果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较
简述果蝇唾液腺染色体实验目的原理和实验要点。
简述果蝇唾液腺染色体实验目的原理和实验要点。
果蝇唾液腺染色体实验是一种常用的遗传实验方法，用于研究果蝇的遗传特性和染色体结构。
该实验的目的是观察果蝇唾液腺细胞中的染色体，以了解染色体的形态、数量和分布情况，从而推断果蝇的遗传特性。
实验原理：果蝇唾液腺染色体实验是通过染色体的染色特性来观察和分析果蝇的遗传特性。
染色体是细胞核内的遗传物质DNA和蛋白质的复合体，能够在特定条件下被染色剂染色。
在果蝇唾液腺染色体实验中，常用的染色剂有吉姆萨染剂和醋酸乌洛托品等。
实验要点：1. 实验前准备：a. 准备果蝇标本：选择具有特定遗传特性的果蝇品系作为实验对象，确保实验结果的可靠性。
b. 准备染色剂：选择合适的染色剂，如吉姆萨染剂或醋酸乌洛托品，根据实验需要进行稀释。
c. 准备显微镜和载玻片：确保显微镜和载玻片的清洁和正常工作。
2. 实验操作：a. 取一只成熟果蝇，用显微镊子将其固定在载玻片上。
b. 用显微镊子将果蝇的头部剪下，然后用显微镊子将唾液腺取出并放置在载玻片上。
c. 用吸管或滴管滴加适量的染色剂到唾液腺上，使其充分浸润。
d. 将载玻片放置在显微镜下，用适当的倍率观察唾液腺细胞的染色体。
e. 根据观察结果，记录染色体的数量、形态和分布情况。
3. 结果分析：a. 根据观察结果，可以推断果蝇的遗传特性。
例如，如果染色体数量异常或形态异常，可能说明果蝇存在染色体突变。
b. 可以通过比较不同果蝇品系的染色体特征，进一步研究果蝇的遗传规律和染色体结构。
总结：果蝇唾液腺染色体实验是一种常用的遗传实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞中的染色体，可以了解果蝇的遗传特性和染色体结构。
实验的关键是选择合适的果蝇品系和染色剂，以及正确操作显微镜和载玻片。
通过该实验可以推断果蝇的遗传特性，并进一步研究果蝇的遗传规律和染色体结构。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第1页
一、试验目标
1.了解唾腺CS特点 2. 学习分离唾腺技术 3. 掌握唾腺CS制片方法
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第2页
二、试验原理
• 永久间期CS • 复制而不分开 与观察
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果蝇唾腺染色体特点：
• 剥离唾腺置载片中央,加一滴HCl,解离23
• 吸去HCl,冲洗23次,吸干;加1d染液,染色5
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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4. 压片及观察
• 载片置平整处,加盖 片,轻敲;压片
• 低倍至高倍镜检
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第19页
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第20页
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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五、注意事项
1. 水不可太多,不然幼虫会漂浮而且活跃 2. 一定加生理盐水,不然唾腺易干 3. 将脂肪组织去除洁净 4. 吸水时勿将唾腺一起吸走 5. 染色时间不可过长,不然背景也着色 6. 压片时要揉,用力要均匀
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第22页
六、作业
1. 制效果很好唾腺CS暂时片1-2张 2. 真实绘制观察到唾腺CS绘图 3. 思索题P66 1-2
4.Puff结构：幼虫不一样发育期，浓缩染色质纤维会成群解 旋、松开，形成泡状涣散结构，使对应基因得以表示，这 种泡状结构称Puff结构，亦称染色体疏松。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第7页
三、试验材料、器具、药品试剂
• 大果蝇(D. virilis)活体三龄幼虫 • 解剖镜,显微镜,培养箱;培养瓶,
1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um， 长约400um，相当于普通染色体100—150倍，因而又称为巨 大染色体。
果蝇唾腺染色体课件 (一)
果蝇唾腺染色体课件 (一)果蝇唾腺染色体是经典生物学实验的重要材料之一，也是遗传学研究领域的重要工具。
本文将介绍果蝇唾腺染色体课件。
一、什么是果蝇唾腺染色体？果蝇唾腺染色体指的是经过特殊处理的果蝇唾液腺细胞染色体。
由于唾腺细胞具有营养丰富、染色体结构紧密和染色质染色容易的特点，因此成为了研究染色体和遗传学的经典材料。
二、果蝇唾腺染色体课件的主要内容1. 唾腺细胞采集和处理：介绍了唾腺细胞的采集、处理和制备过程。
唾腺细胞应在拟革蝇发育最活跃的阶段采集，制作程度应达到果蝇标准染色体制作要求。
2. 染色质的颜色：染色质颜色的变化显示了不同基因的表达情况及染色体不同区段的相对含量。
应用适当染色穿透后显微镜观察，可以清晰地观察到染色体内大片区域的拓扑结构和染色体中同源染色体的相对排列。
3. 显微镜下的观察：通过显微镜的观察，可以观察到唾腺细胞内的染色体结构和染色体内的色带、粗颗粒等特征。
显微镜下还可以观察到染色体条带间断面的质量，并可根据染色带交叉的情况判断染色体的粗细。
4. 染色体的分类和分析：针对唾腺细胞染色体的颜色、形态、长度、条带模式等特征，进行分类、比对和分析。
其中较为重要的是染色体条带分析，可根据不同条带形态和条带展开程度等，造成重组和修复模式的不同，从而对基因互作和重组进行研究。
三、果蝇唾腺染色体课件的研究意义果蝇唾腺染色体课件作为一种特殊的实验教学材料，具有广泛的应用价值。
它不仅能够帮助学生更好地理解生物学中的染色体遗传学理论，而且能够激发学生的科学兴趣和创新思维。
另外，作为重要的研究工具，它还可以用于研究基因组变异、遗传变异和遗传性疾病等领域。
综上所述，果蝇唾腺染色体课件是生物学研究和教学中的重要工具之一，具有学术认可度和实际应用价值。
通过课件的学习掌握，可以提高学生的科学素养和研究能力，为推进生命科学的不断发展提供智力支持。
实验三 果蝇唾腺染色体制片观察
实验三果蝇唾腺染色体制片观察
一、实验目的
1.练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法
2.观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征
二、实验原理
双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细胞，其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
这是由于细胞停止分裂，而染色体仍不断地进行复制而不分开，形成一千个拷贝以上的染色体丝复合体，称为多线染色体。
这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
三、实验材料
1. 黑腹果蝇三龄幼虫
2. 显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、解剖针、小烧杯
3. 0.7%生理盐水1N盐酸1%醋酸洋红
四、实验步骤
1. 取肥大的三龄幼虫在载玻片上
2. 解剖唾腺：滴加1滴生理盐水，在解剖镜下，左手针按住幼虫后1/3处，右手持针压
住头部向外拉，可将一对半透明的袋状唾腺拉出
3. 酸处理：剥离脂肪体，加1滴1N盐酸1分钟
4. 染色：吸掉盐酸，用水洗净后滴加染料，10分钟后盖片、压片（用力适当）
5. 显微观察（5条长臂+1条短臂）拍照、画图
X,2L,2R,3L,3R
参考照片：。
简介果蝇唾液腺染色体课件
果蝇唾腺染色体的观察
解 剖
生理盐水于载波片 选取三龄幼虫置于生理盐水上 左手持解剖针固定幼虫（压住后端1/3处） 右手按住头部(小黑点) 用力向右拉, 拉开幼虫身体 分离得唾腺（棒状, 且透明）
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺剥离示意图
头部
果蝇唾腺染色体的观察
作业及思考题
什么是染色中心？ 根据你所学的知识，联会应出现在什么类型的细胞中？ 绘制你所观察到的果蝇唾腺染色体图。
三龄幼虫
蛹
果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体的观察
实验步骤
解剖（生理盐水） 染色（15-20min） 压片 镜检
果蝇唾腺染色体的观察
注意事项
1. 一定加生理盐水, 否则唾腺易干。 2. 水不可太多, 否则幼虫会漂浮而且活跃。如水多了, 请再剥离唾腺前吸走些, 唾腺剥离后请勿吸水, 以防将唾腺一起吸走。 3. 清除脂肪组织时要量力而行。 4. 染色液勿过多, 否则压片时唾腺易随染色液漂走。如染色时间到后, 染色液已干, 应再少加些染色液, 再盖上盖波片, 避免气泡产生。 5. 压片时要均匀用力, 轻敲盖片。
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺染色体显微照片
果蝇唾腺染色体的观察
带纹
间带
每一臂上所有的横纹的大小和位置是恒定的，即具有种的特征。 整个唾腺染色体划分为102区。 6个段/区：A-F 。 若干条横纹/段：1、2.3… 。 如3C7表示第三区C段第7条横纹。
果蝇唾腺染色体的观察
示X-染色体分区、段、条
果蝇染色体模式图
2R
2L3R3LFra bibliotekX4
果蝇唾腺染色体的观察
着丝粒
果蝇染色体模式图
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾液腺染色体观察
良苯酚品红染色液；果蝇培养基等。
五 实验方法
1．培养果蝇三龄幼虫 将果蝇放在营养丰富的培养基 中，15℃～18℃下饲养，幼虫要生长肥大，才能获得 较大的唾腺。
培养要求：
①饲料松软，含水量较高，营养丰富，发酵良好 （建议配方：玉米粉10g，红糖13g，琼脂1g，酵 母粉2g，丙酸3～4滴，加蒸馏水100～120ml）。
➢果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞， 其中的染色体是巨大的唾液腺染色体。
➢唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经 过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体 丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相 染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多 线染色体。
➢唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究 的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差 别表达等提供了独特的研究材料。
3．解离 将剥好的唾腺移到载片中央，加一滴1
mol/L HCl于腺体上，解离２～３min，使组织 疏松，以便压片时细胞分散，染色体展开。 4．染色
用吸水纸吸去HCl，加1滴蒸馏水轻轻冲洗 后，小心吸干。加1～2滴改良苯酚品红或其它 染液，染色10～15min。
5．压片
染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片 子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使 盖片移动。）
实验5 果蝇唾腺染色体的观察
一 实验目的 1．练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染 色体标本的方法。 2．了解体细胞染色体联会现象，观察果蝇唾腺 染色体的形态特征，并根据唾腺染色体上横纹的 形态和排列，识别不同的染色体。 3．识别染色体结构变异的细胞学表现。
果蝇唾液腺染色体的制片与观察实验报告
果蝇唾液腺染色体的制片与观察张茜111070094一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。
2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。
3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。
生理盐水、1％醋酸洋红。
四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。
（一对双叉形透明的囊状腺体）。
2、除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3、染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。
4、显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。
果蝇唾液腺染色体制片和观察
实验四果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验目的与要求1.实验目的：理解果蝇巨大染色体产生的原因和特点；掌握果蝇睡腺剥离技术以及果蝇唾腺染色体制片法；观察果蝇睡腺染色体。
2.实验要求：本实验为必做实验。
二、实验类型本实验为验证型实验。
三、实验原理及说明20世纪处，D Kostoff用压片法首先在黑腹果蝇幼虫唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体。
双翅目昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫的睡腺细胞很大，唾液腺染色体比普通染色体大得多，唾液腺染色体经过多次复制不分开，大约有1000-4000根染色线拷贝，称为巨大染色体；具有体联会的特点，即体细胞同源染色体呈配对状态，是前期中一种永久性配对形式，所能观察到的染色体只有半数（n）；多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各异的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如染色体缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾液腺染色体上识别出来，所以果蝇的唾液腺是研究遗传学和基因组学的好材料。
四、实验仪器五、实验内容和步骤1.实验准备：（1）用具：双筒解剖镜,显微镜,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片，滤纸等.（2）药品：醋酸洋红,冰醋酸,盐溶液(0.7%的氯化钠),1NHCL,蒸馏水，45%醋酸，乳酸-醋酸溶液（乳酸-60%=1：1）醋酸，乳酸-醋酸-地衣红染色液。
乳酸-醋酸-地衣红染色液的配法：A液：饱和地衣红乳酸溶液（2g地衣红+100 ml乳酸，加热，谨防沸腾），充分溶解后过滤。
B液：饱和地衣红醋酸溶液（2g地衣红+100 ml冰醋酸，加热，谨防沸腾），充分溶解后过滤。
1份A液：1份B液+1份蒸馏水充分混合后在棕色瓶中保存备用。
2.实验步骤：（1）取载玻片于双筒镜下，其上滴一滴生理盐水，幼虫置于生理盐水内，两手各握一枚解剖针，以针揿住幼虫末端的1/3处。
固定幼虫，将另一针揿住幼虫头部，用力向拉，把头部自身体拉开，腺体即随之而出。
腺体们于食道两侧，中间夹有神经球。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。
本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。
制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。
2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。
3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。
4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。
5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。
6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。
观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。
•另一端较短，称为非钩端。
染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。
通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。
这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。
果蝇唾液腺染色体制片和观察
实验报告课程名称遗传学实验实验名称果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验原理果蝇唾腺染色体是永久间期染色体，只发生DNA复制，不发生有丝分裂。
在幼虫唾腺细胞内，每条染色体进行了10次左右的复制，形成了约210=1024条染色体拷贝，再结合同源染色体的配对，共用约2048条同源染色体拷贝进行体细胞联会，形成比正常有丝分裂中期的染色体大200倍的、巨大的多线染色体。
这些染色体的着丝点聚集在一起，形成染色中心，同源染色体的两臂向外伸展。
经过染色，唾腺染色体的显示出独具本染色体特色的带和间带模式。
这个模式是恒定的，可用用于基因的定位，如果发生染色体的结构变异，则可以通过模式的改变而发现出来。
不同的染色体，其端部不同，可以用于鉴别染色体。
在观察唾腺染色体时，会发现膨胀泡结构，这是强烈的基因转录迹象。
二、实验结果图一：果蝇幼虫解剖针分离后效果图图二：剥离的腺体一共分离了3条果蝇幼虫才分离出较清晰的唾液腺体，在分离出带腺管的2侧腺体时，上面还有其他东西，因为想剥离的干净一点，所以没急着拍照，结果分离到一半时，一条腺体丢失，所以照片仅显示剥离中期时剩的一条腺体。
图三：唾腺染色体（借用）图四：唾腺染色体——图片放大（借用）带与间带、染色中心、膨胀泡、3R端部（僧帽）特点如上图标示。
三、总结反思从挑取果蝇幼虫，到幼虫的头身分离和剥离腺体，再到染色，这些操作的较为顺畅，并没有出现大的失误。
虽然刚开始分离的两条幼虫因为手法生疏，并没有分离出完整的腺体，但是第三次尝试时就分离出带腺管的2侧腺体，剥离后还剩一条较为完整的腺体。
染色时操作也较为小心，并未让腺体随水流被滤纸吸走。
就剥离腺体这个操作而言，我觉得这是一个需要耐心、眼力和方向感的事情，可以在剥离的时候将载玻片放在显微镜下，同时2根解剖针也进入显微镜的视野内的两侧，用解剖针判断该划掉哪个方向的一部分，一点点去掉不要的东西，最后就可以留下需要的腺体了。
但是操作一定要细心，腺体特别小，划的时候如果一不小心粘到解剖针上也弄不下来，那条腺体也就没用了。
最新高二生物-果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较 精品
果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较双翅类昆虫如黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）的唾腺染色体（Salivary chromosome）比普通染色体大的多，处于体细胞同源染色体的配对状态，是由于唾腺染色体经过多次复制而并不分开形成的，大约有1000～4000根染色体丝的拷贝，故又称为多线染色体（Poly－tene chromosome）。
它是观察染色体形态、研究染色体结构变异等的好材料。
制作果蝇唾腺染色体标本的染色方法一般有3种：醋酸洋红法、苯酚品红法和孚尔根（Feuglen）染色法（除此之外还有其他方法）、各种方法都有其自身的特点及适用的条件，因此没有1种染色方法是普遍适用完美无缺的。
现将3种常用方法的优缺点分述如下，并提出1个实用的永久封片制作方法。
一、醋酸洋红法洋红的常用浓度为0.5%～1.0%，醋酸常用浓度为45%～50%，一般现配挪用较好。
洋红是从胭脂虫（Coccrs cacti）的雌虫中提取的作为染料的提取物,提取物的品质因胭脂虫的种类而异，是一种混合物，其中具有染色活性的是洋红酸。
洋红酸是一种二元弱酸，如果溶于碱性溶液中，则具有酸性染料的性质，可使细胞质着色；如果溶于酸性溶液中，则具有磁性染料的性质，可使染色质（体）着色。
此法多用满架法，快速简便，为改进其染色效果，也可采用浸染法，并辅以火焰微热（即滴加醋酸洋红盖片后在酒精灯火焰上微热），增加本底清晰度，加大反差。
醋酸洋红的配制和染色都比较简中，对细胞穿透力较强，这是其主要优点，此外它对染色体和核仁均对染色，故也适用于减数分裂的细胞染色。
但其染色强度和分色效果不及其他染色剂，通常只作临时染色观察，不用于制作永久性装片。
也可以用醋酸地衣红替代洋红，这样细胞质着色较少，效果较好。
二、孚尔根染色法孚尔根染色法是常用于鉴别细胞中DNA的一种组织化学方法，细胞核经过温和的盐酸的水解作用（I mol HCI，60℃而破坏了脱氧核糖与嘌呤碱之间的糖苷键，这样嘌呤碱脱掉而使脱氧核糖的第1个碳原子上潜在的醛基获得自由状态。
浅谈果蝇唾腺染色体制片的几种方法
浅谈果蝇唾腺染色体制片的几种方法果蝇幼虫唾液腺内的染色体在细胞分裂间期多次复制而未分开,是普通染色体的100～150倍,因而又称巨大染色体、多线染色体。
果蝇唾腺染色体上的横纹结构是恒定的、特异的,可将基因精确地定位,且染色体上还具有明显的Puff结构,其大小反映了基因转录活性的高低[1]。
因此,果蝇唾液腺染色体是观察染色体的形态特征,研究染色体畸变及对染色體的原位杂交和基因定位等方面很好的材料,果蝇唾腺染色体制片也是《遗传学实验》教材中的经典实验[2]。
但按传统的实验方法,学生难以把握,成功率较低。
笔者经多年的实验教学实践,参考大量相关文献基础上,将实验操作和染色方法上做了一些改进,取得了良好的实验效果。
1 方法与步骤1.1 溶液配制(1)处理液:30％盐酸40ml、45%冰醋酸50ml、甘油10ml按比例混合。
(2)洗脱液:45%醋酸9.8ml,甲醛0.1ml,无水乙醇0.1ml,0.04g苯酚按比例混合。
(3)10%的改良苯酚品红染液:A液:称取0.3g碱性品红溶于10ml70%酒精中;B液:取1mlA液加入9ml5%苯酚溶液,苯酚品红染液:取10mlB液加入1ml37%的甲醛溶液后用5%的醋酸定容到10ml。
(4)结晶紫染液:A液:取9g结晶紫用蒸馏水定容到100ml;结晶紫染液:取20mlA 液加入7ml乳酸溶液。
(5)番红染液:取2.5g番红用95%酒精定容到100ml。
(6)美蓝染液:A液:取0.6g美蓝用95%酒精定容到30ml;B液:取KOH0.01g用蒸馏水定容100ml;美蓝染液:分别配制A液和B液,配好后混合即可。
1.2 实验步骤(1)果蝇唾腺剥离。
将载玻片放置在黑色背景的实验台面上,取瓶壁上行动缓慢的黑腹果蝇三龄幼虫置于0.4%NaCl溶液低渗处理30min[3]。
取出幼虫,分清虫体的头部和尾部。
手持解剖针,左手呈40℃左右压在虫体前端距头部1/3处固定,右手持解剖针压住幼虫的口器(黑色小点处),水平往前拖拉,一对透明棒状唾腺随之被拉出。
果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较
果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较
郜刚
【期刊名称】《生物学通报》
【年(卷),期】2003(038)001
【摘要】@@ <生物学通报>编委:rn您好.笔者对贵刊2002年第37卷第2期第23页刊登的"用Feuglen染色法制作果蝇唾腺染色体"一文感兴趣,但笔者认为文中几处不妥,比如1)水浴温度波幅偏高;2)染色时间不确定;3)试剂配方不全;4)盐酸的浓度单位有误,mol?M?;5)注意事项影响实验结果表述不清.特撰写下文与各位读者商榷.
【总页数】2页(P53-54)
【作者】郜刚
【作者单位】山西师范大学生命科学学院,山西临汾,041004
【正文语种】中文
【中图分类】Q96
【相关文献】
1.果蝇唾腺染色体制片中四种染色方法的初探 [J], 李珺;马力通;李振国
2.果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较 [J], 刘春明;张燕;何丽娟
3.武汉地区3种果蝇的唾腺及唾腺染色体的比较研究 [J], 钱远槐
4.果蝇唾腺染色体四种染色方法的比较 [J], 刘丽影;刘文静;邵红
5.果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与比较 [J], 罗玉娥;黎杰强;何风华;高峰
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唾液腺染色制片的方法和比较
唾液腺染色制片的方法和比较摘要文章以果蝇唾液腺的染色制片方法为例，以果蝇幼虫的培养养，及幼虫在性别，年龄对制片效果影响，和制片方法上的一些比较，从而得出好的制片方法和实验结果。
关键词果蝇；唾液腺；制片方法唾腺普遍存在于双翅目昆虫中，因为唾液腺细胞核中的染色体巨大，易观察横纹。
体联会等特点。
易发现重复，倒位，易位等染色体结构变异，从而使唾腺染色体成为细胞遗传学进化遗传学和分子遗传学研究的不可多得的好材料。
特别在双翅目昆虫的研究中，唾腺细胞的染色和制片技术，显的尤为重要。
本文博众家之长，兼笔者实践经验，尤重视在材料上的选择、方法上也有改进。
采用此方法，染色体易伸展，背景清晰，颜色对比高，获得很好的染色的图象。
一、材料与方法1.果蝇幼虫的培养（1）培养基为常见的玉米培养基。
玉米粉10克，红塘13克，琼脂粉0.7克，酵母粉2克，丙酸0.3ml，加蒸馏水100ml。
（2）培养基要求松软，含水量较高，营养丰富，发酵良好。
（3）放入5-6对果蝇在18-20℃下培养，幼虫出现后可将起放入15-18℃低温培养。
利于幼虫充分发育。
（4）实验时选用肥大，好动的雌性幼虫作材料。
2.唾腺的剥离（1）取一幼虫放在滴有一滴0.7%生理盐水的干净载玻片上。
实验者两手各拿一支解剖针压住幼虫尾端1/3处，用右手的解剖针，压住头部，水平拉动，即可拉出一对透明棒状腺体。
清除其上易剥落的脂肪，移走其他杂物。
3.制片（1）解离。
将腺体周围的生理盐水吸走，滴1-2滴1N盐酸，在室温下解离5分钟左右，然后剥离其上附着的脂肪体。
（2）染色。
滴蒸馏水在一旁，用吸水纸小心吸去盐酸，反复几次。
加1-2滴改良苯酚品红染液于腺体上，染色10-15分钟。
（3）压片。
小心吸去多余染液，用蒸馏水将染上色的腺体冲在另一个干净载玻片上（小心，别丢失了腺体）。
滴上一滴45%醋酸，改上干净的盖片，用滤纸吸去多余的染液后，将滤纸条裹紧载片，左手微用力压住盖片对角，不让其滑动，右手拇指适度用力垂直向下压片，染色体臂分开。
果蝇唾腺染色体
果蝇唾腺染色体引言果蝇（学名：Drosophila melanogaster）作为模式生物，被广泛用于生物学研究领域。
它具有短寿命、高繁殖率和相对简单的基因组，因此成为了遗传学、发育生物学、神经科学等领域的理想研究对象。
其中，果蝇唾腺染色体是一个备受关注的课题。
本文将介绍果蝇唾腺染色体的概述、结构和功能。
概述果蝇唾腺是一种分泌液体的器官，位于果蝇头部部分，主要用于消化食物和帮助摄食。
唾腺染色体是唾腺细胞内的染色体结构，其中包含了果蝇蛋白质合成和分泌所需的基因。
结构果蝇唾腺染色体属于聚体染色体，其以团块的形式存在于细胞核内。
它的特点是致密且呈现棒状结构。
唾腺细胞中通常有数个染色体团块，每个团块之间由非染色质区域分隔，有利于基因的表达和调控。
功能果蝇唾腺染色体在果蝇的唾液合成和分泌中起着重要作用。
唾液中包含了一系列的消化液和酶，这些物质主要通过唾腺细胞合成并最终通过细胞分泌进入口腔。
唾腺染色体中的基因编码了这些消化液和酶的合成蛋白质，起到了调控和控制合成过程的功能。
唾腺染色体的另一个功能是在果蝇的发育过程中起到调控作用。
在果蝇发育的不同阶段，唾腺细胞会经历一系列的细胞分裂和分化。
唾腺染色体通过调控基因的表达和转录活性来影响细胞的分裂和分化程度，从而对果蝇的发育起到重要的影响。
研究方法目前，研究者们通过一系列的实验方法来研究果蝇唾腺染色体的结构和功能。
其中常用的方法包括：1.细胞培养：通过培养果蝇唾腺细胞，观察其形态和功能变化，进一步了解唾腺染色体的特性。
2.染色技术：利用染色技术，如荧光染色和原位杂交等，观察和分析唾腺染色体的形态和结构。
3.基因编辑：通过CRISPR/Cas9等遗传工具，对果蝇细胞进行特定基因的编辑，研究其对唾腺染色体的影响。
结论果蝇唾腺染色体作为果蝇唾液合成和分泌的核心结构，对果蝇的正常生理过程起着至关重要的作用。
通过深入研究果蝇唾腺染色体的结构和功能，我们可以更好地理解果蝇生物学中的基因调控网络和发育过程，为未来相关研究提供重要的参考和基础。
果蝇唾腺染色体制片方法的改进_赵锦慧
52生物学通报2011年第46卷第6期黑腹果蝇是普遍应用于遗传学的果蝇，也是奠定经典遗传学基础的重要模式生物之一［1］，其三龄幼虫是观察唾腺染色体的理想材料。
果蝇唾腺染色体横纹形态特征的特异性和稳定性，因此成为鉴定染色体结构改变的良好材料。
果蝇唾腺染色体制片与观察是遗传学教学中重要的基础实验，但传统的制片方法往往出现唾液腺易丢失、染色体臂不能充分伸展、染色效果不理想等问题，许多学者对其进行了改进［2～5］。
本试验在前人研究的基础上，对果蝇幼虫的培养、脂肪的剥离和染色等环节进一步改进，以获得更好的制片效果。
1材料与方法1.1唾腺染色体的材料黑腹果蝇三龄幼虫。
1.2饲养幼虫的材料玉米粉－糖－琼脂－酵母粉培养基。
1.3染色液改良的苯酚品红染色液。
1.4方法1）培养基的配制。
A：红糖62g，琼脂6.2g，加水380mL，煮沸溶解。
B：玉米粉83g，加水380mL，加热搅拌均匀。
A和B混合加热成糊状后，加5mL丙酸，分装到灭菌过的培养瓶中，冷却凝固待用。
2）三龄幼虫的饲养。
参考张丽［4］的幼虫饲养方法并改进。
在装有培养基的瓶子中分别撒入适量干酵母粉，振荡铺平，挑选体积较大的黑腹果蝇，每瓶放入5～8对，于18℃恒温培养箱中培养，成虫交配后除去。
待有大量幼虫出现后，将培养箱温度调到3~5℃，冷处理24h后，再恢复为原来培养温度。
3）不同浓度的改良苯酚品红染色液的配制［6］。
A液：1.5g碱性品红溶于50mL70%的酒精中（此溶液长期保存）。
B液：取5mL A液加入45mL5%的苯酚水溶液（此液2周内使用）。
C液：取B液45mL加入6mL37%的甲醛溶液。
分别吸取0.8mL、1mL、1.2mL、1.4mL C液，再分别加入0.2g山梨醇和45%醋酸定容到20mL 即配成4%、5%、6%、7%的改良苯酚品红染色液。
4）唾腺染色体的制备及观察。
①唾腺的剥离参照王华峰［2］等剥离唾腺的方法。
②脂肪的剥离传统的方法是剥离唾腺后立即去除脂肪，本试验做了改进，染色完成后再进行脂肪的剔除。
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果蝇唾腺染色体的几种染色方法比较
双翅类昆虫如黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）的唾腺染色体（Salivary chromosome）比普通染色体大的多，处于体细胞同源染色体的配对状态，是由于唾腺染色体经过多次复制而并不分开形成的，大约有1000～4000根染色体丝的拷贝，故又称为多线染色体（Poly－tene chromosome）。
它是观察染色体形态、研究染色体结构变异等的好材料。
制作果蝇唾腺染色体标本的染色方法一般有3种：醋酸洋红法、苯酚品红法和孚尔根（Feuglen）染色法（除此之外还有其他方法）、各种方法都有其自身的特点及适用的条件，因此没有1种染色方法是普遍适用完美无缺的。
现将3种常用方法的优缺点分述如下，并提出1个实用的永久封片制作方法。
一、醋酸洋红法
洋红的常用浓度为0.5%～1.0%，醋酸常用浓度为45%～50%，一般现配挪用较好。
洋红是从胭脂虫（Coccrs cacti）的雌虫中提取的作为染料的提取物,提取物的品质因胭脂虫的种类而异，是一种混合物，其中具有染色活性的是洋红酸。
洋红酸是一种二元弱酸，如果溶于碱性溶液中，则具有酸性染料的性质，可使细胞质着色；如果溶于酸性溶液中，则具有磁性染料的性质，可使染色质（体）着色。
此法多用满架法，快速简便，为改进其染色效果，也可采用浸染法，并辅以火焰微热（即滴加醋酸洋红盖片后在酒精灯火焰上微热），增加本底清晰度，加大反差。
醋酸洋红的配制和染色都比较简中，对细胞穿透力较强，这是其主要优点，此外它对染色体和核仁均对染色，故也适用于减数分裂的细胞染色。
但其染色强度和分色效果不及其他染色剂，通常只作临时染色观察，不用于制作永久性装片。
也可以用醋酸地衣红替代洋红，这样细胞质着色较少，效果较好。
二、孚尔根染色法
孚尔根染色法是常用于鉴别细胞中DNA的一种组织化学方法，细胞核经过温和的盐酸的水解作用（I mol HCI，60℃而破坏了脱氧核糖与嘌呤碱之间的糖苷键，这样嘌呤碱脱掉而使脱氧核糖的第1个碳原子上潜在的醛基获得自由状态。
自由醛基能够与脱色的碱性品红即Schiff试剂反应生成紫红色复合物。
孚尔根染色法的优点是通常只对细胞核和染色体着色，染色均匀一致，背景清晰，组织软化较好，易于压片。
缺点是染色体经过染色后，由于染色时间较长（一般在1～2h，动物细胞略短一些），Schiff试剂中所含的盐酸往往使其过度软化。
因此在压片时染色体不易分散而易于重叠或粘连，这是它不如苯酚品红染色的主要缺点。
另外一个主要缺点是水解条件必须严格控制，l mol HCI水解温度应在60士1℃（某些情况下需要控制在60士0.5℃），因为温度过高或时间过长会造成水解过度，糖与醛基之间的键破坏过大，醛基流失到水解液中，则染色体不均匀着色或染色稍深但细胞质着色，或者出现大小不等的红色小粒；反之，染色体着色浅淡、细胞质中可能有其他醛基存在而呈现扩散的红色。
可见，只有水解合适才能使染色体着色较深而细胞质不显示任何颜色。
染色反应须在低温（10℃左右）、黑暗、尽可能减少氧化的条件下进行，否则氧化生成SO也会影响反应的颜色表现，因此孚尔根染色法宜用浸染法，而不宜用液染。
此外染的
2
色后一般还需用漂洗液和蒸馏水漂洗，这些操作对于较小的果蝇唾腺来说不太适宜，因为材料容易在染色、漂洗等操作过程中丢失。
三、苯酚品红染色法
现常用改良的苯酚品红染色法，它是卡宝品红（Carbol fuchsin）经过山梨醇改良的，也是目前应用最为广泛的一种优良的核和染色体的染色剂。
它既具有醋酸洋红的染色简便、快
速的特点，又同时具有孚尔根反应的分色清晰的优点，采用滴染和浸染均可。
用此法制得的染色体具有耐保存、高稳定、持久不褪色的优点，这是前两种染色方法所不及的。
虽然其缺点仍然是杂色效果与盐酸的解离条件密切相关，但与孚尔根染色法相比，它对温度条件不是很苛刻，只是当解离时间太短时，细胞质会不同程度的着色，当解离过度时染色体不易着色，当然背景也不会有色。
只有在合适的解离条件下染色体着色紫红，细胞质无色或有极淡的红色。
另外染液的配制和保存也比Schiff试剂简单，而且其杂色能力随着放置的时间越久染色效果越好，通常可在常温下存放两年而保持稳定不变质，低温保存时间更长。
四、一种实用的果蝇唾腺染色体永久封片制作方法
根据各种染色方法的优缺点可以针对传统常规方法的“弊病”进行有益的改进。
几个主要改进点列举如下：
1）果蝇三龄幼虫的专门培养（另文介绍）：可以培养出形体比通常大出约l／3的硕大三龄幼虫，便于唾腺的拉取。
2）唾腺的各项操作均在载片上进行，有利于防止材料的丢失。
3）染色前唾腺适度低渗：往唾液腺上滴一滴质量浓度为0.4％的NaCI溶液，低渗处理2min，使唾液腺充分膨胀。
4）适度水解：用小片吸水纸吸除水分及组织（当心切勿将唾液腺吸走）；在唾液腺上满1滴lmol的HCI，根据唾腺的大小室温下水解l～2min。
然后用蒸馏水反复滴几次，洗去盐酸（一边滴清水，一边用吸水纸从材料旁边吸水），再用吸水纸吸干周围的水分。
5）火焰微热压片：满染法染色至唾腺通体紫红后，换成45％乙酸，并在酒精灯火焰上过火，使载片稳热（用手背对准材料接触载片下面，以不烫手为合适），增加本底清晰度。
6）国产光学树脂胶快速封片：用适当温度的水浴将光学树脂胶融化，粘度以挑起时不拉长丝为佳。
用探针挑取光学树脂胶均匀涂抹于盖片四周封住盖片，注意勿搓动盖片。
烘干或晾干即成为一张永久封片，可以永久保存。