实验一 淀粉质原料的蒸煮糖化(改)

实验一淀粉质原料的蒸煮糖化

一、实验目的

1、掌握淀粉质原料蒸煮糖化的原理

2、了解淀粉质原料蒸煮糖化的两种方法：酸解法和酶酸法。

3、掌握还原糖的检测方法

二、实验原理

发酵生产中，部分产生菌不能直接利用淀粉。也基本上不能利用糊精作为碳源。因此，当淀粉作为原料时，必须现将淀粉水解成葡萄糖才能共发酵使用。在工业上将水解淀粉为葡萄糖的过程称为淀粉的“糖化”。可用来制备淀粉水解糖的原料很多，主要有山芋，玉米，小麦，等含淀粉的原料。水解淀粉为葡萄糖的方法有三种，即酸解法，酶解法，酶酸法及双酶法。糖化即以无机酸或酶为催化剂，在一定温度下使淀粉水解，将淀粉全部或部分转化为葡萄糖等可发酵性糖的过程。糖化剂即糖化过程中所用的催化剂，包括无机酸和酶。检测是否糖化完全即检测糖化液中还原糖的含量。糖化主要有酶解法、酸解法和酸酶法。

三、实验试剂和仪器

烧杯玻璃棒恒温水浴锅量筒天平玉米粉α-淀粉酶盐酸

四、实验步骤

（一）还原糖的测定（参照实验书187页——DNS法测定还原糖浓度）

葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖0.5g，加蒸馏水定容至50mL，制成10g/L的葡萄糖溶液。取蒸馏水稀释成葡萄糖标准液，浓度分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0g/L。

水冷却至室温，并加水定容，摇匀。

③于550nm处用分光光计测定吸光度A值，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线。

（二）酸解法

取淀粉7g，加入250mL锥形瓶，加入1%盐酸50ml，用牛皮纸封好口，置于灭菌锅中，在121-125℃水解30min，取出冷却，然后用氢氧化钠中和至pH值4.5-5.0，过滤，得到含葡萄糖的样品溶液。

（三）酶酸法

1、在烧杯或三角瓶中加入60o C的水50ml；称取7g玉米粉加入烧杯或三角

瓶中，边放边搅拌。

2、将三角瓶置于70o C水浴上，加入1g α-淀粉酶，0.15g氯化钙，在70 o C

保温40min液化，并搅拌。然后将烧杯移至电炉加热到95o C至沸，灭活10分钟。

（用玻璃棒蘸取一滴试液于点滴板上，滴加一滴碘液，每隔1min检测一次，出红棕色即可。）

3、滤液降温至60-65o C，加浓盐酸，调节pH至2.0-2.5，与酸解法样品溶

液一同入灭菌锅水解。

4、同酸解法，取出冷却，然后用氢氧化钠中和至pH值4.5-5.0，过滤，得

到含葡萄糖的样品溶液。

（四）水解液葡萄糖含量的测定

取1ml待测样品（酶酸法和酸解法制得的样品）2份，分别稀释50倍（即取1ml滤液定容至50ml），取稀释后溶液1ml，加入50mL容量瓶中，再加入3mL DNS 试剂，沸水浴5min，冷却至室温后，加水定容摇匀，于550nm处用分光光计测量吸光度A，根据标准葡萄糖液所得数据建立的标准曲线，测算待测试样的平均还原糖浓度。

淀粉转化率的计算：

淀粉转化率=

五、实验结果

六、思考题

比较两种不同淀粉水解糖的制备方法