酶工程课件

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第四章酶工程酶的提取与分离纯化ppt课件

第四章酶工程酶的提取与分离纯化ppt课件
在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法: ⑴中性盐沉淀(盐析法) ⑵有机溶剂沉淀 ⑶选择性沉淀(热变性和酸碱变性) ⑷等电点沉淀 ⑸有机聚合物沉淀
从使用情况来看,闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ,但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ,在此 不再说 明。
脂类
蛋白质(6% ~ 8%) 蛋白质
脂类(8.5% ~ 13.5%)
从使用情况来看,闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ,但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ,在此 不再说 明。
细菌细胞壁的结构
从使用情况来看,闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ,但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ,在此 不再说 明。
蛋白质溶解度与盐浓度之间的关系:
loSg loS0 g K sI
I:离子强度,I = 1/2∑MZ2;M:离子浓度(mol/L); Z:离子价数
S:离子强度为I时的蛋白质的溶解度(g/L) S0:离子强度为0时蛋白质的溶解度(g/L) Ks:盐析常数,是与蛋白质和盐种类有关的特性常数。
b. 添加固体硫酸铵
适用于:蛋白质溶液原来体积已经很大,而要 达到的盐浓度又很高时。
实际使用时,可直接查表 (各种饱和度下 需加固体硫酸铵的量)。
从使用情况来看,闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ,但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ,在此 不再说 明。
3. 化学法 应用各种化学试剂与细胞膜作用,
使细胞膜结构改变或破坏。

《酶工程基本原理》课件

《酶工程基本原理》课件

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降低杂质含量:通过优化分离纯化 技术,降低杂质含量,提高酶的纯 度
提高酶的稳定性:通过优化分离纯 化技术,提高酶的稳定性,延长酶 的保存时间
酶的生产与制备技 术
酶的生产方式
微生物发酵法:通过微生 物发酵产生酶
植物提取法:从植物中提 取酶
动物提取法:从动物中提 取酶
化学合成法:通过化学合 成产生酶
基因工程法:通过基因工 程产生酶
酶固定化技术:将酶固定 在载体上,提高酶的稳定 性和活性
酶的固定化技术
固定化酶的定义:将酶固定在载体上,使其保持活性并可重复使用的技 术 固定化酶的优点:提高酶的稳定性、可重复使用、降低成本
固定化酶的种类:吸附法、交联法、共价结合法等
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温度:酶的活性随温 度升高而增加,但超 过一定温度会失活
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pH值:酶的活性随 pH值变化而变化, 通常存在最适pH值
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离子强度:高离子强 度可能影响酶的活性, 导致酶失活
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酶浓度:酶的活性随 酶浓度增加而增加, 但超过一定浓度后不 再增加
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底物浓度:底物浓度 对酶的活性有影响, 通常存在最适底物浓 度
生物能源:用于生物燃料、 生物发电等领域
生物材料:用于生物材料合 成、生物材料改性等领域
酶的分类与性质
酶的分类
按照酶的来源分类: 动物酶、植物酶、 微生物酶
按照酶的催化反应 类型分类:氧化还 原酶、水解酶、转 移酶、裂解酶、异 构酶、连接酶
按照酶的活性中心 分类:金属酶、非 金属酶
按照酶的催化反应 机制分类:单酶、 多酶、复合酶
酶在食品加工中 的应用:酶在食 品加工中主要用 于提高食品品质 和营养价值,如 酶在食品发酵、 食品加工、食品 保鲜等方面的应 用。

第二章 (酶工程)微生物发酵产酶ppt课件

第二章 (酶工程)微生物发酵产酶ppt课件

分解代谢物阻遏现象:
实验:细菌在含有葡萄糖和乳糖的培养基上生长,优先 利用葡萄糖。待葡萄糖耗尽后才开始利用乳糖,产生 了两个对数生长期中间隔开一个生长延滞期的“二次 生长现象”(diauxie或biphasic growth)。
这一现象又称葡萄糖效应, 产生的原因是由于葡萄糖降解 物阻遏了分解乳糖酶系的合成。 此调节基因的产物是环腺苷酸 受体蛋白(CRP),亦称降解物 基因活化蛋白(CAP)。
腺苷酸 环化酶 cAMP
抑制
CAP:降解物基因活化蛋白(catabolic gene activation protein)
5'-AMP
磷酸二酯 酶 激活
分解代 谢产物
三、提高酶产量的策略
(一)菌种选育(一劳永逸) 1.诱变育种
(1) 使诱导型变为组成型——选育组成型突变株
(2)使阻遏型变为去阻遏型
C R P c A M P 复 合 物
C R P + c A M P
cAMP-CRP复合物的作用示意图
操纵基因(Operater gene):
位于启动基因和结构基因之间的一段碱基 顺序,能特异性地与调节基因产生的变构蛋 白结合,操纵酶合成的时机与速度。
结构基因(Structural gene):
决定某一多肽的DNA模板,与酶有各自 的对应关系,其中的遗传信息可转录为 mRNA,再翻译为蛋白质。
阻遏蛋白
蛋白质
诱导剂
调节基因(regulator gene):
可产生一种组成型调节蛋白(regulatory protein) (一种变构蛋白),通过与效应物 (effector) (包括诱导物和辅阻遏物)的特异结合 而发生变构作用,从而改变它与操纵基因的结合力。 调节基因常位于调控区的上游。

《酶工程》课件-酶的应用

《酶工程》课件-酶的应用

转移酶类
催化基团转移反应, 如转氨酶、磷酸酶 等。
合成酶类
催化特定化合物的 合成,如谷氨酰胺 合成酶等。
酶的特性
高效性
酶的催化效率比非酶促反应高 出很多,能显著缩短反应时间

专一性
一种酶通常只能催化一种或一 类化学反应。
不稳定性
在高温、强酸、强碱等极端条 件下,酶的活性会受到破坏。
活性可调节性
通过调节酶的浓度、反应条件 等,可以控制酶促反应的速度

酶的活性与稳定性
温度对酶活性的影响
大多数酶在低温下活性降低,而在适宜温度 下活性最高,温度过高会使酶失活。
抑制剂对酶活性的影响
有些物质可以抑制酶的活性,从而减缓或阻 止酶促反应的进行。
pH对酶活性的影响
大多数酶在一定的pH范围内活性最高,超 出这个范围酶的活性会降低或失活。
激活剂对酶活性的影响
有些物质可以增强酶的活性,从而加快酶促 反应的速度。
04
酶的应用
酶在医药领域的应用
药物生产
酶可用于合成药物,如抗 生素、抗癌药物等,具有 高效、环保的特点。
诊断试剂
酶作为生物催化剂,可用 于制备诊断试剂,如酶联 免疫试剂盒等,用于疾病 检测。
生物治疗
酶可用于基因治疗、细胞 治疗等领域,通过调控基 因表达或促进细胞生长来 治疗疾病。
酶在食品工业中的应用
THANKS
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酶工程面临的挑战与解决方案
酶的稳定性问题
针对酶稳定性差的问题,可以通过蛋白质工程手段对酶进行改造,提高其热稳定性和化学稳定性 。
酶的生产成本问题
通过基因工程技术,实现酶的高效表达和大规模生产,降低生产成本。同时,探索新型的酶生产 方式,如利用微生物发酵或植物细胞培养等。

酶工程总结PPT课件

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酶固定化技术包括固定化载体、固定化方法、固定化酶的分离和回收等关键技术 ,这些技术的应用能够为酶工程提供高效、连续化的生产方式。
酶的分子改造技术
酶的分子改造技术是通过化学或生物 方法对酶的分子结构进行修饰和改造, 从而改变酶的催化性质和功能的技术。
酶的分子改造技术包括化学修饰、定 向进化、点突变等关键技术,这些技 术的应用能够优化酶的催化性能和稳 定性,提高酶的生产效率和降低成本。
THANKS
生物能源开发
酶工程技术可用于生物能源开发,如生物柴油、生物 酒精等。
06
酶工程的前景与挑战
酶工程的发展前景
酶工程在工业生产中的应用前景广阔,特别是在生物制药、生物燃料、环保等领域。
随着酶工程技术的不断进步,酶的产量、活性和稳定性将得到进一步提高,为工业 生产提供更高效、环保的解决方案。
酶工程在医疗领域的应用前景也十分看好,例如用于药物设计和开发、疾病诊断和 治疗等。
环保领域的应用
有毒有害物质降解
01
酶工程技术可用于降解有毒有害物质,如重金属、有机污染物
等。
废水处理
02
酶工程技术可以用于废水处理,通过酶促反应将废水中的有机
物转化为无害物质。
生物修复
03
酶工程技术可用于生物修复,通过酶促反应降解污染物,恢复
生态环境。
食品工业领域的应用
食品添加剂生产
酶工程技术在食品添加剂生产中发挥着重要作用,如生产甜味剂、 防腐剂等。
专一性
一种酶通常只能催化一种或一类化学反应,具有明显的专一性。
不稳定性
大多数酶是蛋白质,容易受温度、pH、重金属离子等环境因素的影响,表现出不稳定性。
酶的活性调节
1 2
共价修饰

酶工程说精品PPT课件

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3.4解决办法:
基于以上重点及难点,我们从教学模式、策略、手段和 方法等多方面着手寻求解决方法,在减少课内学时的同时 ,仍然能保证良好的教学效果。例如:对于 “ 各种酶分 离纯化技术及组合 ” 的难点问题,可以采用分组收集资 料、讨论等形式,按照分离纯化技术的特点分成若干专题 小组,各小组从课内外收集相关原理、规律进行主题研究 。让学生学会发现问题、提出问题和解决问题。然后在专 题研讨和交流的基础上,教师通过启发式教学,帮助学生 总结提炼共性方面的知识,通过知识的再加工使学生对抽 象原理的领悟更为透彻;
1.酶的分子修饰 (4 学时 ) ; 2.固定化技术 (3-4 学时 ) ; 3.酶的非水相催化 (2-3 学时 ) ; 4.酶反应器 (2 学时 ) ; 5.酶与现代食品工业 (2-3 学时 ) ; 6.酶与医药工业 (2-3 学时 ) ; 7.酶与绿色化工制造工业 (2-3 学时 ) ; 8.酶与环境保护 (2 学时 ) 。
教学考核
10%
平时成绩:
到课率,课堂表 现,学生遵守纪律 以及上课积极参与 情况。
30%
过程性考核:
操作熟练程度、 团队协作能力、吃 苦耐劳精神等。
60%
期末考试:
理论加技能综合 水平的考核。(理 论:技能=1:1)
6.教学条件
6.1教学团队—软件条件 近5年来,全系教师获地厅级以上科研成果奖 30余项,其中省级一等奖5项,二等奖10项,三 等奖25项,获省教育厅教改教学成果奖7项;通 过省级科研成果鉴定20项,省级教学成果鉴定10 项。全系教师在全国CN刊物上发表论文120余篇 ,其中核心期刊50余篇,英文期刊1篇,SCI1篇 ;参编出版论著、教材50余部。
4.教学实施
4.1教学模式

酶工程第一章酶学基础知识PPT课件

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酶的生物合成是一个复杂的过程,需要多种酶的参 与和调控。这些酶的作用包括提供能量、合成原料 、修饰和加工等,以确保酶的正确合成和功能。
酶的生产方式
01 02
微生物发酵
通过微生物发酵生产酶是一种常见的方法。不同微生物具有不同的代谢 途径和酶系,可以产生不同类型的酶。通过选择适当的微生物和发酵条 件,可以大规模生产酶。
酶的分离纯化
通过各种分离纯化技术手段,从生物材料中 提取和纯化酶。
酶的改造
通过基因工程技术手段对酶进行改造,以提 高酶的催化效率和稳定性。
酶的固定化
将游离酶或细胞固定在特定载体上,实现酶 的重复利用和连续化生产。
酶的生产与应用
通过生物工程技术手段实现酶的工业化生产, 并将其应用于各个领域。
酶工程的应用领域
1980年代
随着分子生物学和生物工程技术的迅速发展,酶 工程领域取得了重大突破,实现了酶的大规模生 产和应用。
02
酶的结构与功能
酶的活性中心
02
01
03
酶的活性中心是酶分子中与底物结合并催化反应的区 域,通常由少数几个氨基酸残基组成。
这些氨基酸残基在空间结构上相互接近,形成一个凹 陷的空腔,能够与底物特异结合。
酶的活性中心具有催化作用,能够降低反应的活化能 ,加速化学反应速率。
酶的专一性
酶的专一性是指酶只能催化一 种或一类化学反应的性质。
酶的专一性分为绝对专一性和 相对专一性,绝对专一性是指 酶只催化一种底物反应,相对 专一性是指酶对底物的结构有 一定选择性。
酶的专一性是由酶的活性中心 决定的,活性中心的空间结构 和化学组成决定了酶对底物的 选择性。
03
拓展酶的应用领域,将酶应用 于生物医药、食品工业、纺织 工业等领域,提高产品质量和 降低环境污染。

《酶工程》课件-微生物发酵产酶

《酶工程》课件-微生物发酵产酶

05
微生物发酵产酶存在问题与挑战
产量问题
微生物发酵产酶产量低
由于微生物发酵过程中受到多种因素 的影响,如营养物质的供应、发酵条 件、微生物菌种等,导致酶的产量较 低。
发酵周期长
微生物发酵产酶通常需要较长的发酵 周期,这增加了生产成本和时间成本。
稳定性问题
酶稳定性差
许多酶在发酵过程中容易受到温度、pH值、金属离子等因素的影响,导致酶的稳定性降低。
04
微生物发酵产酶应用实例
工业应用
洗涤剂制造
微生物发酵产生的酶可用于制造 洗涤剂,如蛋白酶用于去除蛋白 质污渍,淀粉酶用于去除淀粉污
渍。
纺织工业
利用微生物发酵产生的酶处理纺织 品,可以改善其质地、手感和外观, 如纤维素酶用于棉织物的生物抛光。
造纸工业
通过微生物发酵产酶技术,可以改 进造纸工艺,提高纸张质量和降低 环境污染,如木聚糖酶用于纸浆漂 白。
过程优化与控制
通过人工智能技术,对微生物发酵产酶过程进行建模和优化,提高 目标酶的产量和质量。
个性化定制酶
结合人工智能和基因工程技术,实现个性化定制酶的合成,满足不 同领域的需求。
THANKS
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《酶工程》课件-微生物发酵 产酶
• 微生物发酵产酶概述 • 微生物发酵产酶原理与过程 • 微生物发酵产酶技术与方法
• 微生物发酵产酶应用实例 • 微生物发酵产酶存在问题与挑战 • 未来发展趋势与展望
01
微生物发酵产酶概述
酶工程简介
酶工程定义
酶工程是生物工程的重要组成部分,是利用酶或者微生物细胞、动植物细胞、 细胞器等具有的生物催化功能,借助工程手段来生产有用物质、设计改造酶或 者生产细胞、器官乃至整个生物体的一门科学技术。

全套课件 酶工程

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酶工程
第二章 酶动力学
第一节 酶促反应动力学
一、单底物动力学
k3在单底物酶促反应中,底物(S)首先与酶(E)结合,生成底物和酶的复合物 (ES),然后复合物分解,形成产物(P)并释放出酶,这个过程可表示如下:
式中酶与底物形成复合物的反应是可逆反应,正反应和逆反应的速度常数分别 为k1、k2,复合物分解为产物与酶的反应是不可逆反应,速度常数为k3。
第三节 酶的组成、分类与命名
一、酶的组成
除少数已经鉴定的具有催化活性的RNA分子外,几乎所有的酶都是蛋白质,所 以和其他蛋白质一样,酶也具有四级空间结构形式。根据酶的组成成分可以将酶分 为三类:
1.单体酶 单体酶是指仅有一个活性部位的多肽链构成的酶,其分子量在13000~35000之间。 这类酶很少,且都是水解酶,如胰蛋白酶等
第三节 酶的组成、分类与命名
六、大类酶简介如下:
1.氧化还原酶(oxido-reductases) 氧化还原酶催化氧化还原反应,其催化反应的通式为
被氧化的底物(A-)为氢或电子供体,被还原的底物(B)为氢或电子受体。系 统命名时,将供体写在前面,受体写在后面,然后再加上氧化还原酶字样,如黄嘌 呤:氧化还原酶(习惯名为黄嘌呤氧化酶)。
2H2O2======2H2O + O2 在一定条件下,1mol铁离子可催化10-5mol过氧化氢分解;相同条件下,1mol 过氧化氢酶则可催化105mol过氧化氢分解,过氧化氢酶的催化效率是铁离子的1010 倍。
第二节 酶催化作用的特点
二、专一性
酶的专一性是指在一定的条件下一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进 行某种类型反应的特性。这是酶最重要的特性之一,也是酶与其他非酶催化剂最主 要的不同之处。酶催化的高度专一性是酶在各个领域广泛应用的重要基础。不同的

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(2)优点
条件温和,操作简便,分离范围广,回收率高,层析柱可反复 使用,无需再生处理,可分段分离。 (3)常用的凝胶 交联葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶
三 、 酶 的 生 产 及 分 离 纯 化
3.酶分离纯化的层析技术
2)离子交换层析——电荷性质的差异 它利用离子交换剂上可解离基团对各种离子的亲 和力不同而进行分离。 (1)基本原理 蛋白质是两性电解质,不同蛋白质由于其pI不同,
V=
Km
Vmax [S] Km + [S]
— 米氏常数 Vmax — 最大反应速度

米氏方程的推导:
假设: 1)忽略p的逆反应, 也即在初速度期间; 2)底物浓度远远大于 酶的浓度;
二 、 酶 作 用 原 理
3)反应处于稳态,即 中间产物生成和分解 的速度相等。
2、关于米-门方程的讨论 1)酶初速度和底物浓度的关系为一双曲线;
5、底物的浓度
三 、 酶 的 生 产 及 分 离 纯 化
(一)酶的生产
1.对酶源的要求
2.微生物作为酶的优势
3.对酶生产菌的要求 (二)酶的分离纯化 1.酶提取 2.酶分离纯化的沉淀技术 3.酶分离纯化的层析技术 4.酶分离纯化的电泳技术
三 、 酶 的 生 产 及 分 离 纯 化
(一)酶的生产
1.对酶源的要求 1)酶含量丰富 2)提取、纯化方便
(1)基本原理
空间排阻学说:PEG分子在溶液中形成网状 结构,与溶液中的蛋白质分子发生空间排挤作 用,从而使蛋白质分子凝聚而沉淀下来。 PEG沉淀蛋白质的过程遵循下列方程:
lg S f s x c
三 、 酶 的 生 产 及 分 离 纯 化
2.酶分离纯化的沉淀技术
(2)影响因素 a. 蛋白质的分子质量——大,沉降好

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工业生物技术 (生物催化)
动力学 反应工程 反应器设计
采矿
药物 食品、营养 动物饲料 植物保护 造纸和纸浆 化学品
以生物催化法合成的主要产 品
产品名称
产量
丙烯酰胺
10万吨/年
聚乳酸
1.3万吨/年
阿斯巴甜
2万吨/年
生物柴油与汽油
1000万吨/年
抗菌素中间体6-APA
0.9万吨/年
趋势判断和需求分析
开发生物催化剂:催化性能更好、更快,成本更低 开发生物催化剂工具合:催化反应更广泛,功能更多
样 改善性能: 稳定性, 活性,溶剂兼容性 开发分子模型: 新酶的快速重新设计 创造新技术: 用于新生物催化剂的开发
生物催化剂工程技术瓶颈
对生物催化剂作用机理缺乏深入的认识 对次级代谢产物代谢途径(包括途径间相互关系)缺
新兴、前沿学科往往在学科交叉中产生
生物技术的具体应用
生物技术
医药生物技术 农业生物技术 工业生物技术 环境生物技术 材料生物技术
。 。 。 。
生物技术产业化的三个浪潮
医药生物技术 农业生物技术 工业生物技术
医药生物技术产业
1982年重组人胰岛素上市 至2000年已有基于48种重组蛋白的117种基因工程
乏理解 细胞工程化的方法十分有限(即代谢工程) 生产酶和辅因子的成本过高
当前生物催化的研究热点
新酶或已有酶的新功能的开发 根据已有底物开发新的酶反应 利用突变或定向进化技术改善生物催化剂性能 利用重组DNA技术大规模生产生物催化剂 利用有机溶剂或共溶剂开发新的反应体系 体内或体外合成的多酶体系 克服底物和产物抑制 精细化工品或医药合成技术的放大 辅因子再生 生物催化剂的修饰
生物催化剂的固定化

《酶工程》课件-酶的应用

《酶工程》课件-酶的应用

酶 的 应 用
一、概述 (三)选择合适的酶需考虑的因素 当一个催化反应的工业过程被确定之后, 当一个催化反应的工业过程被确定之后 , 选择合适的酶一 般需考虑以下因素: 般需考虑以下因素: 1、底物特异性。 底物特异性。 2、pH值。 pH值 3、温度。 温度。 4、激活剂和抑制剂。 激活剂和抑制剂。 5、价格因素。 价格因素。
酶 的 应 用
二、酶的应用简介 (二一酶在食品方面的应用 2、酶在食品生产方面的应用(3)酶在果蔬类食品生产方面的应用 酶在食品生产方面的应用( 原理:在果蔬类加工过程中,加入各种酶, 原理:在果蔬类加工过程中,加入各种酶,可以提高在果蔬 类食品加工生产的产量和质量。 类食品加工生产的产量和质量。
13
酶 的 应 用
二、酶的应用简介 (一)酶在食品方面的应用 3、酶在食品添加剂生产方面的应用 原理:是利用酶的催化作用将原料转化为所需要的产物。 原理:是利用酶的催化作用将原料转化为所需要的产物。 4、酶在增强或改善食品的风味和品质方面的应用 酶在增强或改善食品的风味和品质 增强或改善食品的风味和品质方面的应用 原理:是利用酶的催化作用将食品中的相关原料转化, 原理:是利用酶的催化作用将食品中的相关原料转化,从而 改善食品的风味和品质。 改善食品的风味和品质。
17
酶 的 应 用
二、酶的应用简介 (二)酶在轻工、化工方面的应用 酶在轻工、 2、酶在轻工、化工产品生产方面的应用 酶在轻工 化工产品生产方面的应用 轻工、 原理:是利用酶的催化作用将原料转化为所需的轻工、化工 原理:是利用酶的催化作用将原料转化为所需的轻工、 产品, 产品,或利用酶的催化作用除去某些不需要的物质面得到所 需的产品。 需的产品。
2
酶 的 应 用
一、概述 (四)目前酶制剂开发的主要品种 目前,先进国家的酶制剂品种的开发主要集中在: 目前,先进国家的酶制剂品种的开发主要集中在: 1、食品加工用酶,特别是用于生产低聚糖的一些酶类。 食品加工用酶,特别是用于生产低聚糖的一些酶类。 2、饲料用酶,重点是植酸酶。 饲料用酶,重点是植酸酶。 3、纺织用酶,特别是原果胶酶的开发和利用。 纺织用酶,特别是原果胶酶的开发和利用。 4、洗涤用酶,主要研究开发4种酶,即碱性丝氨酸型蛋 洗涤用酶,主要研究开发4种酶, 白酶、碱性脂肪酶、碱性纤维素酶和淀粉酶。 白酶、碱性脂肪酶、碱性纤维素酶和淀粉酶。 5、临床诊断用酶、治疗用酶和化妆品用酶。 临床诊断用酶、治疗用酶和化妆品用酶。
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