植物组织游离脯氨酸含量的测定实验报告精华版

实验报告

一、实验目的：

了解植物体内水分亏缺与脯氨酸积累的关系

二、实验所用仪器、药品、材料：

1.仪器

分光光度计,水浴锅,漏斗,大试管（20ml）,具塞刻度试管（20ml）,注射器或滴管（5-10ml）。

2.材料

植物小麦叶片

3.试剂

（1）3%磺基水杨酸

（2）甲苯

（3）2.5%酸性茚三酮显色液：冰乙酸和6mol·l-1磷酸以3:2混合，作为溶剂进行配制，此液在4℃下2-3天有效

（4）脯氨酸标准溶液：准确称取25mg脯氨酸，用蒸馏水溶解后定容至250ml，其浓度为100μg·ml-1。再取此液10ml，用蒸馏水稀释至100ml，即成10μg·ml-1的脯氨酸标准溶液。

三、实验步骤：

1、标准曲线的绘制：

（1）取7支具塞刻度试管按表9.2-1加入各试剂。混匀后加玻璃球塞，在沸水中加热40min。

（2）取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分振荡，以萃取红色物质。静置待分层后吸取甲苯层以0号管匀对照在波长520nm下比色。

（3）以消光值为纵坐标，脯氨酸含量为横坐标，绘制标准曲线，求线性回归方程。

表9．2．1各试管中试剂加入量

2、待测物的提取、显色、比色等测定的数据记录：

3、计算结果：

从标准曲线中查出测定液中脯氨酸浓度

脯氨酸[μg.g-1(干或鲜重)] =(C．V)·(A·W)－1

式中：C一提取液中脯氨酸浓度(PS)，由标准曲线求得： V －提取液总体积（ml）

A --- 测定时所吸取得体积（ml）

W----- 样品重（g）

脯氨酸[μg.g-1(干或鲜重)] =(C．V)·(A·W)－1=

四、实验小结：（本次实验成败之处和原因分析以及改进措施）

1.配置的酸性茚三酮溶液仅在24h内稳定，因此最好现用现配。

2.测定样品若进行过渗透胁迫处理，结果会更显著。

3.试剂添加次序不能出错。