毛细管电泳-毛细管

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毛细管活化:1.甲醇5min 洗去毛细管在制作过程中的矿物油和酯类;

2.水2min 冲去甲醇;

3.0.1MNaOH 15~30min 平滑毛细管内表面,活化硅羟基;

4.水10min 冲去NaOH;

5.缓冲液10min 平衡毛细管。

毛细管活化可以用专门冲洗毛细管的装置,也可以在毛细管电泳仪上设置冲洗程序活化。

毛细管涂层:可以使用真空泵涂层,也可以使用毛细管冲洗装置,或者在仪器上设置冲洗程序涂层。使用冲洗装置涂层效果较好。

毛细管灌胶:毛细管凝胶电泳中需要给毛细管灌胶。琼脂糖或者聚丙烯酰胺胶。

琼脂糖比较容易灌且不易产生气泡,注意灌胶时要一次搞定,最忌灌入又吸出,这样容易产生气泡。

聚丙烯酰胺比较难灌,分线性和交联。线性即制胶时不加入Acr-Bis,而是Acr溶液。毛细管凝胶电泳,一般用线性的,因为当它的交联度大时,虽然孔径变小、机械强度变大、但是其聚合时体积缩小严重,所以降低交联度甚至不加入Bis,使交联度为0.同时将浓度加大,聚合时凝胶体积变化不严重了,既保证机械强度,又避免气泡产生。

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