病原微生物生理学检验优秀课件
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个人防护措施及注意事项说明
实验服与护目镜
进入实验室需穿着实验服，佩戴合适的护目镜， 防止试剂飞溅或粉尘刺激。
手套与口罩
根据实验需要选择合适的手套和口罩，避免皮肤 接触有害试剂或吸入有害气体。
实验操作规范
规范实验操作，避免产生气溶胶或飞溅物，减少 交叉污染的风险。
实验废弃物处理及环保要求讲解
废弃物分类处理
医学检验微生物ppt课件完 整版x
目录
• 微生物学基础 • 医学微生物学概述 • 常见病原微生物介绍 • 微生物检验技术与方法 • 临床标本中常见病原微生物检测实例分析 • 实验室安全与防护措施
01 微生物学基础
微生物定义与分类
微生物定义
微生物是一类形体微小、结构简单、 必须借助光学显微镜或电子显微镜 才能看到的微小生物。
微生物生长与繁殖
01
微生物营养
微生物从外界环境中摄取和利用营养物质的过程称为营养。微生物营养
类型有光能自养型、光能异养型、化能自养型和化能异养型四类。
02 03
微生物生长
微生物在适宜的环境条件下，通过摄取营养物质、合成细胞物质、增加 细胞数量的过程称为生长。生长曲线可分为迟缓期、对数期、稳定期和 衰亡期四个时期。
通过对微生物基因组进行测序和 分析，了解其基因组成和功能， 为微生物的鉴定和分型提供准确
依据。
基因芯片技术
将大量特异性基因探针固定在芯 片上，通过与待测微生物DNA杂
交来鉴定其种类和型别。
宏基因组学技术
通过对环境中所有微生物的基因 组进行高通量测序和分析，了解 微生物群落的组成和功能，为环 境微生物检测和生态学研究提供
尿液标本中常见病原微生物检测实例分析
尿常规检查
《微生物生理》课件
微生物的生长曲线
微生物的生长可以分为潜伏期、指数增长期、平台期和死亡期等不同阶段。
微生物的耐受性和适应能力
温度耐受性 pH耐受性 化学物质耐受性
微生物对不同温度的适应能力，包括耐寒、 耐热和嗜热等特征。
微生物对不同pH值环境的适应能力，如酸 ophilic和碱ophilic微生物。
微生物对化学物质的耐受性，如抗菌药物 和重金属等。
《微生物生理》PPT课件
本课程将介绍微生物生理的基础知识，包括微生物的定义和分类，生理特征， 代谢途径，生长与营养需求，耐受性和适应能力，以及在生物技术和环境中 的应用。
微生物的定义和分类
微生物简介
微生物是肉眼看不见的 生物体，包括细菌、真 菌、病毒和原生动植物。 它们广泛存在于自然界 中。
微生物分类
微生物根据细胞结构、 生活环境和营养特征等 因素进行分类，包括好 氧菌、厌氧菌、盐爱菌、 酸爱菌等。
微生物的重要性
微生物在生态系统中扮 演着重要的角色，参与 物质循环、生物降解和 产生有益物质等过程。
微生物的生理特征
微生物的细胞结构
微生物细胞包括核酸、蛋白 质、脂质和碳水化合物等组 成部分，具有不同的形态和 结构。
2
厌氧代谢
厌氧微生物在缺氧的环境下进行代谢，通过发酵、硫酸盐还原等途径获得能量。
3
光合代谢
光合微生物利用光能合成有机物质，如植物通过光合作用产生的葡萄糖。
微生物的生长与营养需求
微生物的生长条件
微生物需要适宜的温度、pH值、营养物质和水分等因素来进行生长和繁殖。
微生物的营养需求
微生物需要碳源、氮源、矿物质和生长因子等营养物质来维持正常生长。
微生物的营养摄取方式
微生物可以通过光合作用、 化学合成或异养等方式摄取 营养物质，满足生长和繁殖 的需求。
微生物的生长可以分为潜伏期、指数增长期、平台期和死亡期等不同阶段。
微生物的耐受性和适应能力
温度耐受性 pH耐受性 化学物质耐受性
微生物对不同温度的适应能力，包括耐寒、 耐热和嗜热等特征。
微生物对不同pH值环境的适应能力，如酸 ophilic和碱ophilic微生物。
微生物对化学物质的耐受性，如抗菌药物 和重金属等。
《微生物生理》PPT课件
本课程将介绍微生物生理的基础知识，包括微生物的定义和分类，生理特征， 代谢途径，生长与营养需求，耐受性和适应能力，以及在生物技术和环境中 的应用。
微生物的定义和分类
微生物简介
微生物是肉眼看不见的 生物体，包括细菌、真 菌、病毒和原生动植物。 它们广泛存在于自然界 中。
微生物分类
微生物根据细胞结构、 生活环境和营养特征等 因素进行分类，包括好 氧菌、厌氧菌、盐爱菌、 酸爱菌等。
微生物的重要性
微生物在生态系统中扮 演着重要的角色，参与 物质循环、生物降解和 产生有益物质等过程。
微生物的生理特征
微生物的细胞结构
微生物细胞包括核酸、蛋白 质、脂质和碳水化合物等组 成部分，具有不同的形态和 结构。
2
厌氧代谢
厌氧微生物在缺氧的环境下进行代谢，通过发酵、硫酸盐还原等途径获得能量。
3
光合代谢
光合微生物利用光能合成有机物质，如植物通过光合作用产生的葡萄糖。
微生物的生长与营养需求
微生物的生长条件
微生物需要适宜的温度、pH值、营养物质和水分等因素来进行生长和繁殖。
微生物的营养需求
微生物需要碳源、氮源、矿物质和生长因子等营养物质来维持正常生长。
微生物的营养摄取方式
微生物可以通过光合作用、 化学合成或异养等方式摄取 营养物质，满足生长和繁殖 的需求。
临床检验病原生物学PPT精品课程课件讲义
2、生理特征杆菌需X和V因子
3、生化特征-糖发酵、碳、氮利用试验 4、免疫学特征－菌体抗原＋已知抗体 5、化学组成特征
二、编码鉴定
数码鉴定法
• 有21个生化反应孔，3个为一组，第一个阳性为1分，第二 个阳性为2分，第三个阳性为4分，阴性为0。把七组数字加 起来，输入电脑比较，如5144512为大生物学
主讲：XX XX
凡大医治病，必当安神
定志，无欲无求，先发大慈恻 隐之心，誓愿普救含灵之苦。
- - 孙思邈
PPT内容可自行编辑
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概念
病原微生物
非细胞型
真核细胞型
---病毒 ---真菌
病原生 物
医学寄生虫
↘原核细胞型
原虫 蠕虫
细菌 螺旋体 ----支原体 立克次体 衣原体 放线菌
正常菌群与人体的微生态平衡
• 正常菌群: • l．抵御、拮抗外袭菌群的作用 ---乳酸菌产酸
• 2．产生生理活性物质 ---VB12 、K
• 菌群失调可分三种类型： • ①可逆性失调 ----滥用抗生素 • ②比例失调 ----慢性腹泻 • ③菌群交替 ----二重感染
第二节 人体常见的致病微生物
第四节 微生物的致病条件及类型
感染：
外源性病原 微生物 侵入 内源性条件 致病性微生物 宿主
繁殖 释放毒素
内环境失调 引起病理 过程
第四节 微生物的致病条件及类型
• 一、感染的条件 侵入途径
经黏膜 ---破损、烧伤
经呼吸道----TB、感冒 经消化道---菌痢、甲肝 接触---淋病、艾兹病
侵入数量 ---取决于微生物毒力和机体免疫力
首字母大写 与国际法则相反 Escherichia coli 大肠埃希菌
微生物和微生物学检验(共43张PPT)
聚糖骨架 Ｇ－
四肽侧链 Ｇ＋
Ｎ－酰胞壁酸 Ｎ－乙酰葡糖胺
β－１.4糖苷键
五肽桥（苷氨酸）
Ｇ＋菌肽聚糖厚、层数多、立体状坚固。
图 金黄色葡萄球糖细胞细胞壁的 肽聚糖结构
图 大肠杆菌细胞壁的肽聚糖结构
Ｇ＋菌细胞壁 特殊结构
膜磷壁酸 壁磷壁酸 表面蛋白：SPA、M蛋白
Ｇ－菌细胞壁 特殊结构 (外膜)
法。
五、微生物的遗传变异
（一）遗传变异的物质基础
染色体 质粒（plasmid）：细菌存在于染色体外的少部分
（约1～2%）DNA，可决定细菌的一些生物学特性。
转位因子：插入顺序、转座子 、转座噬菌体
质粒的生物学性质：
1．质粒并非细菌生存所必不可少的遗传物 质。
2．质粒的传递（转移）是细菌遗传物质转移的一
抓特性、去共性 （３）注意新动向。
第一篇 微生物学
细菌学总论
一、细菌(bacterium)的形态与结构
（一）形态：个体微小、形态各异
球菌（coccus）
杆菌 (Bacillus)
弧菌与弯曲菌 螺旋菌及螺旋体
不规则形。
（二）结构：
１．基本结构：包括胞壁、胞膜、胞浆及核质
细胞壁：
主要成分――肽聚糖。
菌毛(Pilus)：（１）普通菌毛：粘附素； （２）性菌毛：１－４根，长而粗，Ｆ＋ 菌转移Ｆ质粒，耐药及毒力质粒。
芽胞(Spore)：不利环境中的一种抵抗 形式，是休眠体而非繁殖体。
二、细菌的繁殖与新陈代谢：
掌握几个概念：
１．自养菌、异养菌；
２．需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微需氧菌。
重50～80%
10～20%
+
-
2024年医学检验微生物ppt课件
光学成像技术在医学检验中的应用
发展高分辨率、高灵敏度的成像技术，提高形态学检测的准确性。
人工智能和大数据在医学检验中应用探讨
人工智能在医学检验中的应用
通过深度学习、机器学习等技术，实现自动化、智能化的检测和分析。
大数据在医学检验中的应用
整合多来源、多维度的数据，挖掘潜在信息，为精准医疗提供支持。
人工智能和大数据结合在医学检验中的应用
微生物的结构
微生物的结构包括细胞壁、细胞膜、 细胞质和核质等部分，其中细胞壁是 微生物特有的结构，不同种类的微生 物细胞壁成分和结构不同。
微生物的超微结构
通过电子显微镜可以观察到微生物的 超微结构，如细菌的鞭毛、菌毛、荚 膜等，这些结构与微生物的致病性和 免疫原性密切相关。
微生物生长与繁殖
微生物的生长条件
微生物的特点
体积微小、种类繁多、分布广泛、代谢旺盛、繁殖迅速、容易变异 等。
微生物在医学检验中的意义
微生物是医学检验中重要的研究对象之一，对于疾病的诊断、治疗 和预防具有重要意义。
微生物分类与命名
微生物的分类
根据微生物的形态、结构、生理 生化特性以及遗传特征等进行分 类，常见的分类系统有伯杰氏系 统细菌学手册、原核生物分类学
病毒性肝炎、艾滋病等。
医院感染控制与预防策略制定
医院感染监测
定期对医院环境、医疗器械、医护人员手等进行微生物监测，及时 发现潜在感染源。
消毒与灭菌
采用物理、化学等方法对医疗器械、环境等进行消毒与灭菌，切断 传播途径，降低医院感染发生率。
手卫生与个人防护
加强医护人员手卫生管理，提高个人防护意识，减少医源性感染的发 生。
2024年医学检验微生 物ppt课件
contents
发展高分辨率、高灵敏度的成像技术，提高形态学检测的准确性。
人工智能和大数据在医学检验中应用探讨
人工智能在医学检验中的应用
通过深度学习、机器学习等技术，实现自动化、智能化的检测和分析。
大数据在医学检验中的应用
整合多来源、多维度的数据，挖掘潜在信息，为精准医疗提供支持。
人工智能和大数据结合在医学检验中的应用
微生物的结构
微生物的结构包括细胞壁、细胞膜、 细胞质和核质等部分，其中细胞壁是 微生物特有的结构，不同种类的微生 物细胞壁成分和结构不同。
微生物的超微结构
通过电子显微镜可以观察到微生物的 超微结构，如细菌的鞭毛、菌毛、荚 膜等，这些结构与微生物的致病性和 免疫原性密切相关。
微生物生长与繁殖
微生物的生长条件
微生物的特点
体积微小、种类繁多、分布广泛、代谢旺盛、繁殖迅速、容易变异 等。
微生物在医学检验中的意义
微生物是医学检验中重要的研究对象之一，对于疾病的诊断、治疗 和预防具有重要意义。
微生物分类与命名
微生物的分类
根据微生物的形态、结构、生理 生化特性以及遗传特征等进行分 类，常见的分类系统有伯杰氏系 统细菌学手册、原核生物分类学
病毒性肝炎、艾滋病等。
医院感染控制与预防策略制定
医院感染监测
定期对医院环境、医疗器械、医护人员手等进行微生物监测，及时 发现潜在感染源。
消毒与灭菌
采用物理、化学等方法对医疗器械、环境等进行消毒与灭菌，切断 传播途径，降低医院感染发生率。
手卫生与个人防护
加强医护人员手卫生管理，提高个人防护意识，减少医源性感染的发 生。
2024年医学检验微生 物ppt课件
contents
常见病原微生物的检测ppt课件
编辑版ppt
9
三、介绍高致病性禽流感的其他知识
鉴定高致病性禽流感的标准: 最近国际上评价禽流感病毒致病力的经典方法是接种易感鸡。
按照国际标准，能引起接种鸡死亡75％以上的分离株，是高致病 性毒株。尽管接种鸡是确定致病的“黄金标准”，但它不能反应 致死率小于75%的H5或H7亚型病毒的潜在致病力。因此0IE(国际 兽疫局〉根据科学家的建议,推出新鉴定标准。
病原的分离和鉴定可以从活体或尸体分离病毒。
用棉拭子法常可从活体的气管和泄殖腔中分离到病毒， 可用不同大小的棉拭子擦取气管或泄殖腔，然后将拭 子放入灭菌的保存液〈25－50%甘油盐水、肉汤或 1000u/ml青霉素和10mg/mL链霉素的细胞维持液〉中。
病料的采取时间很重要,一般在感染初期或发病急性期 采取。如转为后期则因机体已形成足够的抗体而不易 分离到病毒.
潜伏期一般较短，通常为4－5天，体温急剧上升至
43.3－44.4.c，精神沉郁、拒食、病鸡很快陷于昏睡状
态，有些颈部出现向后扭转的神经症状。病鸡多呈急
性死亡，有的也可能出现呼吸道症状，咳嗽、打喷嚏，
气管出现咯音，流泪等症状，羽毛蓬松，产蛋率下降，
死亡率高低不等。
编辑版ppt
7
二、诊断 1、病原的分离
禽流感病毒具有A型抗原,属于A 型流感病毒,列为禽流感病毒类。 本病毒颗粒呈球形、杆状或长丝 状,为多形性。其直径为80－ 120nm,表面有一层棒状和蘑菇 状的纤突，有囊膜,囊膜下面有 一层膜蛋白,紧紧地包裹着呈螺 旋状对称的核衣壳。
编辑版ppt
3
2、禽流感病毒的分型
流感病毒分为三个不同的抗原型,即A、B、 C三型。其中B、C两型仅能对人致病,A型 可对人、猪、马和禽致病。
《病原微生物学》课件
《病原微生物学》ppt课件
目录
CONTENTS
• 病原微生物学概述 • 细菌学 • 病毒学 • 真菌学 • 病原微生物的检测与防治
01 病原微生物学概述
CHAPTER
定义与分类
总结词
病原微生物学的定义、分类和相关概念。
详细描述
病原微生物学是一门研究病原微生物的学科，主要研究病原微生物的形态、分类、生态、致病性、免疫性、诊断 、预防和治疗等方面的内容。病原微生物可以分为细菌、病毒、真菌等不同类型，每种类型都有其独特的生物学 特性和致病机制。
新型抗菌药物研发
针对病原微生物耐药性问题， 研发新型抗菌药物，以保持治
疗效果。
谢谢
THANKS
病毒的基因组
病毒的遗传物质是DNA或 RNA，其大小和编码基因 的数量。
病毒的复制与传播
病毒的复制周期
病毒在宿主细胞内的复制 过程，包括吸附、穿入、 脱壳、生物合成和装配与 释放。
病毒的传播方式
病毒通过直接接触、飞沫 、空气、水、食物等途径 传播。
病毒的变异
病毒基因组变异导致病毒 变异，可能影响病毒的传 播方式和致病性。
有性繁殖
真菌通过有性繁殖方式进行繁殖， 如配子生殖、接合生殖等。
传播方式
真菌可以通过空气、水、土壤等途 径传播，也可通过动物和人类传播 。
真菌的致病性
皮肤感染
真菌可引起皮肤感染，如足癣、股癣等，表现为 皮肤瘙痒、红肿等症状。
呼吸道感染
真菌可引起呼吸道感染，如肺炎、支气管炎等， 表现为咳嗽、咳痰等症状。
病原微生物的特性
总结词
病原微生物的形态、结构、繁殖和变异等方面的特性。
详细描述
病原微生物具有多种形态和结构，如球菌、杆菌、螺旋菌、弧菌、支原体、衣原体等。它们通常比非 病原微生物小，繁殖速度快，容易产生变异。这些特性使得病原微生物能够适应不同的环境，逃避机 体的免疫防御机制，导致疾病的发生和传播。
目录
CONTENTS
• 病原微生物学概述 • 细菌学 • 病毒学 • 真菌学 • 病原微生物的检测与防治
01 病原微生物学概述
CHAPTER
定义与分类
总结词
病原微生物学的定义、分类和相关概念。
详细描述
病原微生物学是一门研究病原微生物的学科，主要研究病原微生物的形态、分类、生态、致病性、免疫性、诊断 、预防和治疗等方面的内容。病原微生物可以分为细菌、病毒、真菌等不同类型，每种类型都有其独特的生物学 特性和致病机制。
新型抗菌药物研发
针对病原微生物耐药性问题， 研发新型抗菌药物，以保持治
疗效果。
谢谢
THANKS
病毒的基因组
病毒的遗传物质是DNA或 RNA，其大小和编码基因 的数量。
病毒的复制与传播
病毒的复制周期
病毒在宿主细胞内的复制 过程，包括吸附、穿入、 脱壳、生物合成和装配与 释放。
病毒的传播方式
病毒通过直接接触、飞沫 、空气、水、食物等途径 传播。
病毒的变异
病毒基因组变异导致病毒 变异，可能影响病毒的传 播方式和致病性。
有性繁殖
真菌通过有性繁殖方式进行繁殖， 如配子生殖、接合生殖等。
传播方式
真菌可以通过空气、水、土壤等途 径传播，也可通过动物和人类传播 。
真菌的致病性
皮肤感染
真菌可引起皮肤感染，如足癣、股癣等，表现为 皮肤瘙痒、红肿等症状。
呼吸道感染
真菌可引起呼吸道感染，如肺炎、支气管炎等， 表现为咳嗽、咳痰等症状。
病原微生物的特性
总结词
病原微生物的形态、结构、繁殖和变异等方面的特性。
详细描述
病原微生物具有多种形态和结构，如球菌、杆菌、螺旋菌、弧菌、支原体、衣原体等。它们通常比非 病原微生物小，繁殖速度快，容易产生变异。这些特性使得病原微生物能够适应不同的环境，逃避机 体的免疫防御机制，导致疾病的发生和传播。
病原微生物细菌的生理[可修改版ppt]
![病原微生物细菌的生理[可修改版ppt]](https://img.taocdn.com/s3/m/1b68706dbb68a98271fefafe.png)
稳定期(stationary phase)：细菌繁殖数与死亡数大致平衡，细菌的外毒 素、抗生素及芽胞在此期产生； 衰亡期(decline phase)：死菌数大于ห้องสมุดไป่ตู้菌数，生物学性状发生变异而不典型。
第三节、细菌的新陈代谢
二、细菌的代谢产物
（一）、分解代谢产物和细菌的生化反应 1、糖发酵试验
[原理]
按营养组成 增菌培养基（enrichment medium）
和用途分
选择培养基（selective medium）
培 养 基
按物理
鉴别培养基（differential medium） 厌氧培养基（anaerobic medium） 液体培养基
红色化合物 （阳性）
3、甲基红（methyl red，M）试验
阴性 阳性
葡萄糖 大肠埃希菌 丙酮酸（酸性）
甲基红指示剂变 红（阳性）
葡萄糖
产气杆菌
脱羧
丙酮酸
乙酰甲基甲 醇（中性）
甲基红指示 剂呈橘黄色 （阴性）
5、吲哚（indol，I）试验
[原理]
某些细菌（如大肠埃希菌、变 形杆菌、霍乱弧菌等）能分解 色氨酸产生靛基质（无色）
根据细菌代谢时对分子氧的需要与否，将细菌分为四类
专性需氧菌：有氧呼吸 如：结核分枝杆菌 微需氧菌：5~10%氧浓度 如：空肠弯曲菌 兼性厌氧菌：有氧/厌氧呼吸 大多数细菌 专性厌氧菌：低氧分压/无氧 如：破伤风梭菌
专性厌氧菌在有氧环境中不能生长的原因
缺乏氧化还原电势高的呼吸酶，如细胞色素和细胞色素氧 化酶等。
不同的细菌因酶系统不 同，能分解不同的糖；
细菌分解糖后能产酸；
如某些细菌因具有特殊 的解氢酶则进一步分解 酸产气。
第三节、细菌的新陈代谢
二、细菌的代谢产物
（一）、分解代谢产物和细菌的生化反应 1、糖发酵试验
[原理]
按营养组成 增菌培养基（enrichment medium）
和用途分
选择培养基（selective medium）
培 养 基
按物理
鉴别培养基（differential medium） 厌氧培养基（anaerobic medium） 液体培养基
红色化合物 （阳性）
3、甲基红（methyl red，M）试验
阴性 阳性
葡萄糖 大肠埃希菌 丙酮酸（酸性）
甲基红指示剂变 红（阳性）
葡萄糖
产气杆菌
脱羧
丙酮酸
乙酰甲基甲 醇（中性）
甲基红指示 剂呈橘黄色 （阴性）
5、吲哚（indol，I）试验
[原理]
某些细菌（如大肠埃希菌、变 形杆菌、霍乱弧菌等）能分解 色氨酸产生靛基质（无色）
根据细菌代谢时对分子氧的需要与否，将细菌分为四类
专性需氧菌：有氧呼吸 如：结核分枝杆菌 微需氧菌：5~10%氧浓度 如：空肠弯曲菌 兼性厌氧菌：有氧/厌氧呼吸 大多数细菌 专性厌氧菌：低氧分压/无氧 如：破伤风梭菌
专性厌氧菌在有氧环境中不能生长的原因
缺乏氧化还原电势高的呼吸酶，如细胞色素和细胞色素氧 化酶等。
不同的细菌因酶系统不 同，能分解不同的糖；
细菌分解糖后能产酸；
如某些细菌因具有特殊 的解氢酶则进一步分解 酸产气。
病原微生物检测方法 27页PPT文档
直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧 光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观 察结果。间接法是在检测样品上滴加已知的细 菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标 记的第二抗体。
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11
酶联免疫技术
酶联免疫技术是根据抗原- 抗体的免疫反应与 酶的高效催化作用原理有机结合,通过酶催化 底物进而发生一系列的化学反应,使溶液呈现 出颜色变化,从而显示抗原抗体特异性反应的 存在。
可以分析得出SARS与非SARS 病人血清中的 蛋白质成分变化。该技术不是利用单独的蛋白 质峰的出现和消失来判断SARS ,而是用5 个蛋 白质峰的出现和消失来判断,好比刑侦破案中 甄别5 个手指的指纹,故此称为“指纹图谱”。
8
八，LAMP技术
环介导等温扩增(loop—mediated isothermal amplification，LAMP)技术是近年来发展出的一 种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传 统PCR方法相比，LAMP不需要热循环，为等温 扩增。且由于LAMP反应中产生大量的副产物一 白色焦磷酸钾沉淀，扩增产物可不经过电泳，通 过肉眼观察或浊度计即可判定结果。
2
二，血清免疫学方法
免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究 组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。为了 显示和观察这种抗原抗体反应,需要预先将某种标记 物结合到抗体上,借标记物的荧光或酶的有色反应、 放射性或高电子密度,在光镜或电镜下进行定性、定 位或定量研究。
荧光抗体技术 酶联免疫技术
用于检测：丙型肝炎病毒(HCV) 、严重急性呼吸 综合征冠状病毒(SARS—CoV) 、乙脑病毒(JEV) 、 甲型流感病毒(AIV) 、 腮腺炎病毒(MV)等。
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酶联免疫技术
酶联免疫技术是根据抗原- 抗体的免疫反应与 酶的高效催化作用原理有机结合,通过酶催化 底物进而发生一系列的化学反应,使溶液呈现 出颜色变化,从而显示抗原抗体特异性反应的 存在。
可以分析得出SARS与非SARS 病人血清中的 蛋白质成分变化。该技术不是利用单独的蛋白 质峰的出现和消失来判断SARS ,而是用5 个蛋 白质峰的出现和消失来判断,好比刑侦破案中 甄别5 个手指的指纹,故此称为“指纹图谱”。
8
八，LAMP技术
环介导等温扩增(loop—mediated isothermal amplification，LAMP)技术是近年来发展出的一 种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传 统PCR方法相比，LAMP不需要热循环，为等温 扩增。且由于LAMP反应中产生大量的副产物一 白色焦磷酸钾沉淀，扩增产物可不经过电泳，通 过肉眼观察或浊度计即可判定结果。
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二，血清免疫学方法
免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究 组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。为了 显示和观察这种抗原抗体反应,需要预先将某种标记 物结合到抗体上,借标记物的荧光或酶的有色反应、 放射性或高电子密度,在光镜或电镜下进行定性、定 位或定量研究。
荧光抗体技术 酶联免疫技术
用于检测：丙型肝炎病毒(HCV) 、严重急性呼吸 综合征冠状病毒(SARS—CoV) 、乙脑病毒(JEV) 、 甲型流感病毒(AIV) 、 腮腺炎病毒(MV)等。
9
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常见病原微生物的检测ppt课件
1 任何分离到A型流感病毒，用0.2mL1:10稀释的无菌尿囊液静 脉或肌肉注射8只4－8周龄易感鸡,10天内的死亡率不低于75%。
2.对所有低致病的H5、H7毒株,血凝素切割位点的氨基酸序列 与高致病性禽流感病毒一致。
3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死1－5只鸡,在缺乏胰蛋 白酶的情况下,能在细胞上生长形成蚀斑。
可依鉴定项目确定是否为布氏杆菌。经一月培养无细
菌生长，可报告阴性。
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27
（二）血清学检查
通常作凝集试验，判定凝集效价1： 50可疑，1：100以上为阳性。效价增高4 倍以上时，更有诊断价值。
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第四节炭疽杆菌
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧 芽胞杆菌属，能引起羊、牛、马等动物 及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。平时，牧民、农 民、皮毛和屠宰工作者易受感染。皮肤 炭疽在我国各地还有散在发生，不能放 松警惕。
家畜患病没有治疗价值。应全部淘汰，消灭传染源。
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26
四、微生物学检验
本菌传染性大，要注意防止实验室污染。
（一）分离培养
急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接种于双相
肝浸液培养基（一半斜面，一半液体）置37℃
10%CO2环境中培养，每隔2天检查一次，如无细菌生 长则摇荡培养基，使液体浸过斜面上，有细菌生长，
常见病原微生物的检测
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第一节 禽流感病毒
禽流感是禽流行性感冒（Avian Influenza，AI）的简称，这是一种由甲 型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾 病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染 病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。
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2.对所有低致病的H5、H7毒株,血凝素切割位点的氨基酸序列 与高致病性禽流感病毒一致。
3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死1－5只鸡,在缺乏胰蛋 白酶的情况下,能在细胞上生长形成蚀斑。
可依鉴定项目确定是否为布氏杆菌。经一月培养无细
菌生长，可报告阴性。
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（二）血清学检查
通常作凝集试验，判定凝集效价1： 50可疑，1：100以上为阳性。效价增高4 倍以上时，更有诊断价值。
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第四节炭疽杆菌
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧 芽胞杆菌属，能引起羊、牛、马等动物 及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。平时，牧民、农 民、皮毛和屠宰工作者易受感染。皮肤 炭疽在我国各地还有散在发生，不能放 松警惕。
家畜患病没有治疗价值。应全部淘汰，消灭传染源。
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四、微生物学检验
本菌传染性大，要注意防止实验室污染。
（一）分离培养
急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接种于双相
肝浸液培养基（一半斜面，一半液体）置37℃
10%CO2环境中培养，每隔2天检查一次，如无细菌生 长则摇荡培养基，使液体浸过斜面上，有细菌生长，
常见病原微生物的检测
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第一节 禽流感病毒
禽流感是禽流行性感冒（Avian Influenza，AI）的简称，这是一种由甲 型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾 病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染 病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。
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诊断学--病原微生物检查PPT共48页
诊断学--病原微生物检查
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
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(5)应用：是鉴定细菌最主要的试验，特别 对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要
2．V-P试验
(1)原理：某些细菌分解葡萄糖产生 丙酮酸，脱羧产生乙酰甲基甲醇， 在碱性环境中被氧氧化为二乙酰， 进而与胍基起作用生成红色化合物， 则为V-P试验阳性。
(2)培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。
(3)方法：将待检菌接种于上述培养基中， 于35 ℃培养48h后加入甲液(6％n·萘酚酒 精溶液)和乙液(40％KOH溶液)，振摇。
(三)细菌的培养方法
1.需氧培养法 2.二氧化碳培养法
1) 二氧化碳培养箱 2) 烛缸法 3) 化学法 3.厌氧培养法
二 病毒分离培养
1．动物接种 动物对病毒的敏感性是不同的，
选择合适动物十分重要。小鼠、乳鼠、 家兔、豚鼠、猴等常用于分离病毒。
2．鸡胚接种 鸡胚是用于分离粘病毒科、疱疹
病毒、痘类病毒的较为理想的材料 3. 组织培养
病原微生物生理学 检验
第一节 分离培养
一、细菌的分离培养
（一）培 养 基
由人工方法配制而成的，专供微生物生 长繁殖使用的混合营养物制品。
1.培养基种类
① 基础培养基 ② 营养培养基 ③ 鉴别培养基 ④ 选择培养基 ⑤ 特殊培养基
包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。 ① 碱性琼脂 ② 血液增菌培养基 ③ 营养肉汤
6. 氰化钾抑制试验
• 原理：检测细菌能否被一定浓度的氰化 钾抑制而不能生长
分离培养基的选择
依据卫生部临床检验中心推荐，应备有 如下分离培养基：
1．血平板 2．巧克力血平板 3．中国蓝平板或伊红美蓝平板 4．麦康凯平板 5．SS琼脂
2.培养基的组成成分
营养物质 凝固物质 抑制剂和指示剂
(二)细菌的接种方法
1.平板划线分离法
1) 连续划线分离法 2) 分区划线分离法
2.斜面接种法 3.液体接种法 4.穿刺接种法 5.倾注平板法 6.涂布接种法
(3)传代细胞系：来于肿瘤细胞，染色体特 征类似肿瘤细胞。常用的有人宫颈癌细胞 (Hela)、人喉上皮癌细胞(Hep-2)。
三、真菌的分离培养
1.大培养 2.小培养
(1) 玻片法 (2) 钢圈法 (3) 方块法
第二节 毒素的检测
一、细菌内毒素的测定
主要用于诊断病人是否发生革兰阴性细 菌感染。另外，还可用于检测注射用液和 生物制品有无内毒素污染
(4)结果：在数分钟内出现红色为阳性；如 无红色出现且于35 ℃ 4h后仍如故者即为 阴性。
(5)应用：常与甲基红试验一起使用，因为 前者阳性的细菌，后者通常为阴性。
3．甲基红试验
(1)原理：某些细菌分解葡萄糖产生丙酮 酸，进一步分解，产生甲酸等，使pH 降至4.5以下，加入甲基红试剂则呈红 色为阳性。若分解葡萄糖产酸量少，则 pH 6.2以上，故加入甲基红指示剂呈黄 色，为阴性。
4. 枸橼酸盐试验(Simmons法）
原理: 枸橼酸盐利用试验是检 测细菌能否利用枸橼酸盐作 为碳的唯一来源的特征，培 养基含有枸橼酸钠和磷酸二 氢胺
结果：培养基由绿色变为深蓝 色为阳性
用途：用于肠杆菌科内各种细 菌的鉴别
5.丙二酸盐试验
• 某些细菌以丙二酸盐 为唯一碳源，生成碳 酸钠
• 使培养基变碱性 • 阳性结果 蓝色 • 溴麝香草酚蓝
本试验对内毒素具有高度特异性，灵 敏度高，可检查出0.005～ 0.0005μg/ml内 毒素。且操作简便，速度快，在2h内即 可得出作用，可被
相应抗毒素中和，若先给动物注射抗毒素， 然后再注射外毒素，则动物不产生中毒症 状。
2．体外毒力试验
不同细菌具有各自独特的酶系统， 因而对底物的分解能力各异，其代谢的 产物也不相同。这些代谢产物又各具有 不同的生物化学特性，为此，可利用生 物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定 细菌
1．糖(醇、苷)类发酵试验
(1)原理：由于细菌含有发酵不同糖类的酶， 故分解糖的能力不同，终末产物亦不一 致。有的能分解，有的仅能分解1~2种， 还有的不能分解。有的产酸产气，有的 仅产酸，故可利用鉴别细菌
(2)培养基：在培养基中加入0.5％-1％的糖 类(单糖、双糖或多糖)、醇类(甘露醇、 肌醇等)、苷类(水杨苷、菊糖等)。可为 液体、半固体、固体或微量生化管几种 类型
(3)方法：将细菌接种到糖发酵培养基中， 培养数小时至2w后，观察结果
(4)结果：能分解糖产酸时，呈酸性反应， 若产气可出现气泡或培养基内有裂隙等 现象;若不分解，除有细菌生长外，无任 何变化
1．细菌内毒素的致热作用
常以家兔作为实验动物，家兔正 常体温38.5℃～40℃。抽取被检物注 入家兔耳静脉，记录体温变化情况， 分析实验结果
2．鲎试验
鲎血液的有核变形细胞内含凝 固酶 原及凝固蛋白原，当内毒素与鲎变形细 胞冻融后的溶解物(鲎试剂)接触时，可激 活凝固酶原，使可溶性的凝固蛋白原变 成凝胶状态的凝固蛋白，利用此种反应 来检测内毒素。
(2)培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。 (3)方法：将待检菌接种于上述培养基中，
培养2~4d，于培养基内加入甲基红试剂， 立即观察结果。 (4)结果：呈现红色为阳性；橘红色为弱 阳性；黄色为阴性。
(5)应用：主要用于鉴别大肠埃希菌与产 气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。 此外肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、 枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性， 而肠杆菌属则为阴性。
是指将人或动物离体的活组织或 分散的活细胞放在实验室的试管或培 养瓶中,模拟体内的生理条件使之生长
2. 组织细胞培养
根据细胞的来源、特性和传代次数分为：
(1)原代细胞培养：将细胞悬液加入营养液 培养，形成的单层细胞，称之为原代细胞。
(2)二倍体细胞株：仍保持二倍体特性。寿 命一般为40～50代，如人胚肺细胞。广泛用 于病毒分离和疫苗制备。
外毒素抗原性强，可刺激机体产生相 应的抗体。在体外以细菌外毒素的特异性 免疫血清为抗体与被检细菌外毒素(抗原) 进行抗原抗体反应，来检测外毒素，从而 鉴定细菌是否产生该种毒素。如白喉棒状 杆菌的Elek平板毒力测定
３．ELISA法
如葡萄球菌肠毒素、肠产毒型大肠埃 希菌LT及ST等的测定
第三节 生化反应
2．V-P试验
(1)原理：某些细菌分解葡萄糖产生 丙酮酸，脱羧产生乙酰甲基甲醇， 在碱性环境中被氧氧化为二乙酰， 进而与胍基起作用生成红色化合物， 则为V-P试验阳性。
(2)培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。
(3)方法：将待检菌接种于上述培养基中， 于35 ℃培养48h后加入甲液(6％n·萘酚酒 精溶液)和乙液(40％KOH溶液)，振摇。
(三)细菌的培养方法
1.需氧培养法 2.二氧化碳培养法
1) 二氧化碳培养箱 2) 烛缸法 3) 化学法 3.厌氧培养法
二 病毒分离培养
1．动物接种 动物对病毒的敏感性是不同的，
选择合适动物十分重要。小鼠、乳鼠、 家兔、豚鼠、猴等常用于分离病毒。
2．鸡胚接种 鸡胚是用于分离粘病毒科、疱疹
病毒、痘类病毒的较为理想的材料 3. 组织培养
病原微生物生理学 检验
第一节 分离培养
一、细菌的分离培养
（一）培 养 基
由人工方法配制而成的，专供微生物生 长繁殖使用的混合营养物制品。
1.培养基种类
① 基础培养基 ② 营养培养基 ③ 鉴别培养基 ④ 选择培养基 ⑤ 特殊培养基
包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。 ① 碱性琼脂 ② 血液增菌培养基 ③ 营养肉汤
6. 氰化钾抑制试验
• 原理：检测细菌能否被一定浓度的氰化 钾抑制而不能生长
分离培养基的选择
依据卫生部临床检验中心推荐，应备有 如下分离培养基：
1．血平板 2．巧克力血平板 3．中国蓝平板或伊红美蓝平板 4．麦康凯平板 5．SS琼脂
2.培养基的组成成分
营养物质 凝固物质 抑制剂和指示剂
(二)细菌的接种方法
1.平板划线分离法
1) 连续划线分离法 2) 分区划线分离法
2.斜面接种法 3.液体接种法 4.穿刺接种法 5.倾注平板法 6.涂布接种法
(3)传代细胞系：来于肿瘤细胞，染色体特 征类似肿瘤细胞。常用的有人宫颈癌细胞 (Hela)、人喉上皮癌细胞(Hep-2)。
三、真菌的分离培养
1.大培养 2.小培养
(1) 玻片法 (2) 钢圈法 (3) 方块法
第二节 毒素的检测
一、细菌内毒素的测定
主要用于诊断病人是否发生革兰阴性细 菌感染。另外，还可用于检测注射用液和 生物制品有无内毒素污染
(4)结果：在数分钟内出现红色为阳性；如 无红色出现且于35 ℃ 4h后仍如故者即为 阴性。
(5)应用：常与甲基红试验一起使用，因为 前者阳性的细菌，后者通常为阴性。
3．甲基红试验
(1)原理：某些细菌分解葡萄糖产生丙酮 酸，进一步分解，产生甲酸等，使pH 降至4.5以下，加入甲基红试剂则呈红 色为阳性。若分解葡萄糖产酸量少，则 pH 6.2以上，故加入甲基红指示剂呈黄 色，为阴性。
4. 枸橼酸盐试验(Simmons法）
原理: 枸橼酸盐利用试验是检 测细菌能否利用枸橼酸盐作 为碳的唯一来源的特征，培 养基含有枸橼酸钠和磷酸二 氢胺
结果：培养基由绿色变为深蓝 色为阳性
用途：用于肠杆菌科内各种细 菌的鉴别
5.丙二酸盐试验
• 某些细菌以丙二酸盐 为唯一碳源，生成碳 酸钠
• 使培养基变碱性 • 阳性结果 蓝色 • 溴麝香草酚蓝
本试验对内毒素具有高度特异性，灵 敏度高，可检查出0.005～ 0.0005μg/ml内 毒素。且操作简便，速度快，在2h内即 可得出作用，可被
相应抗毒素中和，若先给动物注射抗毒素， 然后再注射外毒素，则动物不产生中毒症 状。
2．体外毒力试验
不同细菌具有各自独特的酶系统， 因而对底物的分解能力各异，其代谢的 产物也不相同。这些代谢产物又各具有 不同的生物化学特性，为此，可利用生 物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定 细菌
1．糖(醇、苷)类发酵试验
(1)原理：由于细菌含有发酵不同糖类的酶， 故分解糖的能力不同，终末产物亦不一 致。有的能分解，有的仅能分解1~2种， 还有的不能分解。有的产酸产气，有的 仅产酸，故可利用鉴别细菌
(2)培养基：在培养基中加入0.5％-1％的糖 类(单糖、双糖或多糖)、醇类(甘露醇、 肌醇等)、苷类(水杨苷、菊糖等)。可为 液体、半固体、固体或微量生化管几种 类型
(3)方法：将细菌接种到糖发酵培养基中， 培养数小时至2w后，观察结果
(4)结果：能分解糖产酸时，呈酸性反应， 若产气可出现气泡或培养基内有裂隙等 现象;若不分解，除有细菌生长外，无任 何变化
1．细菌内毒素的致热作用
常以家兔作为实验动物，家兔正 常体温38.5℃～40℃。抽取被检物注 入家兔耳静脉，记录体温变化情况， 分析实验结果
2．鲎试验
鲎血液的有核变形细胞内含凝 固酶 原及凝固蛋白原，当内毒素与鲎变形细 胞冻融后的溶解物(鲎试剂)接触时，可激 活凝固酶原，使可溶性的凝固蛋白原变 成凝胶状态的凝固蛋白，利用此种反应 来检测内毒素。
(2)培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。 (3)方法：将待检菌接种于上述培养基中，
培养2~4d，于培养基内加入甲基红试剂， 立即观察结果。 (4)结果：呈现红色为阳性；橘红色为弱 阳性；黄色为阴性。
(5)应用：主要用于鉴别大肠埃希菌与产 气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。 此外肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、 枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性， 而肠杆菌属则为阴性。
是指将人或动物离体的活组织或 分散的活细胞放在实验室的试管或培 养瓶中,模拟体内的生理条件使之生长
2. 组织细胞培养
根据细胞的来源、特性和传代次数分为：
(1)原代细胞培养：将细胞悬液加入营养液 培养，形成的单层细胞，称之为原代细胞。
(2)二倍体细胞株：仍保持二倍体特性。寿 命一般为40～50代，如人胚肺细胞。广泛用 于病毒分离和疫苗制备。
外毒素抗原性强，可刺激机体产生相 应的抗体。在体外以细菌外毒素的特异性 免疫血清为抗体与被检细菌外毒素(抗原) 进行抗原抗体反应，来检测外毒素，从而 鉴定细菌是否产生该种毒素。如白喉棒状 杆菌的Elek平板毒力测定
３．ELISA法
如葡萄球菌肠毒素、肠产毒型大肠埃 希菌LT及ST等的测定
第三节 生化反应