内质网病变的超微结构观察
光镜和电镜在病理诊断中的应用
光镜和电镜在病理诊断中的应用光学显微镜和电子显微镜是病理诊断中常用的两种显微镜。
光学显微镜(简称光镜)是一种基于光学原理工作的显微镜,能够提供高分辨率的图像,可用于观察组织和细胞的形态和结构。
而电子显微镜(简称电镜)则是一种利用电子束代替光束进行成像的显微镜,具有更高的分辨率和更大的倍率,可用于观察更微小的细胞和组织结构。
下面将分别介绍光镜和电镜在病理诊断中的应用。
光镜在病理诊断中的应用光镜广泛应用于组织学和细胞学的病理诊断中,主要有以下几个方面的应用:1.组织学检查:通过对组织样本进行染色和切片后,使用光镜观察组织的形态和结构,以检测异常变化。
在肿瘤的病理诊断中,光镜能够帮助鉴别肿瘤类型、判断肿瘤的恶性程度以及评估肿瘤的分级和分期。
2.细胞学检查:光镜也被用于观察和分析细胞的形态和结构,以判断细胞的异常变化。
例如,在涂片染色后,光镜可用于检测细胞的形态特征、细胞核的变化、细胞器的变化等。
细胞学检查对于早期癌症的早期诊断和病情监测具有重要意义。
3.免疫组织化学:光镜结合免疫染色技术可以检测组织和细胞中的特定抗原或标记物,以确定特定疾病的诊断和预后。
例如,在肿瘤诊断中,通过免疫组织化学可以检测特定肿瘤标记物的表达情况,有助于区分不同类型的肿瘤。
4.高分辨率成像:光镜的高分辨率成像能力可以提供详细的组织结构信息,帮助病理学家观察微小的病理变化。
这对于病理学家进行病变定位和病变性质评估非常重要,有助于制定最佳的治疗方案。
电镜在病理诊断中的应用相较于光镜,电镜具有更高的分辨率和更大的倍率,能够观察到更细微的结构细节,因此电镜在病理诊断中也发挥着重要作用:1.细胞超微结构的观察:电镜能够观察到细胞和组织的超微结构,如细胞器、细胞核内的核仁、线粒体、内质网等。
通过电镜观察,可以检测细胞内的超微结构变化,判断细胞的功能状态和异常变化。
2.病原微生物的观察:某些病原微生物的大小远小于光限的分辨率,因此光镜很难直接观察到它们。
细胞的超微结构-电子显微镜下的细胞
越来越多的研究表明,细胞的超微结构与疾病的发生和发展密切相关。未来将有更多的研 究关注细胞超微结构与疾病的关系,为疾病的诊断和治疗提供新的思路和方法。
细胞超微结构的动态研究
目前对于细胞超微结构的研究主要集中在静态结构上,而对于细胞超微结构的动态变化研 究相对较少。未来将有更多的研究关注细胞超微结构的动态变化,揭示细胞在生理和病理 状态下的动态过程。
信号分子与细胞膜上的受体结合,引发一系 列跨膜蛋白构象变化,进而激活细胞内的信 号传导途径。
受体介导的信号传导过程
受体识别与信号分子结合
细胞膜上的受体特异性识别并结合信 号分子,如激素、生长因子等。
受体活化与信号转导
信号放大与终止
通过级联反应放大信号,实现细胞对 信号的快速响应;同时,存在负反馈 调节机制以终止信号传导。
在生物学领域的应用举例
细胞生物学
电子显微镜可用于观察细胞的超微结构,如细胞 膜、细胞器、细胞核等,揭示细胞内部的结构和 功能关系。
分子生物学
电子显微镜可用于观察生物大分子的结构和功能 ,如蛋白质、核酸等,揭示生物大分子在生命活 动中的作用和调控机制。
微生物学
电子显微镜可用于观察细菌、病毒等微生物的形 态和结构,了解它们的生命活动和感染机制。
特点
细胞超微结构具有高度的复杂性和组织性,各种细胞器在细胞内 精确地分布和排列,共同维持细胞的生命活动。
研究意义及价值
揭示细胞功能
通过研究细胞超微结构,可以深入了解细胞器的形 态、分布和功能,从而揭示细胞的各种生理功能。
疾病诊断与治疗
许多疾病的发生和发展与细胞超微结构的异常密切 相关,因此研究细胞超微结构对于疾病的诊断和治 疗具有重要意义。
细胞超微结构的观察及力学调控研究进展
性、 无 破坏 性 等优 点 。但 光学 显 微 镜 突 出的 缺 点 是
衍射 极 限 , 它 限制 空 间分辨率 在 2 5 0~3 0 0 a m范围。 扫描 近场 光学 显微 镜 ( s c a n n i n g n e a r — i f e l d o p t i c a l mi —
控制 下细胞超微结构改变的相关研究进展作一综述 。
【 关键词 ] 细胞骨架 ; 超微结构 ; 应力 ; 信 号 传 导
[ 中 图分 类 号 ] R 7 8 0 . 2 [ 文献标识码 ] A [ d o i ] 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 4 — 8 6 0 3 . 2 0 1 3 . 0 3 . 0 1 2
化, 对 细胞 的增殖 、 分化 、 运 动 等产 生影 响 I 2 。 随着 力 学信 号 传 导 机制 研 究 的 深入 , 细胞 超 微 结构 的研 究在 多个研 究领 域展 现 出另外 的格 局 。本
文 就 近 年 细 胞 应 力 改 变 细 胞 超 微 结 构 方 面 的 研 究 进 行 综 述
1 . 2 类 别及 特点
细胞 超微 结 构 主 要 包 括 细 胞 膜 、 细胞 质、 细 胞 核、 线 粒体 、 内质 网 、 及 细胞 骨架 等 。研 究证 明 , 细 胞 核是 细胞 功能及 细胞 代 谢 、 生长 、 增殖、 分 化 的 控 制 中心 。细 胞 核 的 大 小 随 着 细 胞 功 能 变 化 而 有 所 不
机体 组织处 于复 杂 的 生 长 环境 , 多 种 机 械 应 力
谢和 细胞 活力 的 形 态支 柱 , 维 持 细胞 和 机 体 的生 命
的作 用极 大地 影 响着组 织 细胞 的结构 、 形 态和 功能 。
电镜-图象分析
8.重视样品制备技术的精益求精。 9.可采用“普遍取样在先、分别选择在后”
的方法。即在大多数或全部尸活检标本术中 取材固定,待冰冻或石蜡切片观察后再作取 舍。
(二)肿瘤细胞电镜结构的一般特 征
1.多形性 不规则、数量增多、呈现核仁边集,一般认为核仁/
合成核蛋白体和核糖 核酸的场所。
核仁一般形态 图1 G颗粒部 F
纤维部 C无定性 部 ↑核基质伸入 核仁 图2 G颗粒部 F 纤维部 C无定性 部
核仁边集 代谢旺盛的细胞,核仁多,较大,靠近核膜分布 新生细胞、胚胎细胞、恶性肿瘤细胞。
细胞受刺激或代谢活跃 的表现
肿瘤、病毒、药物作用、 激素刺激等。也见正常 组织。
L 血管腔, 内皮细胞 质膜三层结构清晰
示小肠上皮细胞 间的细胞连接
图1、2 T紧密 连接 I中间连 接 D桥粒
G缝管连
接 F相嵌连接M微绒毛源自示桥粒、半桥粒、 自身桥粒
图1桥粒
P附
着板 F微丝 D
中间丝
图2半桥粒(↑) B基膜 E细胞质 D真皮(结缔组织)
图3 人胚羊膜细 胞内的自身桥粒
核比值超过0.25是恶性的一个标准。 2.去分化(低分化性) 3.S期细胞特征 4.分化混乱(双向性或多相性分化) 5.代谢不稳定 6.侵润 7、 其它
致谢
示多聚核蛋白体及单核 蛋白体
图1 ↑多聚核蛋白体
图2 众多单核蛋白体 (↑)
图3 ↑单核蛋白体 C 染色体
内 质 网 池 中 Russell´s body ( 取 自 : 浆 细 胞 )
图2 红白血病骨髓巨 噬细胞巨线粒体
管状嵴的线粒体
图1 嵴呈管状的线 粒体
病理学的基本概念和病理病变的观察与研
组织培养
将组织块或组织切片放置在人工环境中,提 供必要的营养物质和生长因子,以维持其生 长和分化。组织培养技术可用于研究组织的 结构、功能和代谢等方面。
细胞培养
将细胞放置在人工环境中,提供必要的营养 物质和生长因子,以维持其生长和增殖。细 胞培养技术可用于研究细胞的形态、生长、 分化、代谢和功能等方面。
病理病变的过程和结局
过程
病理病变的过程通常包括损伤、抗损伤和修复三个阶段。在损伤阶段,各种致病因素作用于机体,导致细胞和组 织损伤;在抗损伤阶段,机体启动防御和修复机制,对抗损伤因素;在修复阶段,机体通过再生、纤维化等方式 修复受损组织。
结局
病理病变的结局取决于病变的性质、机体的抗病能力以及治疗干预等因素。常见的结局包括完全恢复、不完全恢 复、稳定病变和进行性病变等。在某些情况下,病理病变可能导致严重并发症甚至危及生命。
心血管系统病变
动脉粥样硬化的病理变化
动脉粥样硬化是心血管系统最常见的病变之一,主要表现为 动脉内膜脂质沉积、内膜灶状纤维化、粥样斑块形成等病理 变化。
高血压的病理变化
高血压是一种以体循环动脉压升高为主要表现的临床综合征 ,其病理变化主要表现为细小动脉硬化、心脏和肾脏等靶器 官的损害。
神经系统病变
分子生物学技术在病理研究中的应用
基因克隆与表达
通过基因克隆技术获取目的基因,并在体外 或体内表达系统中表达目的蛋白,用于研究 基因的功能和调控机制。
基因突变与敲除
利用基因编辑技术如CRISPR-Cas9等,对特定基因 进行突变或敲除,以研究基因在疾病发生和发展中 的作用。
蛋白质组学
研究细胞中蛋白质的表达、修饰和相互作用 等,以深入了解疾病的分子机制和寻找潜在 的治疗靶点。
《超微结构病理学》一些知识(第一次修订版)
读图术语:嗜锇性板层小体、酶原颗粒、腺腔、毛细血管、粗面内质网、肾小囊腔、基底膜、足细胞胞体、毛细血管、肾小囊壁层1、脱水:固定后的组织块含有游离水,不能与包埋剂混合,必须用中间介质(脱水剂)驱除水分,以利于包埋剂浸透渗入。
常用脱水剂为酒精或丙酮。
市售无水酒精和丙酮往往含有少量水分而纯度不够,可事先加入无水硫酸钠或硫酸铜等干燥剂吸去水分。
脱水的时间可根据样品的不同而适当延长或缩短。
2、基膜:上皮细胞基底面与深部编译组织之间的细胞间质形成的薄膜,包括透明层、基板、网版。
功能:支持、连接、固定。
3、质膜:亦称为细胞膜。
它是细胞与周围环境、细胞与细胞间进行物质交换和信息传递的重要通道。
细胞膜的厚度约为7-10nm ,在低倍tem 下观察质膜时,它呈一条致密的细线。
在高倍TEM 下,质膜呈现出“两暗一明”的三夹板式结构,称为单位膜。
4、景深:景深不是一种固定的数值,而是与放大倍数和分辨率有关的,用以表达纵深方向层次细节程度的度量。
扫描电镜景深大,图像立体感强。
扫描电镜的景深比光学显微镜大几百倍,比投射电镜大10 倍左右。
★线粒体:线粒体的形状多种多样,一般呈线状、粒状或短杆状。
光镜下,线粒体直径为0.5-1.0um ,长短不一。
电子显微镜下,线粒体由内外两层膜组成。
内、外膜之间的腔隙称线粒体外室,内膜围成的腔称线粒体内室。
线粒体内膜向内折叠形成[ 山脊] 膜之间的间隙称“[ 山脊] 间隙”,与外室想通。
★主要功能:是进行氧化磷酸化,合成ATP ,为细胞生命活动提供能量。
★病理:线粒体对有害因素敏感,易出现超微结构上的异常改变,且在一定范围内又是可逆的,故线粒体是电镜下观察细胞受损的重要形态指标,有人称之为“细胞病变指示器”,是分子细胞病理学检查的重要依据。
1. 肿胀,有室内肿胀和室外肿胀;2. 肥大及增生;3. 巨大线粒体及环形、杯形线粒体;4. 线粒体间疝形成;5. 包含物;6 线粒体固缩;7. 急支颗粒增多、增大。
超微病理4
细胞超微结构及基本病变——细胞核核膜:由内外两层平行排列的膜性结构组成,核周间隙宽20-30nm。
核孔是核膜上的特殊结构,直径70nm,于核孔处有单层隔膜覆盖,中央留一微孔,mRNA通过此处进入胞质。
作用:将核质围在一个相对稳定的环境中,并控制与胞质的物质交换。
染色质:为细胞内的遗传物质,主要成分是DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA。
1.异染色质:深色颗粒状或小块状,电子致密度高。
有三类:周围染色质、分散染色质、核仁旁染色质。
一般不参与RNA及蛋白质的合成代谢活动。
2.常染色质:间期核处于伸展状态的染色质,为极纤细的丝状物,直径3nm,核内呈浅亮的区域,控制分裂间期细胞的代谢活动。
核仁:电镜下,似一团高电子密度、无膜包裹、裸露于核质内的海绵状结构。
分纤维部,颗粒部,核仁相随染色质,无定形部。
功能:合成rRNA少数细胞无核仁,如中性粒细胞;蛋白质合成旺盛的细胞,核仁较大;蛋白质合成不旺盛的细胞,核仁较小。
除核仁大小、数目可随细胞功能而变化外,其位置变化也有意义。
如蛋白质合成旺盛的肝细胞,核仁较大且靠近核膜,肿瘤细胞中也较多见,这种现象称为核仁边集,这可能更有利于合成的RNA自胞核输至胞质。
核质:又称核基质,无定形物组成,含水、无机盐、蛋白质(包括各种酶),是核内其他成分完成其功能的内环境。
染色质间颗粒:位于常染色质区内,直径15-50nm。
染色质周围颗粒:位于异染色质区周围,直径30-50nm,颗粒周围有晕。
细胞核的超微病变核外形的改变:病理情况下,由于核被膜内陷,胞核可出现明显不规则1、裂核:核表面有1-2个很深的凹陷,常见于B淋巴细胞淋巴瘤、卵巢粒层细胞瘤2、曲核:核表面凹陷浅而多,常见于T淋巴细胞淋巴瘤3、脑回核:核表面有多个深浅不一的凹陷,核十分畸形,似脑回,常见于T淋巴细胞淋巴瘤核膜的变化:1、内陷:可致核外形异常2、增厚、增生、复层化:常见于病毒感染3、核膜膨出或大泡形成:核膜向外膨出,常见于培养细胞4、核内板层、小管、液泡的形成:起源于内核膜5、核突:核膜向表面突起所致,呈锤状、结节状、棒状,可附有蒂,外围为核膜,内容为核质6、核袋:核膜内陷,内容可为胞质的一部分,亦可仅为核质,核袋外侧绕以染色质带,多见于恶性淋巴瘤、淋巴细胞白血病7、核纤维板层:紧贴于核膜的纤细的中等电子密度物质,呈片层状,见于修复组织细胞、肿瘤细胞染色质的变化:1、染色质结块:染色质聚集成大小不等的团块,可复性2、染色质边集:染色质浓集,位于核内膜内侧,其它部位的染色质则趋于消失3、染色质均匀化:核内呈均匀中等电子密度,核皱缩呈锯齿状不规则外观4、常染色质增多,染色质周围颗粒、染色质间颗粒增多核仁的变化:1、核仁增大:常见于增生活跃的细胞2、核仁形状不规则、数目增多:见于肿瘤或增生活跃的细胞3、核仁边集:核仁一般位于中间,当细胞处于蛋白质合成增加的状态时,核仁移向周边,紧靠核膜或核膜凹陷附近,有利于核仁物质与胞质的交换,见于肿瘤、再生的肝细胞4、核仁退形性变:核仁空泡化、环形核仁(核仁形成环形,中间为电子密度低的核质,此种改变可能是核蛋白合成受阻,使核仁物质减少)、核仁分离(核仁纤维成分和颗粒成分分开,出现明显界限,核仁上形成一新月体、半球形或帽状团块)核内包涵体:核内出现正常成分以外的物质1、假包涵体:由核膜内陷,进而内陷处的核膜紧靠并逐渐融合而成。
病毒、细菌等病原微生物超微结构
malignant if they persist for a sufficiently long time.
⑦病毒的对称性
三类典型形态Leabharlann 病毒:•二十面体对称的结构(球状):壳体呈20面体, 每一面又呈三角形,核酸折叠在壳体内
•螺旋对称的结构(杆状):核壳体由核酸与核 体的子粒按特殊的结构方式构成
•复合对称的结构(蝌蚪状)
大肠杆菌的T偶数噬菌体是由 椭圆形的二十面体头部和螺旋 对称的尾部组合而成,是病毒 中复合对称的代表。
病毒具备生命活动的最基本特征:遗传 与复制
没有细胞结构,一般病毒主要成分由单 一类型核酸(DNA或RNA)和蛋白质组成, 故也称分子生物。
病毒自身既无产能酶系也无蛋白质合成 系统,没有独立的代谢与能量转化系统, 必须利用宿主的结构、原料、能量与酶系 统进行复制。
病毒是彻底的寄生物:主要的生命活动必 须在细胞内才能完成--复制、增殖
③复合对称的病毒粒子
噬菌体
2、透射电子显微镜下观察病毒
方法:
负染色技术 超薄切片技术
Visualization of individual virus particles 单个病毒粒的可视性
Most biological materials show little contrast with their surroundings unless they are stained. In the case of light microscopy, contrast can be enhanced by using coloured stains which selectively absorb certain wavelengths. The electrons in the electron microscope are absorbed very little by biological material and contrast is obtained mainly by electron scattering.
实验二细胞的超微结构—透射电镜下的细胞器
实验二细胞的超微结构—透射电镜下的细胞器实验目的:通过使用透射电子显微镜观察和研究细胞的超微结构,了解细胞器的形态和组织,以及其在细胞功能中的作用。
实验原理:透射电子显微镜是一种利用电子束通过样品的原理进行显微观察的仪器。
相比传统光学显微镜,透射电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数。
实验步骤:1.准备样品:使用透射电子显微镜需要制备薄片样品。
将细胞或组织固定、切片和上染色剂等。
2.调整放大倍数:根据需要观察的细胞器,调整透射电子显微镜的放大倍数。
3.开始观察:将样品放入透射电子显微镜中,调整焦距和对比度,开始观察细胞超微结构。
4.记录结果:使用电子显微镜拍摄或记录所见到的细胞器的图像和形态。
根据观察结果,对细胞器的结构和功能进行分析和讨论。
实验结果:观察细胞的超微结构可以看到许多细胞器,如细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等。
细胞核是细胞的控制中心,一般位于细胞的中央。
在透射电镜下观察,可以看到核膜(由内核膜和外核膜组成)、核孔、核仁等结构。
核膜通过核孔与细胞质相连,核仁是RNA合成的地方。
线粒体是细胞的能量中心,通过细胞呼吸产生ATP。
在透射电镜下观察,线粒体呈棒状或梭形,内部含有许多内膜,并形成一系列被称为嵴(cristae)的褶层。
嵴上含有许多氧化酶,参与细胞呼吸。
内质网是细胞的重要细胞器之一,两个片层之间的空腔称为内质网腔。
内质网膜上覆盖着许多小颗粒,称为核糖体。
内质网分为粗面内质网和平滑内质网,前者存在核糖体,用于蛋白质合成,后者没有核糖体,参与脂质代谢和钙离子存储。
高尔基体是细胞的分泌细胞器,具有分泌蛋白质、糖蛋白质和磷脂等功能。
高尔基体由多个平面被膜囊构成,形成一系列被称为囊泡的结构。
在透射电镜下可以看到高尔基体具有一层由囊泡组成的堆叠结构。
溶酶体是细胞的消化系统,其内部含有多种水解酶。
溶酶体呈球状或椭圆形,在透射电镜下可以看到其内部含有酶泡。
溶酶体参与细胞内的废物降解和吞噬体的形成。
神经系统的超微结构及常见病变 ppt课件
1.胞体(soma): (1)细胞核:相对较大,呈圆性。位于细胞中
央,核内常染色质多,单个核仁、居中。
中枢神经系统的正常超微结构
中枢神经系统的正常超微结构
中枢神经系统的正常超微结构
(2)核周质(perikaryon): * 尼氏体(Nissl body):由平行排列粗面内质网
内皮细胞:细胞呈扁平形,细胞之间有紧 密连接;胞质连续,其内线粒体较多, 吞饮小泡少;酶类较丰富。
基膜:完整、连续。
中枢神经系统的正常超微结构
中枢神系统的基本病变
神经元变暗、皱缩
中枢神经系统的基本病变
中枢神经系统的基本病变
中枢神经系统的基本病变
神经元肿胀,胞质基质空化
中枢神经系统的基本病变
中枢神经系统的基本病变
细胞毒性脑水肿:神经元肿胀
周围神经系统的正常超微结构
周围神经系统包括脑和脊髓以外 的神经细胞体和神经纤维组成的神经 干、神经丛、神经节及神经末梢。
周围神经系统的正常超微结构
(一)有髓神经纤维: 每根神经纤维由1个神经膜细胞胞体包绕。
周围神经系统的正常超微结构
1.神经膜细胞:又称施万细胞(Schwann cell) ● 细胞呈梭形,表面有基膜; ● 核呈卵圆形; ● 细胞膜大部分形成髓鞘;其余胞质(又称 神经膜)内有线粒体、粗面内质网、高尔基 体、溶酶体、微管及微丝。
五、神经毡(neuropil) 位于神经元和神经胶质细胞胞体之间。
由无髓神经纤维、有髓神经纤维、神经胶 质细胞突起和毛细血管构成。
中枢神经系统的正常超微结构
中枢神经系统的正常超微结构
中枢神经系统的正常超微结构
中枢神经系统的正常超微结构
光学显微镜的观察范围
光学显微镜的观察范围又称为超微结构。
指在普通光学显微镜下观察不能分辨清楚的细胞内各种微细结构。
(普通光学显微镜的分辨力极限约为0.2微米,细胞膜、内质网膜和核膜的厚度,核糖体、微体、微管和微丝的直径等均小于0.2微米,因而用普通光学显微镜观察不到这些细胞结构,要观察细胞中的各种亚显微结构,必须用分辨力更高的电子显微镜。
)能够在电子显微镜下看到的直径小于0.2微米的细微结构,叫做亚显微结构。
电子显微镜的原理:电子显微镜是一种电子仪器设备,可用来详细研究电子发射体表面电子的放射情形。
其放大倍数和分辨率都比光学显微镜高得多。
因为普通光学显微镜的放大倍数和分辨率有限,无法观测到微小物体。
以电子束来代替可见光束,观察物体时,分辨率就没有波长要在可见光谱之内的限制,不过电子透镜无法作得像光学透镜那样完美。
因此理论上,电子显微镜所具有的分辨率并不可靠。
目前电子显微镜的分辨率可达10-7厘米(约为原子直径的两倍)。
通常电子显微镜的放大率是200~200 000倍,再经照相放大可达1000 000倍。
电子显微镜有两大类:(1)发射型。
(2)电磁、静电扫描型。
前者用于研究电子放射现象;后者用以增加普通光学显微镜的应用范围。
1924年法国物理学家德布洛意指出电子和其他的粒子也都具有和光类似的波动性质。
他还求出了计算它们波长的公式:λ=/(mv)式中m是粒子的质量而v是它的速度,h是普朗克常数。
此公式发明的年代较早,后来由美国科学家德维生及革末用实验证明其正确性。
既然正确,也就告诉人们:虽然电子是一种可称重量,可数数目,可以被电子枪发射的粒子,但它同时又是一种波。
从公式中我们可以看到,如果使电子运动的速度十分巨大的话,它就可以明显地显示出波长极短的波动性。
如果在光学显微镜中被观察物的大小比光波波长还小的话,人们就不能分辨出来。
在实用上通常取波长λ的三分之一作为限度,光波波长约在6×10-5厘米左右,它的三分之一就是2×10-5厘米了。
细胞的超微结构及其基本病理
细胞器的多态性
来自不同组织器官的细胞,其细胞器在形 态上有一定的差别,因此在超微结构的研究上 首先必须了解该类细胞器的不同形态,在确证 细胞器的病理变化中尤其应该考虑到这一因素, 下结论一定要慎重。
细胞核在形态上的多样性
细胞核 的正常结构与病理变化 细胞核(nucleus)是遗传信息的载体,细胞的调节中心, 其形态随细胞所处的周期阶段而异,通常以间期核为准。 细胞核外被核膜。核膜由内外二层各厚约3nm的单位膜构 成,中间为2~5nm宽的间隙(核周隙);核膜上有直径约50nm 的微孔,作为核浆与胞浆间交通的孔道,其数目因细胞类型和 功能而异,多者可占全核表面积的25%;在肝细胞核据估算约 有2000个核孔。 核浆主由染色质构成,其主要成分为脱氧核糖核酸 (DNA),并以与蛋白质相结合的形式存在,后者由组蛋白与 非组蛋白组成。染色质的NDA现在已可用多种方法加以鉴定和 定量测定。
核内包含物(intranuclear inclusions) 在某些细胞损伤时可见核内出现各种不同的包含 物,可为胞浆成分(线粒体、内质网断片、溶酶 体、糖原颗粒、脂滴等),亦可为非细胞本身的 异物,但最常见的还是前者。这种胞浆性包含物 可在两种情况下出现:①胞浆成分隔着核膜向核 内膨突,以致在一定的切面上看来,似乎胞浆成 分已进入核内,但实际上大多仍可见其周围有核 膜包绕,其中的胞浆成分常呈变性性改变(如髓 鞘样结构,膜碎裂等)。这种包含物称为胞浆性 假包含物(图1-3);②在有丝分裂末期,某些 胞浆结构被封入形成中的子细胞核内,以后出现 于子细胞核中,称为真性胞浆性包含物。
细胞膜上还有特殊的识别区,结合在糖萼上,借此,细 胞可相互识别,从而相互接近形成一定的细胞组合,或相互 排斥而分离。同样,通过识别区,增生中的细胞在互相接触 时就会停止分裂(接触抑制),而癌细胞则已失去这种表面 功能,故可不受限制地增生。此外,细胞膜上还有一种膜抗 原可以识别“自我”和“非我”(组织相容性抗原)。这种 膜抗原在器官移植中具有重要意义,因为它可致敏受体,从 而引起对移植物的排斥反应。最后,细胞上还有一些特异性 区域带着特殊的化学簇,可以接受相应的化学信号,称为膜 受体或表面受体。但从形态学上不能辨认。这种膜受体具有 十分重要的意义,因为已知许多物质如激素、免疫球蛋白、 药物、毒素以及感染因子等都是作为外来信号被受体接受后 才转化为细胞内效应而发挥其作用。如封闭其受体,则亦同 时消除其作用。
实验八1细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使
实验八1细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使细胞超微结构观察与透射电子显微镜的使用引言:细胞是构成生物体的基本单位,是人们研究生命现象和生理特点的重要对象。
为了更好地了解细胞的组成和结构,科学家们发展了不同的显微镜技术,其中透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope, TEM)成为观察细胞超微结构的最高分辨率显微镜。
本实验旨在通过使用透射电子显微镜,观察和研究细胞超微结构,以加深对细胞组成的理解。
一、实验目的通过透射电子显微镜观察和研究细胞超微结构,加深对细胞组成的理解。
二、实验步骤1.将样品制备成细切片。
2.将细切片固定在铜网上。
3.将样品放入透射电子显微镜中。
4.调整透射电子显微镜的参数,如加速电压和对比度。
5.通过透射电子显微镜观察细胞超微结构,并进行拍照记录。
6.分析和解读观察到的细胞超微结构。
三、实验结果和讨论在透射电子显微镜下观察到的细胞超微结构有以下几个重要组成部分。
1. 细胞核(Nucleus):细胞核是细胞的控制中心,包含DNA分子和相关蛋白质。
在透射电子显微镜下,细胞核可见为一个圆形或椭圆形的结构,外部由双层核膜包围,内部含有染色质和核仁。
2. 内质网(Endoplasmic Reticulum, ER):内质网是一种细胞内膜系统,参与蛋白质合成和运输。
在透射电子显微镜下,内质网可见为一系列连接的膜囊泡、膜管或平片结构。
3. 线粒体(Mitochondria):线粒体是细胞内的能量发生器,参与细胞的呼吸作用。
在透射电子显微镜下,线粒体可见为一个椭圆形的结构,由内外两层膜组成,内膜上有许多呼吸酶。
4. 高尔基体(Golgi Apparatus):高尔基体是细胞内的分泌系统,参与蛋白质的修饰和分泌。
在透射电子显微镜下,高尔基体可见为一系列扁平的膜囊泡。
细胞超微结构的观察和研究有助于我们深入了解细胞的功能和活动。
透射电子显微镜具有高分辨率和高放大倍数的特点,能够观察到细胞内部微观结构的细节,如蛋白质的精确位置和细胞器之间的相互作用。
如何利用电子显微镜观察细胞结构
如何利用电子显微镜观察细胞结构细胞是生物体的基本单位,它的结构和功能对于生物学研究具有重要意义。
为了更深入地了解细胞的结构,科学家们发展出了许多先进的技术,其中电子显微镜是最为常用和有效的一种。
本文将介绍如何利用电子显微镜观察细胞结构,并探讨其在生物学研究中的应用。
一、电子显微镜的原理和优势电子显微镜是一种利用电子束代替光线来观察样品的显微镜。
相比传统光学显微镜,电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数,能够观察到更小的细胞结构细节。
其原理是通过电子束的散射和折射来形成样品的影像,然后通过电子感应器将影像转化为电子信号,最终显示在屏幕上。
二、制备细胞样品在观察细胞结构之前,首先需要制备细胞样品。
通常情况下,细胞样品需要进行固定、切片和染色等处理。
固定是将细胞固定在样品上,常用的固定剂有醋酸乙酯和戊二醛。
切片是将固定后的细胞样品切成非常薄的切片,常用的切片工具有超薄切片机和冷冻切片机。
染色是为了增强细胞结构的对比度,常用的染色剂有重金属盐和荧光染料。
三、观察细胞结构在制备好细胞样品后,就可以使用电子显微镜进行观察了。
首先,将样品放入电子显微镜的样品舱中,并调整好焦距和对比度等参数。
然后,通过控制电子束的方向和强度,将电子束照射到样品上。
样品中的细胞结构会对电子束产生散射和折射,形成影像。
最后,通过电子感应器将影像转化为电子信号,并显示在屏幕上。
四、电子显微镜在生物学研究中的应用电子显微镜在生物学研究中有着广泛的应用。
首先,它可以帮助科学家们观察和研究细胞的超微结构,如细胞核、线粒体和内质网等。
通过电子显微镜的高分辨率和放大倍数,科学家们可以更清晰地观察到这些细胞结构的形态和功能。
其次,电子显微镜还可以用于观察细胞内的亚细胞结构,如蛋白质复合体和细胞器。
通过观察这些亚细胞结构的形态和分布,科学家们可以了解它们在细胞功能和代谢过程中的作用和调控机制。
此外,电子显微镜还可以用于观察细胞的细胞分裂和细胞凋亡等重要生命过程。
光学显微镜的观察范围
光学显微镜的观察范围又称为超微结构。
指在普通光学显微镜下观察不能分辨清楚的细胞内各种微细结构。
(普通光学显微镜的分辨力极限约为0.2微米,细胞膜、内质网膜和核膜的厚度,核糖体、微体、微管和微丝的直径等均小于0.2微米,因而用普通光学显微镜观察不到这些细胞结构,要观察细胞中的各种亚显微结构,必须用分辨力更高的电子显微镜。
)能够在电子显微镜下看到的直径小于0.2微米的细微结构,叫做亚显微结构。
电子显微镜的原理:电子显微镜是一种电子仪器设备,可用来详细研究电子发射体表面电子的放射情形。
其放大倍数和分辨率都比光学显微镜高得多。
因为普通光学显微镜的放大倍数和分辨率有限,无法观测到微小物体。
以电子束来代替可见光束,观察物体时,分辨率就没有波长要在可见光谱之内的限制,不过电子透镜无法作得像光学透镜那样完美。
因此理论上,电子显微镜所具有的分辨率并不可靠。
目前电子显微镜的分辨率可达10-7厘米(约为原子直径的两倍)。
通常电子显微镜的放大率是200~200 000倍,再经照相放大可达1000 000倍。
电子显微镜有两大类:(1)发射型。
(2)电磁、静电扫描型。
前者用于研究电子放射现象;后者用以增加普通光学显微镜的应用范围。
1924年法国物理学家德布洛意指出电子和其他的粒子也都具有和光类似的波动性质。
他还求出了计算它们波长的公式:λ=/(mv)式中m是粒子的质量而v是它的速度,h是普朗克常数。
此公式发明的年代较早,后来由美国科学家德维生及革末用实验证明其正确性。
既然正确,也就告诉人们:虽然电子是一种可称重量,可数数目,可以被电子枪发射的粒子,但它同时又是一种波。
从公式中我们可以看到,如果使电子运动的速度十分巨大的话,它就可以明显地显示出波长极短的波动性。
如果在光学显微镜中被观察物的大小比光波波长还小的话,人们就不能分辨出来。
在实用上通常取波长λ的三分之一作为限度,光波波长约在6×10-5厘米左右,它的三分之一就是2×10-5厘米了。
选修课 电镜技术 质膜及其特化物的超微结构与超微病变
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三、细胞连接
细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间形成的一些特化 结构关系,称之为细胞连接(cell junctions)或细 胞间连接(intercellular junctions)。
胞饮作用(pinocytosis):形成胞饮小泡(pinocytotic vesicle)。 有的胞饮小泡很小,称之为微胞饮作用(micropinocytosis),只能 在电镜下才能见到。
有的含内吞物质的小泡,内吞物质不进入溶酶体,而外排到细胞
另一侧质膜外,这一物质运输过程称为穿胞运输(transcytosis; diacytosis)。
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3、缝隙连接(gap junctions):散在分布于相邻细胞间, 是动物细胞间普遍存在的一种连接。由于连接处两相邻细胞 的单位膜间仅夹有2nm的细胞间隙,故缝隙连接在低倍电 镜下不易区分,但运用冷冻复型技术可见在缝隙连接处质膜 的P面上有一片片聚集的紧密排列颗粒,彼此呈现规律的点 阵排列,进一步研究发现相邻细胞质膜的连接点处是由圆柱 状镶嵌蛋白质微粒组成,一般由六个微粒蛋白围成一中央小 管,即为跨膜蛋白构成的通道。从而在细胞间建立了电和代 谢偶联结构,用胶体氢氧化镧作电子染色示踪剂可证实镧能 自由通过缝隙连接。有学者称之为偶联连接(coupling juncion)或孔隙连接,其对细胞活动的主要功能影响有: 细胞分化、协调代谢和电兴奋传导。
内质网——精选推荐
内质⽹1 概述编辑本段 内质⽹是细胞内的⼀个精细的膜系统。
是交织分布于细胞质中的膜的管道系统。
两膜间是扁平的腔、囊或池。
内质⽹分两类,⼀类是膜上附着核糖体颗粒的叫粗糙型内质⽹,另⼀类是膜上光滑的,没有核糖体附在上⾯,叫光滑型内质⽹。
粗糙型内质⽹的功能是合成蛋⽩质⼤分⼦,并把它从细胞输送出去或在细胞内转运到其他部位。
凡蛋⽩质合成旺盛的细胞,粗糙型内质⽹便发达。
在神经细胞中,粗糙型内质⽹的发达与记忆有关。
光滑型内质⽹的功能与糖类和脂类的合成、解毒、同化作⽤有关,并且还具有运输蛋⽩质的功能。
由KR.Porter、A.Claude和EF.Fullam等⼈于1945年发现,他们在观察培养的⼩⿏成纤维细胞时,发现细胞质内部具有⽹状结构,建议叫做内质⽹endoplasmicreticulum,ER,后来发现内质⽹不仅仅存在于细胞的“内质”部,通常还有质膜和核膜相连,并且与⾼尔基体关系密切,并且常伴有许多线粒体。
2 基本简介编辑本段 内质⽹是指细胞质中⼀系列囊腔和细管,彼此相通,形成⼀个隔离于细胞质基质的管道系统。
它是细胞质的膜系统,外与细胞膜相连,内与核膜的外膜相通,将细胞中的各种结构连成⼀个整体,具有承担细胞内物质运输的作⽤。
内质⽹能有效地增加细胞内的膜⾯积,内质⽹能将细胞内的各种结构有机地联结成⼀个整体。
根据内质⽹膜上有没有附着核糖体,将内质⽹分为滑⾯型内质⽹和粗⾯型内质⽹两种。
滑⾯内质⽹上没有核糖体附着,这种内质⽹所占⽐例较少,但功能较复杂,它与脂类、糖类代谢有关。
粗⾯内质⽹上附着有核糖体,其排列也较滑⾯内质⽹规则,功能主要与蛋⽩质的合成有关。
这两种内质⽹的⽐例与细胞的功能有着密切的联系,如胰腺细胞中粗⾯型内质⽹特别发达,这与胰腺细胞合成和分泌⼤量的胰消化酶蛋⽩有关,在睾丸和卵巢中分泌性激素的细胞中,则滑⾯型内质⽹特别发达,这与合成和分泌性激素有关。
细胞质中内质⽹的发达程度与其⽣命活动的旺盛程度呈正相关。
内质网应激反应蛋白在氧化应激诱导人宫颈癌Hela细胞自噬中的作用
内质网应激反应蛋白在氧化应激诱导人宫颈癌Hela细胞自噬中的作用于春艳;刘希;于春荣;张钰;苏静;刘玉和;康劲松【摘要】目的:探讨内质网应激反应蛋白在氧化应激诱导人宫颈癌Hela细胞自噬过程中的作用,阐明内质网应激-自噬途径调控肿瘤细胞生存的可能机制.方法:人宫颈癌Hela细胞分为对照组、VK3 (30 μmol·L-1)组、内质网应激抑制剂牛磺熊去氧酸钠(TUDC) (500μmol·L-1)组和VK3(30 μmol·L-1)与TUDC(500 μmol·L-1)联合作用组.透射电镜观察Hela细胞内质网形态学变化.MTT法检测细胞生存率.Westernblotting法检测内质网应激特征性分子葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ)的表达水平.结果:对照组细胞形态正常,VK3组细胞浆内可见自噬泡及扩张的内质网.与VK3组比较,VK3与TUDC联合作用组Hela细胞生存率降低(P<0.05).与对照组比较,VK3组GRP78和LC3-Ⅱ蛋白表达水平均增加(P<0.05);与VK3组比较,VK3与TUDC联合作用组GRP78和LC3-Ⅱ蛋白表达水平均降低(P<0.05).结论:在氧化应激诱导Hela细胞损伤过程中,内质网应激反应蛋白可介导Hela细胞发生自噬.【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》【年(卷),期】2014(040)001【总页数】4页(P1-4)【关键词】氧化应激;内质网;葡萄糖调节蛋白78;细胞自噬;Hela细胞【作者】于春艳;刘希;于春荣;张钰;苏静;刘玉和;康劲松【作者单位】北华大学基础医学院病理学教研室,吉林吉林132013;北华大学化学与生物学院,吉林吉林132013;北京昭衍新药研究中心有限公司毒理部,北京100176;吉林大学基础医学院病理生理学教研室,吉林长春130021;吉林大学基础医学院病理生理学教研室,吉林长春130021;北华大学基础医学院病理学教研室,吉林吉林132013;吉林大学基础医学院病理生理学教研室,吉林长春130021【正文语种】中文【中图分类】R363.2;R737.33氧化应激可能通过引起蛋白氧化及积聚诱导内质网应激[1-2]。
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内质网病变的超微结构观察徐娇等摘要:电镜技术的应用使人们对细胞的超微结构有了更深入的了解。
各种细胞器的结构以及其病理状况时发生的改变为人们判断疾病的发生提供了直观科学的依据。
本文主要概述了投射电镜观察下内质网的各种超微病理变化。
关键词:电镜;内质网;病理变化20世纪30年代,德国的RUSKA第一次发现了电子显微镜,随后利用刚刚形成的电子显微镜技术第一次看到了烟草花叶病毒[1]。
随着电子显微镜技术的不断完善和发展,电镜的应用使人们对细胞的研究逐步深入到亚细胞结构,各种细胞器的结构也不断被人们认知。
同时,在医学科研和诊断疾病中做出了重要贡献。
例如,Gyorkey[2]等在2000例肿瘤诊断中8%要靠电镜帮助诊断。
Kuzela[3]等对49例肿瘤的诊断结果分析,11例电镜可进一步提供明确的诊断,占22%,纠正6%的错误诊断,确诊率28%。
国内周晓军[4]报道223例肿瘤电镜诊断,电镜确诊135例,占60%,纠正原病例诊断11例,占5%。
有诊断价值者占65%。
有由此可见,电镜技术在诊断疾病中的应用价值。
电镜分为扫描电镜和投射电镜。
由于其分辨率高,放大倍数大,而且使用较为方便,电镜已经成为研究细胞微观结构最有效的方法之一[5]。
本文所的总结的内质网超微结构变化主要通过投射电镜来观察。
1 内质网的超微结构及生理功能内质网(endoplasmic reticulum),ERKR. Porter、A. Claude 和EF. Fullam等人于1945年发现,是细胞质内由膜组成的一系列片状的囊腔和管状的腔,彼此相通形成一个隔离于细胞基质的管道系统,为细胞中的重要细胞器。
它实际上是一个连续的膜囊和膜管网,可分为粗面内质网(RER,Rough Endoplasmic Reticulum)和滑面内质网(SER,Smooth Endoplasmic Reticulum)两大部分。
粗面内质网上附着有大量核糖体,合成膜蛋白和分泌蛋白;滑面内质网上无核糖体。
内质网是哺乳细胞中一种重要的亚细胞器。
膜分泌性蛋白、氨基多糖、磷脂、胆固醇及钙信号等的代谢均与内质网功能直接相关,例如分泌性蛋白的合成与空间折叠、蛋白质糖基化修饰、蛋白质分泌等均在内质网内发生。
目前研究认为,胰腺细胞、心肌细胞、神经元细胞等内质网功能障碍可能分别是糖尿病、心脑组织缺血梗塞、退行性神经疾病等发生的重要原因[6-8]。
真核细胞的内质网具有四个主要的生理功能:合成膜蛋白和分泌蛋白;折叠形成蛋白质正确的三维空间构象;储存Ca2+;参与脂质和胆固醇的生物合成[9]。
2 内质网的病理性变化形态观察2.1内质网增多内质网的多少可以反应细胞病变状况。
例如在蛋白质合成及分泌活性高的细胞(如浆细胞、胰腺腺泡细胞、肝细胞等)以及细胞再生和病毒感染时,粗面内质网有增多现象。
李颖智[10]等研究了脊髓损伤后继发骨质疏松的骨组织超微结构,发现进行手术后第11w,胫骨成骨骨细胞核空化,粗面内质网增多。
熊娟[11]等观察了锯缘青蟹病毒感染的超微病理变化,发现其胃细胞中粗面内质网肿胀增多。
2.2内质网减少和水祥[12]等用秋水仙素灌大鼠慢性肝损伤大鼠,用电镜观察细胞,发现胞浆内内质网减少。
谢学军[13]等研究了糖尿病大鼠视觉系统三级神经元的病理变化,发现糖尿病大鼠视皮质,神经细胞胞浆中,粗面内质网减少且变形。
山羊冰川棘豆中毒[14],缺血[15,16]等也可导致细胞内粗面内质网减少。
2.3内质网增生张洁[17]等用分离到的鹅副粘病毒毒株进行人工发病实验,并取实验结束时存活鹅的大脑进行电镜观察,发现粗面内质网有增生扩张现象。
张瑞祥[18]等在慢性迁延性乙肝病毒性肝炎的电镜检查中可以看到细胞内滑面内质网增生现象。
2.4内质网扩张及囊泡化内质网扩张和囊泡变(dilaftation and vesiculation ofendoplasmic reticulum)是细胞损伤最常见的内质网病变之一。
内质网扩张是指内质网口径增大,但仍保持原有结构并具有网状外形。
囊泡变是指内质网扩张成大小不等的囊泡。
缺氧、中毒、感染、营养不良和放射线照射均可引起内质网扩张和囊泡病变。
李艳飞[19]等用人工复制的脑软化症雏鸡摸型.研究其主要免疫器官病理解剖学变化、病理组织学变化以及超微结构的变化。
其中脾脏的粗面内质网扩张呈池状。
李颖智[10]等研究了脊髓损伤后继发骨质疏松的骨组织超微结构,发现进行手术后第11w,可以观察到明显的病变,周肱骨骨细胞,粗面内质网空化。
人工感染鸡卡氏住白细胞原虫病引起心、肝、脾、肺、肾、肠、胰等组织的核染色质内出现内质网扩张肿胀现象[20]。
引起组织细胞内内质网扩张的病症还有:急性酒精肝损伤[21],家兔主动脉粥样硬化[22],高胆固醇饮食引起动脉内皮细胞变性[23],急性有机磷农药中毒[24],猪生殖-呼吸综合征[25],海洛因成瘾[26]等。
2.5粗面内质网脱颗粒当细胞受损时,粗面内质网上的核蛋白体往往脱落于胞浆内,粗面内质网的蛋白合成乃下降或消失;当损伤恢复时,其蛋白合成也随之恢复。
帖利军[27]等研究甲状腺机能减退大鼠脑发育临界期神经元超微结构变化,实验大鼠顶叶皮质神经元在电镜下可见内质网变性、扩张,核蛋白体脱落、游离。
李任飞[28]观察经胃左动脉热灌注化疗药物对照正常胃组织超微结构,其中56℃组胃小弯上皮细胞胞质内,内质网扩张脱颗粒。
2.6同心性小体宋福林[29]等对纤维组织细胞性脑膜瘤的临床病理进行了病理学观察,发现纤维组织细胞细胞胞质内的粗面内质网成板层状或扩张成池分别,可见同心性小体分布。
2.7池内隔离郑晓刚[30]等在软骨样脊索瘤的超诶病理对比研究中观察到普通的脊索瘤瘤细胞内的粗面内质网扩张呈大泡。
内质网正常的生理功能维持着细胞以及组织器官的正常运作,因此,通过观察内质网发生不同形式的形态异常,可以判断组织器官出现的病理情况。
了解和熟悉细胞内个细胞器的正常形态和病理形态,能够帮助我们更好的判断疾病,深入探讨疾病的致病机理。
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