牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速测定方法_郭铁筝
检测奶粉三聚氰胺方法
检测奶粉三聚氰胺方法
奶粉中三聚氰胺的检测方法主要有以下几种：
1. HPLC-UV法：利用高效液相色谱技术结合紫外检测器，通过样品中三聚氰胺的特征吸收峰进行定量分析。
2. LC-MS/MS法：利用液相色谱联用串联质谱仪的方法，对样品中的三聚氰胺进行定量分析，具有较高的灵敏度和准确性。
3. 免疫法：通过制备抗三聚氰胺抗体或利用商用的抗体盒，然后利用抗体与三聚氰胺结合形成特定复合物，并通过免疫反应进行检测和定量。
4. 酶法：利用三聚氰胺酶催化三聚氰胺分解产生氨气，然后利用氨气检测仪器进行定量分析。
需要注意的是，以上方法在检测奶粉中三聚氰胺时，通常需要先进行样品的预处理步骤，如提取、净化、富集等，以提高检测的灵敏度和准确性。
此外，不同的方法对样品的处理和仪器设备要求也有所不同，具体操作还需要参考相关的检测标准和方法说明。
奶粉中三聚氰胺的高效液相色谱快速测定法
奶粉中三聚氰胺的高效液相色谱快速测定法作者：吴红萍陶嫣娥来源：《现代商贸工业》2012年第08期摘要：对高效液相色谱法快速测定奶粉中的三聚氰胺进行方法学考察，选用高效液相色谱法，进行线性范围试验、溶液稳定性试验、重复性试验、中间精密度试验。
高效液相色谱法快速测定奶粉中的三聚氰胺，方法线性良好，供试品溶液稳定性好。
不受检验条件、试验环境、人员变化的影响，方法操作简单，准确性好。
关键词：高效液相色谱法；快速测定；三聚氰胺中图分类号：TU文献标识码：A文章编号：1672-3198（2012）08-0187-01自2008年三聚氰胺事件以来，食品安全问题得到了广泛的关注。
“民以食为天”，食物是人类赖以生存的物质基础，食品安全与人类的生命和健康息息相关，在加强和完善食品安全的法律法规以及监督检查力度的同时，作为食品的生产加工销售企业来说，加强对所生产或销售产品的质量控制，保证上市产品的质量尤为重要。
本文对高效液相色谱法快速准确地测定奶粉中残留的三聚氰胺进行方法学考察，意在寻找准确可靠的质量控制方法。
1 试验准备1.1 仪器与试剂Agilent 1260高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，甲醇、乙腈、辛烷磺酸钠为色谱纯，乙醇、三氯乙酸、柠檬酸为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。
1.2 对照品储备液的制备取三聚氰胺对照品约50mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇-水（9∶1）使溶解．并稀释至刻度．摇匀得1ml约含三聚氰胺1mg的溶液作为对照品储备液。
1.3 样品溶液的制备取被测奶粉约2g，精密称定，置25ml容量瓶中，加入20％乙醇溶液17.5ml，用10%的三氯乙酸溶液定容至刻度．超声处理10min，摇匀，冷却至室温后，以10000转／分的转速离心处理10分钟，经0.22μm的微孔滤膜过滤，即得。
1.4 色谱条件选用岛津COLUMN VP-ODS（150×4.6，5μm）色谱柱，以缓冲液（柠檬酸2.10g，辛烷磺酸钠2.16g，加入约980ml水时溶解，调节pH值至3.0，定容至1000ml）-乙腈（90∶10）为流动相，流速1.0ml／min，柱温40℃，检测波长240nm，进样量20μl。
乳品中三聚氰胺快速检测解决方案
28 食品安全导刊 2010年11月刊ANAlySIS & TEST 自2008年三聚氰胺事件爆发以来，乳品安全一直备受关注。
为了加大对乳品行业的监管力度，使中国乳品行业迅速恢复元气，相关职能部门出台了多项措施：在质量控制方面，要求对奶源做到严格把关，有效提高乳品质量安全系数。
因此，在奶站收奶环节，企业对原料奶的检测把关显得尤为重要，同时为保证牛奶不发生腐败变质的现象，必须在最短的时间内对其进行检测并立即入罐冷藏，这些都对乳品的检测技术提出了挑战。
常规的三聚氰胺残留量检测方法主要有液相色谱/质谱法（LC-MS）、高效液相色谱（H PLC）、液相色谱串联质谱（LC-M S-M S）等，这些方法因为存在仪器设备昂贵、检测过程繁琐、检测时间太长和对检验人员的技能要求高等局限，所以不适合现场监控和大量样品的筛查，在鲜奶收购环节使用不现实。
鉴于此，如何选择一种快速、低成本的检测方法，构建从奶□ 张德红 扶胜 杜祥乐 北京望尔生物技术有限公司站、企业到政府监管的安全检测网络已成为当前迫切需要解决的问题。
目前，快速筛查技术主要有两大类：生物分析技术和化学分析技术。
生物分析技术又包含免疫学方法，该方法具有检出限低、准确性好、灵敏度高、重现性好等特点，是现在和未来快速筛查技术发展的主流技术，非常适合对原料乳的快速检测。
依托此项技术，北京望尔生物技术有限公司（以下简称北京望尔）开发出三聚氰胺酶联免疫试剂盒和胶体金试纸卡等检测产品，为广大乳品企业及相关机构提供了有效的三聚氰胺快速检测方案。
三聚氰胺酶联免疫试剂盒检测方案检测原理三聚氰胺试剂盒采用间接竞争E L I SA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的三聚氰胺将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗三聚氰胺抗体，在加入酶标二抗后，用T M B底物显色，样本吸光值与残留物三聚氰胺的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中三聚氰胺的含量。
液相色谱-串联质谱法测定奶和奶制品中三聚氰胺残留
液相色谱-串联质谱法测定奶和奶制品中三聚氰胺残留柳菡1，孙宁宁1，杨雯筌1，刘飞2，丁涛1，徐锦忠 11. 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，南京，210001，2. 赛默飞世尔科技上海有限公司色谱质谱部，上海，201206摘要研究报导了高效液相色谱电喷雾串联质谱联用（HPLC/MS/MS）测定奶和奶制品中三聚氰胺残留的方法。
三氯乙酸溶液沉淀样品中的蛋白，同时提取目标分析物，强阳离子固相萃取柱进一步富集净化后，利用液相色谱-电喷雾串联质谱测定。
方法检测低限为0.05 mg/kg，HPLC/MS/MS添加回收率72 ～ 87 ％之间（基质匹配曲线校正），相对标准偏差（RSD）在4.2％～ 8.2％。
关键词三聚氰胺；奶和奶制品；液相色谱-串联质谱法Determination of melamine residues in milk and dairy products by liquid chromatography tandem mass spectrometryHan Liu1, Fei Liu2, Ningning Sun1, Wenquan Yang1, Tao Ding1, Jinzhong Xu1,1 Animal, Plant and Food Inspection Center (APFIC) of Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Nanjing 2100012 Thermo Fisher Scientific, Shanghai，201206Abstracts: A method for analysis of melamine residues in milk and dairy products was developed by liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS). Trichloroacetic acid solutions were used to precipitate proteins and dissociate the target analytes from sample matrix. After matrix purified by strong cation exchange solid phase extraction cartridge, analyses can be performed using HPLC/MS/MS in the selected reaction monitoring (SRM) mode. The limit of dection is 0.05 mg/kg when using HPLC/MS/MS method. The mean recovery was 72 ~ 108％(matrix match calibration curve)and the standard deviation was 4.2 ~ 12.5 % by HPLC/MS/MS method.KEYWORDS:melamine; milk and dairy products; HPLC-MS/MS9月上旬，甘肃等地报告多例婴幼儿泌尿系统结石病例，调查结果表明，导致多名儿童患泌尿系统结石病的主要原因是患儿服用的奶粉中含有三聚氰胺。
奶粉中三聚氰胺含量测定——实验步骤
高效液相色谱(HPLC-UV)法测定奶粉中三聚氰胺的含量一、实验目的：测量奶粉中三聚氰胺的含量是否达标。
二、仪器：高效液相色谱仪，离心机，固相萃取装置，柱温箱，紫外检测器，C18柱，超声波清洗器，pH 计，电子天平，氮气吹干仪，涡旋混合器；5mL移液管1支,1mL刻度移液管1支，25mL容量瓶1个，100mL容量瓶6个，100mL烧杯1个，微量进样器一支。
三、试剂：三聚氰胺标准品，1%三氯乙酸，氨水，柠檬酸，庚烷磺酸钠（色谱纯），甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），二次水，甲醇水溶液（准确量取50mL甲醇和50mL水，混合备用），5%氨化甲醇（量取5mL氨水和95mL甲醇混合备用），离子对缓冲溶液（准确称取2.10g柠檬酸和2.02g 庚烷磺酸钠加水溶解后调节pH=3，定容至1L备用），三聚氰胺储备液（准确称取100mg三聚氰胺，在100mL容量瓶中用甲醇水溶液定容），净化柱（固相萃取柱，基质为苯磺酸化的聚苯乙烯），氮气。
四、实验步骤：1.样品预处理：准确称取2g样品，用10mL 1%三氯乙酸溶解后转移至25ml容量瓶中，乙腈定容。
超声提取10分钟后离心，干过滤。
用5mL移液管准确移取5mL过滤后的溶液过净化柱，依次用3mL水和3mL甲醇洗涤并抽干后后用约6mL 5%氨化甲醇洗脱。
洗脱液用氮气吹干后用1mL流动相定容，涡旋混合1分钟后经0.20 μm有机相滤膜过滤后进样。
2.色谱条件：C18 色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），以离子对缓冲溶液+乙腈（85+15）作为流动相，流量为1.0 ml/min，柱温为35 ℃，检测波长为240 nm，进样量为20 μl。
3. 标准曲线的绘制：将三聚氰胺标准储备液（1.00×10^3 mg/L）用甲醇-水溶液（1+1）逐级稀释得到浓度为1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mg/L的标准系列溶液，以峰面积（y）对浓度（x）绘制标准曲线。
高效毛细管电泳法测定牛奶和奶粉中残留的三聚氰胺.
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（ !"）［! # "］、液相色谱#质谱法（ !"#$%）［$ # %&］、气 相 色 谱法（ &" ）和 气 相 色 谱#质 谱 法（ &"#$% ）［%’，%(］及 免 疫学法［%"，%$］。!" 是 目 前 最 常 用 的 测 定 方 法，但 由 于三 聚 氰 胺 属 于 强 极 性 化 合 物，其 在 普 通 的 "%) 色 谱柱上几乎无保留，因 此 需 在 流 动 相 中 添 加 庚 烷 磺 酸钠或者辛烷磺酸钠等离子对试剂以得到较好的保 留。&"#$% 和 !"#$% 均可作为三聚氰胺的确证方 法，但 &"#$% 需 要 衍 生 化，操 作 繁 琐；由 于 !"#$% 不能使用离子对试 剂，因 此 只 能 使 用 一 些 特 殊 填 料 的色谱柱（ 例 如 强 阳 离 子 交 换 与 反 相 "%) 混 合 填 料 的色谱柱）使三聚 氰 胺 得 到 较 好 的 保 留。 毛 细 管 电 泳是近十年来蓬勃 发 展 的 一 种 检 测 方 法，因 其 具 有 分离效率高且经济 环 保 的 特 点，已 广 泛 应 用 于 医 疗 和食品安 全 检 测 领 域。!**( 年 "’’( 等［%)］建 立 了 三 聚 氰 胺 树 脂 的 毛 细 管 电 泳#质 谱 检 测 方 法，之 后 )’ 和 *+,,-./0123 等［%+］对 其 进 行 了 改 进，但 目 前 三聚氰胺的毛细管电泳检测方法尚未见报道。本文 建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的高效毛细管电泳# 二极管阵列检测器（ *4"5#676）测 定 方 法，可 作 为 牛奶和奶粉样品中是否含有三聚氰胺的初筛方法。
牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速测定方法_郭铁筝
） 三聚氰胺 （ 简称三胺 ， 学名三氨三嗪 ， 别名蜜胺 、 氰尿酰胺 、 三聚酰胺 ， 分子式为 Ｃ 是一 ｍ ｅ ｌ ａ ｍ ｉ ｎ ｅ ３Ｎ ６Ｈ ６， 种重要的氮杂环有机化工原料 ， 具有一定的肾毒性 ． 三聚氰胺分子中含有大量氮 元 素 ， 而用全氮法测定蛋白 ， 伪蛋白氮 ” 所以一些不法厂家在产品中添加三聚氰胺粉以提高蛋白质含量 ． 三聚氰 质含量时不能区分这种 “ 胺显弱碱性 ， 能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐 ， 在强酸或强碱液中 ， 三聚氰胺发生水解 ， 胺基逐步被羟基取 代， 生成三聚氰酸二酰胺 、 三聚氰酸 － 酰胺和三聚氰酸 ． 乳及乳制品是大众消 费 食 品 ， 公 众 日 常 消 费 量 很 大， 发生在我国的乳制品三聚氰胺污染事件 ， 已经对我国乳品行业造成了极大的负面影 响 ． 因 此， 测定“ 伪 蛋 白” 三聚氰胺 ， 对保证乳制品的质量安全 、 维护人们的身体健康和促进对外贸易具有重要意义 ． ２ ０ １ １ 年 ４ 月我国 卫生部等 ５ 部门联合发布第 １ 公布了我国三聚氰胺在食品中的限量值 ， 即婴幼儿方乳粉中三聚 ０ 号公告 ， ／ ， ／ ， 其他食品中三聚氰胺的限量值为 ２． 高于上述限量的食品一律不得销售 ． 氰胺的限量值为 １ｍ ｋ ５ｍ ｋ ｇ ｇ ｇ ｇ
奶及奶制品中三聚氰胺的检测
奶及奶制品中三聚氰胺的检测□梁海霞连云港市食品药品检验检测中心郭瑛连云港市质量技术综合检验检测中心陈健周文梅连云港市食品药品检验检测中心摘要：随着人们生活质量的不断提高，奶及奶制品的食品安全事件引发了人们普遍的关注。
一些居心不良的人将三 聚象胺加入奶及奶制品之中，导致原料奶及奶制品受到极大的污染，对于人体的健康和安全造成了极大的威胁和危害。
为此，要注重对奶及奶制品中三聚氰胺的检测，采用多样化的检测技术和方法，确保奶及奶制品的食品安全。
关键词：奶及奶制品；三聚氛胺；检测技术随着人们对食品安全健康问题关注度的提升，奶及奶制品中三聚氰胺 的检测成为人们关注的焦点和话题。
一些不法商贩将三聚氰胺冒充蛋白质 添加到奶及奶制品之中，以提升奶及 奶制品的氮含量，导致人体内部形成 无法溶解的氰尿酸三聚氰胺结石，对 人体的肾脏和泌尿系统造成极大的危 害。
为此，要加强对奶及奶制品中的 三聚氰胺的检测，采用多样化检测技 术和方法，并开发和应用简单快速、灵敏高、特异性强的三聚氰胺检测技 术一纳米孔单通道技术，以较好地 实现对奶及奶制品中三聚氟胺的检测。
1三聚氰胺及其在食品中的检测标准三聚氰胺是一种几乎无味的白色单斜晶体，可溶于水、甲醇、甲醛、甘油、吡啶等有机溶剂之中，大多用 于塑料制品生产或粘合剂、金属抗老 化剂、着色剂的生产中，它进入到人 体之中会刺激人体的呼吸道，引发恶 心、呕吐和腹泻等现象，如果人体摄 入微量的三聚氰胺不会造成威胁，而 如果摄入过多则会超出人体肾脏所承 受的排泄能力，引发人体的肾衰竭甚 至死亡现象。
在2007年、2008年的 与三聚氟胺相关的食物中毒事件之中，出现有大面积的婴幼儿因食用含有三 聚氟胺的奶粉或奶制品而引发肾管道 阻塞、肾结石甚至死亡的案例。
为此，我国规定在奶及奶制品中的三聚氰胺 的最大限量值为2.5 mg/kg。
2三聚氰胺的检测方法分析2.1仪器检测分析方法(1)毛细管电泳法（CE)。
超高速液相色谱测定奶粉中的三聚氰胺
收稿日期:2008 11 20 修回日期:2009 01 18*通讯联系人:史烨弘,男,在读博士生,研究方向为环境化学.第25卷第2期V ol.25 N o.2分析科学学报JO U RN AL O F A N AL Y T ICA L SCIEN CE 2009年4月A pr.2009文章编号:1006 6144(2009)02 0214 03超高速液相色谱测定奶粉中的三聚氰胺史烨弘*1,石欲容2(1.北京大学地球与空间科学学院二恶英实验室,北京100871;2.天美(中国)科学仪器有限公司,北京100009)摘 要:使用超高速液相色谱仪(LCU),在LaChromU ltra C18柱(50 2.0mm i.d.,2 m )上,以10m ol/L 柠檬酸-10m ol/L 辛烷磺酸钠/CH 3CN 为流动相,紫外240nm检测,2.2min 内快速检测出奶粉中的三聚氰胺。
结果表明,三聚氰胺浓度在0.25~100 g/m L 范围内线性关系良好(R 2>0.999),平均回收率为87%~95%,保留时间的相对标准偏差为0.26%~0.38%,峰面积的相对标准偏差为0.91%~ 1.82%。
该方法适用于大批量样品的常规分析。
关键词:超高速液相色谱仪;三聚氰胺;奶粉中图分类号:O657.7+2 文献标识码:A三聚氰胺(Melamine)是一种重要的氮杂环有机化工原料,能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐。
它是一种用途广泛的有机化工中间产物,最主要的用途是作为生产三聚氰胺/甲醛树脂(M F)的原料,还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。
目前用于三聚氰胺的检测方法有高效液相色谱(H PLC)法[1-4]、液相色谱 质谱法[5,6]、超高速液相色谱 质谱法[7]。
本文采用超高速液相色谱仪,紫外240nm 检测,在2.2m in 内很好的分离分析奶粉中三聚氰胺,方法适用于常规大批量样品的检测。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂LaChromU ltra 超高速液相色谱仪(日本,日立公司),包括L 2160U 输液泵、L 2200U 自动进样器、L 2300柱温箱、L 2400U 紫外检测器、EZ Chrom ELite 系统工作站;IKA Basic 均质器;津腾0.2 m 针筒式微孔滤膜过滤器。
基于QuEChERS前处理技术和弱阳离子交换色谱的牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法
基于QuEChERS前处理技术和弱阳离子交换色谱的牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法魏杰;郭志谋;沈爱金;章飞芳;梁鑫淼【摘要】A simple , rapid method for the determination of melamine in milk and milk powder was developed using QuEChERS approach coupled with weak cation exchange chromatography (WCX). The samples were extracted and cleaned-up by medicinal alcohol and lipid adsorbent (LAS) simultaneously, then centrifuged and filtered for high performance liquid chromatographic ( HPLC ) analysis. The separation was performed on a WCX column ( 150 mm × 4.6 mm, 5 μm) with 2 mmol/L KH2PO4( pH 3.8 ) as mobile phase. The flow rate was 1.5 mL/min and the detection wavelength was 208 nm. The injection volume was 20 μL and the column temperature was 30 ℃. Under the optimized conditions, good linearity was obtained in the range of 0.02 - 20 mg/L with a correlation coefficient ( r2 ) of 0.9999. For samples spiked with melamine standard in the range of 1 -50 mg/kg, the average recoveries of standard in the milk and milk powder were 98.9％-105.2％ and 86.4％- 102.9％, respectively. The relative standard deviations were 0.9％-3.4％ and 1.5％- 6.7％, respectively. The limits of detection ( LOD ,S/N≥3 ) were 0.05 mg/kg ( milk ) and 0.1 mg/kg ( milk powder ). The present method is green due to not use of the toxic organic solvents.%应用QuEChERS前处理技术,并结合弱阳离子交换色谱,建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法.样品使用医用酒精(乙醇含量75%)和一种新型脂肪吸附(LAS)材料超声振荡处理,在沉淀(吸附)蛋白质和脂肪的同时提取三聚氰胺,然后经8000 r/min离心,上清液过膜直接分析.色谱分析在弱阳离子交换色谱柱(WCX)上进行,采用2 mmol/L pH为3.8的磷酸二氢钾水溶液为流动相,在5 min内实现分离分析.结果表明,该方法在0.02～20 mg/L内线性相关系数大于0.999 9.在1～50 mg/kg添加浓度范围内,牛奶的平均回收率为98.9%～105.2%,相对标准偏差(RSD)为0.9%～3.4%;奶粉的平均回收率为86.4%～102.9%,RSD为1.5%～6.7%.本方法的检出限为0.05 mg/kg(牛奶)和0.1 mg/kg(奶粉).整个分析检测过程没有使用有毒有害有机溶剂,是一种绿色的分析方法.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)007【总页数】4页(P687-690)【关键词】QuEChERS方法;弱阳离子交换色谱;快速分析;三聚氰胺;牛奶;奶粉【作者】魏杰;郭志谋;沈爱金;章飞芳;梁鑫淼【作者单位】华东理工大学药学院,上海,200237;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;华东理工大学药学院,上海,200237;华东理工大学药学院,上海,200237;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023【正文语种】中文【中图分类】O658三聚氰胺 (m elam ine)是一种三嗪类含氮杂环有机化合物,因其相对较高的含氮量(66.7%)被一些不法商贩添加到乳制品中冒充蛋白质,人体长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统损害,引起膀胱、肾部结石,并进一步诱发膀胱癌。
三聚氰胺检测技术 (1)
四、线扫描式拉曼高光谱成像技术无损检测奶粉三聚氰胺
在671.71 cm-1处的原始图像中，由于受到荧光背景的干扰，每个像素点之间的 拉曼强度值差异并不明显。经过光谱预处理后，校正图像中部分像素点的亮度 较高，说明粉三聚氰胺
四、线扫描式拉曼高光谱成像技术无损检测奶粉三聚氰胺
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
限量值
二、高效液相色谱法测定奶制品中的三聚氰胺
二、高效液相色谱法测定奶制品中的三聚氰胺
配制溶液：流动性，三氯氰胺标准溶液
色谱柱条件 试样提取和净化 标准曲线制备
二、高效液相色谱法测定奶制品中的三聚氰胺
将三聚氰胺标准系列溶液按色谱条件进样，以峰面积 A为纵坐标，质量浓度C为横坐标，绘制标准曲线，进 行线性回归，求得回归方程为A=29320C+18930， R2=0．9999。
三聚氰胺检测技术
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
研究对三聚氰胺的分子结构进行了较合理的修饰，制备了两种三聚 氰胺衍生物
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
取100μL三聚氰胺标准溶液(或样品试液)于样品垫中，溶液将沿吸水纸方向移动。 首先与胶金垫上的金标抗体结合，并一同继续向吸水纸方向移动，到达T线区域。 在T线处，溶液中的三聚氰胺与包被抗原竞争金标抗体，溶液中的三聚氰胺浓度越大，能够与 包被抗原相结合的金标抗体的量越少。胶体金的颜色(红色)越浅，通过比对颜色的深浅从而判 断三聚氰胺的含量。
3 次取样结果中均检测到了若干三聚氰胺像素点，说明在该试验参数下，奶粉样本中三 聚氰胺浓度的检测限达到了 0.01%。 随着三聚氰胺颗粒的不断增加，二值图像中三聚氰胺像素点的个数逐渐变多。检测结果 表明应用此方法获取的二值图像能够直观的显示出奶粉样本中三聚氰胺颗粒的多少和具 体的位置分布
家中快速自检三聚氰胺的方法
家中快速自检三聚氰胺的方法
继三鹿牌婴幼儿奶粉事件发生后，卫生部等相关安监部门又检测出包括蒙牛、伊利等名优企业存在三聚氰胺的22家企业的69个批次产品，并且这只是抽检，并不能涵盖这22家企业的全部产品，其他的奶粉生产企业的产品也不能完全排除含“毒”的可能性。
不可否认，有大量的奶制品已经流入了不同的家庭，毕竟有很多的家庭、很多的孩子的确需要奶粉，那么有没有简单易行的查“毒”办法共家庭使用呢?下面的办法就非常符合家庭试用：
以下方法逐步依次实施就能让你测试奶粉中是否含三聚氰胺：
1、按比平常浓的分量用热水冲奶粉，充分搅拌到不见固块，然后放入冰箱，待牛奶静置降温。
2、准备黑布一块和空杯一个。
把黑布蒙在空杯口上作为过滤器。
3、将冷却的牛奶倒在黑布上过滤。
4、如果有白色固体滤出，则用清水冲洗几次，排除其它可溶物。
5、如果冲洗后发现有白色晶体，可以将晶体放入清水中，该晶体如果沉入水底。
那就很可能是三聚氰胺，这种奶粉不能用了。
有可能极少量三聚氰胺测不出。
新闻报道，22家企业的产品三聚氰胺含量的数量级不一样。
三鹿2563mg/ml高举榜首，还有很多个位数的。
圣元从150到15.1不等，有宝宝妈妈通过上述方法试验，即使象圣元牌这样含量较少三聚氰胺的奶粉也能检测出来，说明这个办法非常有效。
电化学方法快速测定牛奶中的三聚氰胺
电化学方法快速测定牛奶中的三聚氰胺金根娣;杜诗;胡效亚【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2011(032)018【摘要】建立一种快速测定牛奶中三聚氰胺的电化学方法。
先用三氯乙酸溶解牛奶样品,通过固相萃取提取其中的三聚氰胺。
将玻碳电极在含三聚氰胺的牛奶样品提取液中进行循环伏安法扫描,在0.7V左右会出现一对氧化还原峰,此峰电流与三聚氰胺含量在15～345mg/kg的范围内呈线性关系,该方法检测三聚氰胺的检测限为5mg/kg,测定方法的回收率和相对标准偏差分别为97.3%～101.2%和3.5%～4.5%。
相对于其他测定方法,此方法的样品预处理过程简单、测定速度快、成本低、不需要复杂的仪器设备。
【总页数】5页(P291-295)【作者】金根娣;杜诗;胡效亚【作者单位】扬州市职业大学生化工程系,江苏扬州225009;扬州大学化学化工学院,江苏扬州225002;扬州大学化学化工学院,江苏扬州225002;扬州大学化学化工学院,江苏扬州225002【正文语种】中文【中图分类】O657.1【相关文献】1.巴比妥酸衍生物荧光增强法快速测定牛奶中的三聚氰胺 [J], 黄晖;向东山;李丽;李海刚;曾国平;何治柯2.气相色谱-质谱法快速测定牛奶中的三聚氰胺和三聚氰酸 [J], 李锋格;姚伟琴;苏敏;李世雨;窦辉;尚德军;朱慧萍3.牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速测定方法 [J], 郭铁筝;潘国卿;赵治国;白国涛;张春艳;纪元4.蒽醌-2-磺酸钠探针快速测定牛奶中三聚氰胺方法的研究 [J], 贝峰;刘存芳5.牛奶中氯霉素残留量LC-MS/MS快速测定方法 [J], 李琴; 王宇坤; 仵军红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
气相色谱-质谱法测定奶粉中三聚氰胺及其同系物
气相色谱-质谱法测定奶粉中三聚氰胺及其同系物冼燕萍;郭新东;罗海英;杜志峰;潘莉;吴玉銮【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2009(035)007【摘要】文中建立了奶粉中三聚氰胺及其同系物(三聚氰酸、三聚氰酸-酰胺和三聚氰酸二酰胺)含量的气相色谱-质谱测定方法.样品经溶剂提取后,取少量提取液氮吹千,硅烷化衍生后,用气相色谱-质谱法测定.三聚氯胺及其同系物在10.0-500.0 μg/L 呈线性,方法检出低限为0.15 mg/kg.在添加水平为0.5-2.0 mg/kg时,回收率为91.1%-101.3%,变异系数为2.5%-5.7%.结果表明,该法操作简便、灵敏、准确,适用于对奶粉中三聚氰胺及其同系物含量的测定.【总页数】3页(P143-145)【作者】冼燕萍;郭新东;罗海英;杜志峰;潘莉;吴玉銮【作者单位】广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广东,广州,510110;广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广东,广州,510110;广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广东,广州,510110;广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广东,广州,510110;广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广东,广州,510110;广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州),广东,广州,510110【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.气相色谱-质谱联用法测定奶粉中的三聚氰胺 [J], 娄大伟;孙秀云;姜久媛;任红;祝波;金丽;刘岩2.气相色谱串联质谱法测定奶粉,液态奶及鸡蛋中三聚氰胺的含量 [J], 董伟峰;张翠芬;陈溪;彭博;马杰3.气相色谱-质谱法测定奶粉中的三聚氰胺 [J], 孟杰;裴力民;靳凤龙4.气相色谱-质谱法测定奶粉及奶制品中的三聚氰胺 [J], 吴惠勤;黄芳;林晓珊;邓欣;马叶芬;黄晓兰;朱志鑫;罗辉泰5.气相色谱-质谱法检测奶粉中的三聚氰胺 [J], 孔祥微因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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内蒙古师范大学学报 （ 自然科学汉文版 ） ） Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｉ ｎ ｎ ｅ ｒ Ｍ ｏ ｎ ｏ ｌ ｉ ａ Ｎ ｏ ｒ ｍ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｇ ｙ（
１ 材料与方法
１． １ 试剂与材料 ／ ， 除非另有说明 ， 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯， 水为 Ｇ 甲醇（ 美国 Ｆ Ｂ Ｔ ６ ６ ８ ２ 规 定 的 一 级 水． ＨＰ Ｌ Ｃ 级） ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ ， 美国 Ｆ 美国 Ｆ ＨＰ Ｌ Ｃ 级） ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ 公 司 ；柠 檬 酸 ；庚 烷 磺 酸 钠 ， ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ公司 ；乙腈 （ ／ ／ ） 公司 ；流动相缓冲液 ： ０． ０ １ｍ ｏ ｌ Ｌ 柠檬酸 －０． ０ １ｍ ｏ ｌ Ｌ 庚烷磺酸钠 （ Ｈ＝３． ０ ． ｐ ， ／ ） ：称取适量三聚 三聚氰胺标准品 （ 纯度 ９ 美国 Ａ ９． ９％ ） Ｃ ＲＯ Ｓ 公司 ；三聚氰胺标准贮备液 （ １． ０ｍ ｍ ｌ ｇ ／ 氰胺标准品 ， 用甲醇 ∶ 水 （ 溶解并定容于 １ 于 ４℃ 条 件 下 保 存 ；标 准 工 作 溶 液 ： ７∶３， Ｖ Ｖ） ０ ０ｍＬ 容 量 瓶 中 ， 根据需要用水逐级稀释配制 ；滤膜 ： ０． ４ ５ ｍ 水相 ． μ
Ｖ ｏ ｌ ． ４ １Ｎ ｏ ． ４ Ｊ ｕ ｌ ２ ０ １ ２ ｙ
牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速测定方法
郭铁筝 ，潘国卿 ，赵治国 ，白国涛 ，张春艳 ，纪 元
（ ） 内蒙古出入境检验检疫局 ， 内蒙古 呼和浩特 ０ １ ０ ０ ２ ０ 摘 要 ：介绍了一种用高效液相色谱法测定牛奶和奶 粉 中 三 聚 氰 胺 的 快 速 方 法 ． 牛奶和奶粉试样中的三聚 提取液经离心 、 浓缩后 ， 用高 效 液 相 色 谱 仪 － 二 级 管 阵 列 测 定 器 测 定 ， 外 标 法 定 量． 氰胺用乙腈 ∶ 甲醇溶液提取 ， ／ ／ ， ／ ， 该方法的线性范围为 ０． 定 量 检 出 限 为 １． 添 加 浓 度 范 围 为 １． 回收率为 ５ ０～１ ０ ０ｍ Ｌ， ０ｍ ｋ ０～５． ０ｍ ｋ ｇ ｇ ｇ ｇ ｇ 相对标准偏差 （ 为 １． 测定方法操作简便、 快速， 回收率高， 适用于牛奶和奶 ８ ３． ８％ ～９ ６． ５％ ， Ｒ Ｓ Ｄ） ２ ７％ ～８． ６ ２％． 粉中三聚氰胺的快速测定 ． 关键词 ：三聚氰胺 ；牛奶 ；奶粉 ；快速测定 ；液相色谱法 （ ） 中图分类号 ：Ｏ ６ ５ ７． ７＋２ 文献标志码 ：Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ ８ ７ ３ ５ ２ ０ １ ２ ０ ４ ０ ４ ０ ６ ０ ４ －－ －－ －－
） 三聚氰胺 （ 简称三胺 ， 学名三氨三嗪 ， 别名蜜胺 、 氰尿酰胺 、 三聚酰胺 ， 分子式为 Ｃ 是一 ｍ ｅ ｌ ａ ｍ ｉ ｎ ｅ ３Ｎ ６Ｈ ６， 种重要的氮杂环有机化工原料 ， 具有一定的肾毒性 ． 三聚氰胺分子中含有大量氮 元 素 ， 而用全氮法测定蛋白 ， 伪蛋白氮 ” 所以一些不法厂家在产品中添加三聚氰胺粉以提高蛋白质含量 ． 三聚氰 质含量时不能区分这种 “ 胺显弱碱性 ， 能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐 ， 在强酸或强碱液中 ， 三聚氰胺发生水解 ， 胺基逐步被羟基取 代， 生成三聚氰酸二酰胺 、 三聚氰酸 － 酰胺和三聚氰酸 ． 乳及乳制品是大众消 费 食 品 ， 公 众 日 常 消 费 量 很 大， 发生在我国的乳制品三聚氰胺污染事件 ， 已经对我国乳品行业造成了极大的负面影 响 ． 因 此， 测定“ 伪 蛋 白” 三聚氰胺 ， 对保证乳制品的质量安全 、 维护人们的身体健康和促进对外贸易具有重要意义 ． ２ ０ １ １ 年 ４ 月我国 卫生部等 ５ 部门联合发布第聚 ０ 号公告 ， ／ ， ／ ， 其他食品中三聚氰胺的限量值为 ２． 高于上述限量的食品一律不得销售 ． 氰胺的限量值为 １ｍ ｋ ５ｍ ｋ ｇ ｇ ｇ ｇ
·４ ０ ８·
内蒙古师范大学学报 （ 自然科学汉文版 ）
第４ １卷
线性相关系数及定量检出限 ２． ３ 方法的线性范围 、 ／ 配制浓度为 ０． 按照选定的 ５ ０， １． ０， ２． ０， ５． ０， １ ０． ０， ２ ０． ０， ５ ０． ０， １ ０ ０． ０ｍ Ｌ 的 三 聚 氰 胺 系 列 标 准 溶 液， ｇ 色谱条件进行测定 ， 用色谱峰面积对三聚氰胺进样浓度进行线性回归 ， 其线性范围为 ０． 线性 ５ ０－１ ０ ０ｍ ． Ｌ， ｇ 方程为 ｙ＝１ 线性相关系数为 ０． ９ ２． ４ ５ ｘ＋２ ８． ０ ７， ９ ９ ９ ７． ／ ） 按照实验步骤 ， 将三聚氰胺标准溶液稀释进样 ， 以信噪比为 １ 计算 ， 三聚氰胺的 最 低 定 量 检 ０（ Ｓ Ｎ＝１ ０ ／ ／ 出浓度为 ０． 则牛奶和奶粉中三聚氰胺的最低定量检出限为 １． 不含三聚氰胺的牛奶样 品 ５ｍ Ｌ， ０ｍ ｋ ． ｇ ｇ ｇ ／ 添加 ２． 的液相色谱图见图 ２， ０ｍ Ｌ 三聚氰胺标准品的牛奶样品的液相色谱图见图 ３． ｇ
收稿日期 ： ２ ０ １ ２ ０ １ １ ０ － － ） 基金项目 ：国家质量监督检验检疫总局科研项目 （ ２ ０ ０ ９ Ｉ Ｋ １ ７ ８ ， ： 作者简介 ：郭铁筝 （ 女， 辽宁省鞍山市人 ， 内蒙古出入境检验检疫局工程师 ， 主要从事食品安 全 分 析 研 究 ， １ ９ ６ ９－ ） Ｅ－ｍ ｉ ａ ｌ ｕ ｏ ｔ ｉ ｅ ｚ ｈ ｅ ｎ ｎ ｍ ｇ ｇ ｇ ６ ３． ｃ ｏ ｍ． ＠１
／ ０ｍ ｋ 图 ２ 不含三聚氰胺的牛奶样品液相色谱图 图 ３ 添加 ２． ｇ ｇ 三聚氰胺的牛奶样品液相色谱图 ／ ｉ ． ２Ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｒ ａ ｍ ｏ ｆ ｂ ｌ ａ ｎ ｋ ｍ ｉ ｌ ｋ ｓ ａ ｍ ｌ ｅ ｉ ． ３Ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｒ ａ ｍ ｏ ｆ ｓ ｉ ｋ ｅ ｄ ｍ ｉ ｌ ｋ ｓ ａ ｍ ｌ ｅ ａ ｔ ２． ０ｍ ｋ Ｆ Ｆ ｇ ｇ ｐ ｇ ｇ ｐ ｐ ｇ ｇ
２ 结果与分析
２． １ 色谱条件的选择 采用常用的反相色谱柱 Ｃ 发现三聚氰胺在 Ｃ １ ８ 色谱柱和 Ｃ ８ 色谱柱进行三 聚 氰 胺 测 定 时 ， ８ 色谱柱上与 杂质分离效果不佳 ， 色谱峰形不理想 ． 所以实验选用 Ｃ 三聚氰胺与杂质分离效果良好 ， 能 １ ８ 色谱柱进行分离 ， 够达到色谱基线分离 ， 且基线平稳 ， 色谱峰形对称 ． 在选择流动相时 ， 进行了离子浓度 、 三聚氰胺对流动相中柠檬 Ｈ 及乙腈比例对色谱分离影响的 实 验． ｐ 酸 － 庚烷磺酸钠缓冲溶液浓度及比例变化比较敏感 ． 缓冲溶液浓度高 ， 三聚氰胺 的 出 峰 时 间 推 迟 ， 但对色谱 柱的影响较大 ． 流动相的 ｐ Ｈ 对三聚氰胺的出峰时间和分离效果影响明显 ， Ｈ＝３． ０ 时色谱保留时间和分离 ｐ ／ ／ ） ， 度均较为理想 ． 因此 ， 选用 ０． 缓冲溶液 ∶ Ｈ＝３． ０ ０ １ｍ ｏ ｌ Ｌ 柠檬酸 －０． ０ １ｍ ｏ ｌ Ｌ 庚烷磺酸钠为缓冲溶液 （ ｐ ／ 乙腈 （ 为流动相 ． ９ ０∶１ ０， Ｖ Ｖ） ２． ２ 提取溶剂的选择 通过对比乙腈 、 甲醇 、 三氯乙酸水溶液 、 乙酸铅水溶液等提取溶剂沉淀牛奶中蛋白质的效果发现 ， 三氯乙 酸水溶液 、 乙酸铅水溶液均需在浓度较大的条件下才能有效的沉淀牛奶中的蛋 白 质 ， 但 三 氯 乙 酸、 乙酸铅的 浓度过大会影响色谱柱的使用寿命 ， 甚至会造成色谱系统的堵塞 ；乙腈沉淀蛋白质的效果良好 ， 但是提取奶 （ ／ 难以进行均质提取 ；采用乙腈 ∶ 甲醇 ＝１∶１ 混合溶液提取时 ， 蛋白质沉淀效果 粉时蛋白质容易凝结 ， Ｖ Ｖ） ／ 良好 ， 蛋白质沉淀分散 ， 易于提取 ． 因此 ， 选用乙腈 ∶ 甲醇 ＝１∶１（ 混合溶液作为提取 溶 剂 ． 由于采用乙 Ｖ Ｖ） 腈溶剂提取液直接进样 ， 三聚氰胺在液相色谱上的响应值明显降低 ， 所以采取蒸发出大部分乙腈 、 甲醇 ， 用水 定容 ， 获得了较好的色谱响应值及较好的分离效果 ．
处理过程时间较长 ， 其中 Ｇ 目前 ， 液相色谱配合紫外检测器或二 耗的试剂较大 ， Ｃ－ＭＳ 方法还需要进行衍生 ． 极管阵列是最常用的检测方法 ， 但其不足在于前处理时间长 、 步骤复杂 ， 降低了检测效率 ． 本文对前处理方法 进行了改进 ， 采用有机溶剂提取牛奶和奶粉样品中的三聚氰胺 ， 不进行 Ｓ 直接进样进行测 Ｐ Ｅ 固相萃取净化 ， 定， 提高了方法的检测速度 ， 建立了一种高效液相色谱法测定牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速方法 ．
［ ］ ［ ］ ［ ０ ］ ／ 、 文献报道的三聚 氰 胺 的 测 定 方 法 有 ＨＰ 毛细管电泳 Ｌ Ｃ 法 １－２ 、 Ｇ Ｃ－ＭＳ 法 ３－４ 、 ＨＰ Ｌ Ｃ－ＭＳ ＭＳ 法 ５－１ ［ ］ ［ ［ １ １ １ ２ １ ３］ １ ４］ － 、 离子色谱法 、 酶联免疫吸附法 （ 上述方法都需要对样品进行 Ｓ 消 法 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 等 ． Ｐ Ｅ 固相萃取净化 ，
第４期
郭铁筝 等 ：牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速测定方法
·４ ０ ７·
１． ２ 仪器与设备 配有紫外 — 二极管阵列 测 定 器 ， 美 国 安 捷 伦 公 司； Ａ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ １ ２ ０ ０ｐ ｌ ｕ ｓ型高效液相色谱仪 ， ３ Ｋ １ ６型离心 － ｇ 机， 德国西格玛公司 ；Ｎ 上海爱朗仪器有限公司 ． １ ０ ０ ０ Ｄ 型旋转蒸发器 ， － １． ３ 分析方法 １． ３． １ 色 谱 条 件 色 谱 柱 ：Ａ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ Ｓ Ｂ Ｃ － ｇ １ ８ 柱 （ ） ， ；柱 温 ： ２ ５ ０ｍｍ×４． ６ｍｍ（ ｉ ． ｄ ５μ ｍ） ２ ５℃ ； 进样量 ： ５ ０ Ｌ；测定波长 ： ２ ４ ０ ｎ ｍ；流动相 ：缓 μ ， ／ ；流速 ：１ ／ ； 冲液 ∶ 乙腈 （ ９ ０ ∶ １ ０ Ｖ Ｖ） ． ０ｍ Ｌ ｍ ｉ ｎ 等度洗脱 ． ／ 采用上述色 谱 条 件 ， 测 定 浓 度 为 ２． ０ｍ Ｌ ｇ 的三聚氰胺标准品溶液 ， 其色谱图如图 １ 所示 ． 准确称取牛 １）样 品 提 取 ． １． ３． ２ 测定步 骤 （ ） 精确到 ０． 于５ 奶样品 ５ ０ １ ０ｍＬ 离心管中 ， ｇ（ ｇ ／ 加 入乙腈 ∶ 甲醇 ＝１∶１ （Ｖ Ｖ） 混 合 溶 振荡溶解１ 液２ ０． ０ｍＬ， ０ｍ ｉ ｎ后超声提取５ ， ／ 取全部上 ｍ ｉ ｎ １ ０ ０ ０ ０ ｒ ｍ ｉ ｎ 下 高 速 离 心 ５ｍ ｉ ｎ． 清液 ， 于４ 用水 ０℃ 以下旋转蒸发去除有机溶剂 ， ／ 定容至 １ 上 ０． ０ｍＬ， １ ０ ０ ０ ０ ｒ ｍ ｉ ｎ 下离 心 ５ｍ ｉ ｎ，