压力蒸汽灭菌讲义
微生物学实验讲义
实验二实验器具的灭菌一、实验目的1.学习并初步掌握和各种实验器具的包扎及高压蒸汽灭菌的方法。
2.了解其他灭菌方法。
二、基本原理高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
其基本原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加，在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃，在此温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
三、器材1、高压蒸汽灭菌锅2、牛皮纸3、棉绳4、仪器和其他用具四、操作步骤1、包扎将各种实验器具进行合理规范包扎后，要用牛皮纸覆盖，最后用棉绳系紧。
2、加热烧开待高压锅内的水烧开，将包扎好的器具放入锅内的桶内，最后放入高压锅。
3、升压完全排除锅内空气后，关闭放弃阀，待压力上升到0.1MPa时，开始计时，维持压力0.1~0.15MPa 20分钟。
4、减压，取出器具到达保压时间后，即可切断电源，压力降到0.5MPa时，可缓慢放出蒸汽，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。
当压力降到零后，才能开盖。
五、思考题（1）、你认为那些环节会影响高压灭菌的效果？如果影响，请简述其中最关节的环节是什麽？实验三牛肉膏蛋白胨培养基的配制—、目的要求1、明确培养基的配制原理2、通过对基础培养基的配制，掌握培植基的一般方法和步骤。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏 3.0g蛋白胨10.0gNaCI 5.0g水1000mIpH 7.4～7.6三、器材1、溶液和试剂牛肉膏，蛋白胨，NaCI,琼脂，1 moI/L NaOH, 1 moI/L HCI。
2、仪器和其他用品试管，三角瓶，烧杯，量筒，破棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH试纸（pH5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
四、操作步骤1、称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨，NaCI放入烧杯中。
压力蒸汽灭菌
压力蒸汽灭菌1 适用范围: 用于耐高温、耐高湿的医疗器械和物品的灭菌。
不能用于凡士林等油类和粉剂的灭菌。
2压力蒸汽灭菌器: 根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器二大类。
3下排气式压力蒸汽灭菌器（1）灭菌原理: 利用重力置换原理，使热蒸汽在灭菌器中从上而下，将冷空气由下排气孔排出，排出的冷空气由饱和蒸汽取代，利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。
（2）灭菌方法：（2）灭菌方法：1）手提式压力蒸汽灭菌器灭菌方法：①在主体内加入适量的清水，将灭菌物品放入灭菌器内；②将顶盖上的排气软管插入内壁的方管中，盖好并拧紧顶盖；③将灭菌器的热源打开，开启排气阀排完空气后(约在水沸腾后10min～15min)关闭排气阀；④压力升至102.9kPa(1.05kg/cm2)，温度达121℃时，维持到规定时间(根据物品性质及有关情况确定，一般20min～30min)；⑤需要干燥的物品，打开排气阀，慢慢放汽，待压力恢复到零位后开盖取物；⑥液体类物品，待压力恢复到零位，自然冷却到60℃以下，再开盖取物。
2）卧式压力蒸汽灭菌器灭菌方法：①将待灭菌物品放入灭菌柜室内，关闭柜门并扣紧；②打开进气阀，将蒸汽通入夹层预热；③夹层压力达102.9kPa(1.05kg/cm2)时，调整控制阀到“灭菌”位置，蒸汽通入灭菌室内，柜内冷空气和冷凝水经柜室阻气器自动排出；④柜内压力达102.9kPa(1.05kg/cm2)，温度达121℃，维持20min～30min；⑤需要干燥的物品，灭菌后调整控制阀至“干燥”位置，蒸汽被抽出，柜室内呈负压，维持一定时间物品即达干燥要求。
⑥对液体类物品，应待自然冷却到60℃以下，再开门取物，不得使用快速排出蒸汽法，以防突然减压，液体剧烈沸腾或容器爆炸。
4 预真空压力蒸汽灭菌器（1）灭菌原理：利用机械抽真空的方法，使灭菌柜室内形成负压，蒸汽得以迅速穿透到物品内部进行灭菌。
蒸汽压力达205.8kPa(2.1kg/cm2)，温度达132℃或以上，开始灭菌，到达灭菌时间后，抽真空使灭菌物品迅速干燥。
压力蒸汽灭菌的使用及监测演示文稿
压力蒸汽灭菌的使用及监测演示文稿第一部分：压力蒸汽灭菌的使用方法1.准备工作-确保灭菌器具完好无损，无泄露和渗漏现象；-检查灭菌器具的密封性，确保能够达到足够的压力；-清理器具内部，清除赘余物质；-准备好需要灭菌的物品，并正确摆放在灭菌器内。
2.灭菌参数设置-根据所需杀灭菌种的特点和要求，设置合适的温度、压力和时间参数；- 通常，灭菌温度为121℃，压力为1.1-1.3kg/cm²，时间为15-30分钟；- 对一些特殊菌种，如芽孢杆菌等，可采用高温高压（134℃、2.2kg/cm²、15分钟）进行灭菌。
3.开始灭菌-确保灭菌器具门完全关闭，并上锁；-打开进气阀，注入蒸汽，并排出残余空气；-当压力达到设定值时，记时开始；-灭菌结束后，关闭进气阀，排出蒸汽；-解除锁定，打开灭菌器具门，取出灭菌物品。
第二部分：压力蒸汽灭菌的注意事项1.物品选择-建议使用耐热性好，并能承受压力的材质制作的器皿。
如不锈钢、玻璃等；-尽量避免使用塑料制品，因为塑料可能会在高温下融化，导致灭菌失败。
2.装载方式-避免过密或过松的装载。
过密可能导致蒸汽无法渗透到物品的每一个角落，过松则可能影响灭菌效果；-建议将物品分装入小容积器具中，这样可以提高灭菌的效率。
3.蒸汽质量-使用蒸馏水或去离子水制备灭菌所需蒸汽；-防止水垢和油渍的附着，定期清洗和清理设备内部。
第三部分：压力蒸汽灭菌的监测要点1.灭菌效果监测-使用生物指示器检测灭菌器的灭菌效果，常见的指示器有热敏菌、单次使用生物指示器等；-按时定期检测，确保灭菌器的正常工作。
2.原辅材料监测-对使用的蒸汽源、灭菌器具等原辅材料进行监测；-确保原辅材料的质量符合相关标准。
3.环境监测-定期对灭菌器周围的环境进行监测；-保持环境的清洁和洁净。
总结：压力蒸汽灭菌作为一种有效的消毒方法，在医疗和食品安全等领域得到广泛应用。
使用时要注意器具的准备工作、灭菌参数的设置以及物品的选择和装载方式。
立式压力蒸汽灭菌器..课件
灭菌完成后取出物品
等待灭菌完成后，先关闭电源 ，再打开灭菌器盖子，取出灭 菌物品。
注意事项
不要超载
灭菌物品不要超过灭菌 篮的容量，以免影响灭
菌效果。
注意观察压力表
在灭菌过程中，要密切 观察压力表的变化，如 有异常立即停止灭菌。
定期维护
定期对灭菌器进行维护 和保养，确保其正常运
行。
安全警示
在操作过程中，不要随 意打开灭菌器盖子，以 免蒸汽喷出造成烫伤。
立式压力蒸汽灭菌器 课件
• 灭菌器简介 • 灭菌器的使用与操作 • 灭菌器的维护与保养 • 立式压力蒸汽灭菌器的优势与局
限性 • 立式压力蒸汽灭菌器的发展趋势
与未来展望
目录
01
灭菌器简介
定义与用途
定义
立式压力蒸汽灭菌器是一种利用 高温高压蒸汽对物品进行灭菌的 设备。
用途
广泛应用于医疗、制药、食品加 工、实验研究等领域，用于对医 疗器械、药品、敷料、培养基等 物品进行彻底的灭菌。
技术创新与改进
新型材料
高效灭菌技术
采用新型材料如不锈钢、陶瓷等，提 高设备的耐腐蚀性和使用寿命。
研究开发新型高效灭菌技术，缩短灭 菌时间，提高灭菌效率。
智能化控制
引入物联网、大数据和人工智能等技 术，实现设备的远程监控、故障诊断 和智能控制。
未来发展方向
个性化定制
根据不同行业和企业的需求，提供个性化的立式 压力蒸汽灭菌器定制服务。
绿色环保
加强设备的环保设计，降低能耗和排放，符合可 持续发展要求。
拓展应用领域
将立式压力蒸汽灭菌器的应用领域从医疗、制药 、食品加工等领域拓展至其他行业。
感谢观看
THANKS
压力蒸汽灭菌的使用及监测讲义
灭菌物品的包装
1)包装材料应允许物品内部空气的排出和蒸汽的透入。市售普通铝饭 盒与搪瓷盒，不得用于装放待灭菌的物品，应用自动启闭式或带通气 孔的器具装放。
2)常用的包装材料包括全棉布、一次性无纺布、一次性复合材料（如 纸塑包装）、牛皮纸、带孔的金属或玻璃容器等。新包装材料在使用 前，应先用生物指示剂验证灭菌效果后方可使用。包装材料使用前应 仔细检查有无残缺破损。
化学监测法
包外指示物则用于包外监测，说明此包是 否经过灭菌过程的标记。每个灭菌包外应 有包外化学指示物，包外化学指示物监测 不合格，灭菌物品不得发放。
包内化学指示物监测：放在灭菌包内，用 于指示包内物品是否灭菌处理合格，高危 险性物品包内应放置包内化学指示物。置 于最难灭菌的部位。
生物监测法
20
4
4
纺织物包
30
4
4
下排气式压力蒸汽灭菌器操作过程
注水 开电源 加热 关门 消毒 记时间 排气 开门 关电源
灭菌后处理
①检查包装的完整性，若有破损不可作为无菌物品使 用.
②湿包和有明显水渍的包不作为无菌包使用；启闭式 容器，检查筛孔是否已关闭。
③每批灭菌处理完成后，记录灭菌物品包的种类、数 量、灭菌温度、作用时间和灭菌日期与操作者等。有 温度，时间记录，应将记录纸存档备查。
④合格的灭菌物品，应标明灭菌日期和有效日期。 ⑤灭菌后的物品，应放入无菌区的柜橱（或架子上，
推车内）；柜橱或架子应由不易吸潮、表面光洁的材 料制成，以便于清洁和消毒。 ⑥储存的有效期受包装材料、封口的严密性、灭菌条 件、储存环境等诸多因素影响。对于棉布包装材料、 牛皮纸，建议温度在25℃以下时保存7～14天，潮湿多 雨季节应缩短天数。对于一次性无纺布、一次性包装 纸和纸塑包装材料，其有效期为一年以上。
压力蒸汽灭菌
压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌法是灭菌中使用最普遍、效果最可靠的医院首选的灭菌方法。
压力蒸汽灭菌的三大因素是指作用时间、作用温度及饱和蒸汽。
压力蒸汽之所以有强大的杀菌作用，主要是因为处于一定压力之下的蒸汽能迅速穿透到物品的内部，同时蒸汽冷凝成水时，能释放潜伏热，使物体温度迅速升高，从而达到杀菌目的。
压力蒸汽灭菌方法的主要特点是杀菌谱广、杀菌作用强、效果可靠、作用迅速、无任何残余毒性，适用于包括液体在内的各种耐热物品的灭菌。
压力蒸汽灭菌可分为两种类型：下排汽式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器。
下排汽式压力蒸汽灭菌器下排汽式压力蒸汽灭菌器结构简单、造价低、适用范围广，其消毒原理是通过向灭菌器内送蒸汽，逐渐将冷空气由上而下挤压至下层排汽口排出。
但这种方式排气不彻底，会列留少量冷空气而影响灭菌效果。
1、下排汽式压力蒸汽灭菌器灭菌前准备：1、1 物品必须清洗与干燥，凡需灭菌的物品必须先清洗处理，达到除污染，除污垢、除热原目的，污染严重的物品应先消毒，达到安全、无害，再进行清洗。
清洁后的物品要晾干或烘干。
2、灭菌包的要求：2、1包裹材料：要求有良好的蒸汽穿透性，允许物品内部空气的排出和蒸汽的透入，能阻挡外界徽生物、有一定的强度和耐温性。
市售的普通铝饭盒与搪瓷盒不得用于装放灭菌的物品，应用自动启闭式或带通气孔的器具装放，常用的包装材料包括全棉平纹细布，纸（牛皮纸），一次性无纺布，一次性复合材料（如纸塑包装）；带孔的金属或玻璃容器等。
使用的一次性无纺布、一次性复合材料必须经过国家卫生行政部门批准。
新包装材料使用前应放在温度18℃~22℃，相对湿度35%~70%的条件下放置2小时，仔细检查有无残缺破损，布包装层数不少于2层。
2、2 灭菌包大小的要求：装载于下排式压力蒸汽灭菌器的物品包，体积不得超过30×30×25㎝，金属包的重量不超过7㎏，敷料包不超过5㎏，包裹封口，物品捆扎不宜过紧，外用化学指示胶带贴封，灭菌包每大包内和难灭菌部位的包内应放置化学指示物。
压力蒸汽灭菌ppt课件
清洁灭菌器
对灭菌器进行彻底清洗，以便下次使 用。
04
压力蒸汽灭菌效果检测
物理检测方法
温度检测
通过温度传感器记录灭菌过程中 各点的温度变化，确保灭菌温度
到达标准要求。
时间检测
记录灭菌过程所需时间，确保到达 规定的时间要求。
压力检测
监测灭菌过程中压力的变化，确保 压力到达标准要求。
化学检测方法
化学指导剂法
可靠性高
压力蒸汽灭菌具有可靠的灭菌 效果，能够保证医疗用品的安
全使用。
02
压力蒸汽灭菌设备
压力蒸汽灭菌设备的分类
01
02
03
按用途分类
医用压力蒸汽灭菌设备、 实验室压力蒸汽灭菌设备 、工业压力蒸汽灭菌设备 等。
按结构分类
立式压力蒸汽灭菌设备、 卧式压力蒸汽灭菌设备、 便携式压力蒸汽灭菌设备 等。
利用化学指导剂的颜色变化判断 是否到达灭菌条件，适用于批量 灭菌效果的检测。
溴甲烷气体检测法
通过检测溴甲烷气体浓度判断是 否到达灭菌条件，适用于密封包 装的物品灭菌效果检测。
生物检测方法
嗜热脂肪芽孢杆菌检测法
将嗜热脂肪芽孢杆菌置于灭菌物品中，灭菌后通过视察该细菌存活情况判断灭 菌效果。
枯草芽孢杆菌检测法
将枯草芽孢杆菌置于灭菌物品中，灭菌后通过视察该细菌存活情况判断灭菌效 果。
05
压力蒸汽灭菌注意事项
灭菌前的注意事项
灭菌前需确保待灭菌物品处于 清洁状态，去除表面的污垢和 尘埃，以免影响灭菌效果。
灭菌前应检查待灭菌物品是否 合适采用压力蒸汽灭菌，了解 其耐受温度和压力范围。
灭菌前需将待灭菌物品放置在 合适的容器或包装中，以避免 在灭菌过程中产生湿气凝结或 污染。
最新高压蒸汽灭菌方法分析讲学课件
其重复性应满足（迈瑞5380）
参数 WBC RBC HGB MCV PLT
范围 （4.0-15.0）×109/L （3.50-6.00）×109/L （110-180）×109/L （70-120）×109/L （150-500）×109/L
3、主要组成成分：
类白细胞、类血小板、红细胞、保存试剂 和防腐剂。
4、储存条件：
2-8 ℃条件下避光保存，同时避免剧烈震动， 储存有效期为60天。开瓶后正确使用时有效 期为7天。禁止冷冻！
校准品校准：把校准物从冰箱里取出，在 室温（15-30℃）条件下放置15分钟，恢复 至室温。
1、在手掌间水平转动混合，请勿使用混匀 器。
参考区间吗？
1、检验人员应掌握仪器的校准操作流程。 2、不能。 3、应该比对。 4、应该应用。
谢谢！
2、校准物应在有效期内使用 3、使用前应详细阅读使用说明书，确认产
品上的批号与参考值表上的批号一致
4、校准物使用前应按说明书的要求充分混 匀，不正确的混匀将导致已使用的和瓶内 剩余的产品失效。
5、校准后应填写校准记录单
思考：
1、校准必须由工程师操作吗？ 2、校准品可以当质控品用吗？ 3、全血模式与稀释模式的比对 4、可以直接应用国家卫计委公布的血细胞
重复性（CV） ≤2.0% ≤1.5% ≤1.5% ≤1.0% ≤4.0%
中国卫生行业标准（CV值）
检测项目 WBC RBC HGB HCT PLT MCV MCH MCHC
检测范围
变异系数
4-10×109/L ≦4.0%
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打开总电源及灭菌器开关Fra bibliotek打开排气阀，排除管道内冷凝水后关排气阀，并打开进气阀
进蒸汽预热至夹层压力达到0.205MPa
B-D试验：将B-D包放于靠近灭菌器排气口上方处，启动B-D程序
B-D程序结束：判读B-D结果
合格：进行正常灭菌运行
不合格：查找原因改进后进行
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
6、注意事项 （1）严格执行安全操作规定，压力蒸汽灭菌器操作人员必
须经过岗位培训，持证上岗。 （2）按规定要求，认真落实安全附件（安全阀、压力表、
温度表等）部件的维护保养及检测。 （3）灭菌器运行时操作人员应坚守岗位，认真巡视、观测
、记录各灭菌运行参数的变化，防止突发事故。 （4）遵循规范要求正确装载被灭菌物品，避免超载，防止
灭菌物品装载在灭菌车架上或灭菌篮筐内，推入灭菌器内
根据物品种类选择灭菌程序，启动灭菌程序键
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灭菌过程观察：设备运行是否正常，参数是否达标 灭菌程序结束：取出灭菌车架，冷却30分钟后卸载，
标准包灭菌质量确认 工作结束，关灭菌器开关和总电源，关闭进气阀
灭菌记录
压力蒸汽灭菌器操作流程
（3）卸载物品时要注意轻拿轻放、平稳放置、避免摞放挤 压。
（4）卸载过程中防止无菌物品损坏和污染，无菌包掉落到 地上或误放到不洁处应视为被污染
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
5、灭菌效果监测 按规范要求做好灭菌记录及灭菌质量监测
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预真空压力蒸汽灭菌器操作流程
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
3、灭菌操作 （1）根据被灭菌物品选择灭菌程序，检查灭菌参数是否正
确。 压力蒸汽灭菌器灭菌参数
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二、压力蒸汽灭菌原理及适用范围
灭菌器在一定压力下产生的蒸汽湿度高、穿透力强，能迅 速有效地杀灭微生物，使蛋白质凝固，导致细菌死亡。压 力蒸汽灭菌器适用于耐湿、耐热诊疗器械、器具和物品的 灭菌，如金属类、橡胶类、玻璃类等。
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
4、灭菌物品卸载 （1）卸载前工作人员应落实手卫生，戴隔热清洁手套。将
灭菌物品从灭菌器中取出后自然冷却，待温度降至室温时方 可卸载。冷却时避开空调冷风口，冷却时间应≥30分钟。
（2）每批次卸载前应确认灭菌过程是否合格，检查标准测 试包的包内、包外化学指示物变色情况。检查包装有无破损 、松散，有无湿包现象等。
压力蒸汽灭菌
内容大纲
Table of Contents
灭菌 相关 概念
01
压力 蒸汽 灭菌 原理
02
压力 蒸汽 灭菌 器
03
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1章
第
PART ONE
灭菌相关概念
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一、灭菌相关概念
灭菌：杀灭或清除医疗器械、器具和物品上一切微生物（ 包括芽孢过程）的处理。
缩空气等运行条件是否符合设备要求；灭菌器压力表是否处 在“零”的位置；记录打印装置是否处于备用状态；灭菌器 柜门密封圈平整、无损坏；柜门安全锁扣灵活、安全有效； 灭菌柜内冷凝水排出口通畅；灭菌柜内壁清洁。
（2）灭菌器预热：减少、清楚灭菌器内冷凝水。 （3）B-D试验：预真空压力蒸汽灭菌器每日开始运行前空 载进行B-D试验，验证灭菌器内室真空度。冷空气是造成预 真空式（或脉动真空式）压力蒸汽灭菌器灭菌失败的主要因 素之一，残存空气与蒸汽混合，降低蒸汽的压力，影响灭菌 柜在原定压力下所能达到的温度；同时残存空气影响热力的 穿透，影响微生物的灭杀效果。
湿包现象发生。对橡胶类制品、塑料制品、导管物品不能弯 折或重叠摆放。
（5）严禁超压超高温操作，灭菌温度、压力、时间等参数 必须控制在允许的范围之内。
（6）工作结束后关闭蒸汽、水源等阀门及电源开关。
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3章
第
PART three 压力蒸汽灭菌器操作流程
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
灭菌操作流程包括灭菌前准备、灭菌物品装载、灭菌物品 卸载、灭菌效果监测。
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
1、灭菌前准备 （1）每天设备运行前进行安全检查：包括水、电、汽、压
三、压力蒸汽灭菌器操作流程
3、灭菌操作 （2）灭菌过程中，应密切观察设备的运行状况，观察灭菌
时的温度、压力、时间等灭菌参数，温度波动范围在+3℃以 内，时间满足最低灭菌时间要求。操作人员不得远离设备， 如有异常，及时处理。
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三、压力蒸汽灭菌器操作流程
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