提取叶绿素的实验原理是

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叶绿素提取纯化实验报告

叶绿素提取纯化实验报告

一、实验目的1. 学习叶绿素的提取方法,掌握叶绿素提取纯化的基本原理和操作步骤。

2. 了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用,以及叶绿素提取纯化在科研、食品、医药等领域的应用。

二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,存在于叶绿体的类囊体薄膜上。

叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b,两者结构相似,仅分子中的镁离子被铁离子取代。

叶绿素提取纯化主要通过以下步骤:1. 提取:利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)溶解叶绿素,使叶绿素从植物组织中分离出来。

2. 离心:通过离心分离叶绿素提取液中的杂质,得到较纯的叶绿素。

3. 分离:采用层析技术(如纸层析、薄层层析等)将叶绿素与其他色素分离。

4. 纯化:通过重结晶、吸附等方法进一步纯化叶绿素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜、丙酮、无水乙醇、碳酸钙、滤纸、层析板、滤液、层析溶剂等。

2. 实验仪器:研钵、剪刀、离心机、层析缸、紫外灯、比色计等。

四、实验步骤1. 叶绿素提取(1)取新鲜菠菜叶片,洗净、擦干,去掉中脉剪碎。

(2)将剪碎的菠菜叶片放入研钵中,加入少量碳酸钙粉和丙酮,研磨至糊状。

(3)将研磨后的混合物转入离心管中,以3000r/min离心5分钟,取上清液。

2. 离心分离(1)将离心后的上清液转入另一离心管中,以4000r/min离心10分钟。

(2)取上清液,即为叶绿素提取液。

3. 叶绿素分离(1)取层析板,用铅笔标记起始线。

(2)用毛细管将叶绿素提取液点在起始线上,重复点样2-3次,待溶剂挥发后,再点样。

(3)将层析板放入层析缸中,加入适量层析溶剂,使溶剂面低于起始线。

(4)待层析溶剂上行至距离起始线约1cm时,取出层析板,晾干。

(5)用紫外灯照射层析板,观察叶绿素a和叶绿素b的分离情况。

4. 叶绿素纯化(1)将分离出的叶绿素a和叶绿素b分别用无水乙醇溶解。

(2)将溶液置于冰浴中,缓慢加入无水乙醇,使叶绿素沉淀。

(3)过滤沉淀,用无水乙醇洗涤沉淀,晾干。

叶绿素的提纯实验报告(3篇)

叶绿素的提纯实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。

2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。

3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素,并通过色谱法进行分离和纯化。

二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a和叶绿素b组成。

叶绿素不溶于水,但可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。

通过提取和提纯,可以得到高纯度的叶绿素,为进一步研究其性质和作用提供条件。

实验过程中,首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素,然后通过层析法分离叶绿素和其他色素,最后收集纯化的叶绿素。

三、实验器材1. 新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮(分析纯)4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素(1)取新鲜植物叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。

(2)加入适量乙醇和丙酮(体积比1:1),研磨至匀浆。

(3)将匀浆倒入分液漏斗,静置分层。

(4)收集有机层,用无水硫酸钠干燥。

(5)过滤,得到叶绿素提取液。

2. 分离叶绿素(1)将层析板放入层析柱中,在底部铺一层脱脂棉。

(2)取适量叶绿素提取液,用移液管滴加于层析板上,确保液面低于层析板边缘。

(3)选择合适的溶剂系统,如正己烷-乙酸乙酯(体积比4:1)。

(4)将溶剂滴加于层析板上,观察层析过程,直至溶剂前沿到达预定位置。

(5)取出层析板,用铅笔标记层析结果。

3. 收集纯化叶绿素(1)用移液管收集叶绿素层,倒入小烧杯中。

(2)加入少量乙醇,搅拌均匀。

(3)用滤纸过滤,收集滤液。

(4)将滤液倒入蒸发皿中,用恒温水浴锅蒸干。

(5)用少量乙醇溶解残留物,得到纯化叶绿素。

五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过有机溶剂提取,可以得到绿色叶片提取物,表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。

2. 叶绿素分离:通过层析法,可以将叶绿素与其他色素分离,证明叶绿素具有独特的性质。

3. 叶绿素纯化:通过蒸发和溶解,可以得到纯化的叶绿素,说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。

叶绿素的提取与分析测定

叶绿素的提取与分析测定

植物叶绿体色素的分析一、实验目的:1、学会叶绿体色素的分离方法。

2、掌握叶绿素的定量测定。

一、3、了解高等植物叶绿体色素的种类组成、性质。

二、实验原理:1、叶绿体色素的提取:(1)原理:叶绿体色素是植物捕获太阳能进行光合作用的重要物质,高等植物的叶绿体色素一般由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素等组成。

叶绿体色素的提取是利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,将待测的植物叶片用研钵研磨让植物组织破碎,利用丙酮的溶解能力将叶绿体色素溶于丙酮中,通过用滤纸过滤分离植物组织碎片,即可以得到叶绿体色素的丙酮粗提液。

(2)步骤:称取新鲜的植物叶子(菠菜等)4g,放入研体中加5ml80%丙酮,少许碳酸钙和石英砂,研磨成匀浆,再加入20ml丙酮,以漏斗过滤到棕色瓶中备用2、叶绿体色素的分离:(1)原理:叶绿体色素的分离提纯一般用层析的方法,其中纸层析是最简单的一种。

当溶剂不断地从纸上流过时,由于混合物中各成分在流动相和固定相间具有不同的分配系数,引起它们的移动速度不同,因而使混合物分离。

(2)步骤:1)取滤纸条(6.5×30cm),在离纸边1.5cm处用铅笔划一直线,在另一端两角分别拴上一根线(见图1),用毛细管取吸绿素提取液沿着铅笔线划一条样带,使样带宽度在3mm以内,如色素过淡用电吹风吹干后再点数次,直到样带呈深绿色为止。

2)在层析缸中加入四氯化碳20ml及少许无水硫酸钠,然后将滤纸吊在层析缸中,使下端浸入溶剂中,色素点要略高于液面,滤纸条边缘不可碰到层析缸璧(如图2)用聚乙烯薄膜两层封住层析缸,直立于暗处层析。

3)0.5小时后,观察色素带分布(最上端是橙黄色的胡萝卡素,其次是黄色的叶黄素,然后是兰绿色的叶绿素a和黄绿色的叶绿素b),记录色谱图。

如图所示:3、叶绿体色素的性质(一)荧光现象:叶绿体色素在吸收光能以后可以从基态跃迁到激发态,当处于第一单线态(激发态)的电子再回到基态时其携带的能量将以光的形式放射出来产生荧光,叶绿素荧光的颜色是红色的。

实验六 叶绿素的提取、分离

实验六 叶绿素的提取、分离

叶绿素的提取、分离一、实验目的1.掌握从植物叶中提取叶绿素的方法。

2. 了解纸层层析的原理,掌握纸层析的一般操作和定性鉴定方法。

二、实验原理1. 叶绿素提取原理:叶绿素等是脂溶性的有机分子,根据相似相溶的原理,叶绿体中含有叶绿体色素(叶绿素a和b、胡萝卜素及叶黄素)等色素分子溶于有机溶剂而不溶于有极性的水。

故在研磨和收集叶绿色素时要用丙酮或乙醇等有机溶剂提取而不用水。

2. 色素分离的原理:纸层析是用滤纸作为载体的一种色层分析法,其原理主要是利用混合物中各组分在;流动相和固定相的分配比(溶解度)的不同而使之分离。

滤纸上吸附的水为固定相(滤纸纤维常能吸20%左右的水),有机溶剂如乙醇等为流动相,色素提取液为层析试样。

把试样点在滤纸的滤液细线位置上,当流动相溶剂在滤纸的毛细管的作用下,连续不断地沿着滤纸前进通过滤液细线时,试样中各组份便随着流动相溶剂向前移动,并在流动相和固定相溶剂之间连续一次有一次的分配。

结果分配比比较大的物质移动速度较快,移动距离较远;分配比较小的物质移动较慢,移动距离较近,试样中各组分分别聚集在滤纸的不同的位置上,从而达到分离的目的。

毛细管点样薄层色谱展开三、仪器和药品研钵、毛细管、漏斗、纱布、小烧杯、试管、培养皿等剪纸形状滤液基线95%酒精、丙酮、石油醚碳酸钙,石英砂四、实验步骤(1)取菠菜或其他植物新鲜叶片20g左右,洗净,用滤纸擦干,去掉叶柄和中脉剪碎,放入研钵。

(2)研钵中加入少量碳酸钙和石英砂,加4-5ml 无水乙醇,研磨至糊状,再加10ml 无水乙醇充分混匀以提取叶片匀浆中的色素,15-20分钟后,过滤入50ml锥形瓶中加塞待用。

分离:(1)取圆形定性滤纸一张(直径15cm),将其剪成滤纸条(15cm×2cm),将其2cm一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条,并在滤纸剪口上方用铅笔画一条直线,作为画滤液细线的基准线(注意:滤液线必须距底边1-1.5cm)。

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告(精选3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告篇1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。

2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。

【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。

当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。

【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。

【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。

2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。

按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。

3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。

4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。

5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。

6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。

【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。

【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。

2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。

3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。

叶绿体色素提取与分离实验

叶绿体色素提取与分离实验

类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
(一)捕获光能的色素
色素
叶绿素a (蓝绿色)
叶绿素 叶绿素b
(黄绿色) 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 (黄色) 胡萝卜素 (橙黄色)
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是( ) A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上,对叶绿体的色素进行色素分析, 会得到近似,同心的四个色素环,排到在最里圈的色素是 () A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内,为了尽可能地降
低植物光合作用的强度,最好安装( B)
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量,哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答: 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜,经研磨、提取得到三种颜色的溶液: 深绿色、黄绿色(或褐色)、几乎无色。注:“+”表示加,“—”表示不加。
处理 二氧化硅(少量) 碳酸钙(少量) 95%乙醇(10ml) 蒸馏水(10ml)
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
( D)
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3.在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液, 进行色素分析,会得到近似同心环状的四个色素圈,
排在外圈的色素呈 [ A]

叶绿体色素的提取与分离实验

叶绿体色素的提取与分离实验
2、叶绿体中色素旳提取和分离旳试验目旳是( ) A、观察多种色素旳吸收光谱 B、验证叶绿体中色素旳种类和多种色素旳颜色。 C、提取高等植物叶绿体中旳色素 D、用纸层析法将色素进行分离
3、用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是( ) A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
(一)捕获光能旳色素
色素
叶绿素a (蓝绿色)
叶绿素 叶绿素b
(黄绿色) 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 (黄色) 胡萝卜素 (橙黄色)
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是( ) A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜,经研磨、提取得到三种颜色旳溶液: 深绿色、黄绿色(或褐色)、几乎无色。注:“+”表达加,“—”表达不加。
处理
二氧化硅(少许) 碳酸钙(少许)
95%乙醇(10ml) 蒸馏水(10ml)
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
(1)A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ,原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
(6)色素分离旳成果:相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ,主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 , 光。
( D)
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜

叶绿素的提取的实验方案研究

叶绿素的提取的实验方案研究

叶绿素的提取的实验方案研究
一、实验目的:
1、熟悉叶绿素在绿色植物中的特性;
2、掌握叶绿素提取的原理与步骤;
3、熟悉叶绿素的测定方法;
4、取得叶绿素的纯度。

二、实验原理:
叶绿素是一种高分子复合物,主要由卟啉环团和葡萄糖环团构成。

它们具有光合作用,能够将光能转化为化学能量,促进植物体内的各种代谢过程,其在绿色植物中具有重要的生理功能。

叶绿素提取,主要是利用溶剂抽提的方法从植物细胞壁中萃取出来,然后用化学试剂把卟啉环团和葡萄糖环团分离开来,最后用特定仪器测定叶绿素的含量,即实现叶绿素的纯度。

三、实验材料与设备:
1、植物样品:棉花、大麦、苋菜、玉米等。

2、试剂:微量元素酶标试剂盒、硝酸钠、乙醇、硫酸重铬酸钾等。

3、仪器:扫描电镜、原子吸收光谱仪等。

四、实验步骤:
1、植物样品的选择:从绿色植物中挑选样品,比如棉花、大麦、苋菜、玉米等;
2、叶绿素的抽提:将植物样品进行切碎,加入乙醇溶液抽提叶绿素,抽提时间为3h;
3、叶绿素的纯化:将抽提液加入2mol/L的硫酸重铬酸钾溶液中,搅
拌混合,然后用氢氧化钠沉淀叶绿素;。

[高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验知识点]叶绿体色素分离

[高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验知识点]叶绿体色素分离

[高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验知识点]叶绿体色素分离1、原理:(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中,所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。

(2)不同的色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢,因而可用层析液将不同色素分离。

3、结果分析:①从色素带的宽度可知色素含量的多少依次为:叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素;②从色素带的位置可知色素在层析夜中溶解度大小依次是:胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a>叶绿素b;③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a与叶绿素b,距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。

4、注意事项:(1)裁取定性滤纸时,注意双手尽量不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。

(2)根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯1cm,高出的部分做直角弯折。

(3)画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中。

(4)研磨要迅速、充分。

a.因为丙酮容易挥发;b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色素;c.叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。

(5)制备滤纸条时,要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。

5、实验创新:在本实验中在圆形滤纸中央点上叶绿体色素的提取液进行层析,会得到近似同心的四个色素环,由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。

一、为什么要选新鲜绿色的幼嫩叶片因为叶绿色含N﹑Mg,而老叶中这两种矿质元素很多已经分解转移,所以鲜绿色的幼叶中叶绿素的含量高,适合于实验.二、制备滤纸条要剪去两角实验中需将滤纸条的一端剪去两角,为什么这样做,如果不会怎么样呢原来若不剪去滤纸条的两角,色素带的两边和中间不是在一条直线上。

这是由于滤纸条两边水分子可以向三个方向散失,向上“跑”的速度快。

而滤纸条中间的水分子只能向两个方向散失,分别是向内和向外,因而会“跑”得慢一些。

提取叶绿素实验报告

提取叶绿素实验报告

一、实验目的1. 理解叶绿素在植物光合作用中的重要作用。

2. 学习叶绿素的提取和分离方法。

3. 掌握实验操作技能,提高实验操作水平。

4. 了解叶绿素的理化性质。

二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要存在于叶绿体的类囊体膜上。

叶绿素由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。

这些色素在有机溶剂中具有良好的溶解性,因此可以使用乙醇、丙酮等有机溶剂进行提取。

实验中,将植物叶片剪碎后,加入适量的石英砂和碳酸钙粉,再使用95%乙醇进行研磨,使叶绿素充分溶解。

随后,通过过滤和离心等步骤,得到叶绿素提取液。

最后,利用薄层色谱法对叶绿素进行分离。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)、石英砂、碳酸钙粉、95%乙醇、层析纸、展开剂(如正己烷、丙酮等)、显色剂(如氯化铜溶液等)。

2. 实验仪器:研钵、剪刀、漏斗、离心机、玻璃棒、烧杯、滴管、层析缸、显微镜等。

四、实验步骤1. 将新鲜植物叶片洗净、晾干,去掉中脉,剪成碎片。

2. 在研钵中加入适量石英砂和碳酸钙粉,再加入剪碎的叶片。

3. 加入95%乙醇,研磨至糊状,并不断搅拌。

4. 将研磨后的混合物倒入漏斗中,用滤纸过滤,收集滤液。

5. 将滤液置于离心机中,以3000r/min离心5分钟,取上清液作为叶绿素提取液。

6. 取一张层析纸,用铅笔在距离底部约2cm处画一条横线。

7. 用滴管将叶绿素提取液滴在层析纸上,注意控制滴液量,避免过多。

8. 将层析纸放入层析缸中,加入适量的展开剂,使其液面高于层析纸上的滴液点。

9. 待展开剂上升到一定高度时,取出层析纸,晾干。

10. 将晾干的层析纸放入显微镜下观察,用氯化铜溶液进行显色,观察叶绿素色素带的分布。

五、实验结果与分析1. 通过实验,成功提取了叶绿素,并分离出叶绿素a和叶绿素b。

2. 层析结果显示,叶绿素a位于层析纸上的上方,呈蓝绿色;叶绿素b位于层析纸的下方,呈黄绿色。

3. 实验结果表明,叶绿素在光合作用中起着至关重要的作用,是植物生长和发育的重要物质。

叶绿素的提取实验报告

叶绿素的提取实验报告

植物叶中色‎素的提取和‎柱色谱分离‎实验报告一.实验目的1、学习从植物‎中提取色素‎的方法。

2、学习柱色谱‎(层析)的原理及其‎操作方法。

3、掌握天然药‎物化学实验‎报告的一般‎写法。

二.实验原理1、绿色植物叶‎中含有叶绿‎素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然‎色素。

各种色素能‎溶解在有机‎溶剂(无水乙醇等‎)中形成溶液‎,使色素从生‎物组织中脱‎离出来。

2、柱色谱是通‎过色谱柱来‎实现分离的‎。

在色谱柱内‎装有固体吸‎附剂(固定相)如氧化铝或‎硅胶。

液体样品从‎柱顶加入,当液体流经‎吸附剂时,由于吸附剂‎表面对液体‎中各组分吸‎附能力不同‎而按一定的‎顺序吸附。

然后从柱顶‎加入洗脱剂‎(流动相),样品中的各‎组分随洗脱‎剂按一定的‎顺序从色谱‎柱下端流出‎,根据不同颜‎色分段收集‎。

吸附剂,常用吸附剂‎有氧化铝、硅胶、氧化镁等。

吸附剂对化‎合物的吸附‎能力与分子‎的极性有关‎,极性越强,吸附能力越‎大,分子中含有‎极性较大的‎基团,其吸附能力‎也越强。

溶剂,溶剂分为溶‎解样品的溶‎剂和洗脱剂‎。

选择溶剂时‎还要考虑到‎被分离物各‎组分的极性‎和溶解度。

通常是先将‎要分离的样‎品溶于非极‎性溶剂中,从柱顶加入‎柱中。

然后用稍大‎极性的溶剂‎使各组分在‎柱中形成若‎干谱带。

再用极性更‎大的溶剂洗‎脱被吸附的‎物质。

为了提高洗‎脱效果,有时也使用‎混合溶剂。

在本实验中‎色素成分在‎不同比例混‎合洗脱剂的‎作用下可以‎分离出来。

三.实验仪器及‎试剂仪器:烧杯、量筒、色谱柱、分液漏斗、玻璃棒、干燥的锥形‎瓶、滤纸、旋转蒸发仪‎、酸式滴定管‎、布氏漏斗、研钵、胶头滴管、剪刀、天平试剂:50g新鲜‎植物叶、中性氧化铝‎、甲醇 ( 9 5 %,分析纯 ) 、乙醇、石油醚 ( 6 0~ 9 0 % ) 、丙酮、无水硫酸钠‎、正丁醇、50g新鲜‎植物叶、四.实验内容1. 绿叶色素的‎提取把新鲜绿叶‎洗净晾干或‎用滤纸吸干‎,称取5g绿‎叶,剪碎后放入‎研钵,再加入10‎m L乙醇。

叶绿体色素的提取实验报告

叶绿体色素的提取实验报告

叶绿体色素的提取、分离、定量及理化性质的鉴定生命科学学院09生科基朱文杰实验目的:掌握提取和分离叶绿体色素的方法;掌握测定叶绿体色素含量的方法;熟悉叶绿体色素的理化性质及吸光特性;了解植物叶绿体色素组成及其与生境的相关性。

实验原理:叶绿体色素是吸收光能的重要物质,包括叶绿素和类胡萝卜。

利用不同色素的极性不同可以用色谱分离法将其分离。

不同的色素对光的吸收范围不同,因此我们也可以测量不同色素在不同波长光下的吸光值,即可用公式计算出其中各色素的含量。

光对叶绿体色素有破坏作用,将叶绿体色素暴露于强光下,可以发现叶绿素被破坏,溶液颜色变化。

叶绿体色素分子吸收光后变为激发态,如能量不被光合作用利用,激发态变回到基态,放出波长较长的红光。

叶绿素分子中卟啉环上的Mg处于不稳定的状态,可被H、Cu、Zn离子取代。

叶绿素不溶于水,能溶于有机溶剂,且各色素的脂溶性不同,故可利用乙醇或丙酮提取,用不同的有机溶剂萃取或用色谱法进行分离。

实验步骤:分别选取2g左右新鲜菠菜和0.2g左右玉米幼株的叶片剪碎放入研钵中。

在研钵中加入5ml丙酮以及少量的石英砂和氯化钙,充分研磨至无纤维装组织。

过滤并转移动至量筒中,再用3ml丙酮冲洗研钵,最后加入丙酮定容至10ml 作为备用提取液。

实验一:吸光值测定:取0.1 ml色素提取液,用80%丙酮稀释到3 ml ,测定663、645 nm 处的吸光值,根据公式计算叶绿素a、叶绿素b的含量。

Chla(μg /ml)=12.7 OD663-2.69OD645,Chlb(μg /ml)=22.9 OD645-4.68 OD663。

实验二:光破坏:取少量色素提取液并稀释3到5倍,分为2份,一份至于暗处,一份正对观察透射光,反身观察反射光,最后放在培养箱中的强光下放置2H。

实验三:铜带反应:取少量色素提取液少许于试管中,一滴一滴加浓盐酸,直至溶液颜色出现褐绿色。

然后加醋酸铜晶体少许,慢慢用水浴加热溶液,则又产生鲜亮的绿色。

叶绿素分离原理

叶绿素分离原理

叶绿素分离原理叶绿素是植物体内一种重要的生物色素,它在光合作用中起着至关重要的作用。

叶绿素分离是生物化学实验中常见的操作,下面我们将介绍叶绿素分离的原理及相关实验步骤。

首先,叶绿素分离的原理是基于叶绿素在不同溶剂中的溶解度差异。

一般来说,叶绿素在极性溶剂中溶解度较高,而在非极性溶剂中溶解度较低。

根据这一原理,我们可以利用不同极性溶剂来分离叶绿素。

在实际操作中,我们通常采用乙醇和丙酮这样的溶剂来进行叶绿素的分离。

首先,将含有叶绿素的植物样品加入乙醇中,通过搅拌或超声等方法将叶绿素从植物组织中提取出来。

然后,将提取得到的叶绿素溶液加入丙酮中,由于丙酮是非极性溶剂,叶绿素会从乙醇中转移到丙酮中,实现叶绿素的分离。

叶绿素分离的实验步骤如下:1. 准备植物样品,将其切碎并加入乙醇中,进行叶绿素的提取;2. 过滤提取液,得到含有叶绿素的乙醇溶液;3. 将乙醇溶液加入丙酮中,充分混合后静置,观察叶绿素在两种溶剂中的分配情况;4. 将丙酮层中的叶绿素取出,即可得到分离后的叶绿素。

通过上述实验步骤,我们可以清晰地观察到叶绿素在乙醇和丙酮两种溶剂中的分离情况,从而验证叶绿素分离的原理。

叶绿素分离实验不仅可以帮助我们理解叶绿素的化学特性,还可以为相关领域的研究提供重要的实验数据。

在生物化学、植物生理学等领域,叶绿素分离实验被广泛应用,对于揭示叶绿素的功能和作用机制具有重要意义。

总之,叶绿素分离原理是基于叶绿素在不同溶剂中的溶解度差异,通过合理选择溶剂并进行分离操作,可以有效地分离叶绿素。

叶绿素分离实验是生物化学实验中常见的操作,通过实验可以验证叶绿素分离的原理,为相关领域的研究提供重要数据。

希望本文对您有所帮助,谢谢阅读!。

叶绿素的提取实验报告

叶绿素的提取实验报告

一、实验目的1. 了解叶绿素在植物光合作用中的作用。

2. 掌握叶绿素提取的方法和原理。

3. 学习使用有机溶剂提取植物中的叶绿素。

4. 了解叶绿素提取过程中可能遇到的问题及解决方法。

二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。

这些色素不溶于水,但溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。

因此,我们可以利用有机溶剂提取植物中的叶绿素。

实验中,我们使用95%乙醇作为提取剂,通过研磨、过滤等步骤提取叶绿素。

提取液中的叶绿素可通过薄层色谱法进行分离和鉴定。

三、实验材料1. 新鲜植物叶片(如菠菜、卤地菊等)2. 95%乙醇3. 研钵、剪刀、石英砂、碳酸钙粉、漏斗、滤纸、烧杯、玻璃棒等四、实验步骤1. 取新鲜植物叶片1克,洗净、擦干,去掉中脉剪碎,放入研钵中。

2. 在研钵中加入少量石英砂和碳酸钙粉,加入2-3 mL 95%乙醇,研磨至糊状。

3. 再加入2-3 mL 95%乙醇,继续研磨,直至植物碎片充分溶解。

4. 将研磨好的混合物用漏斗过滤,收集滤液。

5. 将滤液置于烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀。

6. 取一张滤纸,将滤液均匀涂在滤纸上,晾干。

7. 将晾干的滤纸置于紫外灯下,观察叶绿素荧光现象。

8. 将晾干的滤纸置于薄层色谱板上,用合适的溶剂进行层析。

9. 观察层析结果,确定叶绿素a和叶绿素b的位置。

五、实验结果与分析1. 植物叶片经过研磨、过滤后,滤液呈绿色,说明叶绿素已被提取。

2. 在紫外灯下观察,晾干的滤纸上有绿色荧光,证明叶绿素的存在。

3. 通过薄层色谱分离,叶绿素a和叶绿素b分别在色谱板上形成两个不同的斑点,证明叶绿素已被成功分离。

六、实验讨论1. 实验过程中,使用碳酸钙粉的目的是防止研磨过程中叶绿素被破坏。

2. 乙醇的浓度对叶绿素的提取效果有影响,实验中使用的95%乙醇提取效果较好。

3. 叶绿素提取过程中,温度、研磨时间等因素也会影响提取效果。

4. 薄层色谱分离叶绿素时,选择合适的溶剂和层析条件对分离效果至关重要。

提取叶绿素的实验原理

提取叶绿素的实验原理

提取叶绿素的实验原理
叶绿素的提取实验是一种常用的生物化学实验,它的实验原理如下:
1. 选择叶绿素丰富的植物材料,如菠菜、苔藓等。

这些植物中含有较高浓度的叶绿素,便于提取。

2. 将植物样品研磨成细碎的颗粒状,加入适量的提取液。

通常使用的提取液是无水乙醇或丙酮等有机溶剂,这些溶剂能够溶解叶绿素。

3. 将样品与提取液混合均匀,可以使用研钵和研钉搅拌,也可以使用搅拌器。

4. 将混合物放入冰箱中冷藏,使其在低温下浸泡一段时间。

这一步是为了提高叶绿素的溶解度。

5. 使用离心机将混合物离心,将溶液与固体分离。

6. 取出上清液或溶液,在低温下用试管或容器保存。

此时溶液中含有叶绿素。

7. 准备合适的小瓶或试管,将溶液转移到小瓶中。

可使用滤纸过滤溶液,去除其中的杂质。

8. 使用紫外-可见光谱仪或色度计等测量设备,测定提取液中叶绿素的吸光度。

叶绿素在紫外-可见光谱范围内有较强的吸光性,可通过吸光度测量来定量叶绿素的含量。

叶绿素的提取实验通过以上原理,能够有效地将叶绿素从植物材料中分离出来,并用于后续的研究和分析。

叶绿素提取生物实验报告

叶绿素提取生物实验报告

一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和功能。

2. 掌握叶绿素提取和分离的方法。

3. 探究不同提取溶剂对叶绿素提取效果的影响。

二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要存在于叶绿体的类囊体膜上。

叶绿素分子由一个镁离子和四个吡咯环组成,可以吸收太阳光中的光能,并将其转化为化学能。

叶绿素提取的原理是利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)将叶绿素从植物组织中溶解出来。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、丙酮、乙醇、蒸馏水、层析纸、毛细管、研钵、剪刀、漏斗、烧杯、滤纸等。

2. 实验仪器:显微镜、分光光度计、紫外可见光分光光度计、恒温水浴锅、离心机等。

四、实验步骤1. 准备提取液:将丙酮、乙醇、蒸馏水按一定比例混合,配制成不同浓度的提取液。

2. 提取叶绿素:取新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨。

加入少量碳酸钙,防止研磨过程中破坏叶绿素结构。

将研磨好的菠菜叶转入烧杯中,加入适量的提取液,浸泡一段时间。

3. 过滤提取液:用滤纸过滤提取液,去除固体杂质。

4. 分离叶绿素:将层析纸浸入蒸馏水中,使其充分湿润。

用毛细管将提取液点在层析纸的一端,另一端放入装有蒸馏水的烧杯中,进行纸层析。

5. 观察层析结果:待层析液上升到一定高度后,取出层析纸,观察叶绿素在层析纸上的分离情况。

6. 测量叶绿素含量:用紫外可见光分光光度计测定叶绿素溶液的吸光度,计算叶绿素含量。

五、实验结果与分析1. 不同提取溶剂对叶绿素提取效果的影响:通过比较丙酮、乙醇、蒸馏水三种提取溶剂的叶绿素提取效果,发现丙酮提取效果最好,其次是乙醇,蒸馏水提取效果较差。

2. 叶绿素在层析纸上的分离情况:通过观察层析结果,发现叶绿素在层析纸上呈现出蓝绿色带状,说明叶绿素在层析纸上有较好的分离效果。

3. 叶绿素含量测定:通过紫外可见光分光光度计测定叶绿素溶液的吸光度,计算叶绿素含量。

实验结果显示,叶绿素含量与提取溶剂的浓度、提取时间等因素有关。

六、实验结论1. 丙酮是提取叶绿素的最佳溶剂。

提取叶绿素实验原理

提取叶绿素实验原理

提取叶绿素实验原理
叶绿素是一种存在于植物和一些浮游植物体内的绿色色素,它具有很强的吸收、传递和转化光能的能力。

提取叶绿素的实验原理是基于叶绿素在有机溶剂中的溶解性。

下面是提取叶绿素的实验步骤:
1. 取新鲜的植物叶片,洗净后切碎成小段。

2. 取一定量的叶片放入研钵中,加入少量乙醇溶液,用玻璃杆将叶片压破,使其细胞内的叶绿素溶解在乙醇中。

3. 将研钵中的混合溶液过滤,得到含有叶绿素的乙醇溶液。

4. 将乙醇溶液转移至离心管中,进行离心分离,使得叶绿素沉淀在离心管底部。

5. 倒掉上清液,加入一定量的乙醇,将叶绿素沉淀重新悬浮。

6. 反复洗涤叶绿素沉淀,直至洗涤液完全清晰,去除其他杂质。

7. 最后,将叶绿素沉淀溶解在乙醇中,即可得到纯净的叶绿素提取液。

通过这个实验原理,我们可以从植物叶片中提取出纯净的叶绿素,从而用于后续的分析研究。

叶绿素分离原理

叶绿素分离原理

叶绿素分离原理
叶绿素分离原理是在生命科学、植物学和化学分析中常用的一种技术方法。

叶绿素是植物细胞中重要的生物色素之一,它们吸收太阳光能量,并参与光合作用和光能转化。

叶绿素分离的原理是基于各类色素在不同溶剂体系中的亲和性和亲和力的差异。

通常情况下,某些特定的有机溶剂体系被用来萃取和分离叶绿素。

这些溶剂可以通过调整溶剂极性、极性和温度来实现对叶绿素的选择性提取。

常用的有机溶剂包括丙酮、乙酸乙酯、二甲基亚砜和乙酸甲酯等。

在进行叶绿素分离的过程中,首先将植物组织或叶片粉碎,并加入适量的溶剂,使溶剂与叶绿素充分接触。

随后,通过摇晃、振荡或加热等方式促使叶绿素从细胞中释放出来,并与溶剂形成溶液。

接下来,可以采用常规的分离方法,如离心和过滤,将溶液中的非溶剂成分去除,仅保留叶绿素所在的溶液。

然后,可以通过进一步的处理和分离步骤,如色谱、薄层层析或高压液相色谱,对叶绿素进行纯化和分离。

整个叶绿素分离的过程中,需要注意的是选择合适的溶剂体系、优化提取条件,并避免溶剂对叶绿素的破坏或降解。

此外,还需要在整个分离过程中严格控制温度、时间和搅拌速度等因素,以获得高质量的叶绿素提取物。

总之,叶绿素分离原理是基于自然界中不同溶剂对叶绿素的亲
和性和亲和力差异而建立的一种技术方法。

通过选择合适的溶剂、调节实验条件和利用分离技术,可以有效地分离纯化叶绿素,并应用于不同领域的研究和应用。

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提取叶绿素的实验原理是
叶绿素是植物和一些浮游植物中的重要色素,其含有的镁离子使其呈绿色。

叶绿素起主要的光合作用和光能转化作用,是植物能够进行光合作用的关键物质。

提取叶绿素的实验原理基于其在溶剂中的溶解性。

通常使用的提取溶剂包括酒精、醋酸乙酯和二氯甲烷等有机溶剂。

实验过程大致分为以下几个步骤:
1. 取适量的植物叶片,切碎或捣碎使细胞破碎,使叶绿素释放到溶剂中。

2. 将破碎的植物组织与溶剂混合,振荡或搅拌一段时间,以使叶绿素充分溶解。

3. 将混合物过滤,以除去植物残渣和细胞碎片。

4. 收集过滤液,即叶绿素提取液。

此液体中含有溶解在溶剂中的叶绿素。

5. 利用分光光度计或其他光谱仪器,测量叶绿素提取液的吸光度。

叶绿素在可见光区域(特别是绿光区)有很强的吸收能力,因此可以通过测量吸光度来确定叶绿素的浓度。

通过上述实验原理,可以将叶绿素从植物组织中提取出来,并对其进行浓度测定。

这对于研究植物生物化学和光合作用等方面具有重要意义。

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