苯的急性毒性试验

苯对小鼠急性吸入毒性试验研究

摘要：目的研究苯急性毒性，观察气态苯吸入染毒致小鼠急性中毒一般表现和神经表现，探讨急性毒性机制。方法通过建立气态苯静式吸入染毒小鼠的动物模型，实验组分别按33.9mg/L、43.25mg/L、55.21mg/L、70.47mg/L、89.95mg/L、115.12mg/L剂量组,对照组为NS组,每组10只,雌雄各半。连续染毒1.5h后，观察急性中毒行为表现,分组记录死亡时间及死亡数。结果①苯具有急性毒性;小鼠苯染毒各组都有急性中毒的表现,表现为兴奋症状、抑制症状（闭眼、侧卧），呼吸急促转衰弱，除低剂量组外每组都有小鼠死亡。运用改良寇氏法公式得㏒LC50=1.848，故LC50=70.4mg/L；s=0.0193(LC50的标准误)；LC50 95%CI（可信区间）=（64.71，76.73）。结论①小鼠静式吸入苯蒸气有急性毒性。②LC50=70.4mg/L，属于低毒毒物。关键词：苯小鼠吸入染毒急性中毒LC50

近年来,由于室内装修引发的环境污染与健康问题受到了普遍关注,其中苯是目前主要室内空气污染物之一。室内环境中的苯主要来自建筑装饰中使用大量的化工原材料,如涂料、填料及各种有机溶剂等[1～3]。尽管到目前为止,开展了大量有关苯毒性调查研究工作,但关于苯中毒的发病机制迄今尚未阐明[4]。本文通过建立苯静式吸入染毒小鼠的实验模型,模拟人体实际暴露苯情况,探讨苯对机体的急性毒性危害的机制,以便为深入研究苯的毒性效应,为人接触苯的健康效应评价提供生物标志物奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组

试验动物选择与处理：选择健康、成熟的昆明种小白鼠（沈阳医学院实验中心提供），17~22g，雌雄各半，分别按性别称重，编号。预实验得出LD0与LD100，LD50的计算方法符合改进寇氏公式的条件，随机分组，分6个剂量组和一个NS组，每组10只[5]。

1.2 受试物：国药集团化学试剂有限公司生产的分析纯液态苯，比重ρ为0.89g/ml，纯度>99.5%。

1.3 染毒方法：A-F实验组按照表1剂量接受苯气体静式吸入染毒,连续染毒1.5h;G对照组也在同等条件下的染毒柜内,以自然挥发的水蒸汽为空白对照。

表1 A-G组染毒剂量情况

组别对数剂量剂量(mg/l) 加苯量(ml)

A 1.53 33.9 2.3

B 1.636 43.25 3.1

C 1.742 55.21 3.9

D 1.848 70.47 5.0

E 1.954 89.95 6.4

F 2.06 115.12 7.8

G 0 0 0

1.4 观察指标及方法：观察小鼠最早死亡时间和数量及染毒期间小鼠的中毒症状，用改良寇氏法计算出LD50，进行毒性分级。

1.5 仪器：（1）电子天平,JA21001型,上海精科天平厂;

（2）染毒柜，60L，沈阳医学院毒理组实验室

1.6 统计分析

实验数据采用SPSS 22.0统计软件进行方差分析和q检验。

2结果

2.1 急性毒性一般表现和神经表现

染毒后小鼠出现不同程度中毒症状大致表现为：兴奋症状：痉挛，乱跑、乱窜、反射亢进、管状尾；抑制症状：软弱无力、运动迟缓、闭眼、侧卧；呼吸由缓慢变为深浅；高剂量组出现症状较早且明显，随后出现抽搐，更严重者死亡，剂量越低出现的死亡数越少，低剂量组一般不出现死亡[6]。

2.2 各组动物死亡情况，由表2可见，

表2 静式吸入染毒1.5h小鼠死亡情况

组别染毒剂量

（mg/L）

动物数

(只)

死亡数

(只)

死亡率

（p）

存活率(q) pq

A 33.94 10 0 0 1.0 0

B 43.25 10 0 0 1.0 0

C 55.21 10 0 0 1.0 0

D 70.47 10 6 0.6 0.4 0.24

E 89.95 10 9 0.9 0.1 0.09

F 115.12 10 10 1.0 0 0

2.3 LC50的计算：

因改良寇氏法实验设计要求，因A和B组动物死亡数相同，故A组不参加计算。

按改良寇氏法公式计算：m=Xk－i(∑p－0.5) Sm=i√∑pq/n m：㏒LC50

代入数据计算得，LC50=70.4mg/L，可信限为（64.71，76.73）。

根据我国农药急性毒性分级标准：剧毒物质：＜20mg/m³; 高毒物质：＞20mg/ m³;中等毒物质：200~2000mg/ m³；低等毒物质：＞2000 mg/ m³。苯为低毒物质。

3 讨论

研究苯的急性毒性有利于了解其急性毒性作用与机制，但是温度会影响其挥发性，影响毒作用，通过对苯的研究，了解了苯的急性毒性的危害，提高对苯急性毒性的认识，了解到苯属于低毒物质，但是在以后的学习和生活还是应积极建立预防和控制苯中毒，减少苯带来的危害，提高生活质量[7]。

本文通过建立苯蒸气静式吸入染毒的实验模型,研究苯致机体

急性毒性危害机制。结果表明,苯染毒小鼠后,出现不同的一般急性中毒表现和神经表现。

4 结论

根据本试验，得出以下结论：

（1）苯具有急性毒性。

（2）L C50=70.4mg/L，属于低毒毒物。

5 参考文献

1 Snyder R,Witz G,Goldstein SD.The toxicology of benzene[J].Environ Health Per-

spect,1993,100:393-396.

2Lee BL,New AL,Kok PW,et al.Urinary trans,trans-muconic acid determined by liquid chromatography:application in biological monitoring of benzene exposure[J].Clin- Chem,1993,39(9):1788-1792.

3Weisel C,Yu R,Roy A.Biomarkers of environmental benzene exposure[J].Environ Health Perspect,1996,104(Suppl6):1141-1145.

4Wiester Mj,Winsett DW,Richards WJ,et al.Partitioning of benzene in and animals[J].

Environment Health Perspectives,2002,110(3):255-261.

5Subrahmanyam VV,Ross D,Eastmind DA,et al.Potential role of free radicals in