试验设计书

盐酸左氧氟沙星片人体生物等效性研究

试验设计书

1 试验目的

考察国产盐酸左氧氟沙星片的人体相对生物利用度和生物等效性。

2 药品：

2.1 试验药品(T)：盐酸左氧氟沙星片，规格：100mg/片，批号：，标示量：99.4%。由南京三锐药业有限公司研制提供。

2.2 参比制剂(R)：盐酸左氧氟沙星片（左福欣），规格100mg/片，批号：0305112，批准文号：国卫药准字H20010221，由湖南正清制药集团股份有限公司生产，有效期：2005年5月。

2.3 标准对照品：左氧氟沙星标准品（中国药品生物制品检定所，130455-200202，含量：97.2％）。

3 健康志愿者的选择及给药方法：

3.1 健康志愿者选择

选用20名男性，年龄22-24岁，体重应符合标准体重±10%范围，无心、肺、肝、肾、消化道、神经系统、精神异常及代谢异常等病史，无烟酒等不良嗜好，无过敏史，无体位性低血压。经体检各项指标（如血压、心率、心电图、呼吸状况、肝肾功能、血尿常规和胸部透视）无异常。试验前两周停用任何药物，受试前一周向受试者说明研究的药物和试验内容，并签署知情同意书。

3.2 试验设计：

采用单盲、单剂量、随机、2×2交叉试验设计。即将20名健康受试者随机分为两组，每组各10名。1组先服参比药R，然后服试验药T，两次服药相隔二周，以O表示，即ROT。2组服药顺序为TOR。给药前12小时进清淡晚餐后禁食过夜，于次日早晨空腹口服受试制剂或参比制剂200mg，用200ml温开水送服。服药后2h可以饮水；服药后4h进统一标准午餐。

4 取血时间点的确定

取血时间点：服药前取静脉血一次为空白对照，分别于给药后0.333，0.667，1，1.5，2，3，4，6，8，12，24 h时取静脉血3.5ml，血标本收集于肝素化试管内，3000rpm离心10min，取血浆，-40℃保存。

5 血浆样品的处理：

于1.5ml离心管（EP管）中加入待测血浆0.5ml，混匀后加入70%高氯酸30μl，涡旋30秒，12000rpm离心10min，取上清夜20μl进HPLC检测。

6 高效液相色谱法

6.1 HPLC条件

6.1.1 仪器：高效液相色谱仪为Agilent1100系列，包括G1322A 在线脱气机，G1311A 四元泵，G1316A温控箱，G1315B二极管阵列检测器，G1328B手动进样器和Agilent 化学工作站（Rev A.08.03.[847]）。

6.1.2色谱条件：色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18（4. 6×150mm，

5μm ，Agilent ，USA ），保护柱为XDB-C18保护柱（Agilent ，USA ）。流动相为乙腈：水：2%冰醋酸（20：10：70，V/V ），流速为1.0ml/min 。检测波长为294nm ，参比波长380nm ，柱温为25℃，检测灵敏度为0.1mAU 。

6.2 分析方法的指标与要求：

标准曲线与线性范围：用空白血浆配制标准溶液制备标准曲线，线性范围应覆盖全部待测浓度，不得外推。

灵敏度：最低检测限为0.1ug/ml 。

精密度：回收率重现性好，日间、日内变异均应<15%，LOQ 附近RSD 应<20%。

回收率：高、中、低三个浓度的回收率应不低于70%。

6.3 血浆样品的稳定性：对血样样品在室温、冰冻和冰融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察。

其它各项指标均应与《药物制剂人体生物利用度指导和等效性试验指导原则》一致。

7 生物利用度的计算

100D AUC D AUC F T

R R T ⨯⨯⨯=% AUC T ：试验制剂的浓度-时间曲线下面积

AUC R ：参比制剂的浓度-时间曲线下面积

D R 、D T ：分别为参比制剂和试验制剂的给药剂量

AUC 用梯形面积法计算，其它药代动力学参数采用3P97程序计算。 8 试验结果提供的内容:

①F值。

②各健康志愿者的血药浓度-时间数据、均数和标准差。

③各健康志愿者的血药浓度-时间曲线。

④生物利用度有关的参数ln(AUC0-t)、ln(AUC0-inf)和ln(Ｃmax)的显著性检验，生物等效性采用等效界值法的双向单侧t检验和90%可信区间。T max的非参数秩和检验。AUC：药时曲线下面积；C max：峰浓度；T max：达峰时间。

⑤其它药代动力学参数，应尽可能提供。

9 完成时间和进度

①准备（选择健康志愿者，建立方法）1个月。

②给药，采集血样，测定血浓2个月。

③数据处理，写报告1个月。

代宗顺

华中科技大学同济医学院国家药品临床研究基地

华中科技大学同济医学院临床药理研究所

参考文献

1.张莉,李家泰,吕媛,等. 左氧氟沙星注射液及口服片剂在健康志愿

者体内的药动学研究[J]. 中国药学杂志,2001;36(12):835-837

2.乔海灵,张莉蓉,郭玉忠,等. 3种左氧氟沙星的药动学及相对生物利

用度[J]. 中国医院药学杂志,2000;20(7):396-398

3.殷国真,李会林,金跃,等. 乳酸左氧氟沙星片的人体生物利用度[J].

中国临床药学杂志,1998;7(4):157-159

4. 张莉,李家泰,赵彩云,等. 国产左氧氟沙星片剂健康人体生物等效

性研究. 中国临床药理学杂志,2001;17(3):199-202