蛋白质与酶工程复习资料

酶工程复习提纲

第一章绪论

1.酶及酶工程的概念。

酶：是生物体内一类具有催化活性和特殊空间构象的生物大分子物质。

酶工程：利用酶的催化作用，在一定的生物反应器中，将相应的原料转化成所需产品的一门工程技术。(名词解释) 2.了解酶学的发展历史，尤其是一些关键事件。

1833年，Payen和Persoz发现了淀粉酶。1878年，Kuhne首次将酵母中进行乙醇发酵的物质称为酶。给酶一个统一的名词，叫Enzyme，这个词来自希腊文，其意思“在酵母中”。

1902年，Henri提出中间产物学说。1913年，Michaelis and Menton推导出酶催化反应的基本动力学方程，米氏方程：V=VmS/（Km+S）。1926年，Summer分离纯化得到脲酶结晶。人们开始接受“酶是具有生物催化功能的蛋白质”。Cech and Altman于1982和1983年发现具有催化活性的RNA即核酸类酶，1989年获诺贝尔化学奖。现已鉴定出5000多种酶，上千种酶已得到结晶，而且每年都有新酶被发现。

3.了解酶在医药、食品、轻工业方面的应用。

医药：（1）用酶进行疾病的诊断：通过酶活力变化进行疾病诊断，谷丙转氨酶/谷草转氨酶用于诊断肝病、心肌梗塞等，酶活力升高；葡萄糖氧化酶用于测定血糖含量，诊断糖尿病。

（2）用酶进行疾病的治疗：来源于蛋清、细菌的溶菌酶用于治疗各种细菌性和病毒性疾病；来源于动物、蛇、细菌、酵母等的凝血酶用于治疗各种出血病；来源于蚯蚓、尿液、微生物的纤溶酶用于溶血栓。

（3）用酶制造各种药物：来源于微生物的青霉素酰化酶用于制造半合成青霉素和头孢菌素；来源于动物、植物、微生物的蛋白酶用于生产L-氨基酸。

食品：生产低聚果糖，原料为蔗糖，所需酶为果糖基转移酶、蔗糖酶α（黑曲霉、担子菌）；生产低聚异麦芽糖，原料为淀粉，所需酶为α-淀粉酶、β-淀粉酶、真菌α-淀粉酶（米曲霉）、α-葡萄糖苷酶（黑曲霉）、普鲁兰酶、糖化型α-淀粉酶（枯草杆菌）。

轻工业：用酶进行原料处理；用酶生产各种轻工、化工产品；用酶增强产品的使用效果。

第二章酶学基础

1.酶的化学本质？酶与其他无机或者有机催化剂相比较，具有哪些催化特性？

化学本质：生物催化剂。催化特性：（1）高效率：比非催化高10^8—10^20倍；比非酶催化高10^7—10^13倍，酶催化反应的效率之所以高，是由于酶催化反应可以使反应所需要的活化能显著降低。（2）高度专一性：相对专一性、绝对专一性。相对专一性：键专一性：作用于具有相同化学键的一类底物；基团专一性：酶的作用底物含有某一相同的基因。绝对专一性：一种酶只能催化一种底物进行一种反应。（3）反应条件温和：一般在常温、常压、pH值近乎中性的条件下进行。（4）酶催化是可调控的。

2.解释酶作用专一性机制的学说有哪些？其核心内容？（填空）

锁钥假说：整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样。

诱导契合假说：酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补性状。当底物与酶接近时，底物分子可以诱导酶活性中心构象发生改变，使之成为能与底物分子密切结合的构象。

3.解释酶作用高效性的机制有哪些？

（1）邻近效应与定向作用（2）电子张力作用：应变效应，底物分子的敏感键产生张力或变形（3）多元催化作用。酸碱催化：指通过向反应物提供质子或从反应物夺取质子而稳定过渡态、加速反应的一类催化机制。共价催化：某些酶分子能作为亲核催化剂或亲电催化剂分别放出或汲取电子而与底物分子形成不稳定的共价中间络合物，反应活化能降低而加速反应，称为共价催化。（4）酶活性中心的低介电区：表面效应，微环境效应。

4.什么是酶的活性中心？活性中心的构成？

活性中心：是指酶分子中直接与底物结合并完成酶催化反应的结构区域，该部位化学基团集中，并构成一定空间构象。

活性中心的构成：结合中心：与底物结合的部位，决定酶的专一性；催化中心：促进底物发生化学反应的部分，决定酶所催化反应的性质。

5.酶的一级结构、二级结构、三级结构和四级结构的概念，酶的四级结构与催化功能的关系？

酶的一级结构：一级结构是指构成酶蛋白的氨基酸组成的一条长肽链或多肽链。酶的一级结构是酶的基本化学结构，是催化功能的基础。

酶的二级结构：二级结构是指肽链骨架相邻区段借助氢键等沿轴向方向建立的规则折叠片与螺旋。是所有的酶必须具备的空间结构，是维持酶活性部位所必需的构象。

酶的三级结构：三级结构指在二级结构基础上肽链进一步的折叠片与盘绕成二维空间结构，多肽链中原来相距较远的序列可以集中到一个区域内。

酶的四级结构：在三级结构基础上，由几个到十数个亚基(或单体)组成的寡聚酶或生物大分子称为酶的四级结构。关系：1、具有四级结构的酶，其功能可分为两类：与催化作用有关,与代谢调节有关,酶蛋白的一级结构是酶具有催化功能的决定性部分，而高级结构为酶催化功能所必需部分

6.什么是同工酶，举例说明？

指能催化相同的化学反应，但酶蛋白本身的分子结构组成及理化性质不同的一组酶。如：乳酸脱氢酶LDH，可装配成H4、H3M、H2M2、HM3、M4五种四聚体。

7.根据酶催化反应类型和机制不同，酶的分类？填空题

（1）、氧化还原酶类：催化氧化还原反应

（2)、转移酶类：催化分子基团从一个分子转移到另一个分子的反应

（3）、水解酶类：催化加水分解的反应

（4）、裂合酶类：双键上去除或加入一个基团的反应

（5）、异构酶类：催化分子间重排的有关反应

（6）、连接酶类：催化将两个分子连接在一起，并由ATP提供能量的反应

8.酶活力及比活力？国际酶活力单位IU如何定义的？

酶活力：在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的速度，可用时间单位内底物的减少量或产物的增加量来表示。比活力：指在特定条件下，每毫克酶蛋白所具有的酶的活力单位数。

国际酶活力单位IU：在最适的反应条件（温度25℃）下，每分钟内催化一微摩尔底物转化为产物的酶量定为一个酶活力单位，1IU=1μmol/min