HPLC法测定盐酸二氧丙嗪片的含量

HPLC法测定盐酸二氧丙嗪片的含量
目的建立HPLC法测定盐酸二氧丙嗪片含量的方法。

方法采用HPLC 法，C18柱（46 mm×200 mm，5 μm）；流动相为醋酸盐缓冲液（取0.05 mol/L 的醋酸铵溶液1 000 mL，加三乙胺1 mL，用醋酸调节pH值至6.5）-乙腈（75︰25）；检测波长为258 nm。

结果盐酸二氧丙嗪在2.21～22.08 μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.999 9），平均回收率为99.76%，RSD=0.52%。

结论本方法简便、快速、准确，专属性强，可作为盐酸二氧丙嗪片的含量测定方法。

标签：HPLC法；盐酸二氧丙嗪片；含量
盐酸二氧丙嗪片又名咳速克，具有较强的镇咳作用，并具有抗组胺、解除平滑肌痉挛、抗炎和局部麻醉作用。

适用于镇咳、平喘，也适用于治疗荨麻疹及皮肤瘙痒症等。

关于其含量测定方法，《中国药典2010年版二部》为紫外分光光度法，用0.1 mol/L的盐酸溶液提取后测定其吸光度，该方法专属性差，杂质对测定有干扰[1]。

本实验建立用高效液相色谱法测定盐酸二氧丙嗪的含量，通过色谱条件及系统适应性试验，测出盐酸二氧丙嗪的含量与药典方法比较得出：HPLC 法测定其含量，操作简便，灵敏，专属性强，可作为本品的质量控制[2]。

1?仪器与试药
岛津UV-2450型紫外分光光度计，METTLER双量程电子天平，HP1100高效液相色谱仪，在线脱气机，HP1100化学工作站，Agilent G1313ALS自动进样器。

盐酸二氧丙嗪对照品（中国药品生物制品检定所，批号10299-0001，供含量测定用）；盐酸二氧丙嗪片（焦作福瑞堂制药有限公司生产，H41021659），批号：20110608，20110611，20110703；水为超纯水；乙腈为色谱纯；其他试剂为分析纯。

2?方法与结果
2.1?色谱条件
色谱柱：Diamonsil-C18柱（46 mm×200 mm，5 μm）；流动相：醋酸盐缓冲液（取0.05 mol/L的醋酸铵溶液1 000mL，加三乙胺1 mL，用醋酸调节pH值至6.5）-乙腈（75︰25）；流速：1.00 mL/min；检测波长258 nm；灵敏度：0.01 A VFS；柱温：25℃；进样量：20 μL。

2.2?对照品溶液的制备
取盐酸二氧丙嗪对照品适量，精密称定，加流动相制成每毫升含0.276 mg 盐酸二氧丙嗪的溶液，作为对照品贮备溶液。

精密吸取对照品贮备溶液5.0 mL，置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得浓度为55.2 μg/mL的对照品溶液[3]。

2.3?供试品溶液的制备
取本品20片，分别除去包衣后，用分析天平精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于盐酸二氧丙嗪5.0 mg），分别放置100 mL量瓶中，加流动相适量溶解，然后用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5.0 mL，置25 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液[4]。

2.4?系统适用性试验[5]
分别取已经制备好的盐酸二氧丙嗪的对照溶液、供试品溶液和阴性溶液，按照2.1项下的色谱条件，分别准确进样20 μL，进行系统适用性试验，考察系统适用性。

见图1。

2.5?线性关系的考察
精密量取对照品溶液1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 mL，分置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

对照品溶液的浓度分别为：2.21、5.52、11.04、16.56、22.08 μg/mL。

分别吸取20 μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，以对照品进样量（μg）为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行线性回归，计算回归方程：Y=29 362.3X+301.02，r=0.999 9 结果表明，在2.21～22.08 μg/mL 范围内对照品盐酸二氧丙嗪呈良好的线性关系[6]。

2.6?进样精密度试验
按2.1项下的色谱条件，取浓度为11.04 μg/mL的盐酸二氧丙嗪对照品溶液，重复进样5次，测定色谱峰的峰面积，RSD为0.69%，结果表明此种方法精密度良好。

2.7?稳定性试验
精密吸取2.3项下的供试品溶液，分别于放置0、2、4、6、8、12 h后，分别吸取20 μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，结果盐酸二氧丙嗪的RSD为0.82%。

表明样品在12 h内稳定。

2.8?重复性试验
取批号20110608的样品，按照样品测定方法操作，依法平行测定6次，记录峰面积，计算盐酸二氧丙嗪的RSD为0.77%。

结果表明该方法的重现性较好。

2.9?加样回收率试验
取已知含量的样品，分别取约0.029 g 6份，精密称定，分置100 mL量瓶中，分别加入2.3项下对照品溶液5.0 mL，用流动相超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，按2.1项下的色谱条件测定，结果见表1。

2.10?样品中盐酸二氧丙嗪的含量测定
取3批样品各20片，除去包衣后精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于盐酸二氧丙嗪5.0 mg），按照2.3项下的方法制备样品溶液，分别准确吸取20 μL，按照2.1项下色谱条件，以峰面积计算，结果见表2。

3?讨论
笔者选用258 nm作为检测波长，是将对照品溶液在
200～400 nm的波长范围内进行扫描，结果在258 nm的波长处有最大吸收；以醋酸盐缓冲液（取0.05 mol/L的醋酸铵溶液1 000 mL，加三乙胺1 mL，用醋酸调节pH值至6.5）-乙腈（75︰25）为流动相，出峰时间理想，且色谱峰形好，阴性对照无干扰[7]。

结果证明，回收率高，精密度好，杂质和辅料无影响，可用于盐酸二氧丙嗪片的含量测定。

[参考文献]
[1] 国家药典委员会.中国药典2010年版二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅤD29-31.
[2] 国家药典委员会.中国药典2010年版二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：627-628.
[3] 王友新，刘俊波，阎广华，等.HPLC法测定小儿布洛芬口服液中布洛芬的含量[J].中国医药导报，2010，7（30）：48-49.
[4] 许建平.HPLC法测定布洛芬胶囊的含量[J].中华中西医学杂志，2010，8（3）：6-7.
[5] 王艳芝.HPLC法测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量[J].中国医药导报，2010，7（30）：44-45.
[6] 周岐勋，李健和，徐幸民.高效液相色谱法测定盐酸甲氯芬酯分散片含量及有关物质[J].中国当代医药，2009，16（4）：73-76.
[7] 杨斌.HPLC法测定蒲公英中绿原酸的含量[J].西北药学杂志，2009，24（3）：182-183.。