2.果蝇雌雄的辨认

1)体型雌果蝇体型较大,雄果蝇较小;

2)腹部末端雌性腹部椭圆,末端稍尖,雄性末端钝圆;

3)腹部背面雌性有明显5条黑色条纹,雄性有三条,前两条细,后一条宽,延

至腹面,肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。

4)腹部腹面雌性有较明显的6个腹片,雄性有4个腹片。

5)性梳雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳(图3-3),雌性则无。

6)性梳的有无,是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一

【实验材料与方法】

一、实验材料

1.用具:显微镜,麻醉瓶,培养瓶,滤纸,毛笔,标签,恒温培养箱

2.材料:檀黑体突变型果蝇原种(e)、三隐(白眼、小翅、卷刚毛)突变型果蝇原种(m)

3.药品:乙醚,乙醇,培养基

二、实验步骤

1.设计杂交组合

亲本:正交(m雌×e雄),反交(e雌×m雄)

正交产生的F1代继续杂交,产生F2代。

2.第二步:(9.28-9.30) 收集处女蝇

收集方法:

1)放飞成蝇(生长好、接近羽化蛹多者)

2)清除成蝇后的10小时内收集处女蝇

3.杂交接种(次日就要检查,如有死亡及时补救)。杂交瓶上注明:杂交组合、实验日期、

实验者姓名。

4.部分蛹变黑,F1即将孵出前,移出亲本蝇。亲本蝇冻存(为防止失败,可留存活蝇适当

时间),配制新培养基,用于F1同胞交配。

5.F1代果蝇的观察和交配。 F1代果蝇孵出7-9d观察统计F1,并选10-20对再杂交于

6.一个或多个新瓶。

7.F1杂交一周后,移出F1代果蝇。亲本蝇冻存。

8.第一只F2代果蝇出现后10天内,观察、统计F2代的结果,进行分析

【实验结果及分析】

一、杂交结果

杂交获得的果蝇形状数据见表1、表2。

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