实验三离体蛙心灌流
离体蛙心灌流实验
离体蛙⼼灌流实验实验五离体蛙⼼灌流实验⼀实验⽬的1、了解蟾蜍离体⼼脏的灌流的⽅法。
2、观察细胞外液钾离⼦、钙离⼦浓度变化对⼼脏活动的影响。
⼆实验原理⼼脏离体后，如⽤⼈⼯灌流的⽅法，保持其新陈代谢的顺利进⾏，则⼼脏仍能有节律的⾃动收缩和舒张，并可维持较长的时间。
离体⼼脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起⼼脏活动的变化。
1、任⽒液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏⽔，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流：3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、⼼得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作⽤。
8.、阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢⼼率，加速房室传导，增加⼼房收缩⼒。
三实验器材微机⽣物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙⼼，任⽒液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，⼼得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。
四实验步骤1、标本制备（观看视频）2、仪器及标本的连接3、具体软件操作：1）离⼦试剂：任⽒液→0.65%NaCl溶液→任⽒液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任⽒液清洗⽒液清洗→2%CaCl22）药物试剂：肾上腺素（E）→任⽒液清洗→⼼得安→任⽒液清洗→Ach，任⽒液清洗→阿托品→任⽒液清洗。
五实验结果表1 离体蛙⼼灌流数据记录六结果分析此实验说明⼼脏具有⾃律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体⼼脏静脉窦还能产⽣兴奋并传导到⼼房和⼼室，引起⼼脏有节律的兴奋和收缩。
体内细胞所直接⽣存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常⽣存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起⼼脏收缩的改变。
离体蛙心灌流实验
目的原理观察内环境理化因素相对稳定对维持心脏正常节律性活动的重要作用，了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。
实验对象与用品大蛙或蟾蜍。
斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架等(试剂见实验项目)。
方法步骤(一)实验准备操作对蛙行双刺毁，仰卧固定于蛙板上，用铁剪刀剪去胸壁，再用眼科剪小心地剪开心包膜，暴露心脏，识别心脏动脉球、静脉窦(背面)等结构(图17-1A、B、C)。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，蛙心夹用线固定在蛙板上，松紧以动脉、心房、心室拉直呈水平位为合适。
于主动脉分支下预埋一条棉线做一虚结备用。
把主动脉左支上端结扎，在近动脉球处剪一向心斜切口(注意要剪破血管内膜，每次心缩时有血自切口涌出，但不要把血管剪断。
剪口位置视套管尖端长度与心脏大小而定)，左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后走手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球；把蛙心夹上的连线从固定物上取下，提起心尖，使心室与动脉球约呈100°-200°的钝角，然后当心室缩紧时把套管平直往心室方向推进。
当感觉套管进入心室后再把心尖放平，随即将套管稍向心室推进，调整合适位置，可见套管内液面随心跳而升降。
即将已作虚结之丝线把血管和套管固定起来，余线则扎于套管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。
提起套管，剪断与心脏相连的血管和组织(注意勿损伤静脉窦及两心房)，摘出心脏。
用任氏液洗去心内外的余血后，注入新鲜任氏液备用。
可在套管的下1/3处结一线作为标志，每次换任氏液时使液面与此线相平。
接好二道生理仪和机械－电换能器(图17-2)选用适当参数，待记录。
(二)实验项目1.描记正常心跳曲线并分析其疏密、规律性、幅度、顶点及基线的含义。
2.温度的影响：把套管内换成4℃任氏液，同时作好标记，观察曲线变化，待效应明显后，即换入室温任氏液。
待曲线恢复正常后，再进行下一项目。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
离体蛙心灌流(精)
离体蛙心灌流实验目的学习离体蛙心灌流的方法；观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响。
观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
实验器材动物：蟾蜍器材：斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.65%NaCl 溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液实验方法与步骤1、离体蛙心的制备：双毁髓→左主动脉结扎→左右两主动脉下方活结备用→剪口，插管（管内盛任氏液与肝素）→结扎备用线（套管＋左右主动脉）→剪断动脉→结扎并剪断静脉。
2、固定套管并用任氏液换洗血液；进入RM6240系统。
3、观察并记录正常心搏曲线；4、向套管内分别加入以下溶液（0.65%NaCl溶液2d 、5%NaCl溶液2d 、1%KCl溶液1-2d 、2%CaCl2溶液1d 、1:5000肾上腺素溶液1-2d 、1:10000乙酰胆碱溶液1-2d ），观察并记录曲线变化。
实验结果此图为蛙心正常心搏曲线此图为换入0.65% Nacl溶液后蛙心收缩曲线的变化由波形图可知，Nacl可使心肌收缩能力减弱，心率减慢，导致心率曲线幅度减小。
此图为加入5%Nacl溶液后蛙心收缩曲线的变化有波形图可知，向任氏液中加入5%Nacl之后心搏曲线的幅度大大降低。
此图为加入Kcl溶液后蛙心收缩曲线的变化KCl导致心脏肌细胞收缩能力减弱，心率减慢。
此图为加入Cacl2溶液后蛙心收缩曲线的变化可使心肌收缩能力增强，心率加快，导致心率曲线幅度由上图可知，CaCl2增加。
此图为加入肾上腺素后蛙心收缩曲线的变化由波形图可知，肾上腺素可使心肌收缩力增强，心率加快。
此图为加入乙酰胆碱后蛙心收缩曲线的变化由上图可知，乙酰胆碱可使心肌收缩能力减弱，心率减慢，导致心率曲线幅度降低。
实验结果分析离体蛙心仍可具有揭露性收缩，是因为作为蛙心正常起搏点的经脉都（其功能相当于人体心脏的窦房结）能产生自动节律，通过传导系统维持心脏的波动，心脏正常德节律性兴奋和收缩活动必须在适宜的礼花环境才能维持，一旦适宜的环境被干扰或破坏，心脏后东就会受到影响。
离体蛙心-灌流和影响
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管 1.2 在主动脉根部剪一 斜口，将插管插入动脉 圆锥， 在心室收缩时 将插管插入心室，结扎 固定。
实验步骤
二、连接仪器和装置
1.用试管夹将蛙心管固定 在铁支架上
2.把张力换能器固定铁支 架支台上，在心室舒张期 将与换能器相连的蛙心夹 夹在心尖上。
用，对静息电位无影响。 [Ca2+]o ↑，可使心肌细 胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。
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迷走神经和乙酰胆碱
迷走神经兴奋时，节后纤维释放Ach,激动心肌 细胞膜上M型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、 负性变时等效应。
心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上 腺素，激动心肌细胞膜上的ß受体，产生正性变 力、正性传导、正性变时等效应。
曲线幅度 —— 收缩的程度 曲线疏密 —— 心率 曲线基线 —— 舒张的程度
观察项目
二、观察离子、药物和酸碱的影响 1)更换任氏液为3%氯化钙溶液1～2滴，记录心率 和收缩幅度，冲洗（下同） 2)滴加1～2滴1%氯化钾溶液 3)滴加1～2滴1：10000去甲肾上腺素溶液 4)滴加1～2滴1：10000肾上腺素溶液 5)滴加1～2滴1：10000 乙酰胆碱溶液 6)滴加1～2滴 2.5%碳酸氢钠溶液 7)滴加1～2滴3%乳酸溶液
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影响心肌细胞电生理特性的原因
1.心肌的自动节律性
（1）最大复极电位与阈电位的差距 （2）4期自动除极速度
2.心肌的兴奋性
（1）静息电位水平：依赖于细胞外K+浓度 （2）Na+通道的性状
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影响心肌细胞电生理特性的原因
生理学实验报告-蛙心灌流(2)
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
离体蛙心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。
实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。
三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。
2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。
3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。
4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。
5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。
b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。
c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。
2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。
分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
蛙心灌流实验实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技能，提高实验观察和分析能力。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。
通过离体蛙心灌流，可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。
实验中，利用任氏液作为灌流液，维持蛙心的正常生理活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。
四、实验步骤1. 制备蛙心标本：将蟾蜍放入装有冰块的容器中，使其昏迷。
在蟾蜍背部剪一小口，暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
将心脏与动脉分离，用任氏液冲洗，置于蛙心夹上。
2. 连接实验装置：将蛙心夹固定于支架上，连接张力传感器和计算机采集系统。
将任氏液滴入培养皿中，用滴管控制液面高度。
3. 观察正常蛙心活动：打开计算机采集系统，观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。
4. 改变灌流液成分，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
c. 在灌流液中加入1%KCl溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
f. 在灌流液中加入3%乳酸，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
5. 记录观察结果，分析实验现象。
五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小，表现为心跳频率和幅度降低。
离体蛙心灌流实训报告
一、实验目的1. 熟悉离体蛙心灌流实验的基本原理和操作步骤。
2. 学习观察和分析理化因素对蛙心活动的影响。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中常用的方法之一，主要用于研究心脏的生理功能和调节机制。
实验过程中，将蛙心从体内取出，通过人工灌流的方式，模拟心脏在体内的生理环境，观察和分析理化因素对心脏活动的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛙、任氏液、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品等。
2. 实验仪器：蛙心夹、蛙心套管、显微镜、二道生理记录仪、张力传感器、滴管、培养皿等。
四、实验步骤1. 蛙心提取：将蛙处死，剪开胸腔，取出心脏。
2. 蛙心插管：将蛙心夹夹住心脏尖部，用线固定在蛙板上，松紧以动脉、心房、心室拉直呈水平位为合适。
在主动脉分支下预埋一条棉线做一虚结备用。
将主动脉左支上端结扎，在近动脉球处剪一向心斜切口，左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后走手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球。
3. 蛙心灌流：将蛙心套管与张力传感器相连，通过滴管向套管内加入任氏液，使心脏在灌流液中保持正常生理活动。
4. 观察和分析：观察心脏的活动情况，记录心脏收缩频率、幅度等指标。
分别向灌流液中加入不同浓度的KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品等，观察和分析理化因素对心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常心脏活动：在正常灌流液中，心脏保持节律性收缩，收缩频率约为60-80次/分钟，收缩幅度较大。
2. KCl溶液对心脏活动的影响：加入低浓度KCl溶液后，心脏收缩频率减慢，幅度减小；加入高浓度KCl溶液后，心脏出现纤颤，最终停止跳动。
3. CaCl2溶液对心脏活动的影响：加入低浓度CaCl2溶液后，心脏收缩频率加快，幅度增大；加入高浓度CaCl2溶液后，心脏出现纤颤，最终停止跳动。
蛙心灌流实验报告
蛙心灌流实验报告实验报告：蛙心灌流实验实验目的：1. 了解蛙的心脏解剖结构及其生理特性；2. 掌握蛙心脏灌流的技术操作方法；3. 通过观察和记录实验结果，研究蛙心脏的生理功能。
实验原理：蛙心脏是一种三心室的心脏，左、右心房和右心室之间没有明显的分隔。
在正常情况下，蛙的心脏是按照一定的顺序进行收缩和舒张，完成心脏循环。
通过将生理盐水灌入蛙的心腔，可以模拟蛙的心脏循环过程，使心脏继续收缩和舒张。
实验材料：蛙、生理盐水、手术刀、缝合线、生理盐水注射器。
实验步骤：1. 用手术刀在蛙的腹部切开一小块皮肤，暴露心脏；2. 用手术刀小心地在蛙的心脏下切开一个小孔，用生理盐水注射器将生理盐水注入腔内；3. 观察心脏的收缩和舒张过程，并通过观察流入和流出的生理盐水量来评估心脏的功能；4. 实验结束后，用缝合线将心脏切开的部位缝合，然后将蛙恢复到原来的容器中。
实验结果：在实验过程中，我们观察到蛙心脏在收缩和舒张过程中有规律地推动生理盐水的流动。
正常情况下，心脏的收缩和舒张过程应该是有序的，流入和流出的生理盐水量应该是相等的。
实验结果显示，蛙心脏收缩和舒张过程正常，流入和流出的生理盐水量基本相等。
实验讨论：蛙心灌流实验是一种常用的生理实验方法，通过观察和记录心脏的生理功能，可以研究心脏的结构和功能。
实验中，我们灌流生理盐水来模拟心脏循环过程，这是比较接近真实情况的实验方法之一。
实验结果显示，蛙心脏有较好的收缩和舒张功能，流入和流出的生理盐水量相等，说明心脏的功能正常。
这与虽然虫是体型很小的生物，但它们的心脏结构和功能已经与人的心脏非常相似。
因此，蛙心灌流实验可以作为心脏生理学研究的重要工具之一。
总结：通过蛙心灌流实验，我们可以更深入地了解和研究心脏的结构和功能。
实验过程需要小心谨慎地操作，以确保实验的可靠性和准确性。
通过观察和记录实验结果，我们可以评估和分析心脏的生理功能，为进一步研究心脏疾病提供参考。
娃心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识，提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的血液供应，观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中，常用的灌流液为任氏液，其中含有与心脏内环境相似的离子成分，如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度，可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法：（1）将蟾蜍处死，剥皮，暴露心脏，用蛙心夹固定心脏。
（2）将心脏的动脉插管，连接灌流管，并调整灌流速度。
（3）用生理盐水冲洗灌流管，使灌流液充满管内。
（4）观察心脏在任氏液中的正常活动，记录心率、振幅等指标。
（5）分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度，观察心脏活动的变化，记录心率、振幅等指标。
（6）对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动：心率适中，振幅适中，处于与内环境相似的任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度：当灌流液中Na+浓度降低时，心率减慢，振幅减小；当灌流液中Na+浓度升高时，心率加快，振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度：当灌流液中K+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中K+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度：当灌流液中Ca2+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中Ca2+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
五、结论与展望1. 结论：通过本实验，我们掌握了离体蛙心灌流的方法，观察到理化因素对蛙心活动的影响，进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望：本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中，我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响，如pH值、温度等，以深入了解心脏生理学的基本原理。
蛙心灌注实验
实验三离体蛙心灌注实验成员赵琪328 张科318朱永339 王欢291 【实验目的】1 学习离体蛙心的灌流方法2观察内环境理化因素的相对恒定对维持心脏正常节律性活动的重要作用3观察钠、钙、钾等离子，肾上腺素、乙酰胆碱等药品对心脏活动的影响【实验原理】动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。
心脏正常节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定，所以改变灌流液成分，则可引起心脏活动的改变。
心肌细胞生物电活动的基础是钠、钾、钙等跨膜离子流。
因此细胞外液中这些离子浓度的变化会对心脏的活动产生不同的影响。
调节心脏活动的神经、体液因素对心脏活动的直接作用是神经递质或激素与心肌细胞相应受体结合，导致心脏活动的增强或减弱。
乙酰胆碱与异丙肾上腺素就是通过这种方式发挥作用的。
改变灌流液的理化特性，节律的舒缩活动也随之发生改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件。
【实验材料和器材】蟾蜍，两栖类手术器械，蛙心夹，滑轮，换能器，铁支架，蛙板，任氏液，NaCl，CaCl2，KCl，H+,OH-,肾上腺素，乙酰胆碱等【实验步骤】1取一只蟾蜍，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨，暴露心脏。
用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。
2 蛙心插管，制备离体蛙心。
先在左右主动脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。
再在左主动脉下穿一线结扎。
用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主动脉距分叉3mm处向心脏剪一斜口，右手将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入，先进入动脉圆锥，然后在心室收缩时，向前略向左推动蛙心插管，使之经主动脉瓣插入心室腔内。
结扎插管并将结扎线固定于插管侧面的挂钩上，以防止标本滑脱。
在蛙心插管插入心室后，用吸管及时吸出管内的血液，更换新鲜任氏液。
提起插管，剪断主动脉左、右侧分支，轻轻提起插管和心脏，在静脉窦下方绕一线，将左右肺静脉及前后腔静脉一起结扎，在结扎线下方剪去所有牵连的组织，将心脏摘出。
生物学实验离体蛙心灌流
乙酰胆碱：与心肌细胞的M2受体结合，产生负性变时、变力和变传导效ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ。
实验原理 自律细胞：组成特殊传导系统的心肌细胞
肾上腺素：主要与心肌的β1受体结合，产生正性变时、变力和变传导效应。 观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
另一方面，心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定，所以，改变灌流液的成分，则可以引起心脏活动的改变。
斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.
制备蛙心标本时，勿伤静脉窦；
RP或MDP与阈电位之差
具体作用机制见《大学生工理学作》P2细36~2胞39、：P248普通的具有收缩能力的心肌细胞
肾上腺素：主要与心肌的β1受体结合，产生正性变时、变力和变传导效应。
制备蛙心标本时，勿伤静脉窦；
心率：自律细胞4期自动除极速度
固定套管并用任氏液换洗血液；
斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.
工作细胞：普通的具有收缩能力的心肌细胞
动物与器材
牛蛙 斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任
制备蛙心标本时，勿伤静脉窦； 各溶液作用一旦出现，应立即用新鲜任氏液
换洗，以免心肌受损，而且待心跳恢复正常 后方能进行下一步实验； 蛙心插管内液面应保持恒定； 每次更换或滴加溶液必须做标记；
谢谢观看
离体蛙心灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流的方法； 观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的
影响。 观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏
活动的影响。
实验原理
作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动 产生兴奋。因此，只要将离体失去神经支配 的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间被 仍能产生节律性兴奋和收缩。
蛙类系列实验报告(3篇)
第1篇摘要：本实验报告针对蛙类动物进行了一系列生理学实验，包括离体蛙心灌流实验和坐骨神经-腓肠肌标本制备实验。
通过这些实验，我们学习了蛙类动物的生理学特性，掌握了相关实验操作技术，并观察了不同刺激对蛙类心脏和肌肉的影响。
关键词：蛙类；生理学实验；离体蛙心灌流；坐骨神经-腓肠肌标本；刺激反应一、引言蛙类动物因其结构简单、生理功能明确、实验操作方便等特点，常被用作生理学实验的模型。
通过观察和分析蛙类动物的生理现象，我们可以深入了解人体生理功能及其调控机制。
本实验报告主要介绍了蛙类系列实验的过程、结果及分析。
二、离体蛙心灌流实验1. 实验目的- 学习离体蛙心灌流法。
- 观察Na+、K+、Ca2+及肾上腺素（Adr）、乙酰胆碱（ACh）、乳酸对离体心脏活动的影响。
2. 实验原理离体蛙心灌流实验是通过改变灌流液的成分，观察其对心脏活动的影响，从而了解心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性。
实验中，我们使用斯氏蛙心插管法，将离体蛙心置于适宜的环境中，通过改变灌流液的成分，观察心脏活动的变化。
3. 实验仪器青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
4. 实验方法与步骤（1）斯氏蛙心插管法：暴露心脏，识别心脏周围的大血管，穿一线于动脉圆锥下方，插入灌流管。
（2）灌流实验：将离体蛙心置于任氏液中，通过灌流管向心脏灌流，观察心脏活动。
（3）改变灌流液成分：分别加入不同浓度的Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸，观察心脏活动变化。
5. 实验结果与分析（1）Na+对心脏活动的影响：降低Na+浓度，心脏活动减弱；升高Na+浓度，心脏活动增强。
（2）K+对心脏活动的影响：降低K+浓度，心脏活动增强；升高K+浓度，心脏活动减弱。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告
实验目的，通过离体蛙心灌流实验，观察心脏在不同药物作用下的生理变化，
为心脏药理学研究提供实验数据。
实验材料与方法，取新鲜的蛙心，进行离体灌流实验。
首先，将蛙心置于离体
心脏灌流装置中，通过主动脉插管进行心脏灌流。
然后，分别加入不同药物溶液，如肾上腺素、乙酰胆碱等，观察心脏的生理变化。
实验过程中，记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标，并进行统计分析。
实验结果，在加入肾上腺素后，观察到蛙心的心率明显增加，心脏收缩力增强，舒张力减弱；而在加入乙酰胆碱后，心率明显减慢，心脏收缩力减弱，舒张力增强。
这些结果表明，肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用，而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。
实验讨论，离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法，通过模拟体
内环境，观察心脏在不同药物作用下的生理变化。
本实验结果与心脏药理学理论相符，说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法，能够为心脏药理学研究提供重要数据。
结论，通过离体蛙心灌流实验，我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化，验证了心脏药理学理论。
这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考，也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。
在今后的研究中，我们将进一步探索心脏药物的作用机制，寻找更多有效的心
脏药物，并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域，为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。
通过本次实验，我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解，并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
农学联考415动物生理学实验-离体蛙心灌流
离体蛙心灌流【实验原理】心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行,一旦适宜的环境被破坏,例如酸碱度及离子浓度的急剧改变等,心脏的活动就会受到影响.在整体内,心脏的活动受自主神经的双重支配,交感神经兴奋时,其末梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力量增强,心率加快;而迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力量减弱,心率减慢.强心甙类药物能够增强心肌收缩能力,减慢心率. 蟾蜍心脏离体后,用理化特性近似于血浆的Ringer氏液灌流,在一定时间内,可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张.改变Ringer 氏液的组成成分,如改变Na+、K+、Ca2+ 的浓度及酸、碱度等,心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变.K+对心脏活动的影响:总体看来心脏对细胞外K+浓度变化比较敏感;但不同部位心肌的敏感性不同,心房肌最敏感,房室束-浦肯野纤维系统次之,窦房结敏感性较低.细胞外[K+]↑时,对兴奋性的影响与其浓度升高的程度有关.当[K+]轻度或中度升高时,细胞内外[K+]梯度减小,K+外流力量减小,静息电位(RP)的绝对值减小,和阈电位(TP)的差值减小,细胞的兴奋性升高;当[K+]大幅度升高时, RP的绝对值减小到-55mv时,钠通道的开放效率降低,钠通道逐渐失活,细胞的兴奋性降低或丧失,严重时,可导致心肌停搏于舒张状态.此时,仅由Ca2+来构成动作电位,故上升支小而缓慢,使兴奋传导性降低.当细胞外[K+]↑时,细胞膜对钾的通透性升高,心室肌细胞复极过程加速,平台期缩短,不应期也缩短.高钾对心肌收缩功能有抑制作用.因为细胞外的钾和钙在细胞膜上有竞争性抑制,因此当膜外[K+]↑时,平台期内流的Ca2+减少,心肌细胞内的Ca2+浓度难于升高,减小了Ca2+的兴奋-收缩偶联作用,从而减低了心肌的收缩能力.4期自动除极速度减慢,导致窦房结自律性降低,心律减慢.0.65%NaCl对心脏活动的影响:0.65%NaCl对蟾蜍来说使等渗溶液,完全置换任氏液后,细胞外的Ca2+浓度,K+浓度大大降低,使心肌的收缩能力减弱,心率减慢.Ca2+对心脏活动的影响:细胞外Ca2+在心肌细胞膜上对Na+的内流有竞争性的抑制作用,称为膜屏障作用.因此,细胞外Ca2+浓度发生变化时,与Na+的内流和Ca2+的内流相关的电活动都将受到影响,而对静息电位则无明显作用.当细胞外Ca2+浓度↑时,对Na+的屏障作用↑,由于这种抑制作用,触发Na+快速内流产生0期去极化就比较困难,即TP上移,从而与RP的差距增大,兴奋性降低;发生兴奋后,Na+内流的抑制则导致0期去极化速度和幅度降低,传导性下降.Ca2+内流是慢反应细胞0期去极化和快反应细胞2期的主要离子活动.当细胞外Ca2+浓度↑,使Ca2+内流加快,慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性升高.细胞膜对Ca2+的通透性升高,心室肌细胞平台期Ca2+内流增加,心肌收缩力增强增快;当细胞外Ca2+浓度过高时,心脏将停搏于收缩状态,称为钙僵直.去甲肾上腺素对心脏活动的影响:去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的β肾上腺素能受体结合,激活腺苷酸环化酶(AC),使细胞内cAMP浓度升高,激活PKA和细胞内的蛋白质磷酸化过程,使心肌细胞膜上的钙通道激活,动作电位平台期Ca2+内流增加,心肌收缩力增强;另外去甲肾上腺素能加强4期的内向电流If,使心率加快.乙酰胆碱对心脏活动的影响:乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M型胆碱能受体结合,抑制腺苷酸环化酶（AC）,细胞内cAMP浓度降低,肌浆网释放的Ca2+减少,心肌的收缩力量减弱,心率减慢.乙酰胆碱与窦房结细胞膜上的Ikach（K离子）通道结合,促进K+的外流,最大复极电位增大,自律性降低,此外还抑制4期的内向电流If,使心率减慢.3%乳酸对心脏活动的影响:（反面解释NaHCO3对心脏活动的影响）乳酸的PH值较低,当加入乳酸后,细胞外H+浓度升高,H+和Ca2+离子竞争性结合肌钙蛋白的结合位点,抑制Ca2+离子与肌钙蛋白结合,心肌收缩力量减弱.当再加入2.5%NaHCO3后,解除了H+对Ca2+离子的竞争性作用,Ca2+离子又可与肌钙蛋白结合,心肌收缩力量恢复。
生理学实验报告-蛙心灌流3
蛙类离体心脏灌流之迟辟智美创作一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法.2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响.二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）坚持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够坚持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成份，观察其对心脏活动的作用.心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关.外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可发生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用.三、【实验仪器】青蛙、经常使用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机收集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝安慰电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液.套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸.四、【方法与步伐】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法流露心脏.仔细识别心脏周围的年夜血管(见右图).在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(植物个体小时，结扎位置可靠上些).再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用.左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口.选择年夜小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处拔出动脉圆锥(见右图).当套管尖端达到动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣拔出心室腔内(于心室收缩时拔出，但不成插得过深，以免心室壁堵住套管下口).此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，标明把持胜利(否则需退回偏重新拔出).用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液.稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同拔出的套管用双结扎紧(不得漏液)，再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管.轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保管静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦).用任氏液反复冲刷心室内余血，使套管内灌流液不再有残留血液.坚持套管内液面高度一致(1.5～2 cm)，即可进行实验.（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不成夹得过多，以免因夹破心室而漏液).再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）.注意：勿使灌流液滴到传感器上.调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中.2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0．65％NaCI溶液灌流，并作好加药标识表记标帜，观察心搏变动.待曲线氏插管装置呈现明显变动时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲刷标识表记标帜，并用新鲜任氏液清洗2—3次，待心搏恢复正常.注意：换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时坚持灌流液面一致(以下同).观察可得，NaCI溶液会阻遏心脏搏动.(3)迅速用新鲜任氏液清洗2～3次，待心搏恢复正常.向套管内加入1～3滴2％CaCI：溶液，观察并记录心搏曲线的变动.当呈现明显变动时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常(如果恢复缓慢，可屡次冲刷).(4)同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，记录心搏曲线的变动.把稳搏曲线变动时，同法更换灌流液，待心搏恢复正常.(5)同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲线的变动.(6)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1：10 000)后心搏曲线的变动.（7）同法记录套管中加入l～2滴的3%乳酸后心搏曲线的变动.五、【实验结果与原因分析】曲线的幅度————收缩的水平曲线的密度————心率曲线的基线————舒张的水平1、正常收缩曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析：滴加0.65%NaCl溶液后，心跳减弱，这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，由于灌注液中缺乏Ca2+（），以致心肌细胞举措电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱.3、滴加2%CaCl溶液分析：细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用.[Ca2＋] 0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低.[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速.Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强.[Ca2＋] 0降低时，所引起的变动与高钙时相反.因此加入CaCl2后，心率减少、振幅减少，基线上移.4、滴加1%KCl溶液分析：滴加1％KCl后的心搏曲线发现，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度逐渐下降，最后停止在基线处，即心脏停博于舒张状态.因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低.所以心搏曲线振幅减小.5、滴加1：10000肾上腺素溶液分析：滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增年夜.其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，招致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强.另外，肾上腺素还有降低肌钙卵白与Ca2+亲和力，促使肌钙卵白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，安慰Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强.6、滴加1：10000乙酰胆碱溶液分析：上图可示，蛙心收缩减弱，心率减慢，最后呈现蛙心停止舒张阶段.其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合，一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，将引起：1）窦房强细胞复极时K+外流增多，最年夜复极电位绝对值增年夜；Ik衰减过程减弱，自动除极速度减慢.这两方面因素招致窦房自律性降低，心率减慢.2）复极过程中K+外流增加，举措电位2、3期缩短，Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱.7、滴加3%乳酸溶液分析：H+与Ca2+的竞争机制，招致心肌细胞举措电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱.六、【注意事项】1.制备蛙心标本时，勿伤及静脉窦.2.上述各实验项目，一旦呈现作用应立即用正常任氏液换洗，以免心肌受损，而且必需待心搏恢复正常后方能进行下一步实验.3.尽量选用健壮、体年夜的雄性蟾蜍，手术过程中注意呵护心脏，防止损伤.4.实验中及时用任氏液冲刷心脏，待曲线恢复平稳后再进行下一步把持.5.每次更换任氏液都必需坚持灌流液液面高度恒定，以免因灌流量变动而影响结果.6.严格控制每次药品加入量，先加一滴，效果不明显再加一滴.7.吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用，不成混淆使用，以免影响实验结果.七、【讨论】1. 离体蛙心制备好后，有时候馆内的液面上下移动很不明显，是何原因？如何处置？答：离体蛙心制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动.其实质是：在心室收缩时，心室容积减少，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增年夜，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降.可是有时候蛙心插管内液面摆荡不明显，其主要原因是：⑴插管内尖端呈现血凝块.⑵插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等处所.⑶插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁.⑷蛙心由于长期心肌失血，招致活力下降.2. 实验过程中，为什么必需坚持蛙心插管内液面高度的恒定？液面过高或过低会发生怎样的影响？答：在实验过程中，蛙心插管内液面高度发生变动，心脏收缩曲线会相应发生变动.心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响.插管液面高度所发生的压力，在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷，心室开始收缩的时候，此液体所发生的压力又成为心肌收缩时的后负荷.故高度的改变，进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率.当液面过高时.心缩曲线幅度将降低.因为过高的液面，将使心室前负荷超越了最适前负荷，将招致粗细肌丝过于疏远，而招致收缩的潜力减少，心肌收缩不再增加或下降.而类似的，过高的后负荷，也使心肌收缩的幅度和速度年夜年夜下降.而当液面过低时，心室收缩的幅度也会减少.因为前负荷过小，将招致粗细肌丝过于接近，而招致收缩的潜力减少，实际上，此时由于前负荷的减少招致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而招致的还有明显.类似的，后负荷相应的减少也会招致心室收缩的减弱.所以，在实验中坚持最适的液面高度.是取得较好实验结果的前提.3．各种离子成份改变蛙心收缩的原理是什么？答：由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性.（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关.细胞外液K ＋浓度[K＋]0变动对心肌生理特性的影响较为复杂.高钾：[K ＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高. [K ＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失.另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，招致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞.另外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，举措电位平台期缩短，因此，不应期缩短.另外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K＋与Ca2＋在膜上有竞争性抑制作用，招致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用.[Ca2＋] 0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低.[Ca2＋] 0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速.Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强.[Ca2＋] 0降低时，所引起的变动与高钙时相反.（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变动一般对心肌活动影响不明显.只有当[Na＋] 0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增年夜，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，招致传导性和自律性增高.同时，Na＋内流的增多增进细胞内Ca2＋的外运使细胞内Ca2＋浓度降低，因此，心肌收缩能力减弱.反之，当[Na＋] 0降低，使心肌传导性和自律性降低，心肌收缩能力增强.2010级临床二系四班张娜2010221462张秋2010221463张雪蕊2010221465祝杰2010221484邹彬2010221485(本次书写)。
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（腹面）
（背面）
（两栖类动物心脏解剖结构示意图）
2. 蛙心插管（操作难点）
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蛙心插管步骤小结：
1、在主动脉下穿线，备结扎用；
2、在主动脉根部剪一斜切口；
3、插管装任氏液，食指堵住上口；
4、将插管顺着主动脉方向插入动 脉圆锥；
（腹面）
5、将插管转向插入心室（插入后有血液进入插管），将丝线 结扎固定在蛙心套管上。
部分结果分析
*肾上腺素，心脏正性作用并且舒张完全
1.肾上腺素与心肌细胞膜ß受体结合，使心肌细胞膜 上腺苷酸环化酶活化作用于ATP产生cAMP cAMP的作用： （1）激活Ca2+内流； （2）肌浆网释放Ca2+
因此心肌收缩加强
2.肾上腺素使Ca2+泵活动增强，肌浆网摄取Ca2+ 向细胞外转运，胞内Ca2+减少，心肌舒张过程加 快，舒张完全
三、实验器材及药品
实验对象：蟾蜍
实验器材：
张力换能器 蛙类手术器械一套 铁支架 双凹夹 蛙心套管 蛙心夹 刺激电极 滴管 烧杯
实验药品：
任氏液 无Ca任氏液 1 % KCl 1 % CaCl2 2 % CaCl2 0.01% Ach 0.01% Adr
四、手术操作
1.取蟾蜍，破坏脑和脊髓、暴露心脏。
1、心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境 （离子浓度、pH等），内环境的变化直接影响到 心脏的正常节律性活动。 2、因此可用人工灌流的方法，观察灌流液成分的 改变对离体心脏活动的影响。
无Ca2+任氏液； 任氏液（1% KCl；1% CaCl2；2% )。
心脏活动调节
1、神经调节：在体心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。
3.游离蛙心
1、轻提起蛙心插管，剪断动静脉 (勿损伤静脉窦），将心脏离体， 观察插管内液面高度是否随着心脏 的收缩和舒张而变化？
2、用滴管吸净插管内余血，加入 新鲜任氏液，反复换洗数次，直至 液体完全澄清。
3、始终保持灌流液面高度恒定 （1-2cm）。
五、仪器连接
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仪器连接注意事项
将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住 少许心尖部肌肉，再将蛙心夹上的系线与张力传感器 相连。
部分结果分析
*高Ca2+，心缩加强，舒张不完全，甚至停于收缩状态
心肌舒缩活动取决于胞内Ca2+浓度，当 Ca2+升高到0.01mM，肌钙蛋白可结合足够 Ca2+发生构型改变而触发心肌收缩；当胞内 Ca2+浓度降到0.0001mM时则可解离发生心 肌舒张。高Ca2+使肌钙蛋白与Ca2+不能解 离而造成心肌持续收缩。
无钙任氏液； 任氏液内分别添加: ( 1% KCl；
1% CaCl2； 0.01% Ach； 0.01% Adr；
2% CaCl2； ）
对心脏活动的影响 （心率、收缩力度、基线水平）
（1）吸出插管内全部任氏液，换入无钙任氏液，观 察心缩曲线变化，待效应明显后，吸出灌流液，用 新鲜任氏液换洗3次，直至心缩曲线恢复正常。
（5）加入1-2滴0.01%Ach于任氏液中，待效应出现 后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。
（6）钙僵：
加入4-5滴２% CaCl2于新换入的任氏液中，观察心缩 曲线的变化。
八、注意事项
1.制备标本时，应按指导试探着插管，避免损伤心脏(包括静 脉窦)。
2.每次换液时，插管内的液面均应保持恒定高度。 3.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。 4.药物作用不明显时，可适量增加。每次加药，心搏曲线出现
（2）加1-2滴1% KCl于新换入的任氏液中，观察心 缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗 3次至曲线恢复正常。
（3）加入1-2滴1% CaCl2于新换入的任氏液中，观 察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液
换洗3次至曲线恢复正常。
（4）加入1-2滴0.01% Adr于任氏液中，待效应出现 后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。
* 交感神经末梢释放NE（去甲肾上腺素），使心肌收缩力加强，传
导速度加快，心率加快，即产生正性变时、变力、变传导作用；
* 迷走神经末梢释放Ach（乙酰胆碱），使心肌收缩力减弱，心肌传
导速度减慢，心率减慢，即产生负性变时、变力、变传导作用 。
2、体液调节
0.01% Adr（肾上腺素） 0.01% Ach（乙酰胆碱）
部分结果分析
*无钙任氏液，心跳减弱
心肌收缩活动有Ca2+触发，心肌肌浆网不发达，因此其收缩强 弱依赖于细胞外Ca2+浓度
灌流液中缺乏Ca2+，心肌细胞内Ca2+大大 减少，心肌兴奋--收缩藕联过程减弱，心肌收 缩活动减弱
部分结果分析
*高K+任氏液，心跳明显减弱甚至停跳于舒张状态
K+与Ca2+有竞争性拮抗作用。细胞外 K+浓度增加可抑制细胞膜对Ca2+的转运， 从而使进入胞内的Ca2+减少，心肌兴奋-收缩藕联过程减弱，心缩力降低甚至停于 舒张状态。
1、心肌的生理特性：
自律性、兴奋性、传导性、收缩性。
2、两栖类动物的心起搏点： 静脉窦。 3、心肌兴奋性的周期性变化：
有效不应期； 相对不应期； 超常期。
期前收缩：给予心室肌一次有效刺激， 产生一次正常节律以外的收缩反应，该
有效不收缩应先期于下一=次收正常缩窦房期结兴+奋引舒起张的 早期 收缩。
二、实验原理
不可夹得过多， 以免因夹破心 室而漏液
勿使灌流液滴到 传感器上
六、软件操作
七、实验项目观察与记录
1.描记正常蛙心收缩曲线
曲线疏密：代表心跳频率。 曲线的规律性：代表心室的节律性。 曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。 曲线的基线：代表心室舒张的程度。
2.期前收缩和代偿间歇
3.改变灌流液成分对心脏活动的影响
变化后立即将插管内液体吸出。 5.滴加任氏液于心脏表面使之湿润。 6.固定换能器时应稍向下倾斜，以免自心脏滴下的液体进入换
能器内造成短路。
观看实验录像……
九、讨论分析
*分析各观察结果的原因。 *心肌有效不应期长的生理意义。 *心率过慢，期前收缩后是否有代偿间歇？ *实验中套管内液面为什么要保持相同高度？
实验三 电刺激和化学因素 对心脏活动的影响
一、实验目的
1.学习离体蛙心灌流方法。 2.观察在心脏活动周期内给予刺激所引起的期前收 缩和代偿间歇。 3.观察Na+、K+、Ca2+、Adr（肾上腺素）、Ach（乙酰 胆碱）对心脏活动的影响，理解内环境理化因素相 对恒定对维持心脏正常活动的重要性。
二、实验原理