分子生物学 课后习题 简答

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分子生物学简答题(整理)

分子生物学简答题(整理)

1阐述操纵子(operon)学说:见课本2、乳糖操纵子的作用机制?/简述乳糖操纵子的结构及其正、负调控机制答:A、乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I。

B、阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I 基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。

所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

C、CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。

D、协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。

3、基因调控的水平有哪些?基因调控的意义?答:a、DNA水平的调控。

b、转录水平上的调控。

c、转录后的调控。

d、翻译水平的调控。

e、细胞质与基因调控。

意义:适应物理,化学等环境因素变化,调节代谢,维持细胞生长与分裂。

4、简述乳糖操纵子的结构及其正负调控机制。

答:结构:A、Y和Z,以及启动子、控制子和阻遏子。

正调控机制:CAP分解代谢产物激活蛋白质,直接作用于操纵子区上与cAMP结合形成CAP-cAMP复合物,转录进行。

负调控机制:a、无诱导物时结构基因不转录。

b、有诱导物时与阻遏基因相结合,形成无活性阻遏物,RNA聚合酶可与启动子区相结合,起始基因转录。

5、简述Trp操纵子的结构及其调控机制。

答:Trp操纵子由5个结构基因TrpE、TrpD、TrpC、TrpB、TrpA组成一个多顺因子的基因簇,在5'端是启动子、操纵子、前导顺序和弱化子区域。

分子生物学简答题

分子生物学简答题

1.(1)说明基因组的大小和基因组复杂性的含义基因组的大小:指在基因组中DNA的总量基因组复杂性:指基因组中所有单一序列的总长度(2)这个基因组的大小怎样?4000bp(3)这个基因组的复杂性如何?450 bp2.试比较原核生物与真核生物的翻译原核生物与真核生物的翻译比较如下:仅述真核生物的,原核生物与此相反。

①起始Met不需甲酰化②无SD序列,但需要一个扫描过程③tRNA先于mRNA与核糖体小亚基结合④起始因子比较多⑤只一个终止释放因子3.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主要区别原核生物:操纵子RNA聚合酶核心酶加δ因子不需加工与翻译相偶联类核真核生物:单基因RNA聚合酶Ⅱ聚合酶加转录因子需加工故与翻译相分离核内4.激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP,cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP。

当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。

一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGACA)。

因此RNA聚合酶难以与其结合。

CAP的存在(功能):能显著提高酶与启动子结合常数。

主要表现以下二方面:①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合,起到取代-35区功能的作用。

②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,从而提高与其特定启动子结合的概率。

5.原核生物与真核生物启动子的主要差别原核生物TTGACA——TATAA T——起始位点-35 -10真核生物增强子——GC——CAAT——TA TAA——5mGpp——起始位点-110 -70 -256.比较DNA复制和RNA转录的异同相同点:DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的,体现在:①这两种合成的直接前提是核苷三磷酸,从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成②两种合成都是一个酶为四种核苷酸工作③两种合成都是以DNA为模板④合成前都必须将双链DNA解旋成单链⑤合成的方向都是5-37.假设从一种生物抽提了核酸,你将用什么简便的方法,区别它是DNA或RNA?是单股或双股?我们可用紫外分光光度计对抽提的核酸进行鉴定。

分子生物学课后答案

分子生物学课后答案

第一章绪论1、简述孟德尔、摩尔根与沃森等人对分子生物学发展得主要贡献。

答:孟德尔得对分子生物学得发展得主要贡献在于她通过豌豆实验,发现了遗传规律、分离规律及自由组合规律;摩尔根得主要贡献在于发现染色体得遗传机制,创立染色体遗传理论,成为现代实验生物学奠基人;沃森与克里克在1953年提出DAN反向双平行双螺旋模型。

2、写出DNA与RNA得英文全称。

答:脱氧核糖核酸(DNA, Deoxyribonucleic acid), 核糖核酸(RNA, Ribonucleic acid)3、试述“有其父必有其子”得生物学本质。

答:其生物学本质就是基因遗传。

子代得性质由遗传所得得基因决定,而基因由于遗传得作用,其基因得一半来自于父方,一般来自于母方。

4、早期主要有哪些实验证实DNA就是遗传物质?写出这些实验得主要步骤。

答:一,肺炎双球菌感染实验,1,R型菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒,注入小鼠体内后,小鼠不死亡。

2,S型菌落光滑,菌体有多糖荚膜,有毒,注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。

3,用加热得方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内,小鼠不死亡;二,噬菌体侵染细菌得实验:1,噬菌体侵染细菌得实验过程:吸附→侵入→复制→组装→释放。

2,DNA中P 得含量多,蛋白质中P得含量少;蛋白质中有S而DNA中没有S,所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体得蛋白质,用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体得DNA。

用35P标记蛋白质得噬菌体侵染后,细菌体内无放射性,即表明噬菌体得蛋白质没有进入细菌内部;而用32P标记DNA得噬菌体侵染细菌后,细菌体内有放射性,即表明噬菌体得DNA进入了细菌体内。

三,烟草TMV得重建实验:1957年,Fraenkel-Conrat等人,将两个不同得TMV株系(S株系与HR株系)得蛋白质与RNA分别提取出来,然后相互对换,将S株系得蛋白质与HR株系得RNA,或反过来将HR株系得蛋白质与S株系得RNA放在一起,重建形成两种杂种病毒,去感染烟草叶片。

分子生物学课后习题答案

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第一章第一章 绪论绪论o DNA 重组技术和基因工程技术。

DNA 重组技术又称基因工程技术,目的是将不同DNA 片段(基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。

细胞的新的遗传性状。

DNA 重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研究的结晶,究的结晶,而限制性内切酶而限制性内切酶DNA 连接酶及其他工具酶的发现与应用则是这一技术得以建立的关键。

的关键。

DNA 重组技术有着广泛的应用前景。

重组技术有着广泛的应用前景。

首先,首先,DNA 重组技术可以用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽,如激素、抗生素、酶类及抗体,提高产量,降低成本。

其次,DNA 重组技术可以用于定向改造某些生物的基因结构,使他们所具有的特殊经济价值或功能成百上千倍的提高。

能成百上千倍的提高。

o 请简述现代分子生物学的研究内容。

1、DNA 重组技术(基因工程)2、基因表达调控(核酸生物学)3、生物大分子结构功能(结构分子生物学)4、基因组、功能基因组与生物信息学研究、基因组、功能基因组与生物信息学研究第二章第二章 遗传的物质基础及基因与基因组结构遗传的物质基础及基因与基因组结构o 核小体、DNA 的半保留复制、转座子。

核小体是染色质的基本结构单位。

是由H2A 、H2B 、H3、H4各两分子生成八聚体和由大约200bp 的DNA 构成的。

核小体的形成是染色体中DNA 压缩的第一步。

压缩的第一步。

DNA 在复制过程中,每条链分别作为模板合成新链,产生互补的两条链。

这样新形成的两个DNA 分子与原来DNA 分子的碱基顺序完全一样。

因此,每个子代分子的一条链来自亲代DNA ,另一条链则是新合成的,这种复制方式被称为DNA 的半保留复制。

转座子是存在染色体DNA 上的可自主复制和移位的基本单位。

转座子分为两大类:插入序列和复合型转座子。

分子生物学简答题

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1.简述临床分子生物学检验在复杂性疾病中的应用。

(1)在感染性疾病中,对微生物感染作出确诊、对感染性病原体进行分型和耐药性监测;(2)通过患者的DNA、RNA、染色体、蛋白质和某些代谢产物来揭示与遗传病发生相关的生物学标记,从而对遗传型疾病进行早期预防、早期诊断和早期治疗的目的;(3)用分子生物学检验方法寻找特异性肿瘤基因型标志进行肿瘤基因检测,有利于肿瘤的早期发现和诊断,以及肿瘤的预防和治疗;(4)推动个体化医学的发展。

2.简述RNA 生物标志物的优点。

RNA 生物标志物包括多种形式,如mRNA、tRNA、miRNA、lncRNA 等;多种病理生理过程、药物治疗或食品中的物质均可以在转录水平上出现差异;基因表达在mRNA 水平上的变化通常大于蛋白质水平的变化;在血浆中存在游离的循环miRNA 可以反应体内的病理生理过程;母亲血浆中的胎儿RNA 在无创产前诊断中对染色体疾病的诊断更加方便。

3.简述原核生物基因组的特征。

(1)原核生物基因组较小(2)原核生物的类核结构(3)原核生物的操纵子结构(4)原核生物的结构基因中无内含子成分,其R NA 合成后不需要经过剪接加工过程(5)具有编码同工酶的基因(6)含有可移动D NA 序列4.简述核酸分离纯化的主要步骤。

目前核酸的分离纯化主要包括4 个步骤:①制备细胞及破碎细胞。

②消化蛋白质,去除与核酸结合的蛋白质、多糖及脂类等生物大分子。

③去除其它不需要的核酸分子。

④沉淀核酸,去除盐类、有机溶剂等杂质。

5.简述蛋白质分离纯化的方法及其原理。

(1)根据蛋白分子大小不同:主要有透析、超滤、凝胶过滤和离心等。

(2)根据蛋白分子溶解度不同:常用的方法有等电点沉淀和pH 值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法等。

(3)根据蛋白表面电荷不同:常用方法有电泳和离子交换层析。

(4)采用配体的特异性亲和力:亲和层析等。

6.Southern 印迹杂交的临床应用(1)单基因遗传病的基因诊断(2)基因点突变的检测7.Nouthern 印迹杂交的临床应用(1)RNA 病毒的检测(2)基因表达的检测8.核酸分子杂交的影响因素在核酸杂交反应中影响杂交体形成因素较多,主要有探针的选择、探针的标记方法、探针的浓度、杂交率、杂交最适温度、杂交的严格性、杂交反应时间及杂交促进剂等。

(完整word版)分子生物学简答题

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课后思考题1. 试述乳糖操纵子的结构及调控原理?乳糖操纵子开放转录需要什么条件?(1)乳糖操纵子的结构:含Z、Y、A3个结构基因,分别编码乳糖代谢的3个酶;一个操纵序列O,一个启动序列P,一个CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区.乳糖操纵子的上游还有一个调节基因I。

(2)阻遏蛋白的负性调节:I基因的表达产物为一种阻遏蛋白,在没有乳糖存在时,阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录启动,乳糖操作子处于阻遏状态;当有乳糖存在时,乳糖转变为半乳糖,后者结合阻遏蛋白,使构象变化,阻遏蛋白与O序列解离,在CAP蛋白协作下发生转录。

(3)CAP的正性调节:分解代谢基因激活蛋白(CAP)分子内存在DNA和cAMP结合位点.当没有葡萄糖时,cAMP浓度较高,cAMP与CAP结合,cAMP-CAP结合于CAP结合位点,提高RNA转录活性;当有葡萄糖时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻,乳糖操纵子表达下降。

(4)协调调节:乳糖操纵子阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节机制协调合作,CAP不能激活被阻遏蛋白封闭基因的表达,但如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵序列上解离仍无转录活性。

因此,乳糖操纵子开放转录需要的条件是:1)诱导物乳糖存在,解除阻遏蛋白的负调节。

2)葡萄糖缺乏,CAP蛋白活化,启动正调节。

2.试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同.(1)相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节。

(2)不同点:1)原核生物基因表达调控主要包括转录和翻译水平;真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次.2)原核基因表达调控主要为负调节;真核生物基因表达调控主要为正调节。

3)原核转录起始不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由σ因子决定基因表达的特异性;真核转录起始需要基础、特异两类转录因子,依赖DNA—蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用,调控转录激活。

分子生物学简答题

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第二章1、DNA二级结构的特点?答:(1)DNA分子是由两条互相平行的脱氧核甘酸长链盘绕而成的(2)DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧.2.阐述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验?答:用普通培养基(含14N的氮源)培养15N标记的大肠杆菌,经过一代后,所有DNA 的密度都在15N-DNA和14N-DNA之间,即形成了一半15N和一半14N的杂合分子,两代后出现等量的14N分子和14N-15N杂合分子。

若再继续培养,可以看到14N-DNA分子增多,说明DNA分子复制时均可被分成两个亚单位,分别构成子代分子的一半,这些亚单位经过很多代复制仍然保持着完整性。

3.描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用?答:该酶被认为在切除由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要的作用,它也可用以出去冈崎片段5,端RNA引物,使冈崎片段间缺口消失,保证连接酶将片段连接起来。

4.DNA的损伤原因是什么?答:DNA的损伤分自发性损伤、物理因素引起的DNA损伤、和化学因素引起的DNA损伤.自发性损伤是由于DNA复制中的错误和碱基的自发性化学变化造成DNA的损伤.物理因素引起的DNA损伤常是缘于紫外线引起的DNA损伤和电离辐射引起的DNA损伤.化学因素引起的DNA损伤是突变剂或致癌剂对DNA的作用,包括烷化剂对DNA的损伤和碱基类似物对DNA的损伤.5.组蛋白具有哪些特性?答:进化上的极端保守性,无组织特异性,肽链上氨基酸分布的不对称性,组蛋白的修饰作用(包括甲基化,乙酰化,磷酸化,范素化9口「核糖基化),富含赖氨酸的组蛋白H56.比较原核生物和真核生物DNA复制的不同点。

答:真核生物每条染色质上可以有多处复制起始点,而原核生物只有一个起始点;真核生物的染色体在全部完成复制之前,个个起始点上DNA的复制不能再开始,而在快速生长的原核生物中,复制起始点上可以连续开始新的DNA复制,表现为虽只有一个复制单元,但可有多个复制叉。

(完整版)分子生物学习题与答案

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第0章绪论一、名词解释1.分子生物学2.单克隆抗体二、填空1.分子生物学的研究内容主要包含()、()、()三部分。

三、是非题1、20世纪60年代,Nirenberg建立了大肠杆菌无细胞蛋白合成体系。

研究结果发现poly(U)指导了多聚苯丙氨酸的合成,poly(G)指导甘氨酸的合成。

(×)四、简答题1. 分子生物学的概念是什么?2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的?3. 分子生物学研究内容有哪些方面?4. 分子生物学发展前景如何?5. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么?6.简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术发明。

7. 简述分子生物学的发展历程。

8. 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么?9. 21世纪是生命科学的世纪。

20世纪后叶分子生物学的突破性成就,使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。

试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则,三大支撑学科和研究的三大主要领域?答案:一、名词解释1.分子生物学:分子生物学就是研究生物大分子之间相互关系和作用的一门学科,而生物大分子主要是指基因和蛋白质两大类;分子生物学以遗传学、生物化学、细胞生物学等学科为基础,从分子水平上对生物体的多种生命现象进行研究。

2.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。

二、填空1.结构分子生物学,基因表达与调控,DNA重组技术三、是非题四、简答题1. 分子生物学的概念是什么?答案:有人把它定义得很广:从分子的形式来研究生物现象的学科。

但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。

另一个定义要严格一些,因此更加有用:从分子水平来研究基因结构和功能。

从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。

2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的?分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科,它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象,是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。

分子生物学简答题

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1.为什么在 DNA中通常只发现 A­T和 C­G碱基配对?答:1)C­A配对过于庞大而不能存在于双螺旋中;G­T 碱基对太小,核苷酸间的空间空隙太大无法形成氢键。

2)A和 T通常形成两个氢键,而 C和 G可形成三个氢键。

正常情况下,可形成两个氢键的碱基不与可形成三个氢键的碱基配对。

2.被加工的假基因与其他假基因有哪些不同?它是如何产生的?答:已加工过的假基因具有明显的 RNA加工反应的印迹。

如缺少内含子,有些在 3 ‘端已经经过加工。

推测已加工过的假基因是在基因转录成前体 mRNA、RNA加工后,又经反转录形成 DNA,再将反转录出的 DNA重新整合进基因组。

3.请描述 C值矛盾,并举一个例子说明。

答:C 值矛盾是真核生物单倍体组 DNA总量与编码基因信息 DNA总量差异大。

对高等真核生物而言,生物体基因组的大小与其复杂性没有直接关系。

亲缘关系相近的生物 DNA含量可能差异很大。

如一些两栖动物比其它两栖动物的 DNA相差 100 倍。

4.描述滚环复制过程及其特征。

答:仅是特定环状 DNA分子的复制方式。

(1)复制过程: 1)环状双链 DNA的+链被内切酶切开; 2)以­链为模板,DNA聚合酶以+链的 3'端作为引物合成新的+链,原来的+链 DNA分子的 5' 端与­链分离; 3)+链的 3'端继续延长; 4)引发酶以离开的+链为模板合成 RNA引物,DNA聚合酶以+链为模板合成新的­链; 5)通常滚环复制的产物是一多聚物,其中大量单位基因组头尾相连。

(2)复制过程的特征: 1)复制是单方向不对称的; 2)产物是单链 DNA,但可通过互补链的合成转变为双链; 3)子代 DNA分子可能是共价连接的连环分子; 4)连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。

5.RecA蛋白是怎样调节 SOS 反应的?答: RecA蛋白识别损伤 DNA的单链区,与单链 DNA结合后,Rec A的蛋白活性被激活,将 LexA切割成没有阻遏和与 DNA操纵区结合的两个区,导致 SOS反应(包括 RecA)的高效表达。

简答(分子生物学)

简答(分子生物学)

L111. 如何理解结构决定功能(通过2个以上实例说明)12. 互补测验的原理及用途。

顺反试验,测定两个基因突变作用方式的遗传学试验,即互补测验。

通过测验可确定两个表型效应相似的突变位点是否位于同一个顺反子或基因内。

,L27. The specificity determines the blood group for human (illustrate by example) 决定人类血型的特异性(举例阐述)基因座可能会有不止一条野生型等位基因,即基因座可能会有等位基因的多态分布,而无任何一条等位基因可以被认为是野生型的。

在任何一个遗传位点上并非一定要有一个野生型基因。

ABO血型基因座编码半乳糖基转移酶,其特异性决定了血型的差别。

功能缺失可由空白型表示,即O型。

但是功能性的A型和B型是共显性的,并且对O型表现出显性。

在所有的个体中都产生O型或者H型抗原,它们含有特殊的碳水化合物基团连接到蛋白质。

)ABO等位基因编码一种半乳糖基转移酶,能够在O抗原加上糖基,其特异性决定了血型。

A、B等位基因表达相应的转移酶并利用相应的碳水化合物辅因子产生了A、B抗原,O等位基因无法表达产生转移酶,因此O抗原没有发生修饰。

A和B都不能被认为是野生型的,因为他们表达出一种功能,而没有存在功能缺失或者新功能的产生。

这种现象,即一个群体中存在多条功能型等位基因,被称为多态性L31.Conservation of exons and its application(外显子的保守性及其作用)L41.}2.非互补粘性末端DNA分子间的连接方式;1经过专门作用于单链DNA的Sl核酸酶处理变成平末端之后,可以使用T4 DNA连接酶进行有效连接。

2使用附加衔接物or附加接or同聚物加尾技术的办法提高平末端间的连接作用的效率L51.蛋白质组学研究中所用方法及原理二维电泳(2ED)2.'3.试说明每个等位基因具有不同的表型(举例)4.限制性位点孟德尔遗传定律15人类基因组数目与蛋白质组关系人类基因组的数目约为×109bp,约含有3000~4000条基因,而人类蛋白质组约有50000~60000个蛋白质成员1)基因表达是不连续,且受外部环境影响,存在时间和空间的表达差异。

《分子生物学》习题答案

《分子生物学》习题答案

《分子生物学》习题答案《分子生物学》课后习题第1章绪论1.简述孟德尔、摩尔根和Waston等人对分子生物学发展的主要贡献。

孟德尔是遗传学的奠基人,被誉为现代遗传学之父。

他通过豌豆实验,发现了遗传学三大基本规律中的两个,分别为分离规律及自由组合规律。

摩尔根发现了染色体的遗传机制,创立染色体遗传理论,是现代实验生物学奠基人。

于1933年由于发现染色体在遗传中的作用,赢得了诺贝尔生理学或医学奖。

Watson于1953年和克里克发现DNA双螺旋结构_(包括中心法则),获得诺贝尔生理学或医学奖,被誉为“DNA之父”。

2.写出DNA、RNA、mRNA和siRNA的英文全名。

DNA:deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸RNA:ribonucleic acid 核糖核酸mRNA:messenger RNA 信使RNAtRNA:transfer RNA 转运RNArRNA:ribosomal RNA 核糖体RNAsiRNA:small interfering RNA 干扰小RNA3.试述“有其父必有其子”的生物学本质。

其生物学本质是基因遗传。

子代的性状由基因决定,而基因由于遗传的作用,其基因的一半来自于父方,一般来自于母方。

4.早期主要有哪些实验证实DNA是遗传物质?写出这些实验的主要步骤。

1)肺炎链球菌转化实验:外表光滑的S型肺炎链球菌(有荚膜多糖→致病性);外表粗糙R型肺炎链球菌(无荚膜多糖)。

①活的S型→注射→实验小鼠→小鼠死亡②死的S型(经烧煮灭火)→注射→实验小鼠→小鼠存活③活的 R型→注射→实验小鼠→小鼠存活④死的S型+活的R型→实验注射→小鼠死亡⑤分离被杀死的S型菌体的各种组分+活的R型菌体→注射→实验小鼠→小鼠死亡(内只有死的S型菌体的DNA转化R型菌体导致致病菌)*DNA是遗传物质的载体2)噬菌体侵染细菌实验①细菌培养基35S标记的氨基酸+无标记噬菌体→培养1-2代→子代噬菌体几乎不含带有35S标记的蛋白质②细菌培养基32N标记的核苷酸+无标记噬菌体→培养1-2代→子代噬菌体含有30%以上32N标记的核苷酸*噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA而不是蛋白质。

(完整版)分子生物学课后题

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第一章1、简述细胞的遗传物质,怎样证明DNA是遗传物质?答:核酸是细胞内的遗传物质,包括脱氧核糖核酸(|DNA)和核糖核酸(RNA)两类,DNA是主要的遗传物质,具有储存遗传信息,将遗传信息传递给子代,物理化学性质稳定,有遗传变异能力适合作为遗传信息的特性,T2噬菌体侵染实验证明了DNA是遗传物质,将蛋白质被35S标记和DNA被32P 标记的T2噬菌体分别侵染E.coli后,发现进入宿主细胞的只有32P标记的DNA,而无35S标记物,所产生的子代噬菌体只含有32P标记的DNA,无S标记的蛋白质,因此证明DNA是遗传物质。

2、研究DNA的一级结构有什么重要的生物学意义?答:DNA的一级结构是指DNA分子中的核苷酸排列顺序,它反映了生物界物种的多样性和复杂性,任何一段DNA序列都可以反映出它的高度的个体性和种族特异性,另外DNA一级结构决定其高级结构,研究DNA一级结构对阐明遗传物质结构、功能及表达调控都极其重要。

3、简述DNA双螺旋结构与现在分子生物学发展的关系。

答:DNA双螺旋结构具有碱基互补配对原则具有极其重要的生物学意义,它是DNA复制、转录、逆转录等基因复制与表达的分子基础。

DNA为双链,维持了遗传物质的稳定性。

4、DNA双螺旋结构有哪些形式?说明其主要特点和区别。

答:主要有B-DNA,A-DNA,E-DNA形式B-DNA:每一螺周含有10个碱基对,两个核苷酸之间夹角为36度A-DNA:碱基对与中心倾角为19度,螺旋夹角为32.7度E-DNA:左手螺旋,每圈螺旋含12对碱基,G=C碱基对非对称地位于螺旋轴附近。

第二章1、简述DNA分子的高级结构。

答:1、单链核酸形成的二级结构(发夹结构)2、反向重复序列(十字架结构,每条链从5'--3'方向阅读)3、三股螺旋的DNA(一条链为全嘌呤核苷酸链,另一条链为全嘧啶核苷酸链)4、DNA的四链结构5、DNA结构的动态性与精细结构6、DNA的超螺旋结构与拓扑学性质。

分子生物学简答题全

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分子生物学简答题全————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:简答题6.为什么利用RNAi抑制一个基因的表达较利用反义RNA技术更为彻底。

答:RNAi是外源或内源性的双链RNAﻩ进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降解.dsRNA进入细胞后,在Dicer作用下,分解为21-22bp的SiRNA.SiRNA结合相关酶,形成RNA介导的沉默复合物RISC.RISC在ATP作用下,将双链SiRNA变成单链SiRNA,进而成为有活性的RISC,又称为slicer.slicer与靶mRNA结合,导致其断裂,进而导致其彻底降解。

反义RNA是与靶mRNA互补的RNA,它通过与靶mRNA特异结合而抑制其翻译表达,反义RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以,mRNA不一定完全被抑制。

8.简述真核基因表达的调控机制。

答:(1)DNA和染色质结构对转录的调控:①DNA甲基化,②组蛋白对基因表达的抑制,③染色质结构对基因表达的调控作用,④基因重排,⑤染色质的丢失,⑥基因扩增;(2)转录起始调控:ﻩ①反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节),②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控;(3)转录后调控:①5’端加帽和3’端多核苷酸化调控,②选择剪接调控,③mRNA运输调控,④mRNA稳定性调控;(4)翻译起始的调控:①阻遏蛋白的调控,②对翻译因子的调控,③对AUG的调控,④mRNA 5’端非编码区的调控,⑤小分子RNA;(5)翻译后加工调控:①新生肽链的水解,②肽链中氨基酸的共价修饰,③信号肽调控。

9.简述mRNA加工过程。

答:(1)5′端加帽(由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸,形成帽子结构m7GpppmNP-)。

(2)3′端加入Poly(A)尾(A、组蛋白的成熟mRNA无需加polyA尾;B、加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列;C、加尾不需模板;D剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助)。

分子生物学课后习题简答.docx

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1-6说出分子生物学的主要研究内容。

1、D NA重组技术:它可用于定向改造某些生物基因组结构,也可用来进行基因研究。

2、基因表达调控研究:3、生物大分子的结构功能研究一一结构分子生物学;4、基因组、功能基因组与生物信息学研究。

2-4简述DNA的一、二、三级结构特征。

DNA —级结构:4种核昔酸的的连接及排列顺序,表示该DNA分子的化学结构。

DNA二级结构:指两条多核苜酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋盘绕结构。

DNA三级结构:指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。

2-5原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征?1、结构简练原核生物DNA分子的绝大部分是用来编码蛋白质,非编码序列极少,这与真核D7A的冗余现象不同。

2、存在转录单元原核生物DNA序列中功能相关的RNA和蛋白质基因,往往丛集在基因组的一个或几个特定部位,形成功能单位或转录单元,其转录产物为多顺反子mRNA (能作为多种多肽链翻译模板的mRNA),而真核生物转录产物为单顺反子mRXA (只编码一个蛋白质的mRNA)o3、有重叠基因重叠基因,即同一段D7A携带了两种或两种以上不同蛋白质的编码信息。

主要有3种情况①一个基因完全在另一个基因里面②部分重叠③两个基因只有一个碱基对是重卷的.2-6简述DNA双螺旋结构及其在现代分子生物学发展史中的意义。

DNA的双螺旋结构模型是Watson和Cricket于1953年提出的。

其主要内容是:1、两条反向平行的多核昔酸围绕同一中心轴相互缠绕;两条链都是右手螺旋。

2、脱氧核糖和磷酸交替连接,排列在双螺旋外侧,彼此通过,3* 5•-磷酸二酯键连接,构成DNA分子的基本骨架;碱基排列在双螺旋的内侧,碱基平面与纵轴垂直。

3、双螺旋的平均直径为2. Onm,相邻碱基平面之间垂直距离为0. 34nm,每10个碱基对旋转一圈,碱基对之间的螺距为3. 4nm04、在双螺旋的表面分别形成大沟和小沟。

5、两条链借助碱基Z间的氢键和碱基堆积力牢固结合,维持DNA结构的稳定性。

分子生物学简答

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1.E.CoilDNA复制起始过程答E.Coil的始点位于遗传基因座oric,oric包含4个9bp的起始因子DnaH蛋白的结合位点。

第一轮复制结束之前就从两个新形成的起始位点开始第二轮复制,子细胞得到的是部分还在进行复制的染色体。

DnaB蛋白达到足够量,形成30-40个分子构成的复合体,每分子结合一个A TP其周围的oricDNA呈缠绕形DNA形成超负螺旋,有助于3个13bp长的富含AT 的重复序列的解链,允许DnaB蛋白结合DNA解旋酶并利用ATP水解能量结合并解开双链DNA,DNA引发酶结合到DNA上并合成一段RNA引物,从而引发第一个复制叉的先导链的复制,接下来是双向复制。

2 .DNA复制过程涉及蛋白及作用答1)DNA聚合酶Ⅰ:5′-3′聚合作用。

3′-5′核酸外切酶的活性。

5′-3′核酸外切酶的活性2 )DNA聚合酶Ⅱ:聚合酶活性。

3′-5′核酸外切酶的活性。

DNA修复3) DNA聚合酶Ⅲ:聚合酶活性。

3′-5′核酸外切酶的活性。

校对作用。

4)DNA连接酶:连接双链DNA中一条链的切口。

5)单链结合蛋白:与解开双螺旋后的单链DNA结合,防止DNA重新形成双螺旋,防止DNA 被核酸酶降解。

6)DNA解旋酶:解开DNA螺旋,使其成为单链。

7)引发酶: 催化RNA引物的合成。

3简述亚克隆过程答1)含有目标克隆序列的质粒DNA的提取。

2)用限制性内切核酸酶将质粒酶切成不连续的片段。

3)经琼脂糖凝胶电泳分离片段。

4)纯化目标片段。

5)将目标片段连接在新质粒载体上,形成新的重组分子。

6)将连接好的质粒转入大肠杆菌菌株7)转化菌株的筛选8)重组质粒的分析4简述SB的原理及实验过程答:原理:将带检测的DNA分子经琼脂糖凝胶电泳分离,继而将其变性,转移到尼龙膜或硝酸纤维膜上,固定后再与标记探针杂交,如果待测物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补结合,游离探针洗涤后用于显影,从而显示出待检测片段及其相对大小。

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1-6 说出分子生物学的主要研究内容。

1、DNA重组技术:它可用于定向改造某些生物基因组结构,也可用来进行基因研究。

2、基因表达调控研究:3、生物大分子的结构功能研究----结构分子生物学;4、基因组、功能基因组与生物信息学研究。

2-4 简述DNA的一、二、三级结构特征。

DNA一级结构:4种核苷酸的的连接及排列顺序,表示该DNA分子的化学结构。

DNA二级结构:指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋盘绕结构。

DNA三级结构:指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。

2-5 原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征?1、结构简练原核生物DNA分子的绝大部分是用来编码蛋白质,非编码序列极少,这与真核DNA的冗余现象不同。

2、存在转录单元原核生物DNA序列中功能相关的RNA和蛋白质基因,往往丛集在基因组的一个或几个特定部位,形成功能单位或转录单元,其转录产物为多顺反子mRNA(能作为多种多肽链翻译模板的mRNA),而真核生物转录产物为单顺反子mRNA(只编码一个蛋白质的mRNA)。

3、有重叠基因重叠基因,即同一段DNA携带了两种或两种以上不同蛋白质的编码信息。

主要有3种情况① 一个基因完全在另一个基因里面② 部分重叠③ 两个基因只有一个碱基对是重叠的.2-6 简述DNA双螺旋结构及其在现代分子生物学发展史中的意义。

DNA的双螺旋结构模型是Watson和Cricket于1953年提出的。

其主要内容是:1、两条反向平行的多核苷酸围绕同一中心轴相互缠绕;两条链都是右手螺旋。

3,5-磷酸二酯键连接,2、脱氧核糖和磷酸交替连接,排列在双螺旋外侧,彼此通过,,构成DNA分子的基本骨架;碱基排列在双螺旋的内侧,碱基平面与纵轴垂直。

3、双螺旋的平均直径为2.0nm,相邻碱基平面之间垂直距离为0.34nm,每10个碱基对旋转一圈,碱基对之间的螺距为3.4nm。

4、在双螺旋的表面分别形成大沟和小沟。

5、两条链借助碱基之间的氢键和碱基堆积力牢固结合,维持DNA结构的稳定性。

该模型的建立对促进分子生物学及分子遗传学的发展具有划时代的意义。

对DNA本身的复制机制、对遗传信息的存储方式和遗传信息的表达。

对生物遗传稳定性和变异性等规律的阐明起了非常重要的作用。

2-8 简述原核生物DNA的复制特点。

1、原核生物双链DNA都是以半保留方式遗传的,DNA的复制在整个细胞周期都能进行;2、只有一个复制起点;3、在起点处解开形成复制叉,可以连续开始新的DNA复制,一个复制单元多个复制叉;4、复制叉移动速度很快;5、是半不连续的复制,需要多种酶和蛋白质的协同参与;6、DNA聚合酶在组成和功能上与真核生物有很大的不同。

3-1 什么是编码链?什么是模板链?编码链:DNA双链中与 mRNA 序列和方向相同的那条 DNA 链,又称为有意义链模板链:DNA双链中能作为转录模板通过碱基互补配对原则指导 mRNA 合成的 DNA 链,又称为反义链。

3-2 简述RNA转录的概念及其基本过程。

RNA 转录:以 DNA 中的一条单链为模板,游离碱基为原料,在RNA聚合酶催化下,按照碱基互补配对原则,合成RNA链的过程。

基本过程:⑴模版的识别:RNA聚合酶中的σ因子识别转录起始点,并促进核心酶结合形成全酶复合物。

⑵转录起始:RNA聚合酶全酶促使局部双链解开,并催化ATP或GTP与另外一个三磷酸核3,5-磷酸二酯键。

苷聚合,形成第一个,⑶转录延伸:σ因子从全酶上脱离,余下的核心酶继续沿DNA链移动,按照碱基互补原则,不断聚合RNA。

⑷转录终止:2种机制①依赖辅助因子的终止②不依赖辅助因子的自动终止3-5 简述σ因子的作用。

1、负责模版链的选择和转录的起始,它是酶的别构效应物,使酶专一性识别模板上的启动子;2、可以极大的提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力;3、降低RNA聚合酶与模板DNA上非特异性位点的亲和力。

3-8简述原生物和真核生物mRNA的区别。

1、原核生物可以以AUG,GUG,UUG作为起始密码。

真核生物几乎永远以AUG作为起始密码。

2、原核生物的mRNA可以编码几个多肽,常以多顺反子的形式存在,真核只能编码一个,一般以单顺反子的形式存在。

3、原核生物 mRNA 半寿期很短,一般为几分钟,最长只有数小时。

真核生物 mRNA 的半寿期较长,如胚胎中的 mRNA 可达数日;4、真核生物mRNA的5’端有帽子结构,大部分成熟的mRNA还同时具有3’-多聚A尾巴,原核一般没有。

3-10 真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟mRNA,以用作蛋白质合成的模板?1、减少部分片段:切除5′端签到序列,3′端拖尾序列和中部的内含子;2、增加部分片段:5′端加帽子;3′端加多聚A尾巴( poly A);3、修饰:对某些碱基进行甲基化。

4-1 遗传密码有哪些特性?1、三联子密码:1个密码子由3个核苷酸组成,2、连续性:密码之间无间断也没有重叠;3、简并性:许多氨基酸都有多个密码子(AUG UGG 除外);4、通用性和特殊性:遗传密码无论在体内还是在体外,无论是对病毒、细菌、动物还是植物而言都是通用的,但是也有少数例外;5、密码子和反密码子的相互作用;6、有起始密码子和终止密码子:①起始密码子 AUG ②终止密码子 UAA UGA UAG4-6 什么是SD序列?其功能是什么?SD序列:是存在于原核生物起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段,它与16S rRNA 3′端反向互补。

功能:将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。

不同基因的mRNA有不同的SD序列,它们与16S rRNA的结合能力不同,从而控制着单位时间内翻译过程中起始复合物形成的数目,最终控制着翻译的速度。

4-9 链霉素为什么能够抑制蛋白质的合成?链霉素是一种碱性三糖,能干扰fMet-tRNA与核糖体的结合,从而阻止蛋白质合成的正确起始,也会导致mRNA的错读。

4-10 什么是信号肽?它在序列组成上有哪些特点?有什么功能?信号肽:在起始密码子后,有一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域,被称为信号肽序列,它负责把蛋白质引导到细胞内不同膜结构的亚细胞器内,该序列常常位于蛋白质的氨基端,长度一般都在13~16个残基。

有如下三个特征:1、一般带有10~15个疏水残基;2、常常在靠近该序列N端疏水氨基酸区上游带有1个或者数个带正电荷的氨基酸;3、在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸。

功能:负责把蛋白质引导到细胞内不同膜结构的亚细胞器内。

4-12 蛋白质有哪些翻译后的加工修饰?1、N端f Met 或 Met 的切除:①脱甲酰酶除去甲酰基②氨肽酶水解2、二硫键的形成:二硫键由两个半胱氨酸残基形成,对维持蛋白质立体结构起重要作用。

3、特定氨基酸的修饰:磷酸化、甲基化、羟基化、乙酰化、ADP-核糖化4、新生肽中非功能片段的切除:不少多肽类激素和酶的前体需要经过加工切除不必要的肽段才能成为有活性的分子。

5-1 哪些重要的科学发现和实验推动了DNA重组技术的产生和发展?1、DNA分子的切割与连接技术:第一次成功的DNA体外重组实验2、载体构建和大肠杆菌转化体系的建立:创立了体外重组DNA技术的模式3、Southern杂交、DNA序列分析和聚合酶链反应:简化了传统的体外重组DNA技术5-2 如何理解PCR扩增的原理和过程?(1)PCR的基本原理首先将双链DNA在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子,DNA聚合酶以单链DNA 为模板,并利用反应物中的四种脱氧核苷酸合成新的DNA互补链。

(2)PCR的基本过程加入模板DNA,PCR引物,四种核苷酸,即适当浓度Mg,DNA聚合酶,经过;1.变性(Denaturation):加热使模板DNA在高温(94℃)变性,双链间的氢键断裂成形成两条单链;2.退火(Annealing):使溶液温度降至50℃~60℃,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合;3.延伸(Extension):溶液反应温度至72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应物中的四种脱氧核苷酸,按5’3’方向复制出互补DNA。

上述变性、退火、延伸步骤的重复循环,导致特异的靶序列的指数扩增。

5-3 简述定量PCR的原理和过程原理:(1)利用带荧光检测的PCR仪对整个PCR过程中扩增DNA的积累速率绘制动态变化图,从而消除了在测定终端产物丰度时有较大变异系数问题。

(2)反应在带透明盖的塑料小管中进行,激发光可以直接透过管盖,使其中的荧光探针被激发。

荧光探针事先混合在PCR反应液中,只有与DNA结合后,才能够被激发发出荧光。

随着新合成目的DNA片段的增加,结合到DNA上的荧光探针,即被激发产生的荧光相应增加。

检测模式(1)TaqMan荧光探针(2)SYBR荧光染料5-4 基因组DNA文库和cDNA文库在构建原理上和用途上的主要区别是什么?⑴基因组DNA文库①构建:从生物组织细胞提取出全部DNA将其切成预期大小的片段,分别与载体连接,转入受体细菌或细胞,形成克隆。

这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子,而且可以繁殖扩增,许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体,就称为基因组DNA文库。

如果这个文库足够大,能包含该生物基因组DNA全部的序列,就是该生物完整的基因组文库。

②用途:用于分离特定的基因片段、分析特定基因结构、研究基因表达调控,还可用于全基因组物理图谱的构建和全基因组序列测定。

⑵cDNA文库①构建:cDNA文库是指某生物某发育时期所转录的全部mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。

经典cDNA文库构建的基本原理是用Oligo(dT)作逆转录引物,给所合成的cDNA加上适当的连接接头,连接到适当的载体中获得文库。

②用途:筛选目的基因、大规模测序、基因芯片杂交等功能基因组学研究。

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