酶工程期末复习材料

酶工程期末复习材料work Information Technology Company.2020YEAR

酶工程期末复习材料

一.名词解释

1.绝对专一性：一种酶只能催化一种底物进行一种反应，这种高度专一性称

为绝对专一性。

2.相对专一性：一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反

应，这种专一性称为相对专一性。

3.酶的转换数：又称摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的

分子数。

4.催化周期：是指酶进行一次催化所需的时间。

5.酶结合效率：又称酶的固定化率，是指酶与载体结合的百分率。

6.酶活力回收率：是指固定化酶的总活力与用于固定化酶的总酶活力的百分

率

7.沉淀分离：通过改变某些条件或添加某种物质，使酶的溶解度降低，而从

溶液中沉淀析出，与其他溶质分离的技术过程。

8.盐溶：一般在低盐浓度下，蛋白质的溶解度随盐的浓度升高而增加，这种

现象称为盐溶

9.盐析：盐浓度升高到一定浓度后，蛋白质的溶解度又随盐浓度的升高而降

低，结果使蛋白质沉淀析出，这种现象称为盐析。

10.差速离心：是采用不同的离心速度和离心时间，使不同沉降速度的颗粒分

批分离的方法。

11.密度梯度离心：是样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近

的物质得以分离的一种区带分离方法。

12.等密度梯度离心：当欲分离的不同密度范围处于离心介质的密度范围时，

在离心力的作用下，不同浮力密度的颗粒或向下沉降，或向上漂浮，只要时间足够，就可以一直移动到与它们各自的浮力密度恰好相等的位置，形成区带，这种方法称为等密度梯度离心。

13.离子交换层析：利用离子交换剂上的可解离基团对各种离子的亲和力不同

而达到分离目的的一种层析分离方法

14.凝胶层析：又称凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等，是指以各种多

孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同达到物质分离的一种层析技术。

15.超临界萃取：又称超临界流体萃取，利用遇分离物质与杂质在超临界流体

中的溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。

16.超临界流体：当温度和压力超过其超临界点时，两相变为一相，这种状态

下的流体称为超临界流体。

17.表面活性剂：是由极性基团和非极性基团组成两性分子，有阳离子，阴离

子和非离子型表面活性剂。

18.酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的

催化特性的技术过程称为酶分子修饰。

19.酶的固定化：采用各种方法，将酶固定在水不溶性的载体上，制备固定化

酶的过程称为酶的固定化。

20.固定化酶：固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固

定化酶。

21.Ks分段盐析：在一定的温度和pH条件下，通过改变离子强度是不同的酶或

蛋白质分离的方法

22.β分段盐析：在一定盐和离子强度的条件下，通过改变温度和pH，使不同

的酶和蛋白质分离的方法。

23.酶的非水相催化：酶在非水介质中的催化作用称为酶的非水相催化。

24.离子液：由有机阳离子与有机阴离子构成的室温条件下呈液态的低熔点盐

类，挥发性低，稳定性好。

25.微水介质体系：是由有机溶剂和微量水组成的反应体系，是在有机介质酶

催化中广泛应用的一种反应体系

26.正交束体系：胶束又称为正胶束或正胶团，是在大量水溶液中含有少量与

水不相容的有机溶剂，加入表面活性剂后形成水包油的微小液滴。

27.反胶束体系：又称反胶团，是指在大量与水不相混溶的有机溶剂中，含有

少量的水溶液。加入表面活性剂后形成油包水的微小液滴。

28.必需水：维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量称为必需水

29.最适水含量：在催化反应速度达到最大时的水含量称为最适水含量。

30.水活度：是指体系中水的逸度与纯水逸度之比。

31.酶分子的定向进化：是模拟自然进化过程，在体外进行酶基因的人工随机

突变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。

32.易错PCR：是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链

反应，是扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。

33.DNA重排技术：又称DNA改组技术，是从正突变基因文库中分离得到的同

源DNA，用酶切割成随机片段，经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变的过程。

34.基因家族重排：又称基因家族改组技术，是从基因家族的若干同源基因出

发，用酶切割成随机片段，经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列发生重新排布而引起基因突变的技术流程。

35.盒式诱变：是一种定点突变技术，将靶基因的一段DNA删掉，并用人工化

学合成所具有的突变核苷酸的双链寡核苷酸片段取代。

36.酶反应器：用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。

二.简答题

1.影响酶催化作用的因素

①底物浓度的影响—附P6图1-2；②酶浓度的影响--附P6图1-3；③温度的影响--附P6图1-4；④pH的影响--附P7图1-5；⑤抑制剂的影响—附P8竞争性/

非竞争性/反竞争性抑制剂的定义；⑥激活剂的影响—氯离子是α-淀粉酶的激活剂，钴离子和镁离子是葡萄糖异构酶的激活剂

2.固定化酶活力测定

①振荡测定法——称取一定质量的固定化酶，放进一定形状一定大小的容器中，加入一定量的底物溶液，在特定的条件下，一边振荡或搅拌，一边进行催化反应。经过一定时间取出一定量反应液进行酶活力测定

②酶柱测定法——将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应中，在适宜的条件下让底物溶液以一定的流速经过酶柱，收集反应液，测定底物的消耗量或产物的生成量

③连续测定法——利用连续分光光度计对固定化酶反应液进行连续测定。

④固定化酶的比活力测定；⑤酶结合效率与酶活力回收率的测定；⑥相对酶活力的测定

3.酶的生物合成的阻遏与诱导作用(P33-P35)

4.酶生物合成的模式

①同步合成型--属于该合成型的酶，其生物合成伴随着细胞的生长而开始，在细胞进入旺盛生长期时，酶大量合成，当细胞生长进入平衡期后，酶的合成随着停止，生长偶联型。

②延续合成型--属于该合成型的酶，其生物合成可以受诱导物的诱导，在细胞生长达到平衡期以后，仍然可以延续合成，说明这些酶所对应的mRNA相当稳定，在平衡期后相当长的一段时间内，仍然可以通过翻译而合成所对应的酶。

③中期合成型--酶的生物合成收到产物的反阻遏作用或分解代谢物阻遏作用，而酶所对应的mRNA稳定性较差。

④滞后合成型--属于该合成型的酶，要在细胞生长进入平衡期以后才开始合成，该类酶所对应的mRNA稳定性很好，可以在细胞生长进入平衡期后相当长一段时间内，继续进行酶的生物合成，非生长偶联型。

5.微生物产酶发酵工艺条件的控制