(整理)中科院-分子生物学-1996.

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分子生物学数据库---计算生物学的摇篮

分子生物学数据库---计算生物学的摇篮

分子生物学数据库——计算生物学的摇篮1995年,嗜血杆菌的基因组DNA信息被破解,它具有1700感染基因,人类终于揭开了这一导致继流感之后第二大传染病的细菌的神秘面纱;随后在1996年,酵母基因组DNA全部的6300个基因被测序出来,为后续的研究提供了极大的方便;1998年,人类获得了第一个多细胞生物——线虫的基因组,了解到它含有19100个基因,其中1/3基因与哺乳动物的相似,这预示了我们可以将线虫当作一种模式生物;1999年,果蝇的基因组信息被破解,它有13600个基因,虽然果蝇的拥有的细胞数是线虫的1000被,体积也比线虫大,但是它具有的基因数却少于线虫,这暗示着染色体上有些区域的基因没有直接被翻译成蛋白质的,而有些基因却在转录和翻译过程中编码了多个蛋白质;2000年,荠菜的基因组DNA被测序出来,它有25500个基因,许多基因都具有重复序。

人类基因组计划启动与1990年,到2003年,99.9%的人类基因都被精确地绘图,这其中也含有大量的冗余序列。

在获得了如此多的核算信息后,大量的蛋白质信息也随之可以获得,蛋白的种类、二级或者三级结构、翻译后加工、蛋白质间的相互作用等等。

针对上面提到的大量信息,如果用传统的方法来收集、存储、分析,将会是一个浩大的工程,并且,在这旷日持久的工程中,很可能漏掉了许多重要的、未知的信息。

在美国最初提出人类基因组计划时,成立了一个由42位专家组成的生物信息研究小组,专门处理获得的相关信息。

随着信息的积累,生物学的发展,以及数学、物理、计算机科学的不断渗入,用计算机作为手段,参考数学、统计学、物理等学科的研究方式,将会大大降低人类的工作量,同时更系统,更全面,更快速,更准确的分析已有的数据。

在此背景下,计算生物学和生物信息学应运而生。

计算生物学和生物信息学都属于基于基因组学的交叉学科,二者之间没有一个严格的界限。

总的来讲,计算机生物学和信息生物学都是应用数学的和计算机的科学方法来处理分子生物学的问题,这些问题常常需要海量的数据,计算和分析。

1996-2016年中科院610分子生物学考研真题及答案解析 汇编-推荐下载

1996-2016年中科院610分子生物学考研真题及答案解析 汇编-推荐下载

2、考点综述
通过对历年考研真题分析,明确指明本章节是否为重点章节,常考的题型有哪些,并列出常考的知识点列表。

所有考点、重点一览无余。

等大家复习完一遍教材后,通过本版块可快速把握重点;同时也特别适用于复习时间不够,急需掌握本章节考点的同学。

3、复习建议
对所有的知识点按重点程度的不同,以“了解”、“理解”、“熟悉”、掌握”等进行等级划分,复习时对某一知识点掌握到什么程度做到心中有数,把有限的复习时间用到最为重要的知识点上。

4、典型考题分析
提取出历年考研真题,直接列在本章节中,凸显常考的知识点。

将真题再现,既作为考题,又作为练习题;既作为重点,又作为考点。

5、核心内容
对每一知识点进行详细展开,涵盖了大纲所涉及的所有考察范围,对于特别重要的考点,用“☆”进行单独的标注,重点一目了然。

适用于后期弃掉教材,直接背诵并记忆核心内容与常考知识点。

四、历届诺贝尔生理学或医学奖专题
五、2017版中科院《610分子生物学》考研复习题集
以下为截图预览:
真题及答案预览
高分复习笔记预览
诺贝尔奖专题预览
习题集预览。

分子生物学-第5章-分子生物研究法(上)精选全文完整版

分子生物学-第5章-分子生物研究法(上)精选全文完整版

限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE)
一类能识别和切割双链DNA分子中特定碱基顺序的核酸 水解酶
Bam HⅠ
GGATCC CCTAGG
GCCTAG+
GATCC G
分类: Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ (基因工程技术中常用Ⅱ型)
命名
Hin dⅢ
Haemophilus influenzae 自主 复制能力的 DNA分子( vector),如 病毒、噬菌体 和质粒等小分 子量复制子都 可以作为基因 导入的载体。
1970年Mandel和Higa发现,大肠杆菌细胞经适量氯化钙处 理后,能有效地吸收λ噬菌体DNA。
1972年,Cohen等人又报道,经氯化钙处理的大肠杆菌细 胞同样能够摄取质粒DNA。
把磷酸基团加到多聚核苷酸链的5'-OH末端(进行末端标记 实验或用来进行DNA的连接 在双链核酸的3'末端加上多聚单核苷酸
从DNA链的3'末端逐个切除单核苷酸
从DNA链的5'末端逐个切除单核苷酸 切除位于DNA链5'或3'末端的磷酸基团
1972 - Paul Berg,
Produced first recombinant DNA using
5.1 重组DNA技术回顾 5.2 DNA基本操作技术 5.3 RNA基本操作技术 5.4 SNP的理论与应用 5.5 基因克隆技术 5.6 蛋白质组与蛋白质组学技术
5.1 重组DNA技术回顾
三大成就 :
1. 40年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体 是DNA而不是蛋白质,解决了遗传的物质基础问题;
• 基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒 或其它载体分子,构成遗传物质的新组合,使之 进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续 稳定的繁殖和表达。

考研中国科学院硕士分子遗传学真题1996年

考研中国科学院硕士分子遗传学真题1996年

1996年试题一、名词解释1.拼接体(spliceosome) 2.启动子(promoter)3.增强子(enhancer) 4.终止子(terminator)5.转座子(transposon) 6.反转录转座子(retrotransposon)7.反义RNA(antisense RNA) 8.R酶(核酸质酶)(ribozyme)9.溶源性(lysogeny) 10.引物(primer)11.F′附加体(F′episome) 12.Leu拉链(leucine zipper)13.移码突变(frameshift mutation) 14.同源异型突变(homeotic mutation)15.α-互补(α-complementation)二、假定人类单个细胞总DNA为6×109核苷酸对,以B-构型存在。

请问人类单个细胞DNA总长度为多少?它们又是如何被组装在直径相对来说极其微小的细胞核内?三、正常营养缺陷型突变体不能在没有添加所需营养物质的培养基上生长。

然而,在筛选营养缺陷型突变体的实际实验中,经常会发现一些在没有添加所需营养物质的培养基上仍能缓慢生长的渗漏型突变体(leaky mutants)。

试解释渗漏突变体的分子基础。

四、假定你研究噬菌体φX174 DNA,发现其碱基组成为A,25%;T,33%;G,24%;C,18%。

(1)这符合碱基当量规则(chargaff's rule)吗?(2)你如何解释这一结果?(3)该噬菌体是如何复制的?五、一双链DNA分子如下图所示,在体内它编码五个氨基酸残基的多肽:TAC A TG A TC A TT TCA CGG AA T TTC TAG CA T GTAA TG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG A TC GTA CA T(1)哪条链是转录的模板链?(2)写出该五个氨基酸残基的多肽。

(可以查所附的密码表)六、DNA复制和蛋白质合成均要求高度的忠实性。

分子生物学

分子生物学

对蛋白质结构与功能的进一步认识
1956-58年Anfinsen和White根据对酶 蛋白的变性和复性实验,提出蛋白质的 三维空间结构是由其氨基酸序列来确定 的。1958年Ingram证明正常的血红蛋白 与镰刀状细胞溶血症病人的血红蛋白之 间,亚基的肽链上仅有一个氨基酸残基 的差别,使人们对蛋白质一级结构影响 功能有了深刻的印象。与此同时,对蛋 白质研究的手段也有改进,1969年Weber 开始应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定 蛋白质分子量;
(二)、现代分子生物学的建立和发展阶段
这一阶段是从50年代初到70年代初, 以1953年Watson和Crick提出的DNA双螺 旋结构模型作为现代分子生物学诞生的 里程碑开创了分子遗传学基本理论建立 和发展的黄金时代。DNA双螺旋发现的最 深刻意义在于:确立了核酸作为信息分 子的结构基础;提出了碱基配对是核酸复 制、遗传信息传递的基本方式;从而最 后确定了核酸是遗传的物质基础,为认 识核酸与
蛋白质的关系及其在生命中的作用打下了 最重要的基础。在此期间的主要进展包 括:
遗传信息传递中心法则的建立
在发现DNA双螺旋结构同时,Watson 和Crick就提出DNA复制的可能模型。其 后在1956年A.Kornbery首先发现DNA聚合 酶;1958年Meselson及Stahl用同位素标 记和超速离心分离实验为DNA半保留模型 提出了证明;1968年Okazaki(冈畸)提 出DNA不连续复制模型;1972年证实了 DNA复制
S.Furbery等的X-线衍射分析阐明了核苷酸 并非平面的空间构像,提出了DNA是螺旋 结构;1948-1953年Chargaff等用新的层 析和电泳技术分析组成DNA的碱基和核苷 酸量,积累了大量的数据,提出了DNA碱 基组成A=T、G=C的Chargaff规则,为碱 基配对的DNA结构认识打下了基础。

中科院-分子生物学

中科院-分子生物学

2000年分子生物学真题一、用中文解释下列名词(每题2分)1.Molecular chaperonin(分子伴侣)2.Central dogma (中心法则)3.Isoelectric point (p I)4.Promoter (启动子)5.Northern blotting (RNA印迹)6. Retention time(Tr)7.a-Helix (a-螺旋) 8.Random coil (无规卷曲)9.Reverae transcriptase(反转录) 10.Ribozyme (核酶)二.写出下列物质的结构式(每个5分)1、尿嘧啶2.ATP3.维生素C4.鸟嘌呤三、问答题(共60分)1.说明乳糖操纵子模型及阻遏物是如何阻止转录的?(30分)2.说明真和基因转录的特点及tRNA、mRNA、tRNA基因转录与RNA聚合酶的关系(20分)3.说明什么是DNA甲基化作用及其与转录调控的关系。

(10分)2002年分子生物学真题一、名词解释(每题2分)1.Southern blotting2. .Promoter (启动子)3.Helix-turn-Helix4.Attenuation5. Reverae transcriptase(反转录)6. Ribozyme (核酶)7.Splicing8.IS Sequence9.Conjugation 10.Recombination(重组)二、填空题(每空1分)1.真核生物的RNA聚合酶有()种,各转录()、()、()基因。

2.反义RNA在()水平上调节基因的表达,其机制是()。

3.基因有两条链,与mRNA序列相同的链叫做()链,另外一条叫做()链。

4.遗传重组有以下()、()、()、()四种类型。

5.终止子的结构位置在()、()位点。

6.逆转录酶转录时以()为模板、转录出()。

7.RNA编辑的含义是()。

8.逆转录转座子是指()。

9.内含子加工的生物化学机制是()。

分子生物学实验报告

分子生物学实验报告

分子生物学实验报告----绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆、表达和纯化一、实验背景绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白。

当受到紫外或蓝光激发时,GFP发射绿色荧光。

它产生荧光无需底物或辅因子发色团是其蛋白质一级序列固有的。

GFP由3个外显子组成,长2.6kb;GFP是由238个氨基酸所组成的单体蛋白,相对分子质量为27.0 kMr,其蛋白性质十分稳定,能耐受60℃处理。

1996年GFP的晶体结构被解出,蛋白质中央是一个圆柱形水桶样结构,长420 nm,宽240 nm,由11个围绕中心α螺旋的反平行β折叠组成,荧光基团的形成就是从这个螺旋开始的,桶的顶部由3个短的垂直片段覆盖,底部由一个短的垂直片段覆盖,对荧光活性很重要的生色团则位于大空腔内。

发色团是由其蛋白质内部第65-67位的Ser-Tyr-Gly自身环化和氧化形成。

1996年GFP的晶体结构被解出,蛋白质中央是一个圆柱形水桶样结构,长420 nm,宽240 nm,由11个围绕中心α螺旋的反平行β折叠组成,荧光基团的形成就是从这个螺旋开始的,桶的顶部由3个短的垂直片段覆盖,底部由一个短的垂直片段覆盖,对荧光活性很重要的生色团则位于大空腔内。

实验使用的EGFP蛋白取自原核-真核穿梭质粒pEGFP-NB3B的蛋白质编码序列。

此质粒原本被设计于在原核系统中进行扩增,并可在真核哺乳动物细胞中进行表达。

本质粒主要包括位于PCMV真核启动子与SV40 真核多聚腺苷酸尾部之间的EGFP编码序列与位于EGFP上游的多克隆位点;一个由SV40 早期启动子启动的卡那霉素/新霉素抗性基因,以及上游的细菌启动子可启动在原核系统中的复制与卡那抗性。

在EGFP编码序列上下游,存在特异的BamH I及Not I限制性内切酶位点,可切下整段EGFP编码序列。

表达EGFP 蛋白使用的pET-28 原核载体包含有在多克隆位点两侧的His-tag polyHis 编码序列;用于表达蛋白的T7 启动子,T7 转录起始物以及T7 终止子;选择性筛选使用的lacI 编码序列及卡那霉素抗性序列,pBR322 启动子,以及为产生单链DNA 产物的f1 启动子。

分子生物学课后习题答案(3)

分子生物学课后习题答案(3)

分子生物学课后习题答案(3)《现代分子生物学》第五次作业1、遗传密码有哪些特性?答:a.遗传密码的连续性,密码间无间断也没有重叠,即起始密码子决定了所有后续密码子的位置。

b.遗传密码的简并性,即同一个氨基酸可能由一种以上密码子编码。

c.遗传密码的通用性和特殊性,无论是体内还是体外,也无论是对病毒、细菌、动物还是植物而言,遗传密码都是通用的;但是某些密码子在不同生物中有着相对特殊的作用。

d.遗传密码子与反密码子的相互作用,在蛋白质生物合成过程中,tRNA的反密码子在核糖体内是通过碱基的反向配对与mRNA上的密码子相互作用的。

2、有几种终止密码子?它们的序列和别名是什么?答:3种,它们的序列是UAA、UGA和UAG,其中UAA叫赭石密码,UAG叫琥珀密码,UGA叫蛋白石密码。

3、简述摆动学说。

答:1996年,Crick根据立体化学原理提出摆动学说,解释了反向密码子中某些稀有成分的配对,以及许多氨基酸有两个以上密码子的问题。

假说中提出:在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA可以识别一个以上的密码子。

一个tRNA 究竟能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的,反密码子的第一位A或C时智能识别1种密码子,为G或U时可以识别2种密码子,为I 时可识别3种密码子。

如果有几个密码子同时编辑一个氨基酸,凡是第一、二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。

4、tRNA在组成及结构上有哪些特点?答:(1)所有的tRNA都具有共同的特征:存在经过特殊的修饰碱基,tRNA的3’端都以CCA-OH结束,该位点是tRNA与相应氨基酸结合的位点。

(2)tRNA的三叶草型二级结构:受体臂(acceptor arm):其3’端的最后3个碱基序列永远是CCA。

TφC臂:根据3个核苷酸命名的,其中φ表示拟尿嘧啶,是tRNA 分子所拥有的不常见核苷酸。

分子生物学实验报告

分子生物学实验报告

分⼦⽣物学实验报告分⼦⽣物学实验报告----绿⾊荧光蛋⽩(GFP)基因的克隆、表达和纯化⼀、实验背景绿⾊荧光蛋⽩(green fluorescent protein,GFP)是⼀类存在于包括⽔母、⽔螅和珊瑚等腔肠动物体内的⽣物发光蛋⽩。

当受到紫外或蓝光激发时,GFP发射绿⾊荧光。

它产⽣荧光⽆需底物或辅因⼦发⾊团是其蛋⽩质⼀级序列固有的。

GFP由3个外显⼦组成,长2.6kb;GFP是由238个氨基酸所组成的单体蛋⽩,相对分⼦质量为27.0 kMr,其蛋⽩性质⼗分稳定,能耐受60℃处理。

1996年GFP的晶体结构被解出,蛋⽩质中央是⼀个圆柱形⽔桶样结构,长420 nm,宽240 nm,由11个围绕中⼼α螺旋的反平⾏β折叠组成,荧光基团的形成就是从这个螺旋开始的,桶的顶部由3个短的垂直⽚段覆盖,底部由⼀个短的垂直⽚段覆盖,对荧光活性很重要的⽣⾊团则位于⼤空腔内。

发⾊团是由其蛋⽩质内部第65-67位的Ser-Tyr-Gly⾃⾝环化和氧化形成。

1996年GFP的晶体结构被解出,蛋⽩质中央是⼀个圆柱形⽔桶样结构,长420 nm,宽240 nm,由11个围绕中⼼α螺旋的反平⾏β折叠组成,荧光基团的形成就是从这个螺旋开始的,桶的顶部由3个短的垂直⽚段覆盖,底部由⼀个短的垂直⽚段覆盖,对荧光活性很重要的⽣⾊团则位于⼤空腔内。

实验使⽤的EGFP蛋⽩取⾃原核-真核穿梭质粒pEGFP-NB3B的蛋⽩质编码序列。

此质粒原本被设计于在原核系统中进⾏扩增,并可在真核哺乳动物细胞中进⾏表达。

本质粒主要包括位于PCMV真核启动⼦与SV40 真核多聚腺苷酸尾部之间的EGFP 编码序列与位于EGFP上游的多克隆位点;⼀个由SV40 早期启动⼦启动的卡那霉素/新霉素抗性基因,以及上游的细菌启动⼦可启动在原核系统中的复制与卡那抗性。

在EGFP编码序列上下游,存在特异的BamH I及Not I限制性内切酶位点,可切下整段EGFP编码序列。

中科院生物化学与分子生物学历年考研真题(1996年-)之欧阳语创编

中科院生物化学与分子生物学历年考研真题(1996年-)之欧阳语创编

中科院1996生化与分子一、是非题:10分。

每题答对得1分,打错到扣半分,不答者倒扣。

1、米氏常数(Km)是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。

2、与肌红蛋白不同,血红蛋白由四个亚基组成,因此提高了它与氧的结合能力,从而增加了输氧的功能。

3、维生素D和甲状腺激素的受体都在靶细胞核内。

4、凝胶过滤法可用于测定蛋白的分子量,分子量小的蛋白质先从柱上流出,分子量大的后流出。

5、两条单独肽链经链间二硫交联,组成蛋白质分子,这两条肽链是该蛋白的两个亚基。

6、哺乳动物无氧下不能存活,因为葡萄糖酵解不能合成ATP。

7、体细胞(双倍体)DNA含量约为生殖细胞DNA含量的两倍。

8、真核生物的基因不组成操纵子,不形成多顺子mRNA。

9、光合作用的总反应中,H2O中的氧参入到葡萄糖中去。

10、真核细胞和原核细胞核糖体中的RNA的数目和种类是相同的。

二、选择题:20分。

答错不倒扣分。

1、从血红蛋白规水解得到的氨基酸的手性光学性质:A.都是L型的;B。

都是左旋的;C。

并非都是L型的; D。

有D型的也有L型的。

2、生物膜的厚度在A.100nm左右 B.10nm左右 C.1nm左右3、真核生物中经RNA聚合酶Ⅲ催化转录的产物是A.mRNA B.hnRNA C.rRNA和5SRNA D.tRNA和5SRNA4、消化系统的水解酶,大多是以非活性的酶原形式合成出来的,但也有例外,如A.核糖核酸酶 B.羟肽酶 C.胃蛋白酶5、在染色体中DNA的构型主要是A.A型 B.B型 C.C型 D.Z型6、超过滤于凝胶过滤A.是两种性质不同,用处不同的蛋白质制备方法B.是一种性质,但表现方法不同的蛋白质制备方法C.是同一种方法的两种名词7、研究蛋白质结构常用氧化法打开二硫键,所用的化学试剂是A.亚硝酸 B.过氯酸 C.硫酸 D.过甲酸8、雄激素对物质代谢最显著的一项重要作用是A.促进肝脏糖原分解B.增加脂肪贮存C.加强蛋白质的同化作用 D。

钾、钙、磷等物质的吸收9、核苷酸从头合成中,嘧啶环的1位氮原子来自A.天冬氨酸B.赖氨酸C.谷氨酰胺 D.甘氨酸10、羧肽酶C专门水解C端倒数第二位是哪个氨基酸形成的肽链A.精氨酸B.赖氨酸C.脯氨酸11、将RNA转移到硝基纤维素膜上的技术叫A.Southern blotting B.Northern blotting C.Western blotting D.Eastern blotting12、甘氨酸的解离常数分别为K1=2.34和K2=9.60,它的等电点(PI)是A.7.26 B.5.97 C.7.14 D.10.7713、对一个克隆的DNA片段做物理图谱分析,需要用A.核酸外切酶B.限制性内切酶C.DNA连接酶D.脱氧核糖核酸酶14、原核生物基因上游的TATA盒一般处于什么区A.-10 B.-35 C.-200 D.1K15、通常使用什么测定多肽链的氨基末端A.CNBr B.丹磺酰氯 C.6N HCl D.胰蛋白酶16、蛋白质的变形伴随着结构上的变化是A.肽键的断裂 B.丹基酸残基的化学修饰 C.一些侧链基团的暴露 D.二硫键的折开17、生物膜主要成分是脂质蛋白质,其主要通过什么相连接A.氢键 B.离子键 C.疏水作用 D.共价键18、粗糙型内质网系的主要功能是A.糖类的合成 B.脂类的合成 C.分泌性蛋白质的合成 D.必需氨基酸的合成19、脂肪酸的合成中,每次肽链的延长都需要什么参加A.乙酰辅酶A B.草酰乙酸C.丙二酸单酰辅酶A D.甲硫氨酸20、PPGPP在下列情况下被合成A.细菌缺乏氮源时 B.细菌缺乏碳源时 C.细菌在环境温度太高时 D.细菌在环境温度太低时三、填空题(6题共40空格,共40分)1、按劳取酬Michaelis公式,当V分别为0.9vmax和0.1Vmax时,它们相应的底物浓度的比值[S]0.9/[S]0.1应为。

分子生物学综述论文(基因敲除技术)

分子生物学综述论文(基因敲除技术)

现代分子生物学课程论文题目基因敲除技术班别生物技术10-2学号 *********** 姓名陈嘉杰成绩基因敲除技术的研究进展要摘基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。

此后经历了近20年的推广和应用,直到2007年10月8日,美国科学家马里奥•卡佩奇(Mario Capecchi)和奥利弗•史密西斯(Oliver Smithies)、英国科学家马丁•埃文斯(Martin Evans)因为在利用胚胎干细胞对小鼠基因金星定向修饰原理方面的系列发现分享了2007年诺贝尔生理学或医学奖。

基因敲除技术从此得到关注和肯定,并对医学生物学研究做出了重大贡献。

本文就基因敲除的研究进展作一个简单的综述。

关键词基因敲除、RNAi、生物模型、同源重组前言基因敲除又称基因打靶,该技术通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组,进行精确的定点修饰和基因改制,具有转移性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。

应用DNA同源重组技术将灭活的基因导入小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)以取代目的基因,再筛选出已靶向灭活的细胞,微注射入小鼠囊胚。

该细胞参与胚胎发育形成嵌合型小鼠,再进一步传代培育可得到纯合基因敲除小鼠。

基因敲除小鼠模型的建立使许多与人类疾病相关的新基因的功能得到阐明,使现代生物学及医学研究领域取得了突破性进展。

上述起源于80年代末期的基因敲除技术为第一代技术,属完全性基因敲除,不具备时间和区域特异性。

关于第二代区域和组织特异性基因敲除技术的研究始于1993年。

Tsien等[1]于1996年在《Cell》首先报道了第一个脑区特异性的基因敲除动物,被誉为条件性基因敲除研究的里程碑。

该技术以Cre/LoxP系统为基础,Cre在哪种组织细胞中表达,基因敲除就发生在哪种组织细胞中。

2000年Shimizu等[2]于《Science》报道了以时间可调性和区域特异性为标志的第三代基因敲除技术,其同样以Cre/LoxP系统为基础,利用四环素等诱导Cre的表达。

中科院大学参考书目

中科院大学参考书目

338 生物化学:《生物化学》(2002年第三版),上、下册王镜岩等编著,高等教育出版社《基因VIII》(中文版),Benjamin Lewin,科学出版社(分子生物学主要参考教材建议以《基因VIII》为主)601 高等数学(甲)《高等数学》(上、下册),同济大学数学教研室主编,高等教育出版社,1996年第四版,以及其后的任何一个版本均可。

602 高等数学(乙)《高等数学》(上、下册),同济大学数学教研室主编,高等教育出版社,1996年第四版,以及其后的任何一个版本均可。

603 高等数学(丙)[1]《高等数学》第六版(上、下册),同济大学数学系主编,高等教育出版社,2007年。

[2]《线性代数》第五版,同济大学数学系主编,高等教育出版社,2007年。

612 生物化学与分子生物学《生物化学》(2002年第三版),上、下册王镜岩等编著,高等教育出版社《基因VIII》(中文版),Benjamin Lewin,科学出版社(分子生物学主要参考教材建议以《基因VIII》为主)808 电动力学郭硕鸿著,《电动力学》,高等教育出版社,北京,1997年第二版。

614 科学技术史雷·斯潘根贝格和黛安娜·莫泽,《科学的旅程》,郭奕玲、陈蓉霞、沈慧君译,北京:北京大学出版社,2008年。

611 生物化学(甲)《生物化学》上、下册王镜岩等编著,高等教育出版社(2002年第三版)610 分子生物学《现代分子生物学》(第二版),朱玉贤李毅著,高等教育出版社,2002 《Molecular Biology》(第三版),Robert Weaver著,McGraw-Hill出版社,2005(809)固体物理:黄昆原著,韩汝琦改编,《固体物理学》高等教育出版社,1988年10月(811)量子力学:《量子力学教程》曾谨言著(科学出版社2003年第1版)。

(819)无机化学:《无机化学》第三版,武汉大学、吉林大学等校编,高等教育出版社。

分子生物学复习资料

分子生物学复习资料

分⼦⽣物学复习资料第⼀章绪论1.经典的⽣物化学和遗传学(现代⽣物学的两⼤⽀柱)进化论和细胞学说相结合,产⽣了作为主要实验科学之⼀的现代⽣物学,⽽以研究动、植物遗传变异规律为⽬标的遗传学和以分离纯化、鉴定细胞内含物质为⽬标的⽣物化学则是这⼀学科的两⼤⽀柱。

2.孟德尔的遗传学规律最先使⼈们对性状遗传产⽣了理性认识,⽽Morgan的基因学说则进⼀步将“性状”与“基因”相耦联,成为分⼦遗传学的奠基⽯。

3.证明DNA是遗传物质的两个著名实验:1、Avery的肺炎链球菌转化实验——DNA是遗传信息的载体;2、Hershey和Chase的噬菌体侵染细菌实验—DNA是可以进⼊寄主细胞的转染因⼦。

4.分⼦⽣物学定义从分⼦⽔平研究⽣物⼤分⼦的结构与功能从⽽阐明⽣命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。

5.⼈类基因组计划牵头单位:美国能源部、美国国家卫⽣研究所参加国:美国、英国、德国、法国、⽇本、中国启动时间:1990年⼈类基因组计划最初的⽬标:价值达30亿美元的⼈类基因组计划。

要测定30亿个碱基对的排列顺序,确定基因在染⾊体上的位置,破译⼈类全部遗传信息。

⼈类基因组计划与曼哈顿原⼦弹计划和阿波罗计划并称为三⼤科学计划。

2001年中、美、⽇、德、法、英6国科学家联合公布了⼈类基因组图谱及初步分析结果。

2003年4⽉14⽇,美国联邦国家⼈类基因组研究项⽬负责⼈弗朗西斯·柯林斯博⼠在华盛顿宣布,美、英、⽇、法、德和中国科学家经过13年努⼒共同绘制完成了⼈类基因组序列图,⼈类基因组计划所有⽬标全部实现。

中国贡献:作为参与这⼀计划的唯⼀发展中国家,我国于1999年跻⾝⼈类基因组计划,承担了1%的测序任务。

6.DNA重组技术是20世纪70年代初兴起的技术科学,⽬的是将不同DNA⽚段(基因或基因的⼀部分)按照⼈们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产⽣影响受体细胞的新的遗传性状。

分子生物学发展史

分子生物学发展史

3、初步认识生命本质并开始改造生命的深入发展阶段
(1)重组DNA技术的建立和发展
转基因动物:
转基因植物 基因诊断与基因治疗 (2)基因组研究的发展
(3)单克隆抗体及基因工程抗体的建立和发展
(4)基因表达调控机理
(5)细胞信号转导机理研究成为新的前沿领域
蛋白质是生命的主要基础物质

1897年,Buchner兄弟证明酵母无细胞提取液能使糖发酵产生 酒精
具有易区分的性状
花大,便于人工授粉 1、去雄
(未成熟时)
2、套袋隔离 3、人工授粉
(成熟时)
4、套袋隔离
5、采集种子栽培 收集数据
人工异花授粉示意图
性状 :指生物体的形态特征或生理特征。
相对性状:
一种生物的同一性状的不同表现类型。
孟德尔的遗传定律
孟德尔在1857年到1864年间,用产生圆形种子 的豌豆同产生皱皮种子的植株杂交,得到几百粒全 是圆形的F1代种子。 第二年,他种植了253粒F1圆形种子并进行自交

同一生物的不同组织的DNA碱基组成相同 一种生物DNA碱基组成不随生物体的年龄、营养状态 或者环境变化而改变; A=T,G=C,A+G=C+T 不同生物来源A+T/G+C比值不同

•衍射照片表明: DNA是由两条长链组成的双螺旋,宽度为20埃。
Rosalind E. Franklin
德国植物学家施莱登(Schleiden)
德国动物学家施旺(Schwann )
达尔文的进化论
人 物 主要著作及成就 1859年《物种起
达尔文
(18091882)
源》一书的出版标 志着生物进化论的 诞生,提出“物竞
天择,适者生存”。

中国科学院1996年攻读硕士研究生入学试题.doc

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中国科学院1996年攻读硕士研究生入学试题《细胞生物学》B卷生物类考研专业课资料2009-02-09 11:08:37阅读230评论0字号:大中小一、是非题:每题一分,共20分1、原代培养物经首次传代后即成细胞株。

2、癌组织中细胞间隙连接的数目显著减少,细胞间通讯发生障碍。

3、类病毒仅由裸露的DNA所构成,不能制造衣壳蛋白。

4、带有标记的特定核酸分了做探针,测定与之互补的染色体DNA区段的位置,称为原位杂交。

5、肿瘤细胞的凝集性较正常细胞微弱。

6、不论转录活性是高或低,细胞中核孔的密度和总数都是一样的。

7、肌球蛋白分子的头部具有ATP酶活性。

8、癌细胞特别的中间幺幺蛋白是角蛋白。

9、异噬小体属次级溶酶体。

10、高尔基复合体顺血膜的结构近似质膜。

11、受精卵通过细胞分裂发育成动物个体。

12、细胞一旦分化,便不可逆转。

13、在能识别一个细胞的分化以前,有一个预先保证细胞怎样变化的时期,这一阶段被称为细胞决定。

14、正常细胞中癌细胞如果表达就会导致癌变。

15、绝大多数结构基因为单拷贝。

16、原核细胞中只含一个DNA分子。

17、染色质中DNA与非组蛋白的重量之比总是1: 1.18、逆转录是一种仅为RNA病毒所特有的违反中心法则的例子。

19、细胞周期驱动为依赖周期蛋白的蛋白激酶。

20、在第一次减数分裂过程中染色体着丝粒未分裂。

二、选择题:每题一分,共20分1、立克次氏体是A. 一类病毒B. 一种细胞器C.原核生物D.真核生物2、原核细胞的呼吸酶定位在 A.细胞质中 B.质膜上C.线粒体内膜上D.类核区内3、最小的细胞是 A.细菌B.类病毒C.支原体D.病毒4、推动细胞周期由G2相向M相过度的驱动器为 A. CDK1B. CDK2 C. CDK3 D. CKD45、28SrRNA基因属于A.中度重复顺序B.高度重复顺序C.单一重复顺序D.随体DNA6、DNA 碱基组成具下列特点A. A=C B. T=G C. A+OG+T D. A+T=G+C7、具运输和分拣内吞物质的细胞器是A.衣被小体B.平滑小体C.内吞体D.溶酶体8、在骨骼肌原纤维结构中仅含细丝的部位为 A. I带B. A带C. H带D・M线9、作为高尔基复合物中最具代表性的酶是A5' -6-磷酸酶B单缄转移酶C细胞色素氧化酶D 糖基转移酶10、V-src的表达产物PP60src是A丝氨酸蛋白激酶B磷酸二酯酶C.酩疑酸蛋白激酶D.腺廿酸激酶11、细胞分化的内在基础是A.遗传物质的丢失B.基因的选择表达C.遗传信息的改造D.其它12、在实验条件下能有控制的逆转的癌细胞源自A. Rous肉瘤B. Burkitt淋巳瘤C畸胎瘤D随细胞瘤13、目前制造的单克隆抗体多为 A.鼠.人型 B.鼠.兔型 C.人•鼠型D.鼠■鼠型14、肌球蛋白分日有头、尾之分,具有A. 1个“活动关节”B. 2个“活动关节”C. 3个“活动关节”D. 4个“活动关节”15、染色质纤维上非组蛋白的主要功能是A.组装核小体B.调控基因表达C.组成异染色质D.协助DNA卷曲成染色体5、 细胞通讯信号有四种,内分泌信号、旁分泌信号、6Hela 细胞具有两种中间丝,它们是 和7、 8、 核小体核心是由 缠绕 组9、 具有序列并且编码信息的叫基16、植物细胞间有独特的链接结构,称为胞间连丝,其结构A.类似动物细胞的桥粒B.类似间隙连接C.类似紧密连接D.不是膜结构17、氯霉素抑素是因其A.抑制80S 核糖体移位酶B.抑制RNA 聚合酶C.引起密码错读D.抑制原核70S 核糖体 肽基转移酶 18、中间丝分子通用模式中保守部分为 A.分子的头部B.分子的尾部C.分子的杆状部D.全分子 19、卵受精后的早期几轮细胞周期中无A. DNA 复制B.转录活动C.翻译活动D.翻 译后修饰20、孕酮刺激导致卵内CAMP 水平下降的主要原因ARi 受刺激BRs 受抑制C 磷酸二脂活性 增加D 其他 三、填空题:每题2分,共20分1、存在于细胞基因组中的癌基因称为 ,存在于病毒基因组中的同一基因称为2、细胞生物学使细胞整体、超微结构和分了等各级水平上研究及其 规律的科学。

历年生化真题

历年生化真题

中国科学院遗传研究所一九九六年博士研究生入学考试试题1. 请根据功能对蛋白质分类,并举例说明。

(10 分)2. DNA 的变性与蛋白质变性有何不同,理由是什么?(10 分)3. 列出你所知道的具有DNA 外切酶活性的酶及它们在分子生物学研究中的应用。

(10 分)4. 举例说明蛋白质天然构象的信息存在于氨基酸顺序中。

(12 分)5. 以图示说明:(22 分)a•真核生物基因表达的调节,指出哪些在细胞核中进行,哪些在胞质中进行。

b.哺乳动物的ATP循环,请解释为什么说ATP是自然界的货币”6. 如何运用DNA 序列分析方法确定DNA 序列中与蛋白质结合的区域?(12分)7. 生物膜的不对称的拓扑结构是由什么维持的?它对生物膜的哪些功能是必需的?(12分)8. C3植物和C4植物有何差别?有人提出用基因工程手段将C3植物改造成C4植物,你觉得是否可行?为什么?(12 分)中国科学院遗传研究所1997 年博士研究生入学考试试题一、名词解释:(40 分)1、蛋白质的去折叠与再折叠5、RNA -酶2、差向异构体6、抗体酶3、冈崎片段7、Z-DNA4、信号肽8、酮体二、何谓同工酶?试述同工酶分析的原理及应用。

(12 分)三、简述生物膜流体镶嵌模型的要点。

什么是膜脂的多形性,非双脂层结构的生理意义是什么。

(12 分)四、什么是反义RNA ?举例说明它的理论和实践意义。

(12分)五、列举四种不同类型的PCR技术的原理及应用。

(12分)六、影响DNA 变性和复性的条件是什么?如何根据DNA 复性和反应动力学分离基因组中重复频率不同的序列?(12分)中国科学院遗传研究所一九九八年一、名词解释:(40 分)1. 糖蛋白和蛋白聚糖2. 多酶体系3. 共价催化4. A、B 和ZDNADNA 5. 糖异生6. 非蛋白质性氨基酸7. 蛋白质的四级结构8. 离子泵9. 逆转录转座子( retrotransposon )10. 亲和层析二、哪种类型的蛋白质适用于系统学研究?为什么?比较在系统学研究中的依据蛋白质 分析的技术和依据 DNA 分析的技术。

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2000年分子生物学真题一、用中文解释下列名词(每题2分)1.Molecular chaperonin(分子伴侣)2.Central dogma (中心法则)3.Isoelectric point (p I)4.Promoter (启动子)5.Northern blotting (RNA印迹)6. Retention time(Tr)7.a-Helix (a-螺旋) 8.Random coil (无规卷曲)9.Reverae transcriptase(反转录) 10.Ribozyme (核酶)二.写出下列物质的结构式(每个5分)1、尿嘧啶2.ATP3.维生素C4.鸟嘌呤三、问答题(共60分)1.说明乳糖操纵子模型及阻遏物是如何阻止转录的?(30分)2.说明真和基因转录的特点及tRNA、mRNA、tRNA基因转录与RNA聚合酶的关系(20分)3.说明什么是DNA甲基化作用及其与转录调控的关系。

(10分)2002年分子生物学真题一、名词解释(每题2分)1.Southern blotting2. .Promoter (启动子)3.Helix-turn-Helix4.Attenuation5. Reverae transcriptase(反转录)6. Ribozyme (核酶)7.Splicing 8.IS Sequence9.Conjugation 10.Recombination(重组)二、填空题(每空1分)1.真核生物的RNA聚合酶有()种,各转录()、()、()基因。

2.反义RNA在()水平上调节基因的表达,其机制是()。

3.基因有两条链,与mRNA序列相同的链叫做()链,另外一条叫做()链。

4.遗传重组有以下()、()、()、()四种类型。

5.终止子的结构位置在()、()位点。

6.逆转录酶转录时以()为模板、转录出()。

7.RNA编辑的含义是()。

8.逆转录转座子是指()。

9.内含子加工的生物化学机制是()。

10.热冲击蛋白有()功能。

三、问答题(每题10分)1.DNA带有哪些遗传信息?什么是DNA的变性和复性。

2.原核生物与真核生物染色体结构有什么不同。

3.简述原核生物DNA的复制机制。

4.什么事操纵子?以乳糖操纵子为例,说明操纵子的正负调控机制。

5.真核生物基因表达为蛋白质的过程中,要经过哪些加工步骤。

6.原核生物与真核生物的启动子结构有什么不同。

中国科学院研究生院2007年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题科目名称:分子生物学考生须知:1.本试卷满分为150分,全部考试时间总计180分钟。

2.所有答案必须写在答题纸上,写在试题纸上或草稿纸上一律无效。

一、填空题(15分, 每空1分)1. 基因打靶技术是的DNA序列和细胞内的同源的基因组序列(靶位)之间的过程,是一种通过同源重组、按预期方式改变活细胞乃至生命有机体的遗传信息的实验技术。

2. RNA指纹技术(RNA arbitrarily primed PCR, RAP-PCR)的原理与 -PCR非常类似。

RAP-PCR先从样品中提取RNA,用随机引物逆转录合成cDNA的第一条链。

再用同样的引物,PCR合成cDNA的第二条链,凝胶电泳可以显示全部的PCR产物,再回收差异表达的片段,进行克隆、测序。

3. 与Southern杂交不同,Northern杂交的研究对象是,检测可以与探针同源、杂交的mRNA分子的存在,因而可以研究细胞内特定mRNA的产生,也即特定基因的表达。

4. 真核生物基因的调控区包含有区域和各种调控元件。

调控元件包括各种、和基因座位控制区等,是各种调控因子识别、结合的位点。

它们调节着转录前起始复合物的装配、表达特异性和转录速度。

5. 亮氨酸拉链结构可以形成同源或二聚体,因而可以组合得到各种新功能特性,构成复杂的网络。

6. 产生单个碱基变化的突变叫突变,如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的,并不会造成什么影响,这就是突变。

如果改变了氨基酸残基的密码,这就是突变。

二、判断对错题 (45分,每小题3分,正确的画0,错误的画X)1.DNA的变性指的是DNA双链间氢键的断裂()2,C0t1/2与基因组复杂性相关,而与基因组大小无关()3.A. Kornberg 因发现DNA合成中负责复制的主酶而获得1959年诺贝尔奖( )4.由于DNA是由两条反平行的链组成, 所以在DNA复制时一条新生链是沿5’>3’方向合成, 而另一条新生链则是沿3’>5’方向合成 ( )5.转录和翻译耦联是所有生物为适应外界环境的变化所进化出加速基因表达效率的手段 ( )6.增强子(enhancer)是真核细胞所特有的基因表达调控的顺式作用元件 ( )7.E. coli RNA 聚合酶是E. coli 乳糖操纵子的一个重要组成部分, 其功能是启始多顺反子转录 ( )8.如果剪接发生在一个内含子的GU 序列与相邻内含子的AG 序列间, 会造成位于两个内含子之间的外显子缺失 ( )9.原核细胞mRNA含有启动子、转录起始位点、前导序列、有顺反子间序列隔开的SD 序列和ORF、尾部序列等几个其功能所必需的特征区段 ( )10.tRNA 参与蛋白质的翻译和反转录过程 ( )11.一个复制的染色体中, 两个染色质必须在有丝分裂和减数分裂I期间彼此分开 ( )12.复制完整染色体时,如果没有引物存在,DNA聚合酶将不能起始5’端的复制 ( )13.分子来完成的, 所以为蛋白质编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型的改变 ( )14.拓扑异构酶可使DNA产生正向超螺旋 ( )15.可变剪接的存在说明剪接并不是一个精确的过程 ( )三、名词解释(15分,每题3分)1.顺反子mRNA2.染色质重塑(chromatin remodeling)3.外显子4.锌指结构5.多聚酶链式反应(PCR)四、简答题(50分,每题10分)1.简述如何以λ噬菌体为载体构建基因组文库?2.什么是DNA的甲基化作用?简述如何鉴定DNA片段有无甲基化?3.试述如何对外源基因在大肠杆菌中表达产物进行检测与鉴定?4.何谓DNA的变性和复性?举出至少5种以上的用途。

5.cDNA克隆和基因组克隆有何不同?真核基因组克隆是否可在E. coli细胞中表达? 为什么?五、论述题 (25分)蛋白质生物合成有几步,每步各需要什么因子?根据蛋白质生物合成过程的原理,设计一个蛋白质合成的 in vitro 体系,并说明该体系中国科学院研究生院2012 年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题科目名称:分子生物学考生须知:1.本试卷满分为150 分,全部考试时间总计180 分钟。

2.所有答案必须写在答题纸上,写在试题纸上或草稿纸上一律无效。

注意:附表中提供了遗传密码和对应氨基酸的关系,考生在答题过程中有可能会使用到。

一、填空题(每空1 分,共30 分)1、染色体由DNA、组蛋白、___________以及部分RNA 组成;在真核细胞分裂间期,染色体以___________形式存在于___________中,比较细且松散。

2、核糖体存在于每个进行蛋白质合成的细胞中,它可化分为多个功能活性中心,即___________、___________(A 位)、结合或接受肽基tRNA 的部位、___________(P 位)及形成肽键的部位(转肽酶中心)。

3、蛋白质生物合成中的终止密码有___________ 、___________ 和___________。

4、在蛋白质的前体加工过程可以对特定的氨基酸的侧链进行修饰,主要包括___________、___________、甲基化、___________、___________和羧基化等,其中甲基化主要是由N-甲基转移酶催化的,该酶主要存在于细胞质内。

5、在转录过程中,RNA 的合成方向为___________ ,合成的RNA 带有与DNA___________链相同的序列;在转录完成后,RNA 主要以___________链形式存在于生物体内。

6、大肠杆菌转录起始过程需要RNA 聚合酶全酶,其中___________因子辨认起始点,而β亚基和___________亚基组成了催化中心。

转录的终止反映在___________。

7、生物体内DNA 双链的复制大都是以___________ 方式进行的;复制时,___________通过水解A TP 获得能量解开DNA 双链,而___________消除解链造成的正超螺旋的堆积,使复制得以延伸。

8、RNA 的选择性剪接是指用不同的剪接方式从一个mRNA 前体产生不同的mRNA 剪接异构体的过程.一般将选择性剪接分为几类:___________、___________、___________、___________、及___________。

9、从mRNA 5端起始密码子AUG 到3端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为___________。

10、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为___________,不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为___________。

二、单项选择题(每题2 分,共20 分)1. 真核生物DNA 复制过程中,下面哪一种是不需要的?___________。

(A)端粒酶(B)RNA 引物(C)RNA 聚合酶III(D)DNA 聚合酶α(E)DNA 聚合酶δ2. 真核细胞中,基因转录激活通常与下列哪个相关?___________。

(A)染色质凝聚(B)常染色质(C)异染色质(D)DNA 甲基化(E)端粒3. 真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是:___________。

(A)翻译与转录偶联进行(B)模板都是多顺反子(C)都需要GTP(D)甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸(E)mRNA 的5′端帽子结构和3′端polyA 都参与形成翻译起始复合物4. 下列关于遗传密码的描述哪一个是不正确的?___________。

(A)20 种氨基酸共有64 个密码子(B)碱基缺失、插入可致框移突变(C)AUG 是起始密码(D)UAA 是终止密码(E)一个氨基酸可有多达6 个密码子5. 葡萄糖(Glucose)在代谢物阻遏系统中的功能是:___________。

(A)增强cAMP 活性(通过抑制乳糖操纵子)(B)抑制腺苷酸环化酶(Adenyl Cyclase)活性,从而导致细胞内cAMP 水平下降(C)增强腺苷酸环化酶(Adenyl Cyclase)活性,从而导致细胞内cAMP 水平升高(D)抑制Lac 操纵子活性,导致细胞内cAMP 水平下降(E)增强Lac 操纵子活性,导致细胞内cAMP 水平升高6. 下列那类因子直接介导RNA 聚合酶II 结合到启动子区域,从而使转录起始?___________。

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