高中生物 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养练习
高中生物高考专题12 微生物的培养和应用(解析版)
2020届高考生物难点及易错题精讲精练专题12 微生物的培养和应用【难点精讲】一、微生物的实验室培养和无菌技术例题：(2018·全国Ⅱ，37)在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具___________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_____________________________________________________________________________。
(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能_______________________。
在照射前，适量喷洒________，可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是____________________。
【答案】(1)可以(2)在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽【解析】(1)干热灭菌是指将物品放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃条件下加热1～2 h。
耐高温、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等，可采用干热灭菌的方法。
(2)巴氏消毒法是在70～75 ℃条件下煮30 min或在80 ℃条件下煮15 min，可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营养物质损失较少。
(3)接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30 min，紫外线能破坏微生物的DNA结构，以杀死物体表面或空气中的微生物。
在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以强化消毒效果。
《微生物的培养与应用》测试题
选修1专题2《微生物的培养与应用》章检测一、选择题1. 下列对菌落的表述不正确的是A. 每个菌落都是由多种细菌大量繁殖而成B. 各种霉菌在面包上生长形成的不同颜色的斑块即为菌落C. 噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解，菌落变得透明D. 细菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同2. 将醋酸菌接种到四个相同的培养基中，放在以下条件下培养，其中菌落形成最快的是3. 下列说法不正确的是（）A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。
4. 利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌5. 某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用( )A．天然培养基 B．稀释涂布平板法C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D．用显微镜直接观察、寻找，再培养6. 稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。
下列相关叙述错误的是A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理7. 培养基、培养皿、接种环、实验操作员的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤8.微生物的接种技术最常用的有①平板划线法②稀释涂布平板法③斜面接种④穿刺接种A.①②③B.①②C.②③④D.①②③④9. 下列是对四种微生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是微生物种类乳酸菌根瘤菌硝化细菌衣藻A 能源糖类光能NH3光能B 碳源糖类CO2CO2CO2C 氮源NO3－N2NH3NO3－D 代谢类型异样厌氧型自养需养型自养需养型自养需养型A.整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近进行B.接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后即可伸入菌种试管挑取少许菌种C.菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次D.带菌的接种环应在培养基斜面上由底部向上轻轻划“S”型曲线11. 下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是A.操作顺序为配制培养基、调节pH、分装、灭菌、包扎、倒平板B.琼脂在制备固体培养基时，可作为凝固剂C.将培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.将培养基趁热分装到试管中，培养基的高度约为试管高度的1∕512. 细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌A．接种环、手、培养基 B．高压锅、手、接种环C．培养基、手、接种环 D．接种环、手、高压锅13. 有关平板划线操作正确的是（）A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后无需通过火焰，马上塞上棉塞即可C．将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人恒温培养箱中培养14. 通常用来作为菌种鉴定的重要依据是A.菌落的特征B.细菌的形态C.细菌体积D.细菌结构15. 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的选择培养基 D．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基16. 请选出下列正确的取样培养操作步骤①土壤取样②称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中③吸取0.1ml进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①②③④ B．①③②④C．①②④③ D．①④②③17.下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是( )A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源18.关于灭菌和消毒的理解不．正确的是( )A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等19.产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( )A．一个细菌，液体培养基B．许多细菌，液体培养基C．一个细菌，固体培养基 D．许多细菌，固体培养基20.培养基中浓度过高抑制微生物生长的原因是（）A含热量太多 B 会使微生物失水C 导致微生物休眠D培养基中的碳源和氮源比例失衡21.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂22.下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖23.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板24.如右图是微生物平板划线示意图。
选修1_专题2_课题1 微生物的实验室培养 训练案及答案
高二生物选修1 训练案一、选择题：1．下列4种生物中，哪一种生物的细胞结构与其他3种生物的细胞有明显的区别：（）A．酵母菌B．乳酸菌C．青霉菌D．蘑菇2．细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌。
如果只有在100℃的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪一种生物仍会存活？（）A．大肠杆菌B．一种青霉菌 C．枯草芽孢杆菌D．鼠伤寒沙门氏菌3．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌：（）A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针D．接种针、手、高压锅4、在微生物培养过程中，需要对培养基等进行灭菌，其标准是：（）Ａ．杀死所有的病原微生物Ｂ．杀死所有的微生物Ｃ．杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子Ｄ．使病原菌不生长5．获得纯净培养物的关键是：（）Ａ．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D.防止外来杂菌的入侵6．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是：（）A．.对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基上是否生有杂菌C．没必要放入未接种的培养基D．为了下次接种时再使用7．下列叙述错误的是：（）Ａ．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素Ｂ．培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性Ｃ．培养细菌时需将PH调至中性或微碱性Ｄ．培养厌氧微生物时则需要提B供无氧的条件8．关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是：（）A.称量B.灭菌C.溶化D.倒平板9、下列有关碳源的叙述不正确的是：（）A．碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物B．某些碳源可以作为微生物的主要能源物质C．蛋白质一定不能做碳源 D．不同种类的微生物的碳源可能不同10、消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。
消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。
高中生物2 课题1 微生物的室培养习题高中生物试题
化钝市安居阳光实验学校课题1 微生物的实验室培养1.以下关于无菌技术的叙述,错误的是( ) A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B.将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌C.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触,A 项错误;用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基都应进行灭菌操作,B 项正确;实验过程中为了避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行,C 项正确;实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触,D项正确。
2.煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是( ) A.温度不同 B.时间不同C.前者适用于固体消毒,后者适用于液体消毒D.没有区别100 ℃条件下煮沸5~6 min,而巴氏消毒法则是在70~75 ℃条件下煮30 min 或在80 ℃条件下煮15 min,二者的关键区别是温度不同。
3.细菌培养基常在121 ℃高压蒸汽灭菌锅中灭菌。
如果只是在100 ℃温度下将细菌培养基灭菌,下列生物仍会存活的是( ) A.大肠杆菌 B.一种青霉菌 C.枯草芽孢杆菌的芽孢D.沙门氏菌,100 ℃的温度不能将其杀死。
4.产生形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( ) A.一个细菌、液体培养基 B.许多细菌、液体培养基 C.一个细菌、固体培养基 D.许多细菌、固体培养基,形成于固体培养基上,有一定的形态结构,肉眼可见。
由一个细菌形成的菌落,形态结构是一定的。
由许多细菌形成的菌落,可能不会有比较的形态。
5.下列操作属于灭菌的是( ) A.接种前用火焰灼烧接种环 B.接种前用酒精擦拭双手C.将平板倒置,放入培养箱中培养D.接种在酒精灯的火焰旁完成属于灭菌,B 属于消毒,C 、D 都是实验操作过程中防止杂菌污染的措施,与灭菌无关。
6.稀释涂布平板法是微生物培养中常用的一种接种方法。
下列相关叙述错误的是( )A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格的灭菌处理,形成的菌落连在一起,则得不到单个的菌落。
1.2.1 微生物的培养技术及应用(练习)高二生物(新教材人教版选择性必修3)
1.2.1微生物的培养技术及应用1、关于培养基的配制说法不正确的是()A．在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素B．微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC．虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D．配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例【答案】B【解析】培养基除需要满足碳源、氮源、水和无机盐几种营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，A正确，B错误；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，C正确；不同微生物的生长对各种营养物质的需求不同，配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例，D正确。
2、下列关于灭菌和消毒的理解，正确的是()A．灭菌是指杀死环境中的原核生物B．消毒可以杀死微生物细胞和全部芽孢C．常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法D．常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药品法【答案】C【解析】灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子，A错误；消毒可以杀死物体体表或内部的一部分微生物细胞，但是不能杀死芽孢，B错误；常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法等，C正确；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，D错误。
3、下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是()【答案】D【解析】倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；划线时，从第二次划线开始，每次划线都要从上一次划线的末端开始，让菌种来源于上一次划线末端，这样才能使菌种逐渐稀释，C正确，D错误。
4、有关平板划线操作的说法正确的是()A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．该方法常用于微生物的分离纯化【答案】D【解析】接种环在使用过程中需要多次灭菌，第一次灭菌是为了杀死其他微生物，每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种，A错误；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，接种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，C错误。
人教版选修1 专题2.课题1 微生物的实验室培养 作业
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养理一理判一判1.所有的培养基中都要加入琼脂。
(×)2．微生物在液体培养基表面生长可形成菌落。
(×)3．培养不同微生物的培养基成分完全一样。
(×)4．培养纯净培养物的关键是防止杂菌污染。
(√)5．相对于消毒，灭菌对微生物的杀灭更彻底。
(√)6．无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
(×)7．培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。
(√)8．倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置。
(√)9．若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用。
(√)10．采取平板划线接种法时，每一次划线前都要挑取菌种。
(×)11．对微生物进行计数时最好采用稀释涂布平板法。
(√)12．需要一个不接种的培养基放在相同条件下培养以检验培养基的灭菌是否合格。
(√)悟一悟1.牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供的主要营养是碳源、氮源和维生素。
2．溶化后如需调整pH，应先调节pH，再灭菌。
3．培养基灭菌后要冷却到50 ℃左右时开始倒平板，其原因是琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃会烫手，低于50 ℃时，若不及时操作，琼脂会凝固。
4．倒平板时，要使锥形瓶的瓶口通过火焰。
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
5．平板冷凝后，要将平板倒置。
因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可避免培养基中的水分过快地蒸发。
6．在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
感悟体会：练一练1.[2019·江苏高考题]下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是( )A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基解析：接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A项错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B项正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C项正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D项正确。
2019-2020学年高中生物人教版选修1配套习题：专题2 课题1 微生物的实验室培养
③接种可疑菌后,在温度为 35 ℃的环境中培养 24 h,液体培养基变浑浊,原因是
。对照组试管中应加入 ,与实验组同时培养 6 h 后,若实验组液体
培养基的浑浊度比对照组 (填“高”或“低”),则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染;反之,
则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体
3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( ) A.培养基一般都含水、碳源、氮源和无机盐 B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用 C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数 解析:涂布接种时,涂布器应在酒精灯火焰引燃灭菌,冷却后再使用;用液体培养基培养微生物时, 应放在摇床上,培养皿中的是固体培养基,应倒置放在恒温培养箱内培养;菌落肉眼可见,不需要 借助于显微镜。 答案:A
的原因是
。
解析:实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的
方法灭菌。对于一些不耐高温的液体,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高温瞬时消毒法消毒,这种
消毒方法的优点是可以杀死牛奶中的微生物,并且牛奶中的营养成分基本不被破坏。自来水通
常用氯气消毒,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微
6.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境 解析:接种环等金属用具应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。 答案:B
微生物的实验室培养习题1
微生物的实验室培养习题11.根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。
下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。
首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。
再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。
（1）用无氮培养基可以筛选出。
（2）用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出。
（3）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入。
（4）用加了较高浓度NaCl的培养基可以筛选出，根据菌落的颜色呈现色，将其挑取单独培养。
（5）利用伊红——美蓝培养基培养混合菌，菌落呈色并带有金属光泽的为，挑取该菌落单独培养。
结合显微镜镜检和进一步用伊红——美蓝培养基鉴别来确定。
（6）在无氧环境下培养混合菌，可以生长。
加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取具有生长优势的菌落，即可分离出。
【答案】（1）圆褐固氮菌（2）硝化细菌（3）青霉素（4）金黄色葡萄球菌桔红（金黄）（5）深紫大肠杆菌（6）乳酸菌和酵母菌酵母乳酸菌【解析】大肠杆菌是异养型微生物，通常用伊红——美蓝培养基来鉴别，如果培养基中有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红、美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。
硝化细菌的代谢类型是自养需氧型，其不能利用有机碳源，通常用无机碳源培养。
酵母菌是异养兼性厌氧型的真菌，其对青霉素不敏感，通常用青霉素将其从细菌中选择出来。
金黄色葡萄球菌的菌落呈金黄色，能耐高浓度的食盐。
圆褐固氮菌是自生固氮微生物，可以用缺氮培养基培养。
2.厌氧生物处理是一种低成本的废水处理技术，我国科技工作者对厌氧生物处理中的产甲烷菌进行了非常深入的研究。
下图表示在一定容器中培养的产甲烷菌的增长速率曲线示意图，请回答下列问题：(1)产甲烷菌与硝化细菌的新陈代谢类型是否相同？。
生物复习专项练习：微生物的培养与应用_微生物的实验室培养_实验制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌
实验——制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌课后练习(2)1．下列不属于微生物常用的分离、纯化方法的是（）A．单细胞挑取法B．平板划线法或稀释涂布平板法C．接斜面法D．选择培养基分离法2．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。
实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。
请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。
除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。
要使该实验所得的结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。
一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。
3．下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。
请回答：(1)充当碳源的成分是________和________。
培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______________两种。
在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是______________。
(3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片，可能的原因是什么？________________________________________________________________________。
4．关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（）A．溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上直接倒入烧杯B．常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线利喷洒化学试剂等C．配制同体培养基时加入琼脂，其目的是为微生物生长提供碳源D．用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀5．近期网络上流行一种利用制作酸奶来判断牛奶好坏的方法，以下自制酸奶的方法也随之在网络广泛流传：①将牛奶倒入玻璃杯，放在沸水中加热10分钟。
人教版高中生物选修1专题二课题1微生物的实验室培养二测试卷
专题二课题1微生物的实验室培养一一、选择题(共24小题,每小题2分,共48分)1.微生物在哪种培养基上生长会形成肉眼可见的菌落()A．液体培养基 B．固体培养基 C．选择培养基 D．鉴别培养基2.下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法中，错误的是()A．此培养基可用来培养自养型微生物B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C．表中各成分的含量按照所培养的微生物的营养需要来确定D．若除去①，此培养基可用于培养大肠杆菌3.同学在①②③三种条件下培养大肠杆菌，这三种条件是：①以葡萄糖为碳源的培养基，不断补充培养基，及时去除代谢产物②以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下：假设三种培养基中初始总糖量相等，则①②③三种条件依次对应的趋势图是()A．甲、乙、丙 B．乙、丙、甲 C．丙、甲、乙 D．丙、乙、甲4.无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是()A．紫外线照射前，适量喷洒石碳酸等消毒液，可以加强消毒效果B．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒5.在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，在培养皿中培养36小时后，统计大肠杆菌的菌落数(如表)。
下列表述错误的是()A．对照培养皿Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，表明琼脂是培养基中必需的营养成分B．对照培养皿Ⅰ和Ⅱ，说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子C．对照培养皿Ⅱ和Ⅲ，说明糖类是大肠杆菌需要的碳源D．本实验使用的是固体培养基6.下列有关培养基的叙述正确的是()A．培养基中必须含有琼脂B．不同培养基的具体配方一般不同C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在液体培养基上生长时也可形成菌落7.将配制好的培养基进行灭菌，应用()A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌 C．干热灭菌 D．煮沸灭菌8.含C、H、O、N的大分子化合物可以作为()A．异养微生物的氮源、能源B．异养微生物的碳源、氮源C．自养微生物的氮源、能源、碳源D．异养微生物的氮源、能源、碳源9.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。
人教版高中生物选修一专题2微生物的培养与应用_课题1 微生物的实验室培养 (2)
实验组 唯一氮源
的培养基
是否 接种
是
对照组
牛肉膏 蛋白胨
是
培养基
目的 结果
分离 尿素 细菌
只生长 尿素细 菌
判断该 培养基 有无选 择性
生微镜直接计数： 利用血球计数板(血细胞计数板），在显微镜下 计算一定容积里样品中微生物的数量。
缺点：
不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
五.课外延伸
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH 升高，指示剂将变红，说明该细菌能够 分解尿素。
测定饮水中大肠杆菌数量的方法是 将一定体积的水用细菌过滤器过滤后， 将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上培养， 大肠杆菌菌落呈现黑色，据黑色菌落的 数目可计算出水样中大肠杆菌的数量。
◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前 都要灭菌。
[二]制备培养基
准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。每个稀释 度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。
将稀释相同倍数的菌液，在牛肉膏蛋白胨培养基 上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因 此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照，用来判断选择 培养基是否起到了选择作用。
人为提供有利于目的菌株生长的条件 (包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止 其他微生物生长。
什么是选择培养基？
允许特定种类的微生物生长，同 时抑制或阻止其他种类微生物生长 的培养基。
3、本课题所使用培养基：
KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4`7H2O 葡萄糖
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 （计数）
_高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养三课件新人教版选修
（三）是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有 明显不同，及时观察记录的同学会发现这一 点，并能观察到其他一些细微的变化。
人教版 选修一
专题二 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
课题背景
微生物研究和应用的前提： 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 如何获得纯净培养物？ ①合适的营养和环境条件 ②确保其他微生物无法混入
一 基础知识 （一）培养基
1.概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求， 配制出供其生长繁殖的营养基质。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基 溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能 用来培养微生物吗？为什么？
答：最好不要用这个平板培养微生物。 防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之
间的培养基上滋生。
5.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？
无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃的温室 中培养24～48小时，观察是否有菌落存在以 确定是否被污染或灭菌是否彻底。
2.类型：
按物理性质划分： 按化学成分划分： 按用途划分：
（1）按物理性质划分：
固体培养基
有无 凝固剂琼脂
液体培养基
分离 鉴定
工业 生产
菌落
1.定义： 单个
固体培养基上 子细胞群体
或少数菌体 大量繁殖
2.特征： 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。
3.意义： 鉴定菌种的重要依据
（2）按化学成分划分：
（二）纯化大肠杆菌
菌落
1.定义： 单个
固体培养基上 子细胞群体
或少数菌体 大量繁殖 （肉眼可见）
2.特征： 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。
（二）纯化大肠杆菌
人教版 高中生物 选修一 专题二 课题1 微生物的实验室培养(一)
【学习目标】1、阅读“培养基”部分，回答：（1）什么是培养基，有哪些类型？（2）各种培养基共有的营养成分是哪些？（3）培养基除提供主要营养物质外，还应满足什么条件？举例说明。
2、阅读“无菌技术”部分，回答：（1）回答旁栏思考题（2）什么是消毒？什么是灭菌？二者的主要区别是什么？（3）消毒方法有哪些？适用于哪些对象？如何操作？（4）灭菌方法有哪些？列表比较（从适用物品、灭菌条件、灭菌时间方面展开）知识补充1、生长因子：微生物生长必不可少的微量有机物，如维生素、氨基酸、碱基等，一些天然物质如酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等，可为微生物提供生长因子。
2、芽孢：某些细胞在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。
一个细胞只形成一个芽孢，所以芽孢是一个休眠体而没有繁殖功能，芽孢具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压能力，芽孢的休眠能力惊人，可达几十年。
【达标检测】[必做]1、下列叙述正确的是（ ）A 、培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B 、培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C 、固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D 、微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2、关于微生物的营养，下列说法正确的是（ ）A 、同一种物质不可能既是碳源又是氮源B 、凡是碳源都提供能量C 、除水以外的无机物仅提供无机盐D 、无机氮源也能提供能量【使用时间】 第 2 周 第 1 课时 【编辑】申俊云 【审核】刘萍萍 【编号】2262021 【主题】 第二章 第一节 微生物的实验室培养（一） 2012.02.143、关于灭菌和消毒的理解不正确的是（）A、灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B、消毒和灭菌实质上是相同的C、接种环用灼烧法灭菌D、常用的消毒方法有加热法、紫外线法、化学药品法4、高温灭菌的原理是（）A、每种微生物繁殖和生长的最适温度是一定的B、微生物对于高温环境不适应C、高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸D、高温降低了环境中氧的浓度5、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒的方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤[选做]1、某小组同学为了调查湖水中细菌的情况而进行了实验。
高中生物选修一专题二微生物实验室培养知识点填空+答案
专题二微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、课题背景1．研究和应用微生物的前提是。
2．在实验室培养微生物，一方面需要，另一方面需要。
二、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质称为培养基。
2．种类：根据培养基的物理性质可将培养基可以分为、和半固体培养基。
3．琼脂：是一种从红藻中提取的，在℃以上熔化，在℃以下凝固，在常规培养条件下呈现。
琼脂是制备培养基时最常用的剂。
4．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加，培养霉菌时需将培养基的pH调至，培养细菌时需将pH调至或，培养厌氧微生物时则需要提供的条件。
5．牛肉膏，蛋白胨来源于，含有、和等营养。
三、无菌技术1．获得纯净培养物的关键是防止的入侵。
2．无菌技术围绕着展开，主要包括以下几个方面：(1)对实验操作的、操作者的衣着和进行清洁和。
(2)将用于微生物培养的器皿、和等进行。
(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_____ ______相接触。
3．无菌技术的目的：(1)防止，(2)避免。
4．消毒和灭菌四、大肠杆菌的纯化培养(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：1．计算：依据是培养基 的比例，计算配制某一体积（如100ml ）的培养基时，各种成分的用量。
2．称量：牛肉膏比较 ，可用玻棒挑取到 上，同其一块称量。
牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要 ，称后及时 。
3．溶化： 和称量纸＋少量的水（ ）取出_________→ 加_________和_________ →加 (注意：不断用玻璃棒搅拌，防止_____________而导致_____________)。
当_________完全熔化后→ 补加蒸馏水至100 mL 。
调节__________后再进行灭菌。
4．灭菌⎩⎪⎨⎪⎧培养基：_________灭菌培养皿：_____灭菌5．倒平板：待培养基冷却至_____左右时，在 附近倒平板。
高中生物选修1专题2微生物的培养与应用
4.细菌的计数
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 1.土壤取样 2.制备培养基
牛肉膏蛋白胨培养基—对照
选择培养基 -- 尿素为唯一氮源
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察
稀释涂布平板接种 稀释液的倍数的范围: 真菌:102～104 细菌:104～106 放线菌:103～105
2.灭菌 以强烈的化学或物理方法消灭体内外所有 微生物,包括芽孢和孢子。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形 的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、 高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可 以随风飘散。当环境适宜的时候，芽孢又可以萌发，形 成一个细菌.
常用消毒的方法：
每一个浓度做3个或3个以上平板,求平均值
重复实验--增强说服力和准确性
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察
时间 细菌 1-2d 放线菌 5-7d 霉菌 3-4d
温度 30～37OC 25～28OC
25～28OC
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作
筛选方法: 用显微镜直接计数 间接计数—统计平板的菌落数
间接计数法（活菌计数法）: 原理: 在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上
所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成 的，即一个菌落代表原先的一个细菌
方法: 稀释涂布平板法
计算公式:（C÷V）x M
注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30— —300的平板上进行计数。
1.土壤取样 2.制备培养基 3.接种、培养、观察 4.细菌的计数
(完整版)选修1_专题2_课题1微生物的实验室培养导学案及答案
中学高效课堂高二生物选修1导学案课题专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分，2.掌握培养基制作的一般的步骤，3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。
4.学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。
德育渗透通过本节学习，了解和掌握生物技术在日常生活中的应用，所以要认真学好生物知识。
学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。
学习难点培养基的制备和微生物的分离。
学法指导课前预习，完成自主学习内容。
课前阅读教材，完成自主学习部分，为课上合作探究作好准备。
自主学习内容教师活动（一）培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其营养基质称为培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及氧气的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
（二）无菌技术A、获得纯净培养物的关键是防止外来的人侵，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行清洁和消毒。
2．将用于微生物培养的、接种用具和培养基等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
B、消毒和灭菌1．消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有消毒法和消毒法。
2．灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。
常用的方法有：灭菌、灭菌、灭菌。
（三）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板1.计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。
2.称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3.溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。
2020高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养练习(含解析)1
微生物的实验室培养［基础全练]1．下列有关培养基的叙述，正确的是( ）A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基都只含有水、碳源、氮源和无机盐C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌解析：培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质,A正确;培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，除此之外，可能还含有维生素等,B错误；固体培养基中加入少量水不能制成液体培养基，C错误；单个细菌肉眼看不到,在固体培养基上可形成肉眼可见的单个菌落，D错误。
答案:A2．巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒，该消毒法就是加热到70～75 ℃、保持30 min，或加热到80 ℃、保持15 min,能杀死一般杂菌和病原菌.与灭菌的要求相比，巴氏消毒法（）A．不能杀灭芽孢等耐高温的细菌B．能杀灭芽孢等休眠状态的细菌C．能杀灭各种细菌，包括芽孢D．能杀灭各种真菌，包括孢子解析:由于酒、奶等食品中的某些成分在高温下易被破坏，不宜采取高温灭菌法，虽然巴氏消毒法不能杀灭芽孢等耐高温细菌，但由于奶、酒等的污染并不严重，巴氏消毒法还是能达到消毒要求的.答案:A3．防止杂菌入侵,获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。
下列叙述错误的是( ）A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B．在实验室中,切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染C．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境解析:为防止杂菌污染，研究和应用微生物时应进行消毒和灭菌，实验室可以用紫外线或化学药物进行消毒,A正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染，B 正确；接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，C错误；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养课件选修1
生长 因子
生长必不 可少的微 量有机物
酶和核酸的组成成 维生素、氨基酸、碱
分
基等
营养 要素
含义
在生物体内含量 水 很高，在低等生
物体内含量更高
作用
主要来源
不仅是优良的溶剂， 而且可维持生物大分 子结构的稳定
无机 盐
为微生物提供除 碳、氮元素以外 的各种重要元 素，包括某些大 量元素
细胞内的组成成分， 生理调节物质；
A．制作固体培养基必须加入琼脂 B．加入青霉素可得到放线菌
导学号 06350102
C．培养自生固氮菌不需氮源
D．发酵工程一般用半固体培养基
[答案] C
[解析] 固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的，但不
是唯一的，青霉素可抑制细菌和放线菌的生长，发酵工程一般
用液体培养基。自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故培
二、无菌技术
1．获得纯净培养物的关键是防止__杂__菌____的入侵。 2．消毒和灭菌 (1)消毒，常用方法有__煮__沸____消毒法、___巴__氏___消毒法和 __化__学__药__剂___消毒法。 (2) 灭 菌 ， 常 用 方 法 ： ___干__热___ 灭 菌 、 ___灼__烧___ 灭 菌 、 高__压__蒸__汽__灭菌。 三、纯化大肠杆菌的无菌操作 本实验使用__固__体____培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可 分成_制__备__培__养__基___和___纯__化__大__肠__杆__菌____两个阶段进行。
某些化能自养菌的能 源，酶的激活剂
(4)配制原则 ①目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等)。如培养 基可由简单的无机物组成，生产用的培养基内可加入化学成分 不明确的天然物质，而分类鉴定用的培养基内必须加入已知化 学成分的物质。 ②营养要协调。注意各种营养物质的浓度和比例。 ③pH要适宜。各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细 菌、放线菌和真菌的最适pH分别为：～、～和～。
2---1-微生物的实验室培养
第6页，共48页。
典例精析 2015·广元期中不同的微生物对营养物质的需要各不相
同。下列有关一种以 CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不 正确的是( )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一
第11页，共48页。
菌落
细菌的菌落特征因 种而异
第12页，共48页。
常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min； 2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或
80℃下煮15min；
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔
灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源； 4、紫外线消毒；
第3页，共48页。
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
第4页，共48页。
沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
第5页，共48页。
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和 氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生 物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细 菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧
内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。
2.灭菌： 用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物（包括
芽孢和孢子），而达到完全无菌之过程。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也 是最重要的技术。
第9页，共48页。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽 孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例
高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养11
专题2课题1微生物的实验室培养
一、课题目标
1.知识目标
a.了解有关培养基的基础知识。
b.了解消毒和灭菌方法。
2.能力目标
a.进行无菌技术操作。
b.进行微生物培养。
3.情感目标
形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
二、课题重点
无菌技术操作。
三、课题难点
无菌技术操作。
四教学流程
水、碳源、氮源、无机盐
问题2：从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？
C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。
【小结】共同归纳培养基的基本成分和主要来源。
（2）特殊成分和条件
提醒学生培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求：如乳酸杆菌时需要添加维生素，霉菌需要将培养基pH调节为酸性，细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
（二）无菌技术
讲解：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
强调无菌操作是培养微生物成功的关键。
1.主要方面
讲解无菌技术主要方面：
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；
（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
2.消毒与灭菌的比较
列表让学生进行比较。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
课题1微生物的实验室培养1．培养基物质。
的营养生长繁殖的不同需求，配制出的供其营养物质概念：人们按照微生物对(1) 1.培养基中含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子等营养物质。
2．实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
3．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。
4．平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法。
5．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物；灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括孢子和芽孢。
碳源营养成分：水、无机盐、(3)、氮源、特殊营养物质pH，此外还要满足微生物生长对氧气及的要求。
2．无菌技术(1)目的：获得纯净培养物。
(2)关键：防止的入侵。
外来杂菌(3)不同对象的无菌操作方法[连线]：1．下面是查氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分，请根据下述培养基，回答下列问题：蔗糖15 g(1)提示：固体培养基。
因为该培养基加入了凝固剂琼脂。
(2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的几类营养物质？分别是什么？提示：4类物质。
分别是碳源、氮源、无机盐和水。
(3)蔗糖提供的是哪类营养物质？NaNO3提供的是哪类营养物质？提示：蔗糖提供的是碳源。
NaNO3提供的是氮源和无机盐。
(4)在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物所需要的哪些条件？提示：满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需要。
2．探讨培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶所采用的灭菌或消毒方法。
提示：分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。
3．消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？提示：消毒是杀灭病原微生物和有害微生物，并不要求杀灭一切活的微生物；而灭菌则是杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
[跟随名师·解疑难]1．培养基的成分1．制备固体培养基2．纯化大肠杆菌(1)方法：平板划线法①：通过接种环在琼脂稀的操作，将聚集的菌种逐步连续划线固体培养基表面释分散到培养基的表面。
：将菌液进行一系列的梯度稀释②稀释涂布平板法的菌液分别涂布到稀释度，然后将不同琼脂固体培养基的表面，进行培养。
37未接种鉴定：将接种后的培养基和一个(2)的培养基都放入和12 h恒温箱中，培养_℃24 h后，分别记录观察。
(3)菌种保存：对于频繁使用的菌种，可以采用甘油管临时保藏法；对于需要长期保存的菌种，可以采用藏法。
1．培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板，你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸，感觉上以刚不烫手为准。
2．如果需要调节培养基的pH，应在哪一步骤后进行？提示：溶化后，灭菌前。
3．在用平板划线法接种大肠杆菌时，第一次划线前、每次划线前及划线操作结束后，都要灼烧接种环，请分析其目的分别是什么。
提示：提示：将接种后的培养基和一个未接种的培养基，都放在37 ℃恒温箱中培养，观察并记录结果。
[跟随名师·解疑难]1．微生物培养中有关实验操作的注意事项(1)倒平板操作：①培养基灭菌后，需冷却至50 ℃左右时才能倒平板，原因是琼脂在44 ℃以下凝固。
②培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开。
③整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。
④平板冷凝后要倒置的原因：防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，造成污染。
⑤若倒平板时，培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板应丢弃。
(2)平板划线操作：①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。
②灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
③划线时最后一区域不要与第一区域相连。
④划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。
2．稀释涂布平板操作(1)稀释操作时：每支试管及其中9 mL水、移液管均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。
(2)涂布平板时：稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无菌”，应特别注意：①酒精灯与培养皿的距离要合适。
②吸管头不要接触任何其他物体。
③吸管要在酒精灯火焰周围使用。
3．平板划线法和稀释涂布平板法的比较[例1]A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源B．除水以外的无机物仅提供无机盐C．凡是碳源都能提供能量D．有些无机氮源也能提供能量[解析] 对异养型微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。
如蛋白胨既是碳源又是氮源和能源，葡萄糖是碳源同时又是能源。
除水以外的无机物种类繁多，如CO2和N2是无机物，但也是某些微生物的碳源和氮源。
CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。
NaHCO3可作为自养型微生物的碳源和无机盐。
硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用于化能合成作用的能源。
[答案] D归纳拓展几种微生物的营养能量来源[例2]A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3～5条平行线即可D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养[解析] 在培养基上接种时，一定要做到无菌操作，以防止杂菌污染影响实验或研究的结果。
微生物无处不在，包括空气中也充满了各种微生物，所以无菌操作显得很困难，但在酒精灯火焰附近约10 cm的四周为无菌区，因而菌种试管和待接种试管管口不能离开火焰附近，接种环、棉塞也不能离开火焰附近。
接种完毕之后为了防止菌体污染，要在火焰上灼烧管口和接种环。
为防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，应将平板倒置。
[答案] D易错提醒要建立有菌观念，接种用具、器皿、空气中都充满了微生物，都有被污染的可能，必须严格地消毒灭菌。
同时，在实验室中，不可吃东西、喝水，离开时一定要洗手，以防被微生物感染。
使用过的培养基要经过高压蒸汽灭菌后才能丢弃，以免污染环境。
[随堂基础巩固]1．下列叙述正确的是( )A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌解析：选A 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
培养基的种类根据划分依据的不同而不同，如根据化学成分可分为天然培养基和合成培养基。
固体培养基是液体培养基添加凝固剂形成的，其他成分均相同。
单个的微生物形体微小，肉眼无法看到，必须借助仪器才能看到，在固体培养基上用肉眼观察到的是一个菌落。
2．下列操作错误的是( )A．用酒精擦拭双手B．用氯气消毒水源C．实验室用紫外线进行消毒D．玻璃器皿(吸管、培养皿)用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的解析：选D 玻璃器皿、金属用具等耐高温、需要保持干燥的物品，应采用干热灭菌法进行灭菌，而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌的目的。
3．下列关于牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备，叙述错误的是( )A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板D．等平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置解析：选A 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，其操作顺序为计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板；由于牛肉膏比较黏稠，称量时可连同称量纸一同放入烧杯；待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；平板冷凝后，应将平板倒过来放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
下列叙述正确的是( )A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次解析：选B 培养微生物过程中应先灭菌再倒平板；每一次划线前都要进行接种环的灼烧灭菌；接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养，光照会影响温度等条件；培养过程中观察间隔的时间一般不超过24 h。
[课时跟踪检测](满分50分时间25分钟)一、选择题(每小题3分，共24分)1．下列关于平菇培养的操作程序，正确的是( )A．配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养B．配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养C ．配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养D ．配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养解析：选D 培养平菇常用的培养基有棉子壳、花生饼、玉米芯等，具体的操作程序是：配制培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养。
)(为唯一碳源的自养微生物营养的描述错误的是2CO ．下列有关一种以2 A ．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B ．碳源物质也是该微生物的能源物质C ．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D ．水是该微生物的营养要素之一，属于无机物，不能作为微生物的能源物质。
2CO 该碳源是 B 解析：选 3．无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是( )A ．对培养操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B ．对培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C ．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行D ．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触解析：选A 灭菌是采用强烈的理化因素对用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基进行处理，使物体内外一切微生物，包括芽孢和孢子都要被杀死；实验操作者的衣着和手以及操作空间只能进行消毒。
4．关于实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作，下列说法正确的是( )A ．配制培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行B ．倒平板时，倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C ．划线接种时，灼烧接种环后立即进行再次划线D ．划线接种结束后，需将平板倒置后放入培养箱中培养解析：选D 倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，A 错误；倒入培养基后应立即盖上培养皿的皿盖，冷却后将平板倒过来放置，B 错误；划线接种时，灼烧接种环后要待其冷却后才能进行再次划线，C 错误；划线接种结束后，需将平板倒置后放入培养箱中培养，D 正确。
5．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 ℃恒温箱的目的是( )A ．对比观察培养基有没有被微生物利用B ．对比分析培养基是否被杂菌污染C ．没必要放入未接种的培养基D ．为了下次接种时再使用解析：选B 放入未接种的培养基，起到对照作用，可确定培养基是否被杂菌污染。
6．为了保存菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述错误的是( )A ．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B ．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C ．临时保藏菌种容易被污染或发生变异D ．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4 ℃保藏的方法解析：选D 对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL 甘油瓶中加入1mL 的甘油后灭菌，将1 mL 的菌液转移到甘油瓶中，放在－20 ℃的冷冻箱中保存。