酶工程期末复习材料
酶工程期末复习
酶工程期末复习一、名词解释1、酶工程：是酶的生产、改性与应用的技术过程。
由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新的技术学科。
2、酶的化学修饰：通过化学基团的引入或除去，使蛋白质共价结构发生改变。
3、必需水：一般将维持酶分子完整空间构象所必需的最低水含量称为必需水。
4、抗体酶：具有催化活性的抗体，即抗体酶。
5、别构效应：调节物与酶分子的调节中心结合之后，引起酶分子构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力。
这种影响被称为别构效应或变构效应。
6、别构酶：能发生别构效应的酶称为别构酶。
7、酶活力：又称酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。
8、比活力：也称为比活性，是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数，一般用IU/mg 蛋白质表示。
9、生物传感器：由生物识别单元和物理转换器相结合所构成的分析仪器。
10、蛋白质工程：是以创造性能更适用的蛋白质分子为目的，以结构生物学与生物信息学为基础，以基因重组技术为主要手段，对天然蛋白质分子的设计和改造。
11、酶反应器12、固定化酶：固定在载体上并在一定空间范围内进行催化反应，可以反复、连续使用的酶。
13、水活度：是指在一定温度和压力下，反应体系中水的摩尔系数w χ与水活度系数w γ的乘积：ww w γχα=。
14、生物反应器：指有效利用生物反应机能的系统（场所）。
15、酶反应器：以酶或固定化酶作为催化剂进行酶促反应的装置称为酶反应器。
16、活化能：从初始反应物（初态）转化成活化状态（过渡态）所需的能量，称为活化能。
二、填空题1、酶活力测定的方法有终止法和连续反应法。
常用的方法有比色法、分光光度法、滴定法、量气法、同位素测定法、酶偶联分析。
2、酶固定化的方法有吸附法（物理吸附法、离子交换吸附法）、包埋法（网格包埋法、微囊型包埋法、脂质体包埋法）、共价结合（偶联）法、交联法。
3、酶活力是酶催化反应速率的指标，酶的比活力是酶制剂纯度的指标，酶的转换数是酶催化效率的指标。
酶工程复习资料一
酶工程复习资料一酶工程（Enzyme Engineering）是研究和应用酶的性质、结构和功能，以及改造和设计酶的方法和技术的学科。
它是生物工程的重要分支之一，与生物技术、食品工程、医药工程等领域密切相关。
本篇文档将为读者提供关于酶工程的基本概念、酶的结构与功能、酶的改造和设计等内容的复习资料。
一、酶工程的基本概念酶是生物体内的催化剂，能够在相对较低的温度和压力下加速化学反应速率。
酶工程是指利用化学和生物学的原理和方法，对酶进行改造和优化，使其在特定条件下具有更高的催化活性和稳定性。
酶工程的研究内容主要包括酶的筛选与鉴定、酶的改造与优化、酶的应用与产业化等方面。
二、酶的结构与功能酶是由蛋白质组成的，具有特定的空间结构和功能部位。
酶的空间结构由其氨基酸序列决定，而功能部位则与其所催化的反应类型相关。
酶通过与底物结合形成酶底物复合物，从而降低反应的活化能，加速反应的进行。
酶的催化活性受到pH、温度、离子浓度等环境因素的影响，最适条件下表现出最高的催化效率。
三、酶的改造与优化为了使酶具有更好的催化性能和稳定性，科学家们通过酶的改造与优化来实现这一目标。
常用的方法包括基因工程技术、蛋白工程技术、酶体外修饰等。
基因工程技术可以通过改变酶的基因序列来改变其氨基酸组成，进而改变酶的结构和功能。
蛋白工程技术则可以通过局部改变酶的氨基酸序列来提高酶的催化活性和稳定性。
酶体外修饰则是指在酶的外部添加辅助因子或改变环境条件来改善酶的催化效果。
四、酶的应用与产业化酶在生物技术、医药、食品、农业等领域具有广泛的应用前景。
在生物技术领域，酶被广泛应用于基因工程、蛋白质表达、酶联免疫法等技术中。
在医药领域，酶被应用于药物合成、药物代谢等方面。
在食品和农业领域，酶被应用于食品加工、酿酒、饲料添加等。
大学《酶工程》考试复习资料
1.酶生物合成法生产的主要工艺过程包括那几个步骤？(1)用作培养菌种及扩大生产的发酵罐的培养基的配制(2)培养基、发酵罐以及辅助设备的消毒灭菌(3)将已培养好的有活性的纯菌株以一定量转接到发酵罐中(4)接种到发酵罐中的菌株控制在最适条件下生长并形成代谢产物(5)将产物抽提并进行精制(6)回收或处理发酵过程中产生的废物和废水2.如何控制微生物发酵产酶的工艺条件？发酵过程中，为了能对生产过程进行必要的控制，需要对有关工艺参数进行定期取样测定或进行连续测量。
参数中，对发酵过程影响较大的有温度、ＰＨ、溶解氧浓度等。
(1)温度:温度对发酵的影响是多方面的，主要表现在对细胞生长、产物形成、发酵液的物理性质和生物合成方面。
例如：枯草杆菌的最适温度为34--37℃，黑曲霉的最适温度为28--32℃(2)pH:发酵过程中pH的变化取决于所用的菌种、培养基的成分和培养条件。
微生物生长和生物合成都有其最适和能够耐受的pH范围，大多数微生物生长的最适pH6.3-7.5，霉菌和酵母生长的最适pH4-6，放线菌生长的最适pH7-8。
(3)溶解氧浓度:对于好氧发酵，溶解氧浓度是最重要的参数之一。
好氧性微生物深层培养时，需要适量的溶解氧以维持其呼吸代谢和某些产物的合成，氧的不足会造成代谢异常，产量降低。
简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作:a上样：上样体积不十分严格。
b洗脱:增加溶液的离子强度c梯度洗脱法:改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/L NaCl混合溶液或0.5mol/L HCl处理。
凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。
大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理,根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。
酶工程 复习资料
第一章绪论1.何谓酶工程，试述其主要内容和任务。
酶的生产、改性与应用的技术过程称为酶工程。
酶工程的主要内容包括：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。
酶工程的主要任务是经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。
2.酶有哪些显著的催化特性？酶是生物催化剂，与非酶催化剂相比，具有专一性强、催化效率高和作用条件温和等显著特点。
3.简述影响酶催化作用的主要因素。
酶的催化作用受到底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素的影响。
5.简述酶活力单位的概念和酶活力的测定方法。
酶活力单位：在特定条件下（温度可采用25℃，pH等条件均采用最适条件），每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位，这个单位称为国际单位（IU）。
在特定条件下，每秒催化1mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特（kat）酶活力的测定方法：振荡测定法，酶柱测定法，连续测定法，固定化酶的比活力测定，酶结合效率与酶活力回收率的测定，相对酶活力的测定。
或者测定方法：化学测定法、光学测定法、气体测定法其它.酶的发展历史：4000多年前的夏禹时代——酿酒技术。
3000多年前的周朝——制造饴糖、食酱等食品。
1833年——佩恩和帕索兹从麦芽的水抽提物中得到淀粉酶。
19世纪中叶——巴斯德对酵母的乙醇发酵进行研究。
1913年——米彻利斯和曼吞根据中间产物学说，推导出米氏方程。
1926年——萨姆纳得到脲酶结晶，并证明它具有蛋白质的性质。
1960年——雅各和莫诺德提出操纵子学说。
1982年——切克发现核酸类酶。
1983年——阿尔特曼发现核糖核酸酶P的RNA 部分M1RNA具有核糖核酸酶P的催化活性。
酶的专一性分为绝对专一性和相对专一性。
相对专一性又可分为键专一性和基团专一性米氏方程：酶的可逆性抑制作用可以分为竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争性抑制。
酶工程期末复习
酶工程名词解释、填空（3*10）、简答、论述（12*2或20*1）第一章绪论3、生物工程：发酵工程（微生物工程）、酶工程、基因工程和细胞工程。
4、运用基因工程技术和发酵工程技术可改善原有酶的性能、提高酶的产率、增加酶的稳定性，使其在后提取工艺和应用过程中更容易操作。
5、酶工程分为2类：①化学酶工程：又称初级酶工程，是指天然酶、化学修饰酶、固定化酶以及人工模拟酶的研究和应用。
②生物酶工程：又称高级酶工程，是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。
主要内容包括：用基因工程技术大量生产酶（克隆酶）；对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（突变酶）；设计新酶基因，合成自然界不曾有过的新酶。
第二章酶学基础4、影响酶促反应的因素：①底物浓度：酶浓度不变，当底物浓度较低时，反应速率对底物浓度的关系呈正比关系，表现为一级反应。
随着底物浓度的增加，反应速率不再按正比升高，反应表现为混合级反应。
当底物浓度达到相当高时，底物浓度对反应速率影响变小几乎无关，反应达最大速率，为零及反应。
②酶浓度：酶活力的大小可以用一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度来表示，两者呈线性关系。
③温度：温度对酶反应速率的影响表现在两个方面，一方面是当温度升高时，反应速率加快。
另一方面由于酶是蛋白质，随着温度升高，使酶蛋白逐渐变性而失活，引起酶反应速率下降。
在较低的温度范围内，酶反应速率随温度升高而增大，但超过一定温度后，反应速率反而下降，因此只有在某一温度下，反应速率达到最大值，这个温度就称为酶反应的最适温度。
④pH：在一定pH下，酶表现最大活力，高于或低于此pH，酶活力降低，通常把表现出酶最大活力的pH称为该酶的最适pH。
酶的最适pH不是一个常数，受许多因素影响。
⑤抑制剂：不可逆抑制剂：（1）非专一性不可逆抑制剂，（2）专一性不可逆抑制剂可逆抑制剂：最重要和最常见的是竞争性抑制剂。
⑥激活剂：凡是能提高酶活性的物质都称为激活剂，其中大部分是无机离子或简单的有机化合物。
酶工程期末重点
酶工程期末复习第一章绪论1、酶是具有生物催化功能的生物大分子，分为蛋白类酶（P酶）和核酸类酶（R酶）。
2、酶的生产（enzyme production）是指通过各种方法获得人们所需的酶的技术过程。
3、酶的改性（enzyme improving）是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰，酶固定化，酶的非水相催化和酶定向进化等。
4、酶的应用（enzyme application）是通过酶的催化作用获得人们所需的物质，除去不良物质或者获取所需信息的技术过程。
5、酶活力是指在一定条件下，酶所催化的反应初速度。
单位是国际单位IU或卡特（kat）6、酶的比活力（specific activity）是酶纯度的亮度指标，是指在特定条件下，单位重量蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。
7、酶的生产方法可以分为提取分离，反生物合成法和化学合成法三种。
（1）何谓酶工程，试述其主要内容和任务酶工程是指酶的生产、改性和应用的技术过程酶工程的主要内容包括微生物细胞发酵产酶、动植物细胞培养产酶、酶的提取与分离纯化、酶分子修饰、酶固定化、酶的非水相催化、酶定向进化、酶反应器、酶的应用主要任务：经过预先设计，通过人工操作，优质生产获得人们所需的酶，并通过各种方法改进酶的催化特性，充分发挥其催化功能，对酶进行高效应用（2）酶有哪些显著的催化特性？专一性强、催化效率高、作用条件温和（3）简述影响酶催化作用的主要因素底物浓度（主要）、酶浓度、温度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度（4）简述酶活力单位的概念和测定酶活力的基本步骤-酶活力单位：在特定条件下（温度可采用25℃，pH等条件均采用最适条件），每1min催化1微摩尔的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位。
基本步骤：(1)根据酶催化的专一性，选择适宜的底物，并配制成一定浓度的底物溶液。
(2)根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的温度、pH、底物浓度、激活剂浓度等反应条件(3)在一定的条件下，将一定量的酶液和底物溶液混合均匀，适时记下反应开始的时间。
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酶⼯程期末复习资料酶⼯程期末复习资料名词解释：1.酶⼯程：⼜称为酶技术，是指酶的⽣产与应⽤的技术过程。
2.酶的⽣产：通过各种⽅法获得⼈们所需的酶的技术过程。
3.酶的改性：是通过各种⽅法改进酶的催化特性的技术过程。
4.酶的应⽤：是在特定的条件下通过酶的催化作⽤，获得⼈们所需的产物、除去不良物质或获得所需信息的技术过程。
5.酶⼯程的主要任务：经过预先设计，通过⼈⼯操作，获得⼈们所需的酶，并通过各种⽅法使酶充分发挥其催化功能。
6.酶活⼒：指在⼀定条件下，酶所催化的反应初速度。
7.酶活⼒单位：在特定条件下（温度可采⽤25℃，pH等条件均采⽤最适条件），每1 min 催化1 µmol 的底物转化为产物的酶量定义为1 个酶活⼒单位。
或在特定条件下，每秒催化1 mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特（Kat）。
1 Kat =6×107 IU8.酶的⽐活⼒：是酶纯度的⼀个指标，是指在特定条件下，单位重量（mg）蛋⽩质或RNA所具有的酶活⼒单位数。
9.酶的转换数：Kp，⼜称为摩尔催化活性，是指每个酶分⼦每分钟催化底物转化的分⼦数。
即是每摩尔酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数。
10.酶的催化周期: 转换数的倒数称为酶的催化周期。
催化周期是指酶进⾏⼀次催化所需的时间。
11.固定化酶: 固定在载体上并在⼀定空间范围内进⾏催化反应的酶。
12.酶的结合效率：⼜称为酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率。
13.酶活⼒回收率：是指固定化酶的总活⼒与⽤于固定化的总游离酶活⼒的百分率。
14.相对酶活⼒：具有相同酶蛋⽩（或酶RNA）量的固定化酶活⼒与游离酶活⼒的⽐值称为相对酶活⼒。
15.酶的定向进化技术：模拟⾃然进化过程（随机突变和⾃然选择）在体外进⾏酶基因的⼈⼯随机突变，建⽴突变基因⽂库，在⼈⼯控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
16.酶的提取分离法⽣产：是采⽤各种技术从动物、植物、微⽣物细胞或者其它含酶原料中将酶提取出来，再与所含杂质进⾏分离的技术过程。
酶工程期末复习
通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
酶分子修饰的意义：1）提高酶的活力（activity）（2）增强酶的稳定性（stability）（3）降低或消除酶的抗原性（immunological property）（4）改变酶的动力学特性，如反应温度、pH、Km化学修饰：1、金属离子置换修饰 2、大分子结合修饰 3、小分子修饰（侧链基团修饰）4、肽链有限水解修饰5、氨基酸置换修饰金属离子置换修饰（主要针对金属酶而言）α-淀粉酶中的Ca2+，谷氨酸脱氢酶中的Zn2+，过氧化氢酶分子中的Fe2+，酰基氨基酸酶分子中的Zn2+,超氧化物歧化酶分子中的Cu2+,Zn2+金属离子置换修饰的过程：a.酶的分离纯化b.除去原有的金属离子c.加入置换离子大分子结合修饰（macro molecules combine modification）采用水溶性大分子与酶的侧链基团共价结合，使酶分子的空间构象发生精细的改变，从而改变酶的特性与功能的方法。
抗原性降低或消失聚乙二醇（PEG）、肝素、右旋糖酐、环糊精、羧甲基纤维素、白蛋白、聚丙烯酸等大分子修饰(共价)的过程修饰剂的选择→修饰剂的活化→修饰→分离PEG和人血清白蛋白在消除酶分子抗原性方面效果较好。
精氨酸酶：抗癌作用，经PEG结合修饰，其抗原性消除。
L-天冬酰胺酶：经PEG结合修饰后，使抗原性显著降低甚至消除。
绝大多数酶经化学修饰后，最大反应速度Vm并没有变化，而Km会增大。
固定化酶，是指在一定空间范围内起催化作用，并能反复和连续使用的酶。
酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备成固定化酶的过程。
为什么要制备固定化酶？固定化酶的优点：可反复使用，稳定性高；易与底物和产物分开，便于分离纯化；可实现连续化生产，提高效率。
固定化方法：物理吸附法特点：操作简单、条件温和、使用过程中酶易脱落，常与其它方法结合使用。
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由活细胞产生的生物催化剂，具有特殊作用的蛋白质，能在生命体内(包括动物、植物和微生物)催化一切化学反应，维持生命特征。
是酶学基本原理与化学工程相结合而形成的一门新兴的技术科学， 以应用目的为出发点来研究酶， 利用酶的催化特性并通过工程化将相应原料转化为目的物质的技术。
水溶性酶经物理或者化学方法处理后成为不溶于水的但仍 具有酶活性的一种酶的衍生物，在催化反应中以固相状态作用于底物。
表示酶活力大小的尺度；一个国际单位(IU)是指在特定条件下(25℃)，每分钟内转化 1mol 底物或者催化形成 1mol 产物所需的酶量。
一个 Kat(卡塔尔，酶活性国 际单位)是指每秒钟内转化 1mol 底物所需的酶量， 1 Kat = 6107 IU 。
(酶活力：指酶催化一定化学反应的能力；用在一定条件下， 所催化的反应初速度来表示； 是研究酶的特性，酶制剂生产应用以及分离纯化时的一项必不可少的指标。
) 是酶纯度的量度，是指单位分量酶蛋白所具有的酶活力，单位为 IU/mg 。
比活力越大，酶纯度越高。
比活力=活力单位数/每毫克酶蛋白。
可产生一种组成型调节蛋白(regulatory protein) (一种变构蛋白)，通过与效应物(effector) (包括诱导物和辅阻遏物)的特异结合而发生变构作用，从而改变它与控制基因的结合力。
调节基因常位于调控区的上游。
位于启动基因和结构基因之间的一段碱基顺序，能特异性地与调节基因产生的变构蛋白结合，控制酶合成的时机与速度。
决定某一多肽的 DNA 模板，与酶有各自的对应关系，其中的遗传信息可转录为mRNA ，再翻译为蛋白质。
是指在一定的条件下，用适当的溶剂或者溶液处理含酶原料，使酶充分溶解到 溶剂或者溶液中的过程。
是指在份子水平上不同粒径份子的混合物在通过半透膜时，实现选择分离的技术，半透膜又称为分离膜，膜壁弥漫小孔，根据孔径大小可以分为：微滤膜( )、超滤膜(uF)、纳滤膜(NF)、反渗透膜(RO)等，分离都采用错流过滤方式。
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酶工程期末复习Chapter11.酶的催化特点：·酶具一般催化剂的特征：①只能进行热力学上允许进行的反应；②可以缩短化学反应到达平衡的时间，而不改变反应的平衡；③通过降低活化能加快化学反应速度。
·酶作为生物催化剂的特点：①高效性②专一性高（绝对，相对：键，基团）③反应条件温和④可调节性：（1）调节酶的浓度（酶量）；一种是诱导或抑制酶合成，一种是调节酶的降解速度。
（2）调节酶活力；通过激素（调节物）调节酶活力或反馈抑制调节酶活力，激活剂及抑制剂的调节。
2.酶催化作用的影响因素：①底物浓度②温度③pH ④酶浓度（酶活测定基础:S>>E）⑤抑制剂: 竞争: Km 变大，Vmax不变，酶促反应速度减小非竞争: Km不变，Vmax减小,V减小反竞争：Km 变小，Vmax减小，斜率不变⑥激活剂3.酶的命名：（氧转水裂异合123456）系统名：包括所有底物的名称和反应类型。
推荐名：只取一个较重要的底物名称和反应类型。
氧，转：系统名供体写前面，受体写后面水：底物名（水解作用化学键）（水解）酶裂：裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应系统命名：“底物-裂解的基团-裂合酶”推荐名：在裂解底物名称后面加上“脱羧酶”“醛缩酶”“脱水酶”等，在缩合反应方向更为重要时，则用“合酶”合：合成酶，连接酶，能够催化C-C、C-O、C-N 以及C-S 键的形成反应且必须与ATP分解反应相互偶联4.酶活力测定的步骤：(1)根据酶催化的专一性，选择适宜的底物，并配制成溶液。
(2)根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的温度、pH值、底物浓度、激活剂浓度等反应条件。
(3)在一定的条件下，将一定量的酶液和底物溶液混合均匀，反应时间。
(4) 运用各种生化检测技术，测定产物的生成量或底物的减少量。
注意：若不能即时测出结果的，则要及时终止反应，然后再测定。
5.名词解释：酶活单位U：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量。
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酶工程期末复习材料一.名词解释1.绝对专一性:一种酶只能催化一种底物进行一种反应,这种高度专一性称为绝对专一性。
2.相对专一性:一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反应,这种专一性称为相对专一性。
3.酶的转换数:又称摩尔催化活性,就是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。
4.催化周期:就是指酶进行一次催化所需的时间。
5.酶结合效率:又称酶的固定化率,就是指酶与载体结合的百分率。
6.酶活力回收率:就是指固定化酶的总活力与用于固定化酶的总酶活力的百分率7.沉淀分离:通过改变某些条件或添加某种物质,使酶的溶解度降低,而从溶液中沉淀析出,与其她溶质分离的技术过程。
8.盐溶:一般在低盐浓度下,蛋白质的溶解度随盐的浓度升高而增加,这种现象称为盐溶9.盐析:盐浓度升高到一定浓度后,蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降低,结果使蛋白质沉淀析出,这种现象称为盐析。
10.差速离心:就是采用不同的离心速度与离心时间,使不同沉降速度的颗粒分批分离的方法。
11.密度梯度离心:就是样品在密度梯度介质中进行离心,使沉降系数比较接近的物质得以分离的一种区带分离方法。
12.等密度梯度离心:当欲分离的不同密度范围处于离心介质的密度范围时,在离心力的作用下,不同浮力密度的颗粒或向下沉降,或向上漂浮,只要时间足够,就可以一直移动到与它们各自的浮力密度恰好相等的位置,形成区带,这种方法称为等密度梯度离心。
13.离子交换层析:利用离子交换剂上的可解离基团对各种离子的亲与力不同而达到分离目的的一种层析分离方法14.凝胶层析:又称凝胶过滤,分子排阻层析,分子筛层析等,就是指以各种多孔凝胶为固定相,利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同达到物质分离的一种层析技术。
15.超临界萃取:又称超临界流体萃取,利用遇分离物质与杂质在超临界流体中的溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。
16.超临界流体:当温度与压力超过其超临界点时,两相变为一相,这种状态下的流体称为超临界流体。
《酶工程复习资料》word版
第一章绪论1．酶：是具有生物催化功能的生物大分子，分为蛋白类酶和核酸类酶两大类别。
酶的生产：是指通过各种方法获得人们所需的酶的技术过程，主要包括微生物发酵产酶、动植物培养产酶和酶的提取与分离纯化等。
酶的改性：是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰、酶的固定化、酶非水相催化和定向进化。
酶的应用：是通过酶的催化作用获得人们所需的物质或者除去不良物质的技术过程，主要包括酶反应器的选择与设计以及酶在各个领域的应用等2．酶催化的作用特点：专一性强、催化效率高和作用条件温和等。
酶的催化作用受到底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素的影响。
在酶的应用过程中，必须控制好各种环境条件，以充分发挥酶的催化功能。
3．米氏方程：V=VmS/Km+S,Km为米氏常数，是酶催化反应速度等于最大反应速度一半时的底物浓度。
抑制剂的影响：有可逆抑制剂和不可逆抑制剂之分。
不可逆抑制剂与酶分子结合后，抑制剂难于除去，酶活性不能恢复。
可逆抑制剂与酶的结合是可逆的，只要将抑制剂除去，酶酶活力即可恢复。
可逆性抑制作用可以分为竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争性抑制三种。
①竞争性抑制：是指抑制剂和底物竞争与酶分子结合而引起的抑制作用。
抑制的效果强弱与竞争性抑制剂的浓度、底物浓度以及抑制剂和底物与酶的亲和力大小有关，随着底物浓度增加，酶的抑制作用减弱。
特点：酶催化反应的最大反应速率Vm不变，米氏常数Km 增大。
②非竞争性抑制：是指抑制剂与底物分别于酶分子上的不同位点结合而引起酶活性降低的抑制作用。
特点：最大反应速度Vm减少，米氏常数Km不变。
③反竞争性抑制：在底物与酶分子结合生成中间复合物后，抑制剂再与中间复合物结合而引起的抑制作用称为反竞争性抑制。
特点：最大反应速度Vm和米氏常数Km同时减少。
4．酶的活力测定酶活力：是指在一定条件下，酶所催化的反应初速度。
在外界条件相同的情况下，反应速度越大，意味着酶活力越高。
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1. 酶生物合成的模式有哪些？哪一种模式较为适合生产的需要？对于其他的合成模式，应如何调节发酵的条件以使其更为趋近于最佳的模式？酶生物合成的模式·同步合成型·延续合成型·中期合成型·滞后合成型概念：酶的合成与细胞生长同步进行。
当细胞进入对数生长期，酶大量产生，细胞生长进入稳定期后，酶的合成随之停止。
特点：属于这种类型的酶，其生物合成可以诱导，但不受分解代谢物阻遏和产物阻遏作用。
概念：酶的合成伴随着细胞的生长而开始，但在细胞生长进入平衡之后，酶还可以延续合成较长的一段时间。
特点：这种类型的酶可受诱导但不受分解代谢物阻遏和产物阻遏，其对应的mRNA是相当稳定的。
概念：酶的合成在细胞生长一段时间以后开始，而在细胞进入平衡期后，酶的合成也随着停止。
特点：酶的合成受到反馈阻遏，而且其所对应的mRNA 是不稳定的。
概念：只有当细胞生长进入平衡期后，酶才开始合成并大量积累。
特点：酶的合成受到分解代谢物阻遏作用。
在酶工程生产中为了提高酶的生产率，延长酶的发酵生产周期，酶最理想的生物合成模式应为部分生长偶联型（延续合成型），因为这类酶在发酵过程中没有明显的生长期和产酶区的区别，随细胞生长即有酶的产生，直到细胞生长进入平衡期之后酶还可以合成。
对于其他型的酶，要提高酶产率，可以再细胞选育上，工艺条件等方面加以条件控制。
对于同步合成型的酶，可以采用适当的生产工艺，如降低发酵温度以尽量提高其对应的mRNA的稳定性；对于滞后合成型的酶，在发酵过程中应设法尽量减少甚至借出分解代谢物阻遏，使酶的合成提早开始,控制葡萄糖等易利用碳源, 添加一定量的cAMP；对于中期合成型的酶，则要在提高mRNA稳定性和解除阻遏两方面进行。
控制末端产物浓度,添加末端产物类似物2.试以基因调节控制理论说明酶生物合成的分解代谢物阻遏作用、诱导作用及反馈阻遏作用的原理。
基因调节控制理论-------操纵子学说是指容易利用的碳源阻遏某些酶（主要是诱导酶）生物合成的现象是指加进某种物质，使酶的生物合成开始或加速进行的过程是指酶催化作用的产物或代谢途径的末端产物使该酶的合成受阻的过程3.何为酶电极、酶标免疫测定？是指在放射免疫测定的基础上发展起来的一种分析方法，它是将酶作为标记物质，使之和抗原（或抗体）结合形成酶与抗原（或抗体）复合物，然后再根据待测抗体（或抗原）与复合物专一且定量的结合关系，通过测定与待测抗体（或抗原）结合的酶的活力，从而计算出待测抗体（或抗原）的量。
酶工程期末复习T
一、名词解释（10*2’）1.酶（Enzyme)：具有生物催化功能的生物大分子，按照其化学组成，可以分为蛋白类酶（P酶）和核酸类酶（R酶）两大类别。
蛋白类酶主要由蛋白质组成，核酸类酶主要由核糖核酸（RNA）组成。
2.酶工程（Enzyme Engineering)：从应用目的出发研究酶，在一定的生物反应装置中利用酶的催化性质，将相应原料转化成有用的物质的过程，是生物技术的重要组成部分。
3.单体酶：以一个独立的三级结构为完整生物功能分子的最高结构形式的酶。
4.寡聚酶：以一个独立的四级结构为完整生物功能分子的最高结构形式的酶。
5.多酶复合体：由多种酶彼此镶嵌成一个功能完整的具有特定结构的复合体，它们相互配合依次进行，催化连续的一系列相关反应。
6. 酶活力（enzyme activity）：酶催化底物发生化学反应的能力。
测定酶活力，实际上就是测定酶促反应进行的速度。
7. 酶单位：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量。
酶含量用每克酶制剂或与每毫升酶制剂含多少酶单位来表示（U/g或U/m1）。
8. 酶的比活力：每毫克酶蛋白（酶制剂）所含的酶活力单位数称为酶的比活力（specific activity），用U/mg蛋白表示。
9.蛋白质分子设计：通过蛋白质模型和结构预测来构建具有新功能的蛋白质的技术。
10.蛋白质工程：是指基于蛋白质结构功能的研究结果，通过基因工程技术，改造现有蛋白质和设计制造新蛋白质，因而也称为第二代基因工程。
11.操作基因：可以与调节基因产生的变构蛋白（阻遏蛋白）中的一种结构结合，从而操纵酶生物合成的时机和合成速度。
12.调节基因：可产生一种阻遏蛋白，是一种有多亚基组成的变构蛋白，它可以通过与某些小分子效应物（诱导物或阻遏物）的特异结合而改变其结构，从而改变它与操纵基因的结合力。
13.蛋白质化学修饰:凡是通过活性基团的引入或去除，而使蛋白质一级结构发生改变的过程称为蛋白质的化学修饰。
酶工程复习资料(整理)
第一章：（一）酶工程的概念•是将酶、细胞或细胞器等置于特定的生物反应装置中，利用酶所具有的生物催化功能，借助工程手段将相应原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术•一、酶的分类• 1.氧化还原酶：2.转移酶：3.水解酶：4.裂合酶：5.异构酶 6.连接酶，7. 核酶（一）酶的组成形式1.单体酶( monomeric enzyme) ：由一条或多条肽链组成，肽链间以共价键结合的酶。
2 .寡聚酶(oligomeric enzyme) ：由若干相同或不相同的亚基以非共价键结合而组成，亚基一般没有活性，必须相互结合后才有活性。
3.多酶复合体(multienzyme system) ：由2个或2个以上功能相关的酶通过非共价键连接而成的、能进行连续反应的体系就是多酶复合体。
（二）酶的结构特点(holoenzyme) （apoenzyme） (cofactor)全酶 = 酶蛋白 + 辅因子（金属离子、辅酶、辅基）金属离子无机离子金属离子有机化合物辅酶、辅基⏹辅酶(coenzyme) ：指与酶蛋白结合比较松弛的小分子有机物质，通过透析方法可以除去。
例如硫胺素、焦磷酸。
⏹辅基(prosthetic group) ：是以共价键和酶蛋白结合，结合的较紧密，不能通过透析法除去，需要经过一定的化学处理才能与酶蛋白分开。
四、酶的作用机制（一）酶的结构组成及活性中心调控基团中心外必需基团酶的结构必需基团活性中心结合部位中心内必需基团催化部位活性中心以外的必需基团其它部分1、酶的活性中心(active center) ：是指结合底物和将底物转化为产物的区域，通常是相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。
2、结合部位：酶分子中与底物结合，使底物与酶的一定构象形成复合物的基团。
酶的结合基团决定酶反应的专一性。
3、催化部位：酶分子中催化底物发生化学反应并将其转变为产物的基团。
4、 4、调控基团：酶分子中一些可与其他分子发生某种程度的结合并引起酶分子空间构象的变化，对酶起激活或抑制作用的基团催化基团决定酶所催化反应的性质，同时也是决定反应的高效性。
酶工程((复习资料)
第一章绪论一.1 酶的变性与失活失活作用：凡可使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为酶的失活作用。
2 酶的回收率与纯化比3 酶的结合效率及酶活力回收率酶的结合效率又称酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率酶的结合效率=（加入的总酶活力-未结合的酶活力）/加入的总酶活力*100%酶活力回收率是指固定化酶的总活力与用于固定化的总酶活力的百分率酶活力回收率=固定化酶总活力/用于固定化的总酶活力*100%4 底物抑制及其产生的三个原因（1）、竟争性抑制某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竟争与酶活性中心结合。
当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了（2）、非竟争性抑制酶可以同时与底物及抑制剂结合，但是，中间产物ESI不能进一步分解为产物，因此，酶的活性降低。
（3）、反竞争性抑制作用酶只有在与底物结合后，才能与抑制剂结合，引起酶活性下降。
二.1 什么是酶工程?酶工程(Enzyme Engineering))又称为酶技术，是指酶的生产与应用的技术过程。
是将酶学理论与化工技术、微生物技术结合起来利用酶的催化作用进行物质转化的技术它是借助工程学手段利用酶或细胞、细胞器的特定功能提供产品的一门科学。
就酶工程本身的发展来说，包括下列主要内容：酶的产生、酶的制备、酶和细胞固定化、酶分子改造、有机介质中的酶反应、酶传感器、酶反应器、抗体酶、人工酶和模拟酶2 什么是酶的最适PH及其影响酶的反应机理在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适pH(optimum pH)。
a.过酸或过碱影响酶蛋白的构象，使酶变性失活。
b.影响酶分子中某些基团的解离状态（活性中心的基团或维持构象的一些基团）c.影响底物分子的解离状态故酶反应一般在一定的缓冲液体系中进行3 简述酶活力的测定方法（要求：快速，两个阶段，四个步骤）要求：快速、简便、准确两个阶段：酶在一定条件下与底物反应一段时间然后再测定反应物中底物或产物的浓度变化量。
酶工程期末复习资料(小字版)
绪论酶:具有生物催化功能的大分子，按照分子中起催化作用的主演组分的不同，自然界中天然存在的酶可以分为蛋白酶（p酶）和核酸酶（R酶）酶催化作用效率高的原理:酶可以使反应所需的活化能显著降低米氏方程:V为反应速度，s为底物浓度，Vm为最大反应速度，Km为米氏常数，是酶催化反应速度为最大速度一半时的底物浓度酶活力测定方法:化学测定法，光学测定法，气体测定法酶活力：是指在一定条件下，酶所催化的反应初速度。
酶活力单位（IU）:在最适的反应条件下每分钟内催化一微摩尔底物转化为产物的酶量。
（每1min催化1umol的底物转化为产物的酶量定义为一个酶活力单位）。
卡特（kat）：在特定条件下，每秒催化1mol底物转化为产物的酶量定为一卡特。
酶转换数（Kcat）:又称为摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数，即每摩尔酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数，是酶催化效率的一个指标。
（P18）第二章酶生物合成的模式：①同步合成型②延续合成型③中期合成型④滞后合成型①同步合成型：酶的生物合成与细胞生长同步。
特点：酶的合成可以诱导，但不受分解代谢物阻遏和反应产物阻遏。
这类酶所对应的mRNA很不稳定。
②延续合成型：酶的生物合成在细胞的生长阶段开始，在细胞生长进入平衡期后，酶还可以延续合成一段较长时间。
特点：可受诱导，一般不受分解代谢物和产物阻遏。
所对应的mRNA相当稳定。
③中期合成型：该类型的酶在细胞生长一段时间以后才开始，而在细胞生长进入平衡期以后，酶的生物合成也随着停止。
特点：酶的合成受产物的反馈阻遏或分解代谢物阻遏。
所对应的mRNA是不稳定的。
④滞后合成型：此类型酶是在细胞生长一段时间或者进入平衡期以后才开始其生物合成并大量积累。
又称为非生长偶联型。
许多水解酶的生物合成都属于这一类型。
特点：受分解代谢物的阻遏作用。
所对应的mRNA稳定性高。
产酶微生物有下列特点：①酶的产量高：优良的产酶微生物首先要具有高产的特性，才能有较好的开发应用价值。
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酶工程期末复习材料work Information Technology Company.2020YEAR酶工程期末复习材料一.名词解释1.绝对专一性：一种酶只能催化一种底物进行一种反应，这种高度专一性称为绝对专一性。
2.相对专一性：一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反应，这种专一性称为相对专一性。
3.酶的转换数：又称摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。
4.催化周期：是指酶进行一次催化所需的时间。
5.酶结合效率：又称酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率。
6.酶活力回收率：是指固定化酶的总活力与用于固定化酶的总酶活力的百分率7.沉淀分离：通过改变某些条件或添加某种物质，使酶的溶解度降低，而从溶液中沉淀析出，与其他溶质分离的技术过程。
8.盐溶：一般在低盐浓度下，蛋白质的溶解度随盐的浓度升高而增加，这种现象称为盐溶9.盐析：盐浓度升高到一定浓度后，蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降低，结果使蛋白质沉淀析出，这种现象称为盐析。
10.差速离心：是采用不同的离心速度和离心时间，使不同沉降速度的颗粒分批分离的方法。
11.密度梯度离心：是样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近的物质得以分离的一种区带分离方法。
12.等密度梯度离心：当欲分离的不同密度范围处于离心介质的密度范围时，在离心力的作用下，不同浮力密度的颗粒或向下沉降，或向上漂浮，只要时间足够，就可以一直移动到与它们各自的浮力密度恰好相等的位置，形成区带，这种方法称为等密度梯度离心。
13.离子交换层析：利用离子交换剂上的可解离基团对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析分离方法14.凝胶层析：又称凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等，是指以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同达到物质分离的一种层析技术。
15.超临界萃取：又称超临界流体萃取，利用遇分离物质与杂质在超临界流体中的溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。
16.超临界流体：当温度和压力超过其超临界点时，两相变为一相，这种状态下的流体称为超临界流体。
17.表面活性剂：是由极性基团和非极性基团组成两性分子，有阳离子，阴离子和非离子型表面活性剂。
18.酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的催化特性的技术过程称为酶分子修饰。
19.酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备固定化酶的过程称为酶的固定化。
20.固定化酶：固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。
21.Ks分段盐析：在一定的温度和pH条件下，通过改变离子强度是不同的酶或蛋白质分离的方法22.β分段盐析：在一定盐和离子强度的条件下，通过改变温度和pH，使不同的酶和蛋白质分离的方法。
23.酶的非水相催化：酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化。
24.离子液：由有机阳离子与有机阴离子构成的室温条件下呈液态的低熔点盐类，挥发性低，稳定性好。
25.微水介质体系：是由有机溶剂和微量水组成的反应体系，是在有机介质酶催化中广泛应用的一种反应体系26.正交束体系：胶束又称为正胶束或正胶团，是在大量水溶液中含有少量与水不相容的有机溶剂，加入表面活性剂后形成水包油的微小液滴。
27.反胶束体系：又称反胶团，是指在大量与水不相混溶的有机溶剂中，含有少量的水溶液。
加入表面活性剂后形成油包水的微小液滴。
28.必需水：维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量称为必需水29.最适水含量：在催化反应速度达到最大时的水含量称为最适水含量。
30.水活度：是指体系中水的逸度与纯水逸度之比。
31.酶分子的定向进化：是模拟自然进化过程，在体外进行酶基因的人工随机突变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
32.易错PCR：是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应，是扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
33.DNA重排技术：又称DNA改组技术，是从正突变基因文库中分离得到的同源DNA，用酶切割成随机片段，经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变的过程。
34.基因家族重排：又称基因家族改组技术，是从基因家族的若干同源基因出发，用酶切割成随机片段，经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列发生重新排布而引起基因突变的技术流程。
35.盒式诱变：是一种定点突变技术，将靶基因的一段DNA删掉，并用人工化学合成所具有的突变核苷酸的双链寡核苷酸片段取代。
36.酶反应器：用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。
二.简答题1.影响酶催化作用的因素①底物浓度的影响—附P6图1-2；②酶浓度的影响--附P6图1-3；③温度的影响--附P6图1-4；④pH的影响--附P7图1-5；⑤抑制剂的影响—附P8竞争性/非竞争性/反竞争性抑制剂的定义；⑥激活剂的影响—氯离子是α-淀粉酶的激活剂，钴离子和镁离子是葡萄糖异构酶的激活剂2.固定化酶活力测定①振荡测定法——称取一定质量的固定化酶，放进一定形状一定大小的容器中，加入一定量的底物溶液，在特定的条件下，一边振荡或搅拌，一边进行催化反应。
经过一定时间取出一定量反应液进行酶活力测定②酶柱测定法——将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应中，在适宜的条件下让底物溶液以一定的流速经过酶柱，收集反应液，测定底物的消耗量或产物的生成量③连续测定法——利用连续分光光度计对固定化酶反应液进行连续测定。
④固定化酶的比活力测定；⑤酶结合效率与酶活力回收率的测定；⑥相对酶活力的测定3.酶的生物合成的阻遏与诱导作用(P33-P35)4.酶生物合成的模式①同步合成型--属于该合成型的酶，其生物合成伴随着细胞的生长而开始，在细胞进入旺盛生长期时，酶大量合成，当细胞生长进入平衡期后，酶的合成随着停止，生长偶联型。
②延续合成型--属于该合成型的酶，其生物合成可以受诱导物的诱导，在细胞生长达到平衡期以后，仍然可以延续合成，说明这些酶所对应的mRNA相当稳定，在平衡期后相当长的一段时间内，仍然可以通过翻译而合成所对应的酶。
③中期合成型--酶的生物合成收到产物的反阻遏作用或分解代谢物阻遏作用，而酶所对应的mRNA稳定性较差。
④滞后合成型--属于该合成型的酶，要在细胞生长进入平衡期以后才开始合成，该类酶所对应的mRNA稳定性很好，可以在细胞生长进入平衡期后相当长一段时间内，继续进行酶的生物合成，非生长偶联型。
5.微生物产酶发酵工艺条件的控制①培养基的选择和控制，生产中碳源、氮源对微生物酶生产的诱导或抑制作用是最重要的考虑因素；培养基中碳源与氮源的比例是随生产的酶类、生产菌株的性质和培养阶段的不同而改变的；培养基中无机盐、生长因子和产酶促进剂也是要考虑和控制的。
②温度控制，酶生产的培养温度随菌种而不同；有的为了利于菌体生长和酶的合成，也有进行变温生产的。
③酶生产的合适pH通常和酶反应的最适pH接近；当然也有例外，pH也可能影响微生物分泌的酶系。
④溶解氧的调节控制。
6.溶解氧的调节控制①调节通气量—增大通气量可以提高溶氧速率，减少通气量使溶氧速率降低。
②调节氧的分压—提高氧的分压可以增加氧的溶解度，从而提高溶氧速率。
③调节气液接触时间—气液两相的接触时间延长，可以使氧气更多的时间溶解在培养基中。
④调节气液接触面积—增加气液两相的接触面积有利于提高氧气溶解到培养液中的溶解速率。
⑤改变培养液的性质—培养液的性质对溶氧速率有明显的影响。
7.试述酶发酵动力学的主要内容（材料的试题精选2的简答题）8.细胞破碎方法及其原理（P85表格4-1）9.简述SDS-PAGE操作步骤，分离效果，适用研究范围，加入SDS的作用操作步骤：①制备凝胶—样品胶，浓缩胶，分离胶；②选择电极缓冲溶液—根据欲分离组分而定。
一般蛋白质和核酸的分离选择阴离子电泳系统；碱性蛋白质选择阳离子电泳系统。
③进行电泳，电泳结束后，将凝胶从玻璃板上取出，进行染色，脱色处理后进行分离检测分离效果：该电泳方法广泛应用于各种蛋白质相对分子质量的测定，误差不超过±10%适用研究范围：主要用于酶分子质量的测定，酶蛋白和酶RNA的顺序测定以及酶的分离检测。
加SDS的作用：SDS本身带负电荷，与蛋白质形成复合物，掩盖蛋白质本身电荷的影响。
10.萃取剂的超临界流体具备的条件①具有良好的化学稳定性，对设备没有腐蚀性；②临界温度不能太高或太低，最好在室温附近或操作温度附近；③操作温度应低于被萃取溶质的分解温度或变质温度；④临界压力不能太高，可节约压缩动力费；⑤选择性要好，容易制得高纯度的制品；⑥溶解度要高，可以减少溶剂的循环量；⑦萃取剂要容易获得，价格便宜。
11.酶分子修饰的方法①金属离子置换修饰--只适用于那些在分子结构中本来含有金属离子的酶。
用于金属离子置换修饰的金属离子，一般都是二价金属离子。
②大分子结合修饰--使用一些能与酶非共价地相互作用而又能有效地保护酶的一些添加物，如聚乙二醇；既能通过氢键固定在酶分子表面，也能通过氢键有效地与外部水相连，从而保护酶的活力。
③侧链基团修饰—氨基修饰，羧基修饰，巯基修饰④肽链有限水解修饰—通常使用某些专一性较高的蛋白酶或肽酶作为修饰剂⑤核苷酸链剪切修饰—主要是对核酸类酶进行修饰。
⑥氨基酸置换修饰—酶蛋白基本有氨基酸组成，将肽链的某一个氨基酸置换成另一个氨基酸，从而改变酶的特性。
⑦核苷酸置换修饰—针对核酸类酶的结构上核苷酸进行置换。
⑧物理修饰—通过物理方法使酶分子的空间构象发生某些改变，从而改变酶的催化特性。
12.酶固定化方法①吸附法—常用的固体吸附剂有活性炭，硅藻土，硅胶②包埋法—是将酶包埋在各种多孔载体中，常用的多孔载体有琼脂，海藻酸钠③结合法—选择适宜的载体，使之通过共价键或离子键与酶结合在一起的固定化方法。
④交联法—借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶13.固定化酶的表征手段及其应用表征手段：①扫描电镜法；②红外光谱法；③圆二色谱法；④NMR核磁共振；⑤AFM原子力显微镜应用：①在工业生产中的应用—氨基酰化酶世界上第一种工业化生产的固定化酶，用于连续生产L-氨基酸；②在酶传感器方面的应用—固定化酶与能量转换器结合而成的传感装置，广泛用于临床诊断，工业发酵过程控制和环境监测等领域。
14.高通量筛选技术（P217表8-2）15.酶反应器的类型—要知道各种反应器的缩写，适用的酶，以及简图P225-P229表9-1）三.综合分析题1.酶活力测定的基本步骤（举一个酶为例）--材料试题精选1的简答题第2题2.以一种酶为例，说明如何提高酶产量—材料试题精选2的综合分析题第1题3.酶生物合成的阻遏与诱导机制—材料试题精选2的综合分析题第2题4.酶反应器的设计--材料试题精选9的综合分析题。