蜂蜜蔗糖含量的检测方法
蜂蜜中果糖_葡萄糖_蔗糖_麦芽糖含量的测定_陈永
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蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定
文 ／ 陈永 徐宁
【摘 要 】 以 乙 腈 水 溶 液 对 蜂 蜜 进 行 预 处 理 ， 用 ＨＰＬＣ 法 测 定 处 理 后 样 品 溶 液 中 果 糖 、葡 萄 糖 、蔗 糖 、麦 芽 糖 的 含 量 。方 法 加 标 回 收 率 为 ９６． ３％－ １０４． ３％， ６ 次 测 定 的 Ｒ ＳＤ （ ｎ ＝ ６ ） 小 于 ３． ３５％。方 法 操 作 方 便 ， 分 析 速 度 快 ， 结果准确。 【关 键 词 】 高 效 液 相 色 谱 蜂 蜜 果 糖 葡 萄 糖 蔗 糖 麦 芽 糖
表 ３ 分析结果与精密度试验（ ｎ＝６）
表 ４ 中 的 检 出 限 按 公 式 ρＬ＝ ３Ｓｂ ／ Ｓ ［３ ］ 计 算 ， 其 中 ： Ｓｂ 为 空 白 测 量的标准偏差； Ｓ 为灵敏度， 即校正曲线的斜率。
３．３ 精密度试验 对样品进行 ６ 次分析测定， 计算相对标准偏差， 结果如表 ３ 所 示。 ３．４ 标准加入回收试验 在预处理之前， 将一定量的标准溶液加入到样品中， 按选定的方 法 进 行 预 处 理 ， 测 定 样 品 中 的 果 糖 、葡 萄 糖 、蔗 糖 、麦 芽 糖 含 量 ， 作 回 收试验， 计算回收率， 结果如表 ４ 所示。
１ 引言
目 前 ， 国 家 标 准 对 蜂 蜜 中 果 糖 、葡 萄 糖 、蔗 糖 、麦 芽 糖 的 检 测 方
法 是 液 相 色 谱 示 差 折 光 检 测 法 ［１］。 本 文 采 用 高 效 液 相 色 谱 蒸 发 光
散 射 检 测 方 法 ［２］对 蜂 蜜 进 行 检 测 ； 其 方 法 与 国 标 检 验 方 法 比 较 ， 具
高效液相色谱示差法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖
2.1 样品在纯水溶液中测定的结果分析
对同一样品分别取出 0.5~3 g，然 后用纯水定容至刻度，测验结果见表 1。
从表 1 的数据可以看出，利用水 当溶剂是非常可取的，因为可以避免 溶液出现分离现象，如果溶液分离可 能会导致提取不彻底。利用水当溶剂 来提取这三种糖类，测定的结果具有 稳定性。
35.40
0.59
33.79
0.84
1.27
2.42
6
3.0041
35.89
0.79
33.80
0.87
1.26
1.61
要两种融合剂：乙腈和去纯水。值得 注意的是，这里的水是去离子水，是 反渗透去离子水纯水机制造出来的。 1.2 实验仪器
该 实 验 用 到 的 实 验 仪 器 有 26952414 型高效液相色谱仪、碳水化合物 分析柱、RO DI 型反渗透去离子纯水机。 1.3 测定方法
85 May 2019 CHINA FOOD SAFETY Copyright©博看网 . All 用高效液相色谱示 差法来对蜂蜜中的葡萄糖、果糖和蔗 糖进行测定，通过实验对比，笔者发 现将样品溶于水之后，再用乙腈进行 定容，既能快速提取蜂蜜中的这三种 糖类物质，又能保证数据的准确性。 参考文献
[1] 屠振华 , 朱大洲 , 籍保平 , 等． 蜂蜜中果糖和葡萄糖近红外检测的差 异性分析及优化研究 [J]．分析化学研 究报告 ,2010,38(1):45-50．
[2] 饶震红 , 李民赞 , 吉海彦．短波 近红外光谱法同时定量分析水溶液中 葡萄糖、果糖和蔗糖 [J]．光谱学与光 谱分析 ,2006,26(4):633-635．
作 者 简 介： 张 锐 波（1986—）， 男，广东潮州人，本科，助理工程师。 研究方向：污染元素及营养元素、食 品中糖类的测定。
蜂蜜掺假掺杂的快速检验法(五种)
一、蜜蜂中掺水的检验方法
取蜂蜜数滴，滴在滤纸上，优质的蜂蜜含水量低，所以滴落后不含很快浸渗入滤纸中；掺水的蜂蜜地落后很快浸透、消散。
二、蜂蜜中掺蔗糖的检验方法
1、物理检验
将样蜜少许置于玻璃板上，用强烈日光暴晒（或用电吹风吹），，掺有蔗糖的蜜会因为糖浆结晶而成为坚硬的板结块；纯蜂蜜仍呈粘稠状、
四、蜂蜜中掺了羟甲基纤维素钠的检验
取样蜜10g，加20ml95%乙醇，充分搅拌10分钟，即析出白色絮状沉淀物，取白色沉淀物2g，置于100ml温热蒸馏水中，搅拌均匀，放冷备检。
取上清液30ml，加入3ml盐酸后产生白色沉淀。
取上清液50ml，加入100ml1%硫酸铜溶液后产生绒毛状淡蓝色沉淀。
若上述两项试验皆呈阳性结果，则说明有羧甲基纤维素钠掺入。
五、蜂蜜中掺尿素的检验方法
取样蜜1份加水4份稀释，加热煮沸即可闻到氨味；用湿润的广泛PH值试纸置溶液蒸汽上，若试纸变蓝则说明掺有尿素。
2、化学检验
取样蜜1份加4份水，充分振荡搅拌，若有混浊或沉淀，滴加2滴1%的硝酸银溶液，有絮状物产生者，证明事掺入了蔗糖的蜜。
三、蜂蜜中掺淀粉的检验方法
取样蜜5毫升，加20毫升蒸馏水稀释，煮沸后放冷，加入碘试剂2滴。
如出现蓝色或蓝紫色则可认为掺入了淀粉类物质；如呈现红色，则可认为掺有糊精；若保持黄褐色不变，则说明蜂蜜纯净。
HPLC-RID法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖含量
分析检测HPLC-RID法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖含量赵 芳（晋中市综合检验检测中心，山西晋中 030600）摘 要：建立了高效液相色谱-示差折光检测法（High Performance Liquid Chromatography Differential Refractive Detector，HPLC-RID）测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖5种还原糖含量的分析方法。
蜂蜜试样用水提取，摇匀过滤后，经Kromasil 100-5-NH2色谱柱分离，用示差折光检测器测定。
结果表明，果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖在1.0～10.0 mg/mL线性关系良好，5种还原糖的方法检出限均为0.5 g/100 g，加标回收率为82.4%～109.7%，相对标准偏差RSD为0.87%～3.77%。
该方法前处理过程简单、准确度高、精密度好，适用于蜂蜜中5种还原糖的定量检测。
关键词：蜂蜜；还原糖；高效液相色谱-示差折光检测器法Determination of Fructose, Glucose, Sucrose, Maltose andLactosein Honey by HPLC-RIDZHAO Fang(Jinzhong General Inspection and Testing Centre, Jinzhong 030600, China) Abstract: The method was established for the determination of fructose, glucose, sucrose, maltose and lactose in honey by HPLC-RID. Honey samples were extracted with water, shaken and filtered, separated by Kromasil 100-5-NH2 chromatographic column and determined by differential refractive detector. The results showed that the linear relationship among fructose, glucose, sucrose, maltose and lactose was good in the concentration range of 1.0～10.0 mg/mL. The detection limits of the five reducing sugars were 0.5 g/100 g, the spiked recoveries were 82.4%～109.7%, and the relative standard deviation RSD was 0.87%～3.77%. The method has the advantages of simple pretreatment process, high accuracy and good precision. It is suitable for the quantitative determination of the above five reducing sugars in honey.Keywords: honey; reducing sugar; high performance liquid chromatography differential refractive detector蜂蜜中富含多种糖类、氨基酸、维生素等营养成分，清甜爽口、老少皆宜，饮用蜂蜜具有缓解疲劳、有益身体健康和抗菌消炎、保养皮肤的功效[1-3]。
东北新采收椴树蜜蔗糖含量的检测方法
（以下品种除外：紫花苜蓿蜜、柑桔蜜、刺槐蜜、赤桉 树蜜等：≤１０９／１００９；薰衣草蜜、紫草蜜：≤１５∥ １００９）；国外《食品法典》蜂蜜标准（２００１年修订）中 规定蔗糖含量一般蜂蜜≤５ ｇ，１００９（以下品种除外： 紫花苜蓿蜜、柑桔蜜、刺槐蜜、赤按树蜜、法国忍冬 蜜≤１０９，１００９；薰衣草蜜、紫革蜜：≤１５｛；／１００９）。 东北新采收的椴树蜜蔗糖含量大多在１０％以 上，有的甚至高达２０％以上，１０％以下的很少，符合 检测标准（≤５％）的就更少，被确定为不合格产品， 甚至被认为是掺假产品（掺蔗糖）。根据经验，新采 收的蔗糖含量高的椴树蜜贮存一个月后蔗糖的含 量会降下来，并且存放时间越长，降得越多。为了在 收购短时间内能够检测出椴树蜜是否纯正，采取以 方法，达到预期的效果。 一、材料与方法 １、试验材料：在牡丹江市郊区、海林市、穆棱
含量≤８％；中华人民共和国国家标准一蜂蜜
（ＧＢｌ８７９６—２００５）规定一般蔗糖含量≤５％（桉树蜂 蜜、柑橘蜂蜜、紫苜蓿蜂蜜：≤１０％）；联合国粮农组 织／世界卫生组织食品法典委员会蜂蜜标准（２００１ 年修订版）中规定一般蜂蜜蔗糖含量≤５ ｇ，１００
ｇ
对照幕彝迂海林市穆棱县宁安市林口县
摇出刚封盖蜜
处理２４小时 处理４８小时 处理７２小时 处理９６小时
蜜是否掺假。
万方数据
东北新采收椴树蜜蔗糖含量的检测方法
作者： 作者单位： 刊名： 英文刊名： 年，卷(期)： 李凤玉， 于晓凤 李凤玉(黑龙江农业经济职业学院)， 于晓凤(黑龙汀林口县技术推广中心) 中国蜂业 APICULTURE OF CHINA 2008,59(10)
高效液相色谱蒸发光散射法同时测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖
Ａｍｉｄｅ色谱柱
光检测器（ＲＩＤ）进行测定。但示差折光检测器依据
折射率的变化对样品进行检测，极易受温度、流动相
（４．６ ｍｍ×２５０ ｍｍ，３．５肚ｍ），柱温３５℃，进样量
２０肚Ｌ；流动相为含０．１％（体积分数，下同）氨水的
乙腈溶液，流量１ ｍＬ・ｍｉｎ～。梯度洗脱：０～
４．０
梯度等条件的影响，导致谱图基线漂移，灵敏度偏
ＧＢ／Ｔ １８９３２．２２—２００３［９］中采用液相色谱配示差折
ｇ，用水溶解并定容至１００
ｍＩ。。
使用时用乙腈一水（７０＋３０）溶液稀释至所需质量
浓度。
乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，流
动相过０．４５ ｆｆｍ滤膜后使用。 试验用水为超纯水。 １．２仪器工作条件
１）色谱条件Ｗａｔｅｒｓ
Ｘｂｒｉｄｇｅ
试液５．００ ｍＬ，用乙腈（７０＋３０）溶液稀释至
１００
ｍＬ，经０．４５ ｆｆｍ针式滤头过滤后，在仪器工作
收稿日期：２０１４一１１一０７
・１３３０・
条件下进行测定。
万方数据
蔗糖
２结果与讨论
２．１色谱条件的选择
２．１．１
６
『Ｉ麦芽糖
色谱柱
由于果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖等４种糖具有 较强的极性，在Ｃ。ｓ等反相色谱柱上几乎无保留，因 此，试验使用Ｗａｔｅｒｓ
ａｎｄ
ｒｅｃｏｖｅｒｙ
［７］余娜，周光明，朱娟．离子色谱法检测蜂蜜和葡萄酒中
的蔗糖、葡萄糖和果糖［Ｊ］．食品科学，２０１０，３１（１６）：
１８８—１９１．
［８］张磊，周光明，张丽君，等．离子色谱法测定鲜果和干果 中的三种糖［Ｊ］．四川大学学报：自然科学版，２０１４，５１
（４）：７９１—７９６．
HPLC-ELSD法测定蜂蜜中四种糖含量
蜂蜜购于超市 。果糖、 葡萄糖 、 麦芽糖 、 蔗糖标 准试剂（ 国家标物 中心购买纯度 Ｉ ＞９ ６ ％） ， 乙腈 （ 色 谱纯 ， 迪马公司） ， 超纯水 （ 现制备现用， Ｍ ｉ ｌ ｌ ｉ —Ｑ纯
水机 ） 。
１ ． ２ 仪器 设备
中图分 类号 ： ０ ６ ５ ７ ． ３
蜂 蜜作 为 中 国的传 统食 品 ， 一 直被 人们所 喜爱 。 目前世 界 上 蜂 蜜 的消 耗量 在 １ ０ ０万 ｔ 左右 ， 中 国 每
１ ． ３ ． １ 各 种溶 液的 配制
４种糖 标准 储 备液 ： 分别称取 ０ ． ２ ５ ｇ精 确 至 浆标准品于 ２ ５ ｍ Ｌ的容量瓶 中， 加水溶解定容 至刻 度。得 １ ０ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ的四种糖标准储备液。
第３ ０卷 第 ７期 ２ ０ １ ４年 ４月
Ｇａ ｎｓ ｕ Ｓ ｃ ｉ ｅ 甘肃科 ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ 技 Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
． ３ ０ Ｎｏ ． ７
Ａ ｐｒ ． ２ ０１ ４
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ—Ｅ Ｌ Ｓ Ｄ法 测定 蜂 蜜 中 四种 糖 含 量
１ ２ ６ ０型高 效液 相色谱仪 （ 美 国安捷伦 公司 ） 、
３ ３ ０ ０型蒸 发光 散 射 检 测 器 （ Ａ Ｌ Ｌ ｔ ｅ ｃ ｈ格 雷 斯 中 国有 限公 司 ） 、十万 分 之一 天平 。
１ ． ３ 方法
将１ ． ３ ． ３ 制备好 的蜂蜜样品 ， 按照 １ ． ３ ． ２节的 条件洗进行设置色谱条件 ， 谱 图如图 １ 所示 。 结果 表 明 ， 样 品 中四种糖 能 够得 到很好 的分离 ， 色谱图基线稳定。增益对其结果影 响较小 。
蜂蜜中糖分的检测
摘要 ： 蜂蜜 中主要成分是糖类 ， 中以单糖如葡萄糖和果糖为主 ， 其 还有双
４＿ 测 定 ２
４３ 结 果计 算 Ｘ１ ０ ／ １ １ ０ ． ＝Ｔ ８ ０（ Ｖ ） ０ ｍ
蜂 蜜 中糖 分 的检
徐善 佳 （ 城市 蜂蜜 有限 盐 花美 制品 公司）
６ Ｔ Ｃ检 测 蜂 蜜 中糖 Ｌ ６１ 活 性 炭 柱 和 样 品 前 处 理 采 用 ＧＢ １ ９ ２２ ２ ０ ． Ｆ ８ ３ ．— ０ ２规 定 方 糖 类 都 具 有 还原 性 ， 们 在 一 定 条件 下 容 易 被 氧 化 ， 以 测 定 蜂 蜜 中 还 原 糖 法 ， 后 用 １ ｍ『 它 所 最 ５ 乙醇 （ １：１ 分 ３次 洗涤 蒸 干 的茄 形 瓶 ， 脱 液 收集 ） 洗 含 量 可 以 了解 蜂 蜜 的品 质 状 况 。 我 国 蜂 蜜 的 蔗 糖 含 量 一般 低 于 ５ ， 据 这 于 小 茄 形 瓶 ， ８ ℃ 水 浴 中蒸 干 ， ０１ 蒸 馏 水 于 小 茄 形 瓶 ， 解 ％ 根 在 Ｏ 加 ．ｍｌ 溶 个 指 标 可 以 鉴 定 蜂 蜜 中是 否 掺 入 蔗糖 或 是 完 全 不 成 熟 的蜂 蜜 。 薄 层 色 谱 法 溶 出 物 ， 为薄 层 层 析 用 点 样 液 。 作 （ Ｌ 定 性 检 测蜂 蜜 是 否 掺 入 高果 糖 浆 ， 出 限 为 ５ 。 Ｔ Ｃ） 检 ％ ６２ 蜂 蜜 Ｔ Ｃ 条 件 如 下 普 通 硅 胶 Ｇ 薄 层 板 使 用 之 前 放 入 ． Ｌ 关键词 ： 还原糖 葡萄糖 果糖 蔗糖 薄层 色谱 １ ０Ｃ 箱 中活 化 １ 。 。烘 １ ｈ １概 述 展 开 剂 ： 丁醇 ：乙酸 ： ：２ ： 正 水 １：１ 。 蜂 蜜 是 一 种 高 浓 度 复 杂 的 糖 类 混 合 物 ，主 要 成 分是 葡 萄糖 、 果 ６３ 薄层 板 显 色 将 薄 层 板 放展 开 槽 中 ，按 倾 斜 上 行 法 展 开 ， ． 当 糖 、 糖 、 分 等 ， 常 我 们 检 测 上 述糖 类 指 标 ， 蜂 蜜 中是 否 掺 入 高 蔗 水 通 对 展 开 剂 前 沿 到 达 薄层 板 顶端 时 ， 展 开 槽 中 取 出 薄层 板 ， 吹 风机 把 从 用 果糖 浆 就 用 Ｔ Ｃ 方 法 检 测 。 Ｌ 展 开 剂 完 全 吹 散 后 ，均 匀 喷 上显 色 剂 ，等 显 色 剂 完 全 蒸 发 后 ，放 入 ２ 试剂和仪器设 备 ９ ℃烘 箱 中烘 １ ３ ５分 钟 使 显 色 ， 出 。 取 ２１ 试 剂 ａ１ 铁 氰 化 钾 溶 液 、 ．Ｏ Ｎ ＯＨ Ｃ３ ％ Ｎ ＯＨ ｄ ． ．％ ｂ１ ％ ａ 、 ．０ ａ 、． 如 图 １ 最 右 边 试 样 是 混 有 ５ 高 果糖 浆 的纯 蜂 蜜 作 为 对 照 ， ， ％ 最 ５ ％Ｎａ ＯＨ、 ．％ 次 甲基 蓝 、． 酞 指 示剂 。 ｅ１ ｆ 酚 左 边 纯 蜂 蜜 只 在 Ｒ 值 ０３ ｆ ．５以 上 区 域 有 ２—３个 蓝 色 中 带灰 色 或 咖 ２２ 仪器 和 设 备 碱 式滴 定 管 、 普 通 硅 胶 Ｇ 薄 层 板 、 薄 层 层 析 ＿ 啡 色 斑 点 ， 他 试 样 在 原 点 和 Ｒ 值 ０３ 其 ｆ ．５之 间 出 现 蓝 色 带 状 斑 点 群 ， 缸 、 箱 、 量进 样 器 、 贝折 光 仪 。 烘 微 阿 与 掺 有 高 果 糖 浆 的 蜂 蜜 对 照样 相 比 ， 定 为 阳性 ， 明 此 试样 蜂 蜜 掺 判 说 ３ 还 原 糖 测 定 有 高 果 糖 浆 ， 且 掺 入 比例 超 过 ５ 。 而 ％ ３１ 试 样 制 备 称 取 蜂 蜜 样 品 １ ， 水 定 容 至 ２ ０ ， 到 样 液 ． ｇ用 ０ ｍｌ 得 Ｓ ， 取 Ｓ ５ 定 容至 １ Ｏ ， 到 转化 前还 原 糖 待 测 液 Ｓ 。 １吸 １２ ｍＩ Ｏ ｍＩ得 ２ ３２ 测 定 吸 取 １ ｍＩ 氰 化 钾 溶 液 和 ２５ Ｏ Ｎ ０Ｈ 置 于 ． ０ 铁 ．ｍＩ１ ％ ａ 锥 形 瓶 中 ， 水 １ ．ｍＩ 几 粒 玻 璃 珠 ， 滴 定 管 中放 入 较 预 滴 定 时 加 ２５ 和 从 所 耗 量 少 Ｏ２ ．ｍＩ 液 Ｓ ，置 石 棉 网上 将 溶 液 迅 速 煮 沸 并 继 续 ． ～０３ 样 ２ 沸 腾 ３ ｓ 加 １滴 次 甲基 蓝 ， 即 用 样 液 趁 沸 滴 定 至 蓝 色 消 失 为止 ， ０， 立 记 下 所 耗 样 液 毫 升 数 Ｖ１ 。 ４ 蔗 糖 测 定 图 １ ４１ 样 液 制 备 吸 取 制 备 好 样 液 Ｓ ２ ｍｌ １ ０ 容 量 瓶 中 ， ． １ ５ 于 ０ ｍｌ ７ 结果 和 讨 论 加 ２ ｍｌ 和 ５ 浓 盐 酸 ， 于 ７ ℃ 水 浴 中 １ ５ 水 ｍｆ 置 ０ Ｏ分钟 ， 出置 流 水 下 取 化 学 滴 定 法 测 定 蜂 蜜 中 糖 分 ： 种 蜂 蜜 和 两 种糖 浆 的水 分 、 原 两 还 冷 却 至 ２ ｏ 加 入 ７ ０ Ｎ ＯＨ， ５ Ｎ ＯＨ 中和 至 微碱 性 ， ０Ｃ， ｍｌ ％ ａ ３ 用 ％ ａ 定 糖 、 糖 、 萄 糖 、 蔗 葡 果糖 含 量 如 表 １ 容 至 １ ０ ， 到 转化 后 还 原 糖 待 测 液 Ｓ 。 ｍｌ ０ 得 ３ 表 １ 蜂蜜 中糖分含量
市售蜂蜜中糖类成分含量的快速测定
ａ ： 蜂博士牌洋槐 花蜂蜜 ， 购于时代超市 ， 棕色、 无结晶 ； ｂ ：
葡萄糖浓 度 （ Ｙ ） 绘 制 标准 曲线 ， 获 得线 性 回归方 程 为 ｙ＝ ０ ． ０ ０ ７ ｘ （ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ７ ） ， 葡萄糖浓度 在 ０— ８ ｏ ， ｇ ／ ｍ Ｌ范围 内吸
蔗糖 旋 光 度 分 别 为 ： 蔗糖 ［ ］ 。 ２ ０： ＋６ ６ ． ６ ０ 。 ， Ｄ一 葡 萄 糖
［ ］ ２ 。 ０ ＝＋ ５ ２ ． ５ ０ 。 ， Ｄ一果 糖 ［ ］ 。 ２ ０＝一９ １ ． ９ 。 ， 旋光度 有加 合 性， 其数值与糖分含量里线性关 系。 蜂蜜水解前旋 光度 ． 与蔗糖 、 葡萄糖和果 糖含量关 系 ： ｏ 【 ＝ ５ ２ ． ５ Ｘ＋６ ６ ． ６ Ｙ 一 ９ １ ． ９ Ｚ； 蜂蜜 完全 水解后旋光度 ２ 与蔗 糖、 葡萄糖和果 糖含 量 关系 ： ：＝ ５ ２ ． ５（ ＋Ｙ ）一９ １ ． ９ （ Ｙ＋ ｚ ） ， 总糖含量 Ｇ和葡萄糖 含量 、 蔗糖含量 ｙ和果糖含 量 ｚ
蜂蜜具有较高的营养价值 和药 用价值 ， 被 广泛应用在 中
成药和食品中。蜂蜜组成 成分 复杂 ， 可检 出成分 在 ２ ０种 以 上 ， 其 中蔗糖 、 葡 萄糖 和果 糖 占６ ５ ％ 一８ ０ ％， 为蜂蜜 的主
１ ． ３
试 验 原理 及 数 据 处理
蜂蜜 中蔗糖被稀酸水解 ， 产生等 量的 Ｄ～葡萄糖 和 Ｄ一
（ 南京理工大学泰 州科技学院化工学 院， 江苏泰州 ２ ２ ５ ３ ０ ０ ）
摘要 ： 采用硫酸 一 苯酚法测定蜂蜜总糖含量 ， 利用旋光度法测定蜂蜜水解前后旋光度 ， 并计算蜂蜜 中葡萄糖 、 果糖
和蔗糖 含 量 。结 果 表 明 ， １ ０种 蜂 蜜 总 糖 含 量 为 ６ ６ ． ２ ８ ％ ～９ ３ ． ７ １ ％ 之间， 蔗糖含量在 １ ． ３ ７ ％ 一２ ． ５ ５ ％， 都 符 合
液相色谱法蜂蜜含量检测方案（依据2015版中国药典）
液相色谱法蜂蜜含量检测方案（依据2015版中国药典）明朝李时珍的《本草纲目》这样记载蜂蜜的功效：清热也、补中也、润燥也，解毒也、止痛也。
蜂蜜在很多中成药药丸中，都是以辅料的形式出现，为了便于成型，再就是做药引，蜂蜜有很大的药用价值的。
蜂蜜的药用价值非常广泛，不仅只体现在中成药这一块，蜂蜜对肝炎、肺结核、失眠、神经衰弱、胃肠疾病都有很好的辅助治疗作用。
检测标准AUPOS液相色谱应用实验室依照2015版《中国药典》一部中蜂蜜样品进行检测，对蜂蜜样品中果糖、蔗糖、葡萄糖、和麦芽糖的含量做出详细应用方案。
溶液配制供试品溶液：取蜂蜜样品约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
系列对照品溶液：分别精密称取果糖对照品1.0g,葡萄糖对照品0.8g,置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖，葡萄糖对照品储备液。
另精密称取蔗糖对照品0.2g，麦芽糖对照品0.2g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，摇匀，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。
分别精密量取果糖，葡萄糖对照品储备和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加40%乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、麦芽糖混合对照品溶液。
每一浓度溶液配制中，储备液的用量和稀释体积见下表：色谱条件仪器：APS80-16PLUS智能液相色谱仪流动相：乙腈：水=75：25（V/V）流速：1.0ml/min柱温：30℃检测器：示差（40℃）进样量：15ul测试图谱及结果评价图1：系列浓度对照品溶液叠加图表1：拟合曲线方程图2：供试品溶液图谱：图3：供试品溶液连续进样三针叠加图谱对蜂蜜样品供试品测试结果显示结论：在药典色谱条件下，APS-80-16PLUS智能液相色谱系统，采用APS-Hon-Sugar色谱柱（蜂蜜专用柱）的分离过程中，对果糖、蔗糖、葡萄糖、和麦芽糖的混合对照品溶液测定，绘制标准曲线，得回归方程，回归系数R²>0.99,完全符合药典对于四种糖准确定量的要求。
[最新]蜂蜜中掺假的检测
![[最新]蜂蜜中掺假的检测](https://img.taocdn.com/s3/m/cac78ed19fc3d5bbfd0a79563c1ec5da50e2d688.png)
蜂蜜中掺假的检验在食品的各类掺假活动中，蜂蜜及其制品的掺假是较为严重的现象之一。
蜂蜜中常见的掺假物有饴糖、蔗糖、转化糖、糊精、食盐等。
一、实验目的：1、了解蜂蜜中常见的掺假物的种类。
2、掌握检测蜂蜜中掺假物的方法。
二、实验步骤：1、蜂蜜中掺蔗糖人为将蔗糖熬成浆状掺入蜂蜜中出售是最常见的掺假现象，其特点是色泽鲜艳明亮，多为浅黄色，味淡，回味短，有一种糖浆味。
硝酸银快速检验法取蜜样2份（各1g）分别置于二支试管中，各加水4mL、混匀。
其中A试管加2%AgNO3溶液2滴，B试管加1% AgNO3溶液2滴，观察有无白色絮状物产生。
判断：A管如有白色絮状物产生，蔗糖含量疑为1%以上；B管如有白色絮状物产生，蔗糖含量疑为4%以上。
2、蜂蜜中掺人工转化糖蔗糖在稀酸作用下可转化为含葡萄糖和果糖的糖浆，俗称转化糖浆或果葡糖浆。
掺有人工转化糖浆的蜂蜜稀薄、粘度小，波美度大，可通过检测CL-的存在予以判别。
试验方法：取1g蜜样于试管中，加水5mL混均后，加1-2滴5%AgNO3指示剂，如呈白浊状，疑掺有人工转化糖（与正常蜂蜜对照）。
3、蜂蜜中掺饴糖试验方法：取蜂蜜2mL于试管中，加水5mL，混匀，然后缓缓滴加95%乙醇数滴，观察有无白色絮状物产生。
判别：若出现白色絮状物疑为掺加饴糖，若成浑浊状则说明正常（与正常蜂蜜对照）。
4、蜂蜜中掺淀粉类物质蜂蜜中如掺加有米汤、糊精及淀粉类物质，外观浑浊不透明，蜜味淡薄，用水稀释后溶液浑浊不清。
试验方法：取蜂蜜2g于试管中。
加水10mL。
加热至沸后冷却，加0.1mol/L碘液2滴，观察颜色变化。
同时做正常蜂蜜对比试验。
判别：如有蓝色、蓝紫色或红色出现，疑为掺有淀粉类物质。
5、蜂蜜中掺羧甲基纤维素钠羧甲基纤维素钠（CMC-Na）是一种增稠剂，掺加入蜂蜜后，蜂蜜颜色变深，粘稠度变大。
试验方法：取蜂蜜10g于另一烧杯中，加入95%酒精20mL。
充分搅拌均匀，即有白色絮状物析出，取白色絮状物2g于另一烧杯中，加热水100mL，搅拌均匀，冷却后备用。
蜂蜜快检方法
蜂蜜快检方法
1.蜂蜜中掺水的检验方法
取蜂蜜数滴，滴在滤纸上，优质的蜂蜜含水量低，所以滴落后不会很快浸渗入滤纸中；掺水的蜂蜜地落后很快浸透、消散。
2.蜂蜜中掺蔗糖检验方法
取样蜜1ml加4ml水，充分振荡搅拌，若有混浊或沉淀，滴加数滴1%的硝酸银溶液，有絮状物产生者，证明是掺入了蔗糖的蜜。
3.蜂蜜中掺饴糖检验方法
取蜜2ml于试管中加5ml蒸馏水稀释，混匀，然后缓缓加入95%乙醇数滴，若呈浑浊则说明正常。
4.蜂蜜中掺淀粉检验方法
取蜜5g加入20ml蒸馏水稀释，煮沸后放凉，加入碘试剂（取1-2粒碘溶于1%碘化钾溶液20ml中制成）2滴，如出现蓝色或蓝紫色则掺入了淀粉类物质，如呈现红色，则可认为掺有糊精；若保持黄褐色不变，则说明蜂蜜纯正。
5.蜂蜜中掺羧甲基纤维素钠检验方法
取样蜜10g加20ml95%乙醇，充分搅拌10分钟，即析出白色絮状沉淀物，取白色沉淀物2g置于100ml温热蒸馏水中，搅拌均匀，放冷备检。
取上清液30ml加入3ml盐酸后产生白色沉淀为阳性，取上清液50ml加入100ml硫酸铜产生绒毛状淡蓝色沉淀为阳性。
若上述两项试验皆呈阳性结果，则说明有羧甲基纤维素钠掺入。
6.蜂蜜中掺尿素检验方法
取样蜜5ml加水20ml稀释，加热煮沸，即可闻到氨味；用广泛PH值试纸置溶液蒸汽上，若试纸变蓝则说明掺有尿素。
蜂蜜的化学检验方法
蜂蜜的化学检验方法
蜂蜜的化学检验方法包括以下几个方面：
1. 温度测定：通过温度计或红外线测温仪测定蜂蜜温度，一般在35℃~38℃之间为正常蜂蜜。
2. 水分含量测定：蜂蜜的水分含量一般在17%以下为合格，可以通过干燥法或称量法测定。
3. 甘露醇含量测定：甘露醇是蜂蜜中的主要含量，可以通过比旋光法测定蜂蜜中甘露醇的含量。
4. 糖类含量测定：蜂蜜主要含有葡萄糖、果糖、蔗糖等糖类成分，可以通过高效液相色谱法、比色法等测定。
5. 抗氧化活性测定：蜂蜜具有一定的抗氧化活性，可以通过DPPH自由基清除法、Folin-Ciocalteu法等测定。
6. 微生物检验：可以测定蜂蜜中的菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌等微生物指标，判断蜂蜜是否符合卫生标准。
蜂蜜中蔗糖转化酶的测定
蜂蜜中蔗糖转化酶的测定蜂蜜是一种天然的甜味品，其味道甘甜可口，因此备受人们喜爱。
但是，蜂蜜中所含的蔗糖却对某些人群有一定的影响，特别是糖尿病患者。
因此，了解蜂蜜中蔗糖的含量对于人们选择合适的食物具有重要意义。
为了测定蜂蜜中蔗糖的含量，可以采用蔗糖转化酶测定的方法。
蔗糖转化酶是一种能够将蔗糖分解成葡萄糖和果糖的酶，通过测定其转化蔗糖的速率可以间接测定蜂蜜中蔗糖的含量。
下面是测定蜂蜜中蔗糖转化酶的具体步骤：1. 样品制备：将蜂蜜样品称取一定量加入到试管中，加入适量的缓冲液，并进行适当的稀释。
同时，准备好空白试管作为对照组。
2. 预处理：将试管中的样品放入恒温水浴中，在一定温度下孵育一段时间，使蔗糖转化酶充分发挥作用。
3. 反应停止：加入一定量的酸性溶液（例如硫酸）停止反应，使蔗糖转化酶停止工作。
4. 离心和过滤：将试管中的混合液进行离心，然后使用滤纸过滤，除去其中的固体颗粒。
5. 测定还原糖含量：将过滤后的样品吸取一定量，加入到还原糖测定试剂中，进行比色测定。
根据比色反应的结果，可以间接测定还原糖的含量。
6. 数据处理：根据比色的结果，通过标准曲线或参比溶液来计算蜂蜜中蔗糖的含量。
此外，还可以借助现代化学分析仪器，如高效液相色谱仪（HPLC），进行蔗糖转化酶测定。
HPLC可以在短时间内精确测定蜂蜜中蔗糖、葡萄糖和果糖的含量，提高测定的准确性和效率。
总之，测定蜂蜜中蔗糖转化酶的含量是一项重要的分析工作，对于了解蜂蜜的营养成分以及选择健康食品有重要意义。
在实际操作中，可以根据实验室条件和需求选择适合的方法进行测定。
同时，需要注意样品的处理和数据的分析，以确保测定结果的准确性和可靠性。
蜂蜜蔗糖检测实验报告
一、实验目的1. 了解蜂蜜蔗糖检测的基本原理和方法。
2. 掌握蜂蜜中蔗糖含量的测定技术。
3. 评估蜂蜜产品的质量，为消费者提供科学依据。
二、实验原理蜂蜜的主要成分是果糖和葡萄糖，两者含量合计约占70%。
蜂蜜中的蔗糖含量较低，但有时由于加工或储存不当，蜂蜜中可能含有较多的蔗糖。
本实验采用蒽酮比色法检测蜂蜜中的蔗糖含量。
蒽酮比色法是一种常用的定量分析方法，其原理是：在酸性条件下，蒽酮与蔗糖发生显色反应，生成深蓝色复合物。
通过测量该复合物的吸光度，可以计算出蜂蜜中蔗糖的含量。
三、实验器材1. 电子天平2. 移液器3. 烧杯4. 试管5. 比色计6. 蜂蜜样品7. 蔗糖标准溶液8. 蒽酮试剂9. 醋酸溶液四、实验步骤1. 样品制备：取蜂蜜样品5g，加入50ml蒸馏水，搅拌均匀，静置10分钟。
2. 标准曲线制作：取6个试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml蔗糖标准溶液，再分别加入5ml蒽酮试剂和5ml醋酸溶液，混匀。
以蒸馏水为空白对照，在波长620nm处测定吸光度，绘制标准曲线。
3. 样品测定：取蜂蜜样品溶液5ml，按照步骤2的方法进行测定，得到吸光度值。
4. 结果计算：根据标准曲线，计算蜂蜜样品中蔗糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：以蔗糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，发现吸光度与蔗糖浓度呈线性关系。
2. 样品测定：蜂蜜样品溶液的吸光度值为X。
3. 结果计算：根据标准曲线，计算出蜂蜜样品中蔗糖的含量为Y。
六、实验结论1. 本实验采用蒽酮比色法成功检测了蜂蜜中的蔗糖含量。
2. 通过对蜂蜜样品的检测，可以评估蜂蜜产品的质量，为消费者提供科学依据。
七、实验注意事项1. 实验过程中应严格控制温度，避免温度对实验结果的影响。
2. 在配制溶液时，应准确称量，确保实验数据的准确性。
3. 实验过程中应避免交叉污染，保证实验结果的可靠性。
八、实验总结本实验通过蒽酮比色法成功检测了蜂蜜中的蔗糖含量，为蜂蜜产品的质量评估提供了科学依据。
20版药典-蜂蜜中糖类物质的检测
峰号 1
保留时间 min 8.114
峰面积 μV*s 178785
2
9.239
161130
3
12.661
97795
4
14.763
53139
*药典要求理论板数按果糖峰计算应不低于 2000。
峰高 μV 15665 8926 5352 2292
理论塔板数* N
5329187
2
9.355
4958434
3
12.771
2020551
4
14.948
1289187
*药典要求理论板数按果糖峰计算应不低于 2000。
样品 A 溶液
峰高 μV 375693 244806 101573 47228
理论塔板数 N
7686.230 4680.131 9592.379 7124.614
11326.208
6203.857
10667.005
9469.679
USP 拖尾因子
1.163 1.228 0.980 1.040
分离度
— 2.908 7.132 3.832
混标中浓度(果糖 20 mg/mL，葡萄糖 16 mg/mL，蔗糖 2 mg/mL，麦芽糖 2 mg/mL)
1. 果糖 2. 葡萄糖 3. 蔗糖 4. 麦芽糖
峰号
保留时间 min
峰面积 μV*s
1
8.114
3485760
2
9.308
3219123
3
12.671
331276
4
14.803
220020
*药典要求理论板数按果糖峰计算应不低于 2000。
蜂蜜中蔗糖含量的快速测定——蜂蜜试剂Ⅰ——比色法
蜂蜜中蔗糖含量的快速测定——蜂蜜试剂Ⅰ——比色法许寿华;郑崇斐
【期刊名称】《福建师大福清分校学报》
【年(卷),期】1986(000)001
【摘要】无
【总页数】5页(P98-102)
【作者】许寿华;郑崇斐
【作者单位】无
【正文语种】中文
【相关文献】
1.不同蜂蜜中果糖·葡糖糖和蔗糖含量的测定 [J], 盛文胜;江军山;王训斌;李树岚;万丹
2.吉林省市售蜂蜜中果糖、葡萄糖以及蔗糖含量的测定及分析 [J], 王婷;赵洋;周欣蕊;金昱言
3.蜂蜜中蔗糖含量快速测定方法的研究 [J], 史满田;史长生
4.蜂蜜中蔗糖含量测定的研究 [J], 刘旭兴;田福林;冯义;徐明泉;杜艳秋;邵文丰;高凤友
5.蜂蜜淀粉酶值快速测定试剂盒的研制 [J], 赵贵明;邓钥;张旭
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蜂蜜蔗糖含量的检测方法
到药店里买一小瓶碘酒（1－2元），用一个一次性的透明茶杯，到入样蜜10－15克，然后倒3－5滴碘酒，搅拌均匀，杯底放上一张干净的白纸，这样就更容易分辨，（见下图）。
5分钟后观察颜色，如颜色和碘酒倒入时一样，则说明该样品蔗糖含量正常（国标GB18796规定蔗糖少于5％），假如颜色逐渐加深，则说明你买的就是蔗糖含量超标的蜂蜜（不合格的蜂蜜）或假蜂蜜，颜色越深说明白糖含量越高，因为白糖中含有淀粉糊精的成分，所以与碘酒会发生反应，此方法适合任何蜂蜜蔗糖含量的检测。