呼吸道标本的处理_PPT课件
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呼吸道标本采集和结果解读
披膜病毒科 小RNA病毒科 腺病毒科 冠状病毒科 疱疹病毒科 细小病毒科 呼肠孤病毒科
病毒种 流感病毒 呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、副流感病 毒、人类偏肺病毒
风疹病毒 鼻病毒、柯萨奇病毒和埃可病毒的部分型别 腺病毒 人类冠状病毒、SARS冠状病毒 单纯疱疹病毒、带状疱疹、EB和CMV 人类博卡病毒 呼肠孤病毒（1，2，3，4型）
真菌涂片或其他真 支气管抽吸物 菌染色方法
无菌杯或管，室温，2h
真菌培养
支气管肺泡灌洗液；
PSB
半 乳 甘 露 聚 糖 血清
（GM）
支气管肺泡灌洗液
1-3 β-D 葡 聚 糖
（G）
促凝管，室温，立即送检 无菌杯或管，室温，2h
20
老年CAP患者的病原学诊断方法
老年CAP患者的病原学诊断
血培养
染色法
芽窄食单胞菌、金黄色葡萄球 革兰染色
痰 ； 支 气 管 抽 吸 物 ；无菌杯或管，室温，2h
菌和MRSA、流感嗜血杆菌 定量或半定量需氧 支气管肺泡灌洗液；
和厌氧细菌培养 PSB；肺组织
肺炎链球菌 混合厌氧菌（吸入）
曲霉菌属
同上
革兰染色 培养
尿液
PSB标本 肺组织
无菌容器，室温，2h
无菌管；无菌容器放组织； 室温，2h
咽拭子的采集方法
用拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（3-5次）
9
上呼吸道感染标本的采集
咽拭子的采集
正确拿咽拭子的方法
错误拿咽拭子的方法
上呼吸道感染标本的采集
鼻 拭 子 标 本 的 采 集
请患者头部保持不动，将拭子轻轻转动缓缓插入患者鼻腔，不要用力， 当遇到阻力后即到达后鼻咽，停留数秒吸取分泌物，轻轻旋转取出拭子
病毒种 流感病毒 呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、副流感病 毒、人类偏肺病毒
风疹病毒 鼻病毒、柯萨奇病毒和埃可病毒的部分型别 腺病毒 人类冠状病毒、SARS冠状病毒 单纯疱疹病毒、带状疱疹、EB和CMV 人类博卡病毒 呼肠孤病毒（1，2，3，4型）
真菌涂片或其他真 支气管抽吸物 菌染色方法
无菌杯或管，室温，2h
真菌培养
支气管肺泡灌洗液；
PSB
半 乳 甘 露 聚 糖 血清
（GM）
支气管肺泡灌洗液
1-3 β-D 葡 聚 糖
（G）
促凝管，室温，立即送检 无菌杯或管，室温，2h
20
老年CAP患者的病原学诊断方法
老年CAP患者的病原学诊断
血培养
染色法
芽窄食单胞菌、金黄色葡萄球 革兰染色
痰 ； 支 气 管 抽 吸 物 ；无菌杯或管，室温，2h
菌和MRSA、流感嗜血杆菌 定量或半定量需氧 支气管肺泡灌洗液；
和厌氧细菌培养 PSB；肺组织
肺炎链球菌 混合厌氧菌（吸入）
曲霉菌属
同上
革兰染色 培养
尿液
PSB标本 肺组织
无菌容器，室温，2h
无菌管；无菌容器放组织； 室温，2h
咽拭子的采集方法
用拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（3-5次）
9
上呼吸道感染标本的采集
咽拭子的采集
正确拿咽拭子的方法
错误拿咽拭子的方法
上呼吸道感染标本的采集
鼻 拭 子 标 本 的 采 集
请患者头部保持不动，将拭子轻轻转动缓缓插入患者鼻腔，不要用力， 当遇到阻力后即到达后鼻咽，停留数秒吸取分泌物，轻轻旋转取出拭子
呼吸道标本规范化采集和运送护理课件
采集后的注意事项
提醒患者在采集后注意个 人卫生，如洗手、避免接 触呼吸道等，以降低感染 风险。
定期评估和改进
评估培训效果
定期对医护人员进行呼吸道标本 采集和运送知识的考核，以确保
他们能够熟练掌握相关技能。
收集反馈意见
通过调查问卷、座谈会等方式收 集医护人员和患者对呼吸道标本 采集和运送工作的意见和建议， 以便不断改进和完善相关工作流
痰标本采集通常采用自然咳痰法，患者清晨起床后用清水漱 口，深呼吸数次后用力咳出气管深处的痰液，收集到无菌容 器中并及时送检。采集过程中应注意避免交叉感染，确保容 器无菌，避免痰液被污染。
支气管肺泡灌洗液采集
支气管肺泡灌洗液采集是通过支气管镜向肺泡内注入生理盐水并进行冲洗，收集 灌洗液进行分析的方法。
采集后应及时进行标本处理 和送检，避免长时间存放导 致标本质量下降。同时，应 对采集过程进行记录和监控 ，以便及时发现和纠正误差 。
确保运送安全性和及时性
01 总结词
呼吸道标本的运送安全性和及 时性是影响检验结果的重要因 素之一。
02
详细描述
为确保运送安全性，应选择适 当的运送方式和工具，如低温 冷藏、避光等措施，以保持标 本的新鲜度和完整性。同时， 应确保运送过程中不受剧烈震 动、碰撞等因素的影响。
程。
持续改进
根据评估结果和反馈意见，对呼 吸道标本采集和运送工作进行持 续改进，提高工作效率和质量，
确保患者安全。
03
总结词
04
为保证运送的及时性，应合理安 排运送时间和路线，确保标本尽 快送达检验机构。
详细描述
加强与检验机构的沟通和协作， 建立快速响应机制，以便在出现 意外情况时及时处理和解决。同 时，应定期对运送流程进行评估 和优化，提高运送效率和质量。
呼吸道标本的采集与送检要求
2. 延迟送检或待处理标本应置于4℃冰箱保存（疑为肺链和流感嗜 血杆菌等苛养菌不在此列），以免杂菌生长，但保存的标本应在24h 内处理。
3. 对可疑烈性呼吸道传染病（SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者 标本，在采集、运送或保存过程中必须注意生物安全保护。
二、临床微生物标本转运要求 1. 密闭运送原则。 2. 及时运送原则。 3. 生物安全原则，运送箱三层包装。
键（更加重要）。 4. 改善患者全身情况。
标本采集送检频次
一、怀疑普通细菌性肺炎： 1. 每天一次，连续2-3天。如果每天均报告同一种菌，
且++或+++，则有临床意义，但实际情况每天大多报告不 同菌。
2. 不建议24h内多次采集。
3. 关于是否一定要采集晨起第一口痰的质疑？——因第 一口痰会受胃肠道和口咽部细菌的影响，并存在过早采 集无法保证及时送检等问题。所以实际临床操作中只要 方便采集，正规口腔处理，及时送检，并非必须晨起第 一口痰。
一份培养结果与多个环节相关，最 关键的因素就是标本的正确采集与运 送!!!
感染的病原体是 什么？
是不是很难确诊 哪个是真正的致
病菌？ Why？
微生物检测背景及流程
一、常规项目检验时间： 标本接收（1-2min）——标本接 种、涂片（5min）——细菌培养 （18-48h）——细菌鉴定、药敏 试验（18-24h或48小时）——结 果报告（5min）
2. 经人工气道吸引分泌物：是目前临床较为常用的微 生物标本。但由于这些宿主的气管纤毛黏液防御机制受 到损害，有学者提出此法的标本应该先做细胞学筛选。
五、培养阳性细菌都需要抗菌药物治疗吗？ 1. 不是，培养阳性≠感染，可能为污染（血培养），可
3. 对可疑烈性呼吸道传染病（SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者 标本，在采集、运送或保存过程中必须注意生物安全保护。
二、临床微生物标本转运要求 1. 密闭运送原则。 2. 及时运送原则。 3. 生物安全原则，运送箱三层包装。
键（更加重要）。 4. 改善患者全身情况。
标本采集送检频次
一、怀疑普通细菌性肺炎： 1. 每天一次，连续2-3天。如果每天均报告同一种菌，
且++或+++，则有临床意义，但实际情况每天大多报告不 同菌。
2. 不建议24h内多次采集。
3. 关于是否一定要采集晨起第一口痰的质疑？——因第 一口痰会受胃肠道和口咽部细菌的影响，并存在过早采 集无法保证及时送检等问题。所以实际临床操作中只要 方便采集，正规口腔处理，及时送检，并非必须晨起第 一口痰。
一份培养结果与多个环节相关，最 关键的因素就是标本的正确采集与运 送!!!
感染的病原体是 什么？
是不是很难确诊 哪个是真正的致
病菌？ Why？
微生物检测背景及流程
一、常规项目检验时间： 标本接收（1-2min）——标本接 种、涂片（5min）——细菌培养 （18-48h）——细菌鉴定、药敏 试验（18-24h或48小时）——结 果报告（5min）
2. 经人工气道吸引分泌物：是目前临床较为常用的微 生物标本。但由于这些宿主的气管纤毛黏液防御机制受 到损害，有学者提出此法的标本应该先做细胞学筛选。
五、培养阳性细菌都需要抗菌药物治疗吗？ 1. 不是，培养阳性≠感染，可能为污染（血培养），可
呼吸道标本采集
试剂要求：应使用无菌、无热原、无杂质、无刺激性的试剂，确保采集到的呼吸道标本质量 可靠。
采集容器：应选择密封性好、防漏、不易变形、易于灭菌的采集容器，以便于保存和运输呼 吸道标本。
采集工具：应使用一次性或经过严格消毒的采集工具，避免交叉感染和污染。
采集环境及安全要求
采集环境：选 择清洁、安静、 通风良好的环 境，避免交叉
相关法律法规及规定
涉及的法律法规： 涉及《医疗废物 管理条例》、 《传染病防治法》 等相关法律法规
采集人员的资质 要求：必须具备 相应的医学知识 和技能，并经过 相关培训和考核
采集过程中的伦 理要求：尊重患 者的知情权和自 主权，保护患者 隐私，确保患者 安全
涉及的法律责任： 违反相关法律法 规及规定可能面 临行政处罚或刑 事责任
咽拭子标本采集
采集方法：使 用医用棉签擦
拭咽部
采集部位：咽 后壁、扁桃体
隐窝等处
采集目的：检 测呼吸道病毒、 细菌等病原体
注意事项：采 集前应告知患 者注意事项， 采集时应避免 损伤咽部粘膜
支气管肺泡灌洗液标本采集
采集方法：通过纤维支气管镜，将灌洗液注入肺泡内，然后回收 采集目的：用于诊断肺部感染、肺泡蛋白沉积症等疾病 优点：可以直接观察到肺泡内的病变情况，提高诊断的准确性 注意事项：采集前需要评估患者的病情和肺功能状态，避免出现不良反应
呼吸道标本采集
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目录
添加目录项标题
呼吸道标本采集的种类 呼吸道标本采集的质量控 制
呼吸道标本采集的步骤
呼吸道标本采集的临床意 义
呼吸道标本采集的伦理和 法律问题
01
添加章节标题
02
呼吸道标本采集的 步骤
采集容器：应选择密封性好、防漏、不易变形、易于灭菌的采集容器，以便于保存和运输呼 吸道标本。
采集工具：应使用一次性或经过严格消毒的采集工具，避免交叉感染和污染。
采集环境及安全要求
采集环境：选 择清洁、安静、 通风良好的环 境，避免交叉
相关法律法规及规定
涉及的法律法规： 涉及《医疗废物 管理条例》、 《传染病防治法》 等相关法律法规
采集人员的资质 要求：必须具备 相应的医学知识 和技能，并经过 相关培训和考核
采集过程中的伦 理要求：尊重患 者的知情权和自 主权，保护患者 隐私，确保患者 安全
涉及的法律责任： 违反相关法律法 规及规定可能面 临行政处罚或刑 事责任
咽拭子标本采集
采集方法：使 用医用棉签擦
拭咽部
采集部位：咽 后壁、扁桃体
隐窝等处
采集目的：检 测呼吸道病毒、 细菌等病原体
注意事项：采 集前应告知患 者注意事项， 采集时应避免 损伤咽部粘膜
支气管肺泡灌洗液标本采集
采集方法：通过纤维支气管镜，将灌洗液注入肺泡内，然后回收 采集目的：用于诊断肺部感染、肺泡蛋白沉积症等疾病 优点：可以直接观察到肺泡内的病变情况，提高诊断的准确性 注意事项：采集前需要评估患者的病情和肺功能状态，避免出现不良反应
呼吸道标本采集
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呼吸道标本采集的种类 呼吸道标本采集的质量控 制
呼吸道标本采集的步骤
呼吸道标本采集的临床意 义
呼吸道标本采集的伦理和 法律问题
01
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02
呼吸道标本采集的 步骤
五呼吸系统标本微生物检验
支气管肺泡灌洗液
应尽快送检，室温下不超过2小时； 如不能及时送检，应4℃保存，不超 过24小时。
呼吸系统感染常见微生物
01
02
03
细菌
肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、 金黄色葡萄球菌、卡他莫拉菌
等。
病毒
呼吸道合胞病毒、流感病毒、 副流感病毒、腺病毒等。
真菌
白色念珠菌、曲霉菌等。
04
其他微生物
支原体、衣原体等。
定期演练和培训
定期组织实验人员进行应急演练和培训，提高应对生物安全事件的 能力和水平。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
肺炎链球菌检验
通过血平板培养、Optochin敏感试验和胆汁溶菌试验等方法进行 鉴定。
流感嗜血杆菌检验
采用巧克力平板进行分离培养，并通过卫星现象、X因子和V因子依赖 试验等方法进行鉴定。
05 微生物检验结果解读与临 床意义
检验结果解读原则及注意事项
遵循微生物学原则
在解读检验结果时，需遵循微生物学的基本原则，包括微生物的 种类、数量、生长特性等。
高度的敏感性和特异性。
真菌学检验
1 2 3
直接镜检
采集患者的呼吸道分泌物或组织样本，在显微镜 下直接观察真菌的形态和结构特征，以初步判断 真菌的种类。
培养法
将样本接种于适当的培养基上，进行真菌培养， 观察真菌的生长情况和菌落特征，以鉴定真菌种 类。
血清学检测
利用特异性抗体与真菌抗原的结合反应，进行血 清学检测，如凝集试验、沉淀试验等，以辅助诊 断真菌感染。
病毒
如流感病毒、呼吸道合胞病毒等，病毒感染一般采取对症治疗和支持治疗。
真菌
如白色念珠菌、曲霉菌等，真菌感染多见于免疫力低下患者，治疗需考虑抗真菌药物。
呼吸道标本采集和结果解读
测结果。
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检测方法的局限性：不同检测方法可能存在不同的敏感性和特 异性，影响结果的准确性。
添加项标题
标本采集的局限性：呼吸道标本采集过程中可能存在污染、取 样不足等问题，影响结果的可靠性。
添加项标题
检测试剂的局限性：不同品牌、不同批次的检测试剂可能存在 差异，导致结果不一致。
添加项标题
呼吸道标本采集 和检测的时间较 长，需要等待实 验室结果才能做 出诊断，可能会 延误患者的治疗
时间。
汇报人：XX
解读人员的局限性：不同专业背景和经验水平的解读人员可能 对结果有不同的理解和判断，影响结果的解读和解释。
呼吸道标本采集 和检测不适用于 所有情况，如病 情较轻、无呼吸 道症状的患者可 能无法采集到有
意义的标本。
呼吸道标本采集 和检测的准确性 受到多种因素的 影响，如采集方 法、标本保存和
运输等。
呼吸道标本采 集和检测的敏 感性较低，可 能会漏检某些 病原体，导致 误诊或漏诊。
呼吸道标本采集难度大，易 受污染
采集过程中易发生交叉感染
呼吸道标本采集对患者的创 伤较大
呼吸道标本检测的准确性受多 种因素影响，如病毒变异、检 测试剂的灵敏度等。
呼吸道标本采集的难度较大， 容易受到污染或交叉感染。
呼吸道标本检测的特异性有时 不够理想，容易出现假阳性或
假阴性的结果。
呼吸道标本检测的时间较长， 需要等待较长时间才能获得检
检测原理：利用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增呼吸道标本中的病毒核酸片段，从而检测病毒 的存在。
采样方法：通常采用鼻咽拭子或痰液作为呼吸道标本，通过专用的采样拭子采集后送检。
检测步骤：包括样本采集、保存、运输、核酸提取和扩增等步骤，通过荧光定量PCR仪进行检测。
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检测方法的局限性：不同检测方法可能存在不同的敏感性和特 异性，影响结果的准确性。
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标本采集的局限性：呼吸道标本采集过程中可能存在污染、取 样不足等问题，影响结果的可靠性。
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检测试剂的局限性：不同品牌、不同批次的检测试剂可能存在 差异，导致结果不一致。
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呼吸道标本采集 和检测的时间较 长，需要等待实 验室结果才能做 出诊断，可能会 延误患者的治疗
时间。
汇报人：XX
解读人员的局限性：不同专业背景和经验水平的解读人员可能 对结果有不同的理解和判断，影响结果的解读和解释。
呼吸道标本采集 和检测不适用于 所有情况，如病 情较轻、无呼吸 道症状的患者可 能无法采集到有
意义的标本。
呼吸道标本采集 和检测的准确性 受到多种因素的 影响，如采集方 法、标本保存和
运输等。
呼吸道标本采 集和检测的敏 感性较低，可 能会漏检某些 病原体，导致 误诊或漏诊。
呼吸道标本采集难度大，易 受污染
采集过程中易发生交叉感染
呼吸道标本采集对患者的创 伤较大
呼吸道标本检测的准确性受多 种因素影响，如病毒变异、检 测试剂的灵敏度等。
呼吸道标本采集的难度较大， 容易受到污染或交叉感染。
呼吸道标本检测的特异性有时 不够理想，容易出现假阳性或
假阴性的结果。
呼吸道标本检测的时间较长， 需要等待较长时间才能获得检
检测原理：利用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增呼吸道标本中的病毒核酸片段，从而检测病毒 的存在。
采样方法：通常采用鼻咽拭子或痰液作为呼吸道标本，通过专用的采样拭子采集后送检。
检测步骤：包括样本采集、保存、运输、核酸提取和扩增等步骤，通过荧光定量PCR仪进行检测。
呼吸道标本采集
（4）标本运送：
咽拭子标本的运送宜采用带 保湿功能的运送培养基，避 免由于送检时间过长而干燥。 如未采用运送培养基，应于 0.5h 内 送 检 。 即 使 采 用 运 送 培养基，室温保存也不应超 过24h。
02 痰液标本
痰培养仅用于下呼吸道感染，主 要是肺部感染的诊断。
（1）临床采样指征：
咳嗽、脓性痰，伴有发热，影 像学检查出现新的或扩大的浸 润影；气道开放患者，出现脓 痰或血性痰；考虑下呼吸道感 染患者采集痰液标本，同时送 血培养标本。
（3）标签及申请单：
申请单除应包括患者基本信息外，患者的临床诊断、 症状、是否使用了抗菌药物、检测目的，标识是普通 培养、抗酸杆菌还是真菌培养。一定要注明标本种类 为肺泡灌洗液，以及采集时间。无菌管上的标签要求 有唯一标识号或条码，注明标本采集时间、检测目的。
（4）标本运输：
标本采集后需尽快送到实验室，不要冷藏标本。
质量不合格标本：显微镜下细胞学检查发现 标本受口咽部菌群污染。合格痰标本鳞状上 皮细胞＜10个/低倍视野，白细胞＞25个/低 倍视野，或白细胞与鳞状上皮细胞的数量比 值＞2.5。
无标签或标签贴错。
标识信息不明，未提供 采集时间及送检目的等。
超过2h送达实验室，且未 正确保存的标本。
运送容器有渗漏。
同一天同一项目重 复送 检的痰标本。
（2）采集要求：
痰标本的采集时机十分关键，应严格遵循以下 原 则采集标本：
争取首剂抗菌药物治疗使用前及更换抗菌药物前采集。 标本采集后保证2h内送达实验室并得到接种。 只要有可能得到合格的痰标本，应马上采集、送检。 宜在医护人员直视下留取合格痰标本。 送检痰标本后三天内不主张再次送检。
（3）标本采集 ：
呼吸道管理ppt课件
ppt课件.
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方法
A.拍背
在背部垫一块毛巾，避免局部皮肤刺激 和受损。操作者有节奏地用屈曲的手掌或 扣击器扣击正在作体位引流肺段的胸壁。
每个肺段拍3—5分钟。避开锁骨、脊 椎或游离肋骨。
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B.胸壁振动：
将双手置于胸壁并适当加压，给予 快速振动。嘱病人作深呼吸，在吸气末 开始振动直至呼气末，周而复始。此手 法对移动分泌物进入主呼吸道非常有效。
8
吸痰的禁忌症
有插管指征者，应尽快插管， 然后再吸痰。
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9
㈠ 口鼻腔吸痰法
病人准备： ➢ 听诊肺部，观察有无吸痰指征，决定
是否需吸痰。 ➢ 将病儿置于头高斜坡卧位（有禁忌症
除外）。这种体位有利于病儿咳嗽、 排痰。 ➢ 病情严重者，应给予脉氧饱和度监测。
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吸痰器负压选择
新生儿 60-80mmHg （0.008～0.012 MPa） 婴儿 80-100mmHg (0.012 ～ 0.013MPa) 儿 童 100～120mmHg (0.013 ～ 0.016MPa) 年长儿 100～150mmHg (0.013 ～ 0.02MPa)
• 病人不合作，镇静药未给或不足，未给予 上肢约束。
• 据国外研究，意外脱管与护士人力无显著
关系
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后果
• 导管滑入一侧支气管，以右侧支气 管多见。
• 导管脱出 • 导管滑入食道
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预防及处理
• 每班交接导管外露长度 • 吸痰及护理处置后，再次测量外露长度 • 妥善固定导管。及时更换浸湿的胶布
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引导性咳嗽的最佳体位
呼吸道标本培养(51页)精选全文
17、一个人即使已登上顶峰，也仍要 自强不 息。202 4/10/2 2024/1 0/22024 /10/22 024/10/ 2ຫໍສະໝຸດ 析前一、痰（细菌）培养适应症
针对肺部感染患者：
特别是ICU及住院的社区获得性肺炎（CAP） 慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD) 肺脓肿（咳痰非最适标本）等适应症 可疑细菌性病原引起的肺部感染患者（见附录A）
下呼吸道感染细菌培养
痰的来源？ 是否被上呼吸道污染？
草绿色链球菌 奈瑟菌属 嗜血杆菌属 莫拉菌属
细胞内病原引起非典型肺炎 ： • 肺炎支原体 • 肺炎/ 鹦鹉热衣原体 • 嗜肺军团菌 • 柯克斯体（Q热）
常见引起细菌性社区感染典型肺炎病原菌： • 肺炎链球菌 • 流感嗜血杆菌 上呼吸道正常菌群 • 金黄色葡萄球 • 卡他莫拉菌
注3：暴露在特殊气溶胶环境：与飞沫有关的结核分枝杆菌、与尘暴和鸟排泄 物有关的双相真菌等。
痰涂片对下呼吸道感染病原菌诊断的作用
除引起社区非典型肺炎的病原不能常规培养外，其他 常见肺部感染的病原菌均可常规培养方法分离；
但培养方法敏感性低，无法判断分离菌的来源。
涂片革兰染色方法：
宿主细胞、蛋白质和肺部炎症反应的分泌物等来自下呼吸 道痰的组分，可反映感染的状况； 痰经咳嗽从肺深部进入气道，未受损的粘膜纤毛运动将痰 送入口腔，痰标本会被上呼吸道和口腔定植菌污染； √评价痰标本是否合格； √涂片还可发现培养不能生长的细菌。 √涂片方法提高了培养方法的特异性及敏感性。
厌氧菌，金黄色葡萄球菌， 需氧G-b
医院获得性肺炎
G-b (肠杆菌属/克雷伯菌属/不 动杆菌属/假单胞菌属)， 金黄色葡萄球菌，厌氧菌， 社区获得性肺炎的典型菌
军团菌，肺炎链球菌
呼吸道标本采集、运送及保存共33页文档
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪费时间是一桩大罪过。——卢梭
呼吸道标本采集、运送及保存
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ，而是 让儿童 练习良 好道德 行为， 克服懒 惰、轻 率、不 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童பைடு நூலகம் 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
呼吸道标本的细菌培养
整理ppt
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国内概况：
• 国内最早儿童肺炎链球菌脑膜炎个案报告
在1942年。60年代中期以前研究资料显示 SP肺炎、脑膜炎在冬春季发病较多，是儿 科住院病人中常见病例多发生在婴幼儿。 SP性脑膜炎占化脑的11.1-22.1％，仅次于 流脑。SP也是小儿肺炎的重要病原菌之一， SP所致大叶性肺炎，5岁以下儿童中可占70 ％。
整理ppt
9
（三）痰标本细菌培养存在的问题。
• 痰标本的培养时间：
呼吸道(痰)标本培养应该为24~72小时。24小 时培养后细菌生长稀少或未生长的平板应继续培 养到72小时后再作报告，防止一些生长缓慢的细 菌会遗漏，如卡他莫拉菌、奴卡菌、嗜血杆菌等。
整理ppt
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（四）呼吸道（痰）标本的接种处理
儿童呼吸道常见细菌培养鉴定技术
整理ppt
1
病原菌确定原则
• 自从发现细菌以来，已经确定上百种疾病的病原菌，对这
些常见的传染病，通常只要检出已经确定的病原菌，就可 以认定这种疾病的原因。
• 新出现的传染病，需要用确定病原菌的古老标准来确定。
• 对病人组织、器官中分离到的一种微生物，不足以说明就
是疾病的原因。对于细菌性疾病，需要满足郭霍原则 （Koch）。
齐。
• 不典型的SP菌落有水滴样，菌落较大，边缘不整
齐；还有细小、似草绿色链球菌但较湿润的菌落 也需注意。
整理ppt
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整理ppt
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细菌染色形态
• 革兰氏染色阳性，呈矛头状，成双或链状排列，
有荚膜；在痰标本中大多数成双排列。
整理ppt
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鉴定要点：
• Optochin敏感，胆汁溶菌和荚膜肿
胀试验阳性，菊糖分解试验阳性， 小鼠毒力试验阳性。
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痰培养标本培养前规范
实验室在接种前必须作痰涂片革兰染色当 在低倍镜下白细胞小于10个每视野、上皮 细胞大于25个每视野时应作为不宜作培养 的标本
当白细胞小于10个每视野，上皮细胞小于 25个每视野时再参照油镜观察标本中细菌 分布作判断；
痰培养标本培养前规范
当标本中细菌种类超过3种以上，未见到纤 毛柱状上皮细胞，作为不合格标本；
标本
从扁桃体和后咽部采集标本的咽拭子
选择性培养基（如表1）
5%羊血琼脂 含抗生素的Thayer Martin 琼脂（GC+）和无抗生素的
<GCO>(仅用于淋病奈瑟菌病例) 巧克力琼脂（仅用于会厌炎和喉气管炎病例）
质量控制
培养基使用之前，QC由培养基组负责。
上呼吸道标本处理程序
培养程序
下呼吸道标本的处理
下呼吸道标本培养的常见病原菌
革兰阳性菌 革兰阴性菌
金黄色葡萄球菌 化脓性链球菌 肺炎链球菌
脑膜炎奈瑟氏菌 流感嗜血杆菌 肠杆菌科细菌
结核分支杆菌
非发酵菌
白喉棒状杆菌
嗜肺军团菌
假丝酵母菌
下呼吸道标本的处理
质量控制
培养基使用之前，QC由培养基组负责。
操作程序
肉眼观察 记录痰标本的外观并记录在申请单背面。 外观描述及简写如下：
培养程序
1. 水样痰标本
直接接种到培养基，并划线分离
2. 脓性标本（特别是痰）-匀浆化 3. Sputasol（OXIDE）的配制 4. 无菌操作下，取瓶中的液体1.5ml，加入到18.5 ml无菌水
中。无菌条件下2-8℃至少稳定48小时
痰液化的常规操作程序。
• 痰液中加入等体积的稀释后SPUTASOL • 旋涡振荡标本20-30 s， 并置室温15分钟 • 再次旋涡振荡是标本达到进一步液化。准备立即接种标本。 • 用拭子取混悬液到培养基，并划线。
2. 尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱 穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养
3. 便标本厌氧培养标本采集;可用排出的便 作厌氧培养但也应少与空气接触。
第二部分标本培养前规范草案
合格的标本是培养成功的最重要的因素， 实验室有权利对不合格提出终止检查或要 求重送标本的要求，因此实验室必须建立 标本接种前的质量控制和标本合格的检测。 要求对除血液外的标本均作涂片革兰染色 检查，用于评价标本的质量和区别分离细 菌是定植菌或致病菌。
5. 支气管灌洗液（BAL）的定量培养 6. 旋涡振荡BAL并用0.01 ml定量接种环接种到平板上。
放置在5%CO2培养箱内
您可能每天面临以下问题的挑战
痰标本分离出4种细菌做哪一 种细菌的药敏试验？
数量很多的凝固酶阴性葡萄 球菌在痰里分离出来是否要 做药敏?
临床微生物实验室规 范操作草案
草案分七部分
痰标本的采集和运送条例
1. 标本采集时间：用抗生素前；晨痰; 2. 采集方法： （1）自然咳痰：用清水漱口3次，应包括
咽喉部，用力咳出痰，与灭菌容器中或输 送培养基中。
痰标本的采集和运送条例
（2）帮助咳痰：不易获得痰的患者可雾化吸入加 温的氯化钠（45℃10％氯化钠水溶液）
（3）支气管镜或支气管毛刷：由医生采集，建议 直接种入输送培养基。
在1/6琼脂表面用力滚动拭子，并划线分离。 在一区用接种针穿刺血平板几次。（图1） 把平板放置在5%CO2培养。
下呼吸道标本的处理
大多数标本需要在安全柜内操作
常规细菌培养
原理
下呼吸道感染包括支气管炎，细支气管炎和 肺炎。以上炎症，特别是肺炎，可以引起严 重甚至是致命的疾病。虽然病毒，支原体， 立克次(氏)体和真菌都可以引起下呼吸道感 染，但细菌是主要的病原体，其所占的比例 要比上呼吸道感染要高很多。
唾液（S） （W）
带血 （BS） 粘液状（M） 水样
粘液脓性的（MP） 脓痰（P）脓性粘液痰（PM）
拒收“唾液”标本并报告“标本不适合用于进一步处 理”“请重留”
ห้องสมุดไป่ตู้
下呼吸道标本的处理
显微镜检
用拭子取所有类型标本的脓液部分涂片， （最好在60度热固定涂片2小时），并 准备革兰染色
低倍镜下检查涂片（10倍目镜）；定量 计数10个视野下鳞状上皮细胞和白细胞 平均数。按照表1分级标准记录在工作 表上。
低倍镜下细胞计数（10个视野平均数）
倍数
0 偶见 1+ 2+
3+
上皮细胞×100 无
<10 10-25
>2 5
WBC ×100
无 <25 / 25-75 >80(或四分之一视野> 20)
如果标本要求革兰染色，在100倍目镜下 检查病原体并记录在工作表上
对涂片显示上皮细胞占优势，（3+）丢 掉标本并报告“涂片显示口腔正常菌群 污染”“标本不适合用于进一步处 理”“请重留”
（4）胃内采集痰标本：婴幼儿不会咳痰而且常把 痰误咽入胃中。可在清晨，用胃管插入胃内，用 注射器抽出胃液。
（5）小儿采集痰标本：用压舌板刺激咳嗽使肺部 和器官的分泌物喷出，用拭子采取标本送检，如 不能立即送检应种入输送培养基。
厌氧培养标本采集规范条例
1. 痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管 穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不 能用于厌氧培养。
如见到数量不等的白细胞或纤毛柱状上皮 细胞或两者同在，含1-2种不同细菌，可考 虑继续培养，结果可根据病情再作分析；
标本采集和运送的规范条例 培养前标本质量检测规范 标本接种规范条例 细菌鉴定基本流程规范条例 细菌药物敏感试验规范条例 实验室质量控制 细菌报告规范条例等
第一部分 标本采集和运送
标本采集和运送是细菌培养成功的最重要 的关键!
但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人 自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且 不知道问题所在之处，由此引发的最主要后果是 阳性率下降，这也是临床医生最不能接受的问题， 为此建议来一次革命，用输送培养基代替传统的 标本的容器。
内容简介
上呼吸道标本标准操作程序（SOP） 下呼吸道标本标准操作程序（SOP） 痰标本的规范化操作（草案）
上呼吸道标本处理程序
大部分步骤需要在生物安全柜内接种 细菌性咽炎的实验室诊断 原理
大多数上呼吸道感染是由病毒引起的。细菌性咽炎经 常是由化脓性链球菌引起。但重度的会厌炎和喉气管 炎则是例外，其一般是由于b型流感嗜血杆菌引起。