第二章+菌种来源

8、短杆菌 (Brevibacterium) 氨基酸、核苷酸工业生产中常用的菌种，也 是酶法合成生产辅酶A的菌种
9、黄单胞菌 (Xanthomonas)
细胞直杆状，G－，无芽孢，极生鞭毛
在含蔗糖的琼脂平板上形成圆形、边缘整齐、粘稠光滑的黄 色菌落；液体培养形成黄色粘稠的胶状物——荚膜多糖，其黄色 为一种水溶性色素 野油菜黄单胞菌(X. campestris) 可以淀粉生产黄原胶(Xanthan gum)
4、球拟酵母 (Toruiopsis)
此属酵母有些种能产生不同比例的甘油、赤藓糖、阿 拉伯糖；有的能利用烃类生产蛋白质。 5、假丝酵母 (Candida) 能形成假丝，液体培养时能形成浮膜 可生产SCP、甘油、脂肪酶
6、红酵母 (Rhodotorula)
有明显的红色或黄色色素，很多种因生荚膜而形 成粘质状菌落

已工业化产品生产菌的介绍
AK:天冬氨酸激酶 HD:高丝氨酸脱氢酶 HT:高丝氨酸转乙酰酶 黄色短杆菌中赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸和异亮氨酸的合成 调节机制

已工业化产品生产菌的介绍
氨基酸生产菌的要求： 代谢途径比较清楚， 代谢途径比较简单 谷氨酸发酵的菌种： 棒杆菌属，短杆菌属、节杆菌属或小 杆菌属的棒型细菌 其它氨基酸生产菌： 常规菌种一般也是以谷氨酸生产菌 选育而成；工程菌，大肠杆菌，枯 草芽孢杆菌
龟裂链霉菌 (Streptomyces rimosus)
菌落灰白色，表面后期有皱折，呈龟裂状 生产土霉素
2、小单胞菌属 (Micromonospora) 与一般放线菌不同，菌丝体长 入培养基内，不形成气生菌丝， 而在基内菌丝体上长出 孢子梗， 其顶端生一个球形、椭圆形孢子。
菌落致密，与培养基紧密结合 在一起，表面凸起，多崎岖，疣 状；菌落常为橙黄色、红色、深 褐色、黑色和兰色。
1、链霉菌属 ( Streptomyces )
灰色链霉菌(Streptomyces griseus) 生产链霉素 金霉素链霉菌 (Streptomyces aureofaciens)
在PDA培养基上生长时，基内菌丝产生金黄色 色素
生产金霉素 红霉素链霉菌 (Streptomyces erythreus) 产红霉素
（四）霉菌
1、根霉 (Rhizopus)
米根霉 ( Rhizopus oryzae ) 淀粉酶活力极强，多作糖 化酶使用；又由于具有较强的 蛋白质分解能力，也可用于制 造腐乳。 华根霉 ( Rhizopus chinentis )
是酿酒所必须的重要霉菌，也 是酸性蛋白酶和腐乳生产中的重要 菌种。
（三）酵母菌
单细胞真核，主 分布于含糖质较 多的偏酸性环境 中，如水果、蔬 菜、花蜜和植物 叶子上，以及果 园土壤中。
1、啤酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)
根据长与宽的比例，分三组：
第一组 长宽比为1～2
细胞多为圆形、卵圆形； 主要供生产啤酒、白酒和酒精及面包 第二组 长宽比为2 多供生产葡萄酒、果酒用

（一） 细菌
1、枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)
分布广，常存在于枯草、土壤等，一般为
腐生菌；
在酱油、酱类和白酒制曲时，如果水分含
量大，温度较高，就容易造成枯草杆菌迅速 繁殖；不仅消耗原料蛋白质和淀粉，而且生 成刺眼鼻的氨味，造成曲子发粘发臭，使制 曲失败。
能产生大量淀粉酶和蛋白酶
多种可产抗生素，如 棘孢小单胞菌 （M. echinospora）产庆大霉素
3、游动放线菌属 （Actinoplanes） 一般不形成气生菌丝，孢囊在基内菌丝上形成，孢 囊孢子在孢囊内盘卷或呈直线排列；孢子球形，有时 端生1-40根鞭毛，能运动。 济南游动放线菌 (Actinoplanes tsinanesis) 产创新 霉素(creatmycin; 1964)
4、诺卡氏菌属 (Norcadia)
一般无气丝，基丝培养十几小时形成横隔，并 断裂成杆状或球状孢子。 菌落较小，边缘多呈树根毛状。 生产利福霉素、蚊霉素 等
5、孢囊链霉菌属 (Streptosporangium)
孢子丝盘卷成球形孢囊，内形成孢囊孢子，孢囊孢 子无鞭毛 产多霉素、创新霉素
1、抗生素生产有关的微生物 抗生素是次级代谢产物，需要生物体进行复杂的代谢， 目前发现的生物来源如下：
放线菌（链霉素 四环素；红霉素 等） 真菌（青霉素、头孢等）
一些产芽孢的细菌 植物或动物来源
2、氨基酸生产有关的微生物
50, 60年代以氨基酸发酵为代表的代谢控制发酵，是 发酵工业发展历史上的一个转折点： 代谢控制发酵：用人工诱变的方法，有意识地改变微生 物的代谢途径，最大限度地积累产物，这种发酵形象地 称为代谢控制发酵，最早在氨基酸发酵中得到成功应用。
可由菌体提取大量脂肪、-胡萝卜素
7、棉病针孢酵母 ( Nematspora gossypii ) 又名棉病囊霉，能危害许多重要的经济作物，如棉 花、柑橘、番茄等 该菌具有大量合成核黄素的能力，是核黄素生产的 重要菌种
9、毕赤氏酵母 ( Pichia ) 能利用石油或农副产品及工业废料产生菌体蛋 白，有些菌株能生产麦角固醇、苹果酸、磷酸甘露 聚糖 近年来其在基因工程中的作用日益得到重视
2、毛霉 ( Mucor ) 鲁氏毛霉 ( Mucor rouxianus ) 从我国小曲中分离出来； 能糖化淀粉且能生成少量酒精； 能产生蛋白酶，有分解大豆蛋白的能力， 常用来制作腐乳 总状毛霉 ( Mucor racemosus )
是毛霉中分布最广的一种，几乎在各地 土壤中、一些生霉的材料上、空气中都能找到； 酒曲中常见
AS1.393 蛋白酶 BF7658 -淀粉酶
2、大肠杆菌 (Escherichia coli)
可利用大肠杆菌制取天冬氨酸、苏氨酸、缬氨酸等 大肠杆菌的谷氨酸脱羧酶在工业上被用来进行谷氨酸 的定量分析 基因工程的很好材料
3、乳酸杆菌 (Lactobacillus sp.)
革兰氏阳性，无芽孢，厌氧或兼性厌氧
使糖汁变粘而无法加工，为糖厂有害菌
6、醋酸菌 (Acetobacter)
不形成芽孢，G－，好气性
分两群：1）只将乙醇氧化成醋酸 2）将产生的醋酸继续氧化成CO2和水
可生产醋酸
7、棒状杆菌 (Corynebacterium)
以葡萄糖为原料发酵产生酸，是谷氨酸和其他氨基酸 的高产菌 生产谷氨酸等 如北京棒杆菌AS1.299钝齿棒杆菌AS1.542
可生产乳酸
干酪的成熟、乳脂的酸化和腌菜、泡菜制作
4、丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutyleum)
芽孢卵形，中生或次端生，使芽孢囊膨大成梭状 或鼓槌形 专性厌氧 发酵生产丙酮丁醇
5、肠膜状明串珠菌 (Leuconostoc mesenteroides)
G+、微需氧至兼性厌氧，生长需要缬氨酸和谷氨酸 在蔗糖液中形成特征性葡聚糖黏液（20~25ºC促使形成） 可生产葡聚糖
中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）表达系统
3、食品酶制剂生产有关的微生物
开发一个新酶，都要经过一系列研究的毒理试验。关于 食品用酶，美国需要得到FDA的批准。目前已同意使用的 仅仅少数微生物能用于生产食品用酶。
百度文库
α—淀粉酶：黑曲霉、米曲霉、米根酶、枯草牙孢杆菌 和地衣牙孢杆菌
4、常用的基因表达系统
(一)原核生物：大肠杆菌(1977年Boyer)、枯草牙胞杆菌 沙门氏菌
展开青霉 ( P. patulum )： 又名寻麻青霉，主要用于生产灰黄霉素（一种 有效的可口服抗生素，用于治疗真菌性皮肤病、痢 疾及灰指甲） 橘青霉 ( P. citrinum ) : 许多菌系可产生橘霉素，也能产生脂肪酶、葡 萄糖氧化酶和凝乳酶 有的菌系产生5`-磷酸二酯酶，可用它生产5`核苷酸 （肌苷酸和鸟苷酸具有很强的助鲜作用）
4、青霉 ( Penicillum )
产黄青霉 ( Penicillum chrysogenum ) 生产青霉素，也可用来生产葡萄 糖氧化酶、葡萄糖酸、柠檬酸和抗坏 血酸
娄地青霉 ( Penicillum roqueforti )
属不对称青霉组，具有分解油 脂和蛋白质的能力，可用于制造干 酪；该菌孢子能将甘油三酯氧化为 甲基酮
1.微生物的特性及工业微生物的要求 2.发酵工业常用的微生物 3.一些工业化产品生产菌种的特点

4.自然界中有目的微生物分离的原则 5.菌种选育、分子育种

1.微生物的特性 2.发酵工业对微生物菌种的要求
尽管工业用微生物菌种多种多样，但作为大规模生 产，选择菌种应遵循以下原则：
1、能在廉价原料制成的培养基上迅速生长， 并形成所需的代谢产物，产量高。 2、可以在易于控制的培养条件下迅速生长 和发酵，且所需酶活力高。
5、白地霉 ( Geotrichum candidum )
节孢子单个或连接成链 白地霉菌体蛋白营养价值很高，可供食用和饲 料用，也可用来提取核酸，在废料废水的利用上很 有价值
6、产黄头孢霉 ( Cephalosporium chrysogen ) 头孢霉素、先锋霉素 营养菌丝分隔； 分生孢子梗短，大多从 气丝上生出； 分生孢子从顶端长出后 推至侧旁，靠黏液连成 假头状，遇水散开
第三组 长宽比大于2
耐高渗透压，供发酵甘蔗糖蜜生产酒精用
啤酒酵母在液体培养基中的生长行为有两类：
上面酵母——发酵度较高，不易凝集沉淀，浮于上面 下面酵母——发酵度较低，易凝集沉淀
啤酒酵母的应用非常广，常用于传统的发酵行业， 如啤酒、白酒、果酒、酒精、药用酵母、面包制作， 故又称酿酒酵母。
近年来，利用啤酒酵母提取核酸、麦角固醇、细 胞色素C、凝血质和辅酶A等；生产单细胞蛋白 (SCP)可食用、药用和作为饲料；它的转化酶可用 于转化蔗糖，制造酒心巧克力。
10、假单胞菌 (Pseudomonas)
能发酵生产维生素B12、丙氨酸、谷氨酸、葡萄 糖酸、色素、果胶酶；也能进行类固醇（甾体） 转化；有些菌株可利用烃类生产单细胞蛋白。
（二） 放线菌
因其菌落呈放射状而得名
属原核微生物类群，在自 然界中分布很广，尤其在 有机质丰富的微碱性土壤 中较多。
大多腐生，少数寄生。 产生多种抗生素（12 000 余种，60%左右来自放线 菌），经济价值大

3、根据代谢控制的要求，选择单产高的营 养缺陷型突变株或调节突变株或野生菌株。 4、选育抗噬菌体能力强的菌株，使其不易 感染噬菌体。 5、菌种纯粹，不易变异退化，以保证发酵 生产和产品质量的稳定性。 6、菌种不是病原菌，不产生有害的生物活 性物质和毒素，以保证安全。

（一） 细菌 （二） 放线菌 （三）酵母菌 （四）霉菌
生长迅速、蛋白产量高; 表达蛋白的纯化、分离及分析快速； 外源基因的导入相对容易； 已建立了整套表达理论及技术.
(二) 真核细胞表达系统
酵母(既是微生物又是真核细胞)
生长迅速，营养要求不高，易培养； 安全性好； 比哺乳动物细胞操作简单； 具有一定的修饰蛋白的能力。
2、葡萄汁酵母 (Saccharomyces uvarum) 与酿酒酵母相似，主要的区别在于葡萄汁酵母能发酵 棉子糖和蜜二糖 葡萄汁酵母常用于啤酒酿造的底层发酵，也可食用、 药用或作饲料。 3、汉逊酵母 (Hansenula) 此属酵母多能产生乙酸乙酯，从而增加产品的香 味，可用于酿酒和食品工业。 但由于它能利用酒精作碳源，又能在饮料表面产 生干皱的菌膜，所以又是酒精生产的有害菌。
可制作豆豉
3、曲霉 ( Aspergillus )
米曲霉 ( Aspergillus oryzae )
有较强的蛋白分解能力，同时又具有糖化能力
酿酒中的糖化菌；蛋白酶和淀粉酶的生产菌
黑曲霉 ( Aspergillus niger )
◇具有多种强大的酶系，如淀粉酶、蛋白酶、果 胶酶、纤维素酶和葡萄糖氧化酶等； ◇还能产生多种有机酸，如抗坏血酸、柠檬酸、 葡萄糖酸和没食子酸等 ◇是生产柠檬酸和葡萄糖酸的重要菌种