常用细菌培养基配方
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是用于细菌、真菌、植物细胞等生物的培养和繁殖的一种营养物质。
不同生物种类和培养目的需求不同，所以有许多种不同的培养基配方。
以下是几种常见的培养基配方：1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）LB培养基是一种常用于培养细菌的全面培养基，其配方包括：5g酵母膏、10g蛋白胨、10g氯化钠，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至7.0。
LB培养基可用于大多数菌种的培养，是最常用的细菌培养基之一2. TSB培养基（Tryptic Soy Broth培养基）TSB培养基是一种适用于多种细菌的全面营养培养基，其配方包括：15g胰胨蛋白胨、5g酵母膏、5g氯化钠，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至7.3、TSB培养基可用于培养细菌、真菌等微生物。
3. MS培养基（Murashige and Skoog培养基）MS培养基是一种用于植物组织培养的配方，适用于各种植物种类的生长和繁殖。
其配方包括：4.4gMS盐基础培养基粉、30g蔗糖，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至5.8、MS培养基还可以根据不同植物种类的需求调整添加适当的植物激素。
4. YPD培养基（Yeast Peptone Dextrose培养基）YPD培养基是用于酵母菌培养的常用培养基，其配方包括：10g蛋白胨、20g葡萄糖、20g酵母浸出物，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至6.0。
YPD培养基可满足酵母菌对碳源、氮源等营养物质的需求。
5. SDA培养基（Sabouraud Dextrose Agar培养基）SDA培养基是一种常用的真菌培养基，其配方包括：20g葡萄糖、15g 琼脂、10g酵母提取物，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至5.6、SDA培养基可用于分离和培养真菌。
以上是几种常见的培养基配方，不同生物种类和培养目的需要选择适合的培养基。
培养基的配方还可以根据需要进行调整和优化，以满足特定菌种或细胞的生长需求。
最适合的培养基应根据具体实验需求进行选择。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。
甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
各种培养基配方
146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL（rose bengal，玫瑰红水溶液）琼脂15—20gpH自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～7.6。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。
*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。
常用25种培养基详细配方
一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7．0—7．21．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基，培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0．5gK2HPO40．5gMgSO40．5gFeSO40．01g琼脂20g水1000mlpH 7．2—7．4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，在火上加热，边搅拌边加水及其他成分，溶化后，补足水分至1000ml。
1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
三、查氏培养基(培养霉菌用，实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0．5gMgSO40．5gFeSO40．01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0．5g1/3000孟加拉红(rose bengal，玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0．56kg/cm2(8磅/英寸2)，112．6℃灭菌30分钟。
临用前加入0．03%链霉素稀释液100ml，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000ml。
1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1．取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，置15℃阴暗处发芽，上盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
2．将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴锅中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
几种微生物培养基配方
几种微生物培养基配方微生物培养基是用来培养和繁殖各类微生物的营养基质，其配方可以根据不同微生物种类和研究需求进行调整。
下面将介绍几种常见的微生物培养基配方。
1.普通营养琼脂培养基普通营养琼脂培养基是最常见的一种培养基，适用于大多数微生物的培养。
其主要成分包括肉汤，琼脂，氨基酸和糖类等。
普通营养琼脂培养基的配方如下：-肉汤：10克-酵母浸泡液（菌种培养基，可选）：5克-琼脂：15克-蒸馏水：1000毫升将肉汤和酵母浸泡液加入蒸馏水中，搅拌均匀后加热至溶解，再加入琼脂，继续加热至完全溶解。
搅拌均匀后，将溶液倒入培养皿中，冷却凝固后即可使用。
2.高营养琼脂培养基高营养琼脂培养基适用于对营养需求较高的微生物，如快速生长的细菌或真菌。
其配方相对于普通营养琼脂培养基略有不同，具体配方如下：-肉汤：10克-蛋黄粉：10克-葡萄糖：5克-琼脂：15克-蒸馏水：1000毫升将肉汤和蛋黄粉加入蒸馏水中，搅拌均匀后加热至溶解，再加入葡萄糖和琼脂，继续加热至完全溶解。
搅拌均匀后，将溶液倒入培养皿中，冷却凝固后即可使用。
3.铁琼脂培养基铁琼脂培养基用于培养铁菌等对铁元素营养要求较高的微生物。
其配方如下：-琼脂：15克-蔗糖：10克-磷酸二氢钾：0.2克-氯化铵：2克-硫酸亚铁：0.1克-蒸馏水：1000毫升将以上成分加入蒸馏水中，搅拌均匀后加热至溶解，然后继续加热至沸腾。
搅拌均匀后，将溶液倒入培养皿中，冷却凝固后即可使用。
4.特殊需求培养基除了普通营养基外，一些微生物需要特定的培养基才能生长。
例如，大肠杆菌需要含有葡萄糖和氧气的LB培养基；霉菌需要含有麦芽提取物和琼脂的SDA培养基。
这些特殊需求培养基的配方可以根据具体要求进行调整，以适应不同微生物的生长。
总结：微生物培养基有许多种，以上仅介绍了几种常见的配方。
实际应用中，根据不同微生物种类和研究需求，配方可以根据需要进行调整。
制备培养基时，需要严格按照操作规程操作，避免外界污染，以保证培养基的质量和可靠性。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
常用微生物培养基配方大全
（1）分离细菌时，在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素，可以抑制霉菌和菌的生长。
（2）（2）分离放线菌时，在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠（SDS）不仅可以抑制细菌的生长，还能激活放线菌孢子的萌发。
加入氟哌酸（5mg/L）+制霉菌素（50mg/L）+青霉素（0.8mg/L）也可以有效地抑制细菌和真菌，而不影响放线菌的生长。
（3）（3）分离霉菌和菌时，在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml，可以抑制细菌和放线菌生长。
（4）（4）分离根霉和毛霉时，由于这些微生物的菌丝易蔓延成片，难以得到纯化的菌落，通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延，使菌落长得小而紧密。
（5）一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂，这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦，现已有成品供应，只要直接加入基础培养基即可。
如氨苄西林，主要用于分离亲水气单孢菌。
（6）1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠 0.5克，琼脂 1.5克，水 1000毫升在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。
过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。
配方四根瘤菌培养基葡萄糖 10克磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克硫酸镁 0.2克酵母粉 0.4克琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：1. LB培养基（Luria-Bertani）LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺（L-Glutamine）: 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水：使混合液体稀释至所需体积配制方法：将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中，调整pH值至7.4，混合均匀即可。
培养基配方
培养基配方1、PDA培养基（用于分离、培养植物内生真菌）：马铃薯（去皮）200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml，用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基（用于分离、培养植物内生细菌）：牛肉膏3g，蛋白胨5g，葡萄糖2.5g，琼脂粉15g，蒸馏水1000ml，pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml，用于抑制真菌生长。
115℃，20min 灭菌。
3、LB培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；4、DSM1培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，胰蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL，pH=7.0；5、DSM2培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl5 g，细菌学蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；6、Msgg培养基：磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0)，MOPs 100 mmoL/L（pH7.0），MgCl2 2 mmoL/L，CaCl2 700 mmoL/L，MnCl2 50 μM，FeCl3 50 μM，ZnCl2 1 μM，VB1 2 μM，甘油0.5 %，谷氨酸0.5 %，色氨酸50 μg/mL，苯丙氨酸50 μg/mL，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
7、N%NA培养基：牛肉膏3.0 g，细菌学蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂粉N*10 g，8、BGM1培养基：牛肉膏3 g，胰蛋白胨10 g，NaCl 5 g，磷酸三钾26.631 g（pH7.0），二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，葡萄糖1 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分：牛肉膏或牛肉汤500克，葡萄糖10克，胰蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分：NaCl300克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分：果胶5克，葡萄糖5克，NaNO32克，K2HPO40.2克，MgSO4·7H2O0.1克，CaCO30.02克，FeSO4·7H2O0.01克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分：土豆提取物4克，蛋白胨2克，乳糖10克，NaCl10克，胆盐0.75克，碱性蓝2克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分：石蜡300克，肉浸膏100克，大豆酪蛋白胨20克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分：肉膏1克，酵母提取物2克，葡萄糖2克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani（LB）培养基成分：酵母提取物5克，酪蛋白胨10克，NaCl10克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖40克，醇20克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分：鱼精膏20克，胆盐胆红素15克，玛琪琼脂25克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分：马加提琼脂50克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖20克，醇30克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升。
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基是为了满足微生物的生长和繁殖需要而制备的特定组分的物质。
不同的微生物对培养基的组分有不同的要求，因此有一系列常用的培养基配方。
下面介绍几种常用的培养基配方。
1.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是最常用的培养基之一，可以满足大多数微生物的生长需求。
其基本配方如下：-蛋白胨：5g-酵母粉：2.5g-琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将蛋白胨、酵母粉和琼脂加入蒸馏水中，加热溶解，然后加热熔化琼脂，混合均匀后倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
2.大肠杆菌富集培养基大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，在微生物学实验中经常使用。
它具有良好的生长能力，但在培养基中易受到其他菌群的竞争。
因此，需要使用富集培养基来选择性地培养大肠杆菌。
其基本配方如下：-脱水牛肉粉：10g-酵母提取物：5g-氯化钠：5g-蒸馏水：1000mL将脱水牛肉粉、酵母提取物、氯化钠加入蒸馏水中，加热溶解后加入琼脂，混合均匀后倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
3.血平板培养基血平板培养基用于检测细菌对血液的溶血能力以及细菌的形态特征。
其基本配方如下：-马肉膏：6g-鸡蛋膏：5g-硫酸镁：0.5g-酚红指示剂：0.025g-蒸馏水：1000mL将马肉膏、鸡蛋膏、硫酸镁加入蒸馏水中，加热溶解后加入酚红指示剂，混合均匀后倒入培养皿中，待凝固后用刀或针在培养基上划线，然后点菌于线上即可使用。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基Sabouraud葡萄糖琼脂培养基是一种选择性培养基，常用于真菌的培养。
其基本配方如下：-葡萄糖：40g-氯化钠：10g-氯仿：0.1mL-青霉素：0.1g-琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将葡萄糖、氯化钠、硫酸镁加入蒸馏水中，加热溶解后加入氯仿和青霉素，混合均匀后加热熔化琼脂，在冷却至40-45℃时倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
以上是一些常用的培养基配方，不同微生物可能有不同的培养基要求，所以在实际应用中还需要根据具体情况进行调整和优化。
微生物常用的培养基配方
微生物常用的培养基配方1、用于细菌培养——LB(Luria-Bertani)培养基LB培养基分为液体及固体两种形态的培养基，主要在分子生物学中应用。
(1) LB液体培养基，在90mL双蒸馏水中加入：胰蛋白胨1g氯化钠1g酵母提取物0.5g摇动容器直至溶质溶解后，用1当量NaOH调节pH至7.0，再用双蒸馏水定容至100mL。
而后进行高压蒸汽灭菌。
(2) LB固体培养基在100mL液体培养基的基础上，加入1.5g琼脂粉。
2、用于细菌培养——牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏 1.5g蛋白胨5g氯化钠 2.5g水500mL，pH调至7.4~7.6。
3、用于霉菌或酵母菌培养——马铃薯培养基(PDA)马铃薯（去皮）200g蔗糖（葡萄糖）20g水1000mL将马铃薯去皮切成小块放入锅中，加水至1000mL，煮至沸腾后维持20-30min，注意不时用玻璃棒搅拌防止糊底。
用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，弃去滤渣。
取滤液加糖（培养霉菌用加蔗糖，培养酵母菌用加葡萄糖），补充水至1000mL，自然pH。
4、用于V.P.反应和甲基红试验——葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨0.5g葡萄糖0.5g磷酸氢二甲0.2g水100mL，调节pH至7.2~7.4，115℃湿热灭菌20min。
5、用于吲哚实验——蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g水1000mL，调节pH至7.2~7.4，121℃湿热灭菌20min。
6、用于厌氧菌培养——RCM培养基（强化梭菌培养基）酵母粉3g牛肉膏10g蛋白胨10g可溶性淀粉1g葡萄糖5gL-半胱氨酸盐酸盐0.5g氯化钠5g醋酸钠3g琼脂0.5水1000mL，调节pH至6.8±0.1，121℃高压灭菌15min。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～76。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～76。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～72。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。
*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。
常用培养基的配方
伊红美蓝培养基原理一般用来鉴定大肠杆菌;伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料;当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有绿色金属光泽;在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不能结合,故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落;金葡菌在此培养基上不生长;常用的伊红美蓝乳糖培养基,可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌;如果有大肠杆菌,因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸,菌体带H+,故菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽;用伊红美蓝培养基鉴定水中大肠杆菌步骤如下：①制作伊红美蓝培养基,趁热注入培养皿中,凝成平板,待用;②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水,按1：10稀释;③取毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上;用平板划线分离法进行分离;④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时;培养基中会出现大肠杆菌菌落,菌落中心呈暗蓝黑色,发金属光泽;⑤将菌落接种于斜面培养基上由营养琼脂培养基制成;蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氢二钾 2g琼脂 20~30g蒸馏水 1000ml2%伊红水溶液 20ml%美蓝水溶液 13ml储备培养基的制备先将琼脂加至900ml蒸馏水,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨,混匀使之溶解,再以蒸馏水补足至1000ml,调整PH为~;趁热用脱脂棉或绒布过滤,再加入乳糖,混匀后定量分装于烧瓶内,置高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min,贮存于冷暗处备用;制法将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用;临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50～55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板;麦康凯培养基原理1.全称麦康凯琼脂或是麦康凯2.一种用于分离鉴定的培养基,杆菌在其上呈红色或,有的菌落只是中间红色;配置方法蛋白胨17g脙胨3g猪胆盐或牛、羊胆盐 5g氯化钠5g琼脂17g蒸馏水1000mL乳糖10g%结晶紫水溶液 10mL%中性红水5mL麦康凯-制法1 将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶解于400mL中,校正;将琼脂加入600mL加热溶解;将两液合并,分装于烧瓶内,121℃灭菌15min备用;2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50～55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板;注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌;吲哚试验吲哚indol试验有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚靛基质,经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚而呈红色,是为吲哚试验阳性;LB培养基配方1g提取物0.5g1g-2g 100mlLB培养基-LB培养基条件LB培养基-固态培养基LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板;LB固体培养基倒板1.配制：100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉2.抗生素的加入：高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时手可触摸加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀;3.倒板：一般10ml倒1个板子;培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟;4.保存：用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用;牛肉膏蛋白胨培养基营养琼脂配方10g；3g ；5g；15～20g；1000mL；制法将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH 至～;加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化;分装烧瓶,121℃高压灭菌15min;注：此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面;如用于菌落计数,琼脂量为%；如作成平板或斜面,则应为2%;甲基红试验甲基红试验-化学属性甲基红Methyl Red试验肠杆菌科各菌属都能发酵,在分解葡萄糖过程中产生,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基PH值下降至以下,使甲基红变红;甲基红试验-试验方法挑取新的待试纯培养物少许,接种于通用培养基,培养于36±1°C或30°C以30°C较好3~5天,从第二天起,每日取培养液1ml,加甲基红指示剂1~2滴,阳性呈鲜红色,弱阳性呈淡红色,阴性为黄色;迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定; 甲基红为酸性指示剂,pH范围为~,其pK值为;故在以下,随酸度而增强黄色,在以上,则随碱度而增强黄色,在或上下接近时,可能变色不够明显,此时应延长培养,重复;尿素酶某些能产生尿素酶,分解尿素产生大量的氨,使培养基变碱;将待检菌接种于含有尿素的培养基中,35℃孵育18~24h,观察结果;红色为阳性,不变为阴性;主要用于肠杆菌科变形、普罗威登菌属、克雷伯菌属及假单胞菌属的鉴定;明胶液化gelaune liquefaction指把的现象;明胶液化-它的特征这种能力可因细菌种类不同而有显着差异,因此很早以来就被用来作为、的一种特征;明胶液化-适应范围、、属均具有能力,而大肠杆菌就无这种液化能力;由于明胶是在热水中溶解胶原collagen而成的,因此,它是由产生于体外的蛋白酶进行分解的;用血清或蛋清清蛋白代替明胶也可看到大致相同的现象;VP试验VP试验-试验简介英 VP test检验中常用的之一;某些在蛋白胨水中能分解葡萄糖产生,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在环境下,被空气中氧氧化为,二乙酰与蛋白胨中的生成红色化合物,称V－P+反应;VP试验-试验方法1O’Meara氏法：将试验菌接种于通用培养基,于36±1°C培养48h,培养液1ml 加O’Meara试剂加有%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氢氧化钠水溶液1ml,摇动试管1~2min,静置于室温或36±1°C恒温箱,若4h内不呈现伊红、即判定为阴性;亦有主张在48~50°C水浴放置2h后判定结果者;2Barritt氏法：将试验菌接种于通用培养基,于36±1°C培养4天、培养液先加入5°Cα萘酚2-na-phthol纯酒精溶液,再加40%氢氧化钾水溶液,摇动2~5min,阳性菌常立即呈现红色,若无红色出现,静置于室温或36±1°C恒温箱,如2h内仍不显现红色、可判定为阴性;3快速法：将%肌酸溶液2滴放于小试管中、挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养物一接种环,乳化接种于其中,加入5%α-萘酚3滴,40%氢氧化钠水溶液2滴,振动后放置5min,判定结果;不产酸的培养物不能使用;本试验一般用于肠杆菌科各菌属的鉴别;在用于芽胞杆菌和葡萄球菌等其它细菌时,通用培养基中的磷酸盐可阻碍乙酰甲基醇的产生,故应省去或以氯化钠代替;生理盐水生理盐水就是%的氯化钠水溶液,因为它的渗透压值和正常人的、组织液都是大致一样的,所以可以用作补液不会降低和增加正常人体内钠离子浓度以及其他医疗用途,也常用作体外培养活组织、细胞;氯化钠：俗称盐、食盐;菌注射用水一般使用来溶解难溶于药物使用的, 生理盐水就是我们静脉点滴常用的％的氯化钠注射液,外用具有一定的杀菌消毒作用;所以它们不是一样的概念. ;人体生活中所处环境的配方：需用生理盐水浓度是%;称取0.9克氯化钠,溶解在少量水中,稀释到100毫升;血琼脂平板制法：取营养琼脂PH7．6,加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升加或血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于或分装,制成斜面备用;血琼脂平板-用途用途：1．一般棉拭子均接种此培养基;2．尿液,脓液3．分离标本用;胰蛋白胨胰蛋白胨水成分胰蛋白胨10g；蒸馏水1000mL；制法将上述成分溶解,校正pH;分装试管,121℃高压灭菌15min;Baird－Parker氏培养基成分胰蛋白胨10g ；牛肉膏5g ；酵母膏1g ；丙酮酸钠10g ；甘氨酸12g ；氯化锂LiCl·6H2O5g ；琼脂20g ；蒸馏水950mL ； ;增菌剂的配法30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚蹄酸钾溶液10mL混合,保存于冰箱内;制法将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解;冷至25℃,校正pH;分装每瓶95mL,121℃高压灭菌15min;临用时加热溶化琼脂,冷至50℃,每95mL加入预热至50℃的卵黄亚蹄酸钾增菌剂5mL,摇匀后倾注平板;培养基应是致密不透明的;使用前在冰箱储存不得超过48h;血浆凝固酶血浆凝固酶-血浆凝固酶:是能使含有肝素等的人或兔血浆发生凝固的物质,致病株大多数能产生,是鉴别有无的重要.。
常用微生物培养基配方大全
常用培养基配方01 糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌1 5min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好1 0%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100mL培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2～3d.迟缓反应需观察14～30d.02 ONPG培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG) 60mg(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1～3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1～3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～5d,哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～4d.哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06 丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07 葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08 Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09 马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,高压灭菌121℃20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100mL中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10～15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.8～7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4～7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH 应为6.8～7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22～25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12 氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18～24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1～2d,必要时可培养4～5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mLpH7.4制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36±1℃培养1～2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15 尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121℃高压灭菌15min.冷至50～55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16 氰化钾(KCN)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水1000mL0.5%氰化钾溶液20mLpH7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm×100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17 氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18 硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g蛋白5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:溶解,校正pH,分装试管,每管约5mL,121℃高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.试验方法:接种后在36±1℃培养1～4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19 细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2～3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20 过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1 mL.静置于室温(20℃)中30～60min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7.2制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL. 稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL.分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000mLpH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min.24 乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21) 10g甘油20g蒸馏水10mL制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25 肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4～7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min.26肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL琼脂17～20g制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心) 1000g15%氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000mL制法:1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min.2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃.3 加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4～5h,每小时摇动一二次.4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性.6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜.7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸.8 校正pH7.4～7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用.28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000mL浓盐酸10mL制法:1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎.2 用绞肉机将猪血块绞碎.3 将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动.4 从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜.5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2～7.4.6 用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4～7.6) 1000mL琼脂20g黄豆粉浸液50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100mL.置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30血琼脂成分:pH7.4～7.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血) 5～10mL制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15～20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2～7.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%.32营养肉汤成分:蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min.33 乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34乳糖发酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35 EC肉汤成分:胰蛋白胨20g3号胆盐(或混合胆盐) 1.5g乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2.36 缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 9g磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾 1.6g蒸馏水1000mL乙液氯化镁(化学纯) 40g蒸馏水100mL4.13.3 丙液0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液.38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000mL碘溶液碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121℃高压灭菌15min备用.临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL.39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液:蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠3g碳酸钙45g蒸馏水1000mL将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O) 50g蒸馏水加至100mL碘溶液碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121℃高压灭菌20min.制备:基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾 4.58L-胱氨酸0.01g蒸馏水1000mL1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1.41 GN增菌液成分:胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶225mL,115℃高压灭菌15min.42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min.43 亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18～20g蒸馏水1000mLpH7.5制法:1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解.3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃4 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀.冷至50～55℃,倾注平皿. 注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44 DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18～20g蒸馏水1000mLpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH. 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50～55℃,倾注平板.45 HE琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18～20g蒸馏水1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAndrade指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50～55℃,倾注平板.注:①此培养基不可高压灭菌.②甲液的配制硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL②乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mL②Andrade指示剂酸性复红0.5g1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1～2mL.46 SS琼脂牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐 3.5g琼脂17g蒸馏水1000mL再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100mL乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33mL加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.②煌绿溶液配好后应在10d以内使用.③可以购用SS琼脂的干燥培养基.47 WS琼脂成分:②胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAndrade指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000mLpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:①供沙门氏菌分离用.②Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂.48 麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g眎胨3g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g琼脂17g蒸馏水1000mL乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10mL0.5%中性红水溶液5mL制法:1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2.将琼脂加入600mL加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50～55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49 伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红Y溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000mLpH7.1制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50～55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52 克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂 6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂2g葡萄糖1g0.2%酚红溶液5mL制法:1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解.2 分别加入其他各种成分.将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内,每管约2mL.115℃高压灭菌10min.3 将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固.4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5mL,放成斜面.53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g葡萄糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.54 葡萄糖半固体发酵管成分:蛋白胨1g牛肉膏0.3g氯化钠0.5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖1g琼脂0.3g蒸馏水100mLpH7.4制法:将蛋白胨,牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正pH后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌121℃15 min.55 5%乳糖发酵管成分:蛋白胨0.2g氯化钠0.5g乳糖5g2%溴麝香草酚蓝水溶液1.2mL蒸馏水100mLpH7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH.将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌12 1℃15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内.注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵.56 CAYE培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤.57 Honda氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白20g酵母浸膏粉10g氯化钠 2.5g磷酸氢二钠15g。
各种培养基的配方
各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。
配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。
配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。
微生物常用培养基配制方法
微生物常用培养基配制方法基础培养基的配制方法如下：1.海藻提取物培养基（海藻提取物培养基是最常见的一种基础培养基，适用于大多数微生物的生长）：a.加入20克海藻提取物和1升蒸馏水到容量瓶中；b.加热并搅拌溶解海藻提取物；c.pH值调整至7.0-7.4；d.若需要固化培养基，加入15克琼脂并搅拌均匀；e.加入适当的抗生素（如青霉素或链霉素）以防止细菌污染；f.用蒸气灭菌器或高压灭菌锅高压灭菌。
2.肉汤培养基（适用于一般细菌的培养）：a.研磨肉粉，加入1升蒸馏水中；b.进行水浴加热，在60-80℃下保持30分钟；c.过滤肉汤，静置冷却；d.改正pH值至6.8-7.2；e.若需要固化培养基，加入15克琼脂并均匀搅拌；f.加入抗生素（如青霉素、链霉素等）以防止细菌污染；g.用高压灭菌锅高压灭菌。
选择性培养基的配制方法如下：1. MacConkey琼脂培养基（选择性培养大肠杆菌等肠道杆菌）：a. 加入28.5克MacConkey琼脂培养基和1升蒸馏水到容量瓶中；b.加热并搅拌溶解琼脂培养基；c.若需要选择性抑制革兰阳性菌，可加入50毫克靛胆盐和20毫克碱性溴心兰紫；d.若需要选择性抑制革兰阴性菌，可加入2毫克氯化罗红素；e.pH值调整至7.0-7.4；f.若需要固化培养基，加入15克琼脂并搅拌均匀；g.加入青霉素（100国际单位/升）以防止细菌污染；h.用高压灭菌锅高压灭菌。
2.酵母蔗培养基（选择性培养真菌、酵母菌）：a.加入10克蔗粉、4克乳酪粉和1升蒸馏水到容量瓶中；b.加热并搅拌溶解蔗粉和乳酪粉；c.pH值调整至5.5-6.0；d.若需要固化培养基，加入15克琼脂并搅拌均匀；e.加入青霉素（100国际单位/升）以防止细菌污染；f.用高压灭菌锅高压灭菌。
以上是微生物常用培养基的配制方法，不同细菌或真菌对培养基的要求略有不同，因此配方可能会有所调整。
另外，严格按照消毒操作要求进行灭菌，以确保培养基的无菌状态。
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常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
常用培养基LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
(实验室一般都不调PH)SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1 mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。
建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。
为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。
培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素。
按所用原料不同，可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。
化学试剂中的培养基，大多为合成培养基。
由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。
培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6。
C的冰箱内。
常见培养基有：1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠0.5克，琼脂1.5克，水100毫升在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。
过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基（高氏培养基）可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。
在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。
调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升把面粉用水调成糊状，加水到500毫升，放在文火上煮30分钟。
另取500毫升水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。
3、真菌培养基配方一萨市（Sabouraud’s）培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，补足水分。
在滤液中加入10克琼脂，煮沸溶解后加糖20克（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。
把这培养基的pH值调到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升洗净黄豆芽，加水煮沸30分钟。
用纱布过滤，滤液中加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补足水分到1000毫升，分装，灭菌，备用。
把这培养基的pH值调到7.2～7.4，可用来培养细菌和放线菌。
配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取80粒干豌豆加水，煮沸1小时，用纱布过滤后，在滤液中加入琼脂，煮沸到溶解，分装，灭菌，备用。
4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克把马铃薯洗净去皮后，切成小块。
称取马铃薯小块200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后，过滤。
在滤汁中补足水分到1000毫升，即成20%马铃薯煮汁。
在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，补足水分，分装，灭菌，备用。
使用该培养基对pH值要求不严格，可以不测定。
配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。
在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。
分装，灭菌，备用。
该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
5.烟草的培养基在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA 高时,愈伤组织分化芽CTK/IAA低时,分化根;CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化愈伤组织诱导培养基制备以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水,加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0.加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化,然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中.烟草叶片愈伤组织诱导取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种5小片,一共接种6瓶.接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周,然后在同样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶).观察愈伤组织诱导结果,统计愈伤组织诱导率.器官分化及植株再生培养将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照,温度20-22 C条件下培养3周,统计愈伤组织再生植株情况.愈伤组织诱导的总体情况烟草愈伤组织诱导培养4周后,愈伤组织基本形成,即排除因生长时间不够而未形成愈伤的情况.具体情况见表一中所示,6瓶培养物均有愈伤形成,且都未发生污染,但诱导率几乎各不相同.其中, 在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为60.0℅, 在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%.由于实验过程中,外植体即烟草叶片取得偏小,接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡,使整个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小.培养基还有:1640培养基特殊培养基：一选择性培养基1酵母菌富集培养基葡萄糖5% 尿素0.1% 硫化铵0.1% 磷酸二氢钾0.25% 磷酸氢二钠0.05% 七水合硫酸镁0.1% 七水合硫酸铁0.01% 酵母膏0.05%孟加拉红0.003% pH4.52 Ashby无氮培养基富集好养自生固氮菌甘露醇1% 磷酸二氢钾0.02% 七水合硫酸镁0.02% 氯化钠0.02%二水合硫酸钙0.01% 碳酸钙0.5%二鉴别培养基EMB培养基，常用于鉴别E.coli蛋白胨10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氢二钾2g 伊红Y 0.4g 美蓝0.065g蒸馏水1000g pH7.2分离海洋微生物的培养基配方2216E培养基配方（固体培养基）蛋白胨5克酵母膏1克磷酸高铁0.01克琼脂15-----20克陈海水1000毫升煮沸氢氧化纳（5%）的溶液调PH值7.6—7.8其他培养基：1.高氏一号培养基KNO3:1g,NaCl:0.5g,K2HPO4:0.5gMgSO4·7H2O：0.5gFeSO4·7H2O：0.01g可溶性淀粉20g琼脂20g蒸馏水1000mlpH调至7.2~7.4，121°C灭菌30min制法：先用少量水将淀粉调成糊状，再取700ml水在电炉上加热煮沸然后边搅拌便将淀粉糊倒入，同时保持沸腾。