哈尔滨地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学分析

哈尔滨地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学分析

发表时间：2011-06-10T10:20:24.420Z 来源：《中外健康文摘》2011年第11期供稿作者：任莉娜1 孙亚萍2 杜溪乔1 [导读] 通过调查初步了解哈尔滨地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点

任莉娜1 孙亚萍2 杜溪乔1

（1黑龙江哈尔滨疾病预防与控制中心 150056;2杭州市余杭区疾病预防控制中心检验科 311100）

【中图分类号】R725.7【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2011)11-0155-02

【摘要】目的通过调查初步了解哈尔滨地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点。方法采用一步法RT-PCR,对2010年度随机采集哈尔滨市儿童医院3岁以下腹泻住院患儿粪便标本108份进行轮状病毒（RV）、杯状病毒（HuCV）及星状病毒（AstV）检测。结果在108份标本中共检出RV感染61份（56.48%），57份RV检测阴性的样品检出HuCV感染5份（8.77%），均为GⅡ型，同时检出AstV感染3份（5.26%）。结论 RV是哈尔滨地区婴幼儿病毒性腹泻的主要病原，HuCV和AstV也是重要病原之一。

【关键词】病毒性腹泻轮状病毒杯状病毒星状病毒病原学

腹泻病主要发生在婴幼儿中，成为婴幼儿急诊和死亡的第二位病因[1]。世界卫生组织报告显示，每年大约有150-200万婴幼儿死于腹泻有关的疾病或并发症[2]。在引起婴幼儿病毒性腹泻的各种病原体中,轮状病毒（RV）是造成重症腹泻的最常见病因，杯状病毒（HuCV）和星状病毒（AstV）也是重要病因之一。本文通过调查初步探讨哈尔滨地区婴幼儿腹泻的病毒病原学特点。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2010年选择婴幼儿腹泻发病较高的秋冬季节，在哈尔滨市儿童医院随机采集腹泻住院患儿粪便标本108份（肉眼脓血便除外）。粪便均在患儿入院初期采集，顺序编号后，冷藏运送至哈尔滨市疾病控制中心病毒检验科，-70℃冰箱保存备用。

1.2 标本处理方法见文献3。

1.3 病毒RNA的提取见文献3。

1.4 RV引物序列及检测方法见文献4。

1.5 HuCV和AstV引物序列及检测方法引物序列见文献5，一步法RT-PCR选用TaKaRa One Step RNA PCR kit(AWV)试剂盒（货号DRR024A），反应条件:50℃ 30分，94℃ 3分，(94℃ 30秒，55℃ 30秒，72℃ 1分) 35次循环，72℃ 7分；反应体系50ul：DEPC H2O 17ul, 10×One step RNA PCR buffer 5ul, dNTP Mixture(10mM) 5ul, MgCl2(25mM) 10ul, RNase Inhibitor(40U/ul) 1ul, AMV RTase XL(5U/ul) 1ul, AMV-rTaq(5U/ul) 1ul,上游引物 1ul, 下游引物 1ul, RNA 10ul。

2 结果

2.1 RV感染的基本情况

收集108份腹泻住院患儿粪便标本，经一步法RT-PCR检测RV阳性的标本61例，阳性率为56.48%，61份RV阳性患儿中，0～6月龄4人占阳性患儿的6.65%、7～12月龄32人占52.46%、13～18月龄16人占26.23%、19～24月龄9人占14.75%。7～12月龄占阳性患儿百分比最高。

2.2 HuCV和AstV感染的基本情况

经RV检测阴性的57份标本进行HuCV和AstV检测，HuCV阳性5份,阳性率为8.77%（5/57），均为GⅡ型；AstV阳性3份，阳性率为5.26%（3/57），HuCV和AstV阳性患儿年龄均集中在7～12月龄。

3 讨论

RV感染引起的婴幼儿腹泻是婴幼儿腹泻的主要原因之一，本次调查RV阳性结果与课题组2007年的调查结果[3]基本一致。三种病毒感染阳性的患儿均集中在7～12月龄，与其他地市调查结果相符[5,6]，7～12月龄的婴幼儿体内保护性抗体逐渐减少，失去被动免疫，主动免疫处于建立过程中，同时该年龄段婴幼儿也是添加辅食的种类较多的阶段，由于其胃肠道生理发育和免疫状况的原因，此时抵抗力最差。 HuCV分4个属，其中诺如病毒（NoV）和札如病毒（SLV）感染人类，其中NoV分为GⅠ和GⅡ两个型，HuCV在世界各地都有广泛的传播，被研究较多的是NoV。据美国CDC统计，美国每年有3000万例胃肠炎，其中大约2300万是由NoV引起的[7]。欧洲10个监测系统的数据显示，NoV应该对1995年～2000年间超过85%的病毒性食源性疾病负责[8]。据日本IASR监测网报道，日本冬季儿童腹泻的主要病原是NoV[9]。随着我国生活水平和经济水平的不断提高，在我国发达城市是否会出现NoV引起的胃肠炎上升的趋势有待于进一步监测和研究。 AstV首次发现是于1975年，人类星状病毒分为8个血清型HAstV-1～HAstV-8[10]。AstV可引起散发也可爆发流行，已被证实为是婴幼儿、老年人及免疫缺陷病人发生腹泻的重要病原之一，有研究认为AstV已成为婴幼儿病毒性腹泻的第二位病因，仅次于轮状病毒。AstV广泛分布于世界各地，各血清型流行情况因地区和流行年份不同而有所不同，其中多以HAstV-1型为主。星状病毒感染具有较明显的季节性，一般在温带地区星状病毒感染的流行季节为冬季，而在热带地区的流行季节为雨季[11]，与轮状病毒的流行季节相似。本次调查AstV阳性检出率低于国内其他地区[12、13],可能存在标本选择性差异。

通过本次调查，初步了解了哈尔滨地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点，但本次调查样本数量较小，对于HuCV和AstV缺少完整的流行病学资料。为了能够掌握哈尔滨地区较为完整的婴幼儿病毒性腹泻的病原流行病学资料，有待于建立婴幼儿病毒性腹泻的长效监测机制。

参考文献

[1] 黄祯祥,洪涛,刘崇柏.医学病毒学基础及实验技术[M]科学出版社:616.

[2] Word Health Report.2005.Making every mother and child count.

[3] 任莉娜,张炳丽,梁英,等. 哈尔滨地区引起婴幼儿腹泻轮状病毒的分子流行病学特征[J].中国卫生检验杂志,2009(3):596-599.

[4] 任莉娜,梁英,张崇华等.A组轮状病毒G3型哈尔滨地方株VP7基因序列分析[J]. 中国卫生检验杂志,2010(11):2695-2697.

[5] 金玉,黄湘,方肇寅等.兰州地区婴幼儿病毒性腹泻的分子流行病学研究[J].中国实用儿科杂志,2006(1):15-18.