临床基础检验学：红细胞及白细胞计数

缺
点
费时
吸管、计数板、 分布及技术水平 影响
精密度和准确度 较低
分析仪法
筛检方法 高效、简便、易标准化， 准确度和精密度高 大规模普查
昂贵 人为因素干扰 非病理因素干扰
七、细胞计数质量保证
采血管、盖玻片
• 血细胞计数误差的种类及消除方式
误差种类
原因
误差减少方法
技术误差 采血部位不当
规范操作
避免凝固、溶血、组织液
病例分析
• 男，54 岁，反复发作的右上腹及剑突下疼痛史5年，本次 无明显诱因上腹隐痛3天，伴发热38.6℃，全身乏力，不思 饮食，恶心、无呕吐，尿色如浓茶。查体：急性病容，咽 部微红，扁桃体不肿大，皮肤巩膜未见明显黄染。上腹部 有轻度压痛，右侧为甚。
• 实验室检查：感染科就诊，检查血常规WBC 18.6 x 109/L ， 检验人员镜检白细胞分类时，发现镜下白细胞没有仪器法 那么多，检验人员用手工方法给患者复查了白细胞，手工 方法 WBC 6.2 X 109/L ，一个患者，一样的血液，得到了两 个结果。到底相信哪个结果？为什么？
病例分析
肝病患者红细胞膜脂类异常/贫血/红细胞内含有大 量的 sHb. Hb-CO;
溶血剂使红细胞溶解不完全造成白细胞计数假性 增加;
血液分析仪计数的白细胞是加溶血素溶解红细胞 后计数自细胞的;
本例因慢性肝脏疾病红细胞膜脂类物质增多，血 液分析仪每次计数加溶血素是固定的，所以使红细 胞溶解不完全，未溶解的红细胞按白细胞计数，所 以使白细胞计数假性增高。
＞30
适当减少采血量 增加稀释倍数
【注意事项】
1.挤压，针刺深度 2.采血应顺利 3.稀释倍数要准确（血量/稀释液量） 4.压线细胞计数：数上不数下、数左不数右 5.稀释液、小试管、计数板均清洁干燥 6.充池一次完成，不能满溢、不足、有气泡 7.每个中方格之间红细胞相差>20个要重新充池2次计
数不超5%；各大格白细胞数相差8个以内。 8.有核红细胞对白细胞计数的干扰处理。
九、细胞计数临床意义
1.红细胞计数临床意义
生理性变化 (1)年龄与性别的差异 (2)精神因素 (3)剧烈体力运动和劳动 (4)气压降低 (5)妊娠中、后期
病理性变化 贫血：①丢失过多； ②红细胞寿命缩短； ③造血原料不足；④骨髓造血功能减退
红细胞增多： ①原发性红细胞增多； ②继发性红细胞增多：引起低氧血症的疾病如心血管 病、肺疾病、肾上腺皮质功能亢进（库欣病）等； ③相对性红细胞增多:剧烈呕吐、严重腹泻、 大量流 汗、大面积烧伤
【WBC原理】用白细胞稀释液（醋酸）将血液稀释一定 倍数，同时破坏红细胞，充入血细胞计数池，在显微 镜下计数一定区域内的白细胞数量，经换算出每升血 液中白细胞数量。
四、基本器材
1.微量吸管： 2.血细胞计数盘：改良Neubauer计数盘
3.试剂 红细胞稀释液：Hayem液，NS，枸橼酸钠甲醛盐水等 白细胞稀释液：冰乙酸、结晶紫
÷4：为每大方格（即0.1μl）内白细胞平均数。 ×10：1个大方格的容积为0.1μl，换算成1μl。 ×20：血液的稀释倍数。 ×106：将μl换算成L
【报告方式】X.X × 109/L
镜下情况
【六方、法方学法评价学】评价
方法
优点
显微镜法
WHO参考方法 简单，经济 校准用 基层单位和分散检测 仪器复核
正确使用器材
稀释倍数不准、混合不匀
提高操作技能
充液不当
百度文库
器材处理及使用不当
细胞识别错误
检测t、检测T、计数原则
仪器误差 器材（计数板、盖片、吸管等） 校正各种器材 不准确、不精密
分布误差 血细胞在计数池分布不均匀
扩大细胞计数范 围和（或）数量
白细胞数量（×109/L） 措施
＜3
扩大计数范围
缩小稀释倍数
新生儿：RBC明显增高、两周后下降，6-7岁最低 男性：25岁-35岁达高峰 女性：13岁-15岁达高值，21岁-35岁低水平，以后渐增高
• 关于血细胞计数误差来源,不属于技术误差的是 取血部位不当 稀释倍数不准 充液不当 计数域误差
• 取10μl血加至3.99ml红细胞稀释液中混匀,静置后 滴入计数盘,计数中央大方格中10个中方格内红 细胞数为500个,应报告红细胞数为 2.50×1012/L 5.00×1012/L 6.25×1012/L 10.00×1012/L
2.柠檬酸盐甲醛盐水 氯化钠 0.6g 调节渗透压 柠檬酸钠 1.0g 调节渗透压，抗凝 36%甲醛 1ml 防腐 蒸馏水加至100ml，过滤2次后使用。 3.生理盐水或加1%甲醛的生理盐水
五、细胞计数流程
【计算】
N/4×10 ×20 ×106/L=N /20×109=白细胞/L
式中：在法定计量单位制中用△.△△×109/L表示 N：为4个大方格内白细胞总数。
100
实际白细胞/L=
×校正前WBC
100+有核红细胞数
八、细胞计数参考区间
1.RBC
成年男性： (4～5.5)×1012/L
成年女性： (3.5～5.0)×1012/L
新生儿：
(6.0～7.0)×1012/L
医学决定水平：＞ 6.8×1012/L，＜ 3.5×1012/L
2.WBC
成人： （4～10）109/L 新生儿： （15～20）109/L 6月～2岁：（11～12）109/L
• 红细胞计数(red blood cell count，RBC) • 白细胞计数(white blood cell count，WBC)
一、细胞发育演变
二、细胞计数定义
红细胞/白细胞计数:测定单位体积血液中细胞数量
仪器法 • 血细胞分析依法 手工法 • 显微镜计数法
三、细胞计数原理
【RBC原理】等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计 数池后，在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量， 换算求出每升血液中的红细胞数量。
0.1mm
计数原则
计数原则
总原则：循一定方向 压线细胞数上不数下 数左不数右
（1）压单线细胞 （2）压双线细胞 ：以压外线为压线
【试剂】 红细胞稀释液：任选一种
1.Hayem稀释液：氯化钠1.0g、硫酸钠（含10个结晶 水）5.0g，氯化高汞0.5g，蒸馏水加至200mL，过滤 后使用。
氯化钠---调节渗透浓度 硫酸钠---提高比重防止红细胞粘连 氯化高汞---防腐剂，有毒