紫外可见分光光度计的使用(精)
UV752紫外可见分光光度计的使用
T:透光率; I:透过光强度; I0:入射光强度;
k:样品的吸光系数;
c:样品浓度;
L:吸收层厚度
二、使用方法
1、预热:打开仪器电源预热 30 分钟。 2、放样品:手持比色皿毛面,用参比(空白)或样品溶液润洗比色皿 2-3 次, 将参比(空白)或样品溶液倒入比色皿约 3/4 高度,用擦镜纸将比色皿外液体擦 干,将透光面擦拭干净,依次放入样品架,盖上样品室盖。置入样品架时,石英 比 色 皿 上 端 的 “Q” 、 玻 璃 比 色 皿 上 端 的 “G” 标 记 方 向 应 一 致 。 ( 紫 外 区 200-340nm 需使用石英比色皿,可见光区 340-1000nm 使用玻璃比色皿) 3、调波长:通过波长旋钮选择到所需波长位置。 4、选择模式:按 MODE 键切换测量值,A(吸光度)、T(透射比)、C(浓度)、 F(斜率)。指示灯亮的位置就表示切换到的位置。 5、调空白:
T 模式下:把黑体拉入光路,按【0%T】键,待显示 0.0,取出黑体; T/A 模式下:把装有参比溶液的比色皿拉入光路中,按【100%T/ABS0】键, 显示 0.0。 6、样品测量:将装有样品溶液的比色皿拉入光路中,读数即为该溶液的测量值。 7、实验结束:打开样品室盖,手持比色皿毛面并将其取出,盖上样品室盖,将 比色皿清洗干净,倒置滤纸上晾干。
UV752 紫外-可见分光光度计使用方法
一、仪器原理
物质对光的吸收具有选择性,在光的照射下产生吸收效应。不同的物质具有
不同的吸收光谱,当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减
弱的程度和物质的浓度呈一定的比例关系。在一定浓度范围内符合朗伯比尔定律:
A=lg1
(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用
应用分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。
基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即A= kcl式中比例常数k与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。
c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。
组成各种型号的紫外-可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。
1.光源在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源。
热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。
2.单色器单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。
单色器质量的优劣,主要决定于色散元件的质量。
色散元件常用棱镜和光栅。
3.吸收池吸收池又称比色皿或比色杯,按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外区。
吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池最为常用。
4、检测器检测器的作用是检测光信号,并将光信号转变为电信号。
现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
5、信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及自动记录和数字显示装置等。
操作步骤操作之前1.1开启电源进行初始化开启主机电源,分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化,如下图所示。
所有项目检测完毕,初始化结束,整个过程大约需要4min(若使用多池检测需5min)。
每个项目进行初始化操作时将被加亮显示,当初始化完成后,该项右边的星标也将加亮显示。
(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用
应用分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。
基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即A= kcl式中比例常数k与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。
c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。
组成各种型号的紫外-可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。
1.光源在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源。
热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。
2.单色器单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。
单色器质量的优劣,主要决定于色散元件的质量。
色散元件常用棱镜和光栅。
3.吸收池吸收池又称比色皿或比色杯,按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外区。
吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池最为常用。
4、检测器检测器的作用是检测光信号,并将光信号转变为电信号。
现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
5、信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及自动记录和数字显示装置等。
操作步骤操作之前1.1开启电源进行初始化开启主机电源,分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化,如下图所示。
所有项目检测完毕,初始化结束,整个过程大约需要4min(若使用多池检测需5min)。
每个项目进行初始化操作时将被加亮显示,当初始化完成后,该项右边的星标也将加亮显示。
紫外可见分光光度计的使用方法
紫外可见分光光度计的使用方法1、电源开关,使仪器预热20分钟;▪仪器接通电源后,仪器即进入自检状态,自检结束后波长自动停在546nm处,测量的方式自动设定在透射比方式(%T),并自动调100%与0%T。
注意:①开机前,先确认仪器样品室内就是否有东西挡在光路上。
光路上有东西将影响仪器自检甚至造成仪器故障。
②检查透过率模式下,挡光位置,透过率就是否显示00、0%T。
否则要调整暗电流,按“0%T”键,使透过率显示为00、0%T。
返回对光位置时仍能显示100、0%T,否则重新调100%T。
通过“▲”与“▼”键,设定测试波长;按“100%T”键,使透过率显示为100、0%。
如果您要获得被测样品的透射比参数时(透射比方式):T2、按方式键“MODE”将测试方式设置为透射比方式:▪显示器显示“3、按波长设置键“▲”或“▼”设置您想要的分析波长,如340nm;▪按波长设置键“▲”或“▼”直到显示器显示“340nm xxx x%T”▪每当波长被重新设置后,请不要忘记调整“100、0%T”。
4、将您的参比溶液与被测溶液分别倒入比色皿中;▪比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米,大约25毫升。
否则,会影响测试参数的精确度。
▪被测试的样品中不能有气泡与漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。
5、打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。
▪一般情况下,参比样品放在样品架的第一个槽位中。
▪被测样品的测试波长在340nm—1000nm范围内时,建议使用玻璃比色皿,被测样品在190nm—340nm范围内时,建议适用石英比色皿。
▪仪器所附的比色皿,其透射率就是经过测试与匹配的,未经匹配处理的,比色皿将影响样品的测试精确度。
▪比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。
否则,将影响样品的测试精确度。
6、将参比溶液推入光路中,按“100%T”键调整零ABS。
▪仪器在自动调整100%T的过程中,显示器显示“ 340nm Blank 、、、”当100、0%T调整完成后,显示器显示“340nm 100、0%T”7、将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示就是被测样品的透射参比数。
标题 紫外-可见分光光度计的正确使用方法
标题紫外-可见分光光度计的正确使用方法紫外-可见分光光度计(UV-Vis Spectrophotometer)是一种用于测量物质吸收和透过性的仪器。
正确的使用方法对于确保实验结果的准确性非常重要。
以下是紫外-可见分光光度计的正确使用方法的参考内容。
1. 仪器的准备:a. 检查光源和检测器:确保光源和检测器都处于正常工作状态,并没有损坏或需要更换的零件。
b. 清洁样品室:使用干净的棉纱或镜头纸轻轻擦拭样品室的玻璃表面,以确保获取准确的测量结果。
c. 预热:根据仪器的说明书,预热光度计至指定温度。
这个步骤通常需要一些时间,所以在进行实验前需要提前预热。
2. 样品的准备:a. 清洁样品:使用适当的方法和溶剂清洁或稀释样品,以确保最佳的光学透过性。
b. 样品的体积:添加合适量的样品到样品室中,以确保光路完全填充,并能够提供准确的测量结果。
如果样品室不完全填充或过于拥挤,可能会影响测量结果。
3. 校准:a. 参考空白:在测量目标物质之前,先进行空白测量。
在样品室中添加溶剂或介质,然后进行测量,并将其设置为参考光谱。
这样可以消除背景的干扰,使测量结果更加准确。
b. 波长校准:根据仪器的说明书,确定正确的波长校准,以确保获得准确的吸光度值。
这通常需要使用校准滤光片或标准样品来进行波长校准。
4. 测量操作:a. 设置波长:根据需要的波长,将仪器设置在对应的波长。
b. 吸光度的测量:在样品室中放置样品,并使用仪器进行吸光度测量。
等待仪器测量完成或按照仪器的指示进行测量。
c. 重复测量:进行至少三次重复测量,并计算平均值,以减小可能的误差。
5. 数据分析:a. 数据记录:记录测量结果和相应的实验条件,包括波长、样品浓度等信息。
b. 数据处理:使用适当的软件对数据进行处理,如绘制吸光度曲线、计算浓度或其他所需的数据处理操作。
6. 仪器的关机:a. 进行所需的数据保存或导出。
b. 关闭光度计,按照仪器的说明书进行正确的关机操作。
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项紫外可见分光光度计是一种科学仪器,它可以测量物质分子吸收光谱。
它还可以用来测量样品中物质的含量,以及检测物质的结构和化学性质。
作为一种重要的分析工具,它在化学、生物学、制药等领域中都得到了广泛的应用。
本文详细解析了紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项。
紫外可见分光光度计是一种原理上可以让用户对紫外线和可见光源中某些分子作出反应、精确测量样品中物质含量的仪器。
它是专业用来测量物质分子吸收光谱的仪器。
根据吸收光谱,用户可以精确测量样品中物质的含量,以及计算出样品的结构和化学性质。
它的使用对于科学研究和制药领域都有很重要的意义。
紫外可见分光光度计的使用非常简单,但需要遵循一些基本的步骤和注意事项。
首先,使用者要正确安装、组装紫外可见分光光度计,其次,要确保紫外可见分光光度计处于稳定的工作状态。
仪器应该置于室内,且要保持不变温,以避免对测量结果造成干扰。
其次,使用者要根据实验要求调整紫外可见分光光度计的参数,以获得最真实的测量结果。
最后,使用者要按照说明书的要求进行定期的维护保养。
另外,在使用紫外可见分光光度计过程中,还应注意以下几点:1.不要将样品放置在仪器上方,以免影响读数的准确性。
2.使用前应将样品放置在室温下2小时以上以便读数准确。
3.实验中所用样品不能带有油脂、杂质等物质,以免影响测量结果。
4.使用高温时,应注意样品具有一定的稳定性,以免受温度的影响而产生误差。
5.实验中如遇到仪器故障,及时反馈给生产厂家,以便及时进行维修。
综上所述,紫外可见分光光度计的正确使用对于科学研究和制药领域都具有重要的意义。
因此,使用者在使用紫外可见分光光度计时一定要遵守上述步骤和注意事项。
只有正确使用,才能得到更准确、更可靠的测量结果,以提高科学研究和制药水平。
紫外可见分光光度计的使用方法
紫外可见分光光度计的使用方法
紫外可见(UV-Visible)分光光度计是用于测量物质在紫外和可见光区域的吸收和透射特性的仪器。
以下是使用紫外可见分光光度计的一般步骤:
1. 打开紫外可见分光光度计的电源,并保证仪器充分预热。
2. 设置光源和检测器。
选择合适的波长范围(紫外或可见光谱),以及光源和检测器的位置。
3. 使用背景校准。
将空白试剂槽放入样品槽中(样品槽通常是一个透明的玻璃或石英池),然后选择背景校准选项。
这将记录光通过样品槽的基线吸收。
4. 准备样品。
将待测样品溶液放入样品槽中。
确保样品槽没有气泡或污渍,以免影响结果。
注意,为了比较样品结果,可以将每个样品的浓度保持相对一致。
5. 设置波长。
选择测量波长,并调整仪器以使其与待测样品的最大吸收光谱相匹配。
某些仪器还允许选择多个波长以进行多重波长读数。
6. 开始测量。
按下“开始”或“测量”按钮,仪器将测量样品吸收光谱。
读数时间通常很短,大约为几秒到几分钟不等。
7. 记录结果。
读取仪器显示屏上的吸收值,并将其记录下来。
注意,部分仪器可以直接将结果导出到计算机或打印机上。
8. 清洁和关闭仪器。
在使用完毕后,使用适当的清洁溶液清洁样品槽,以防止残留污渍。
最后,将仪器关闭。
需要根据具体仪器的操作手册来设置和操作紫外可见分光光度计,因为不同的仪器可能有不同的步骤和功能。
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项
详细解析紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项紫外可见分光光度计是多功能实验仪器中的一种,它可以测量和分析样品中的紫外可见光谱的吸收。
由于紫外可见分光光度计的多种用途,它已成为实验室中不可缺少的仪器之一。
本文将详细介绍紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项,以助于使用这种仪器的人员能够更加正确有效地使用该仪器。
首先,在使用紫外可见分光光度计之前,应检查仪器的各个部分和电源。
确保所有接头处都接好,确保仪器的电源也被正确插入。
其次,将样品分离出来,并将其原液和添加剂放入样品瓶中,然后将样品瓶装入仪器的样品腔内,这是进行测量的基本程序。
接下来,在配置仪器的参数和设置时,需要仔细校准谱线周期。
紫外可见分光光度计测量波长为200到900nm之间,但可根据样品的特性调整其扫描范围,以适应不同的应用需求。
最后,在完成配置后,操作员将进行实际测量。
接下来,我们来谈谈在使用紫外可见分光光度计时应该注意的事项。
首先,使用时应注意安全,任何维修或检修工作都应在专业的技术人员的指导下进行。
此外,请勿将恒温槽设定过高,否则可能会烧坏恒温槽以及样品。
其次,在使用仪器之前,请严格检查每个部件及其安装是否完好,确保各部件间的连接是正确的,以免测量过程中出现问题。
再次,在测量过程中应注意,不要让仪器受到震动,否则将影响测量的准确性。
最后,在使用之后,应当关闭采样灯管,按下关机按钮,以确保仪器的健康和安全。
以上就是本文所介绍的关于紫外可见分光光度计的使用方法和注意事项。
紫外可见分光光度计是多功能实验仪器中的一种,它可以测量和分析样品中的紫外可见光谱的吸收,是实验室中不可缺少的仪器之一。
使用前应确保所有部件安装正确,安全地进行操作,使用后应关闭电源,并及时检查、清洗和保养,以确保该仪器的正常使用。
紫外可见分光光度计的操作步骤
紫外可见分光光度计的操作步骤紫外可见分光光度计操作步骤紫外可见分光光度计是一种常用的实验仪器,常用于测量溶液的吸光度和透过率。
下面将介绍紫外可见分光光度计的操作步骤,帮助读者了解如何正确地使用该仪器。
1. 准备工作在开始使用紫外可见分光光度计之前,需要进行一些准备工作。
首先,检查仪器是否正常运行,包括电源、灯泡和检测器等。
确保仪器处于正确的工作状态。
其次,准备好所需的样品溶液,并将其放置在透明的玻璃或石英容器中,以避免对测量结果的影响。
最后,检查擦拭仪器的可见光波长校准标准溶液,并确保其符合标准要求。
2. 打开仪器并调整参数将仪器接通电源并打开开关。
在仪器界面上选择所需的波长,可以通过键盘或旋钮来输入目标波长。
根据样品的特点和需要测量的光谱范围,选择起始波长和终止波长,并设置扫描速度。
一般情况下,快速扫描适用于样品溶液透过率的快速测量,而慢速扫描适用于吸光度的测量。
3. 校正零点在进行样品测量之前,需要对仪器进行零点校准。
校准零点是为了消除仪器的内部误差,确保测量结果的准确性和可靠性。
校正零点的方法是切换至“T”模式,即透过率模式,并将空白试剂(如纯溶剂或去离子水)放入光池中进行测量。
记录下校正后的透过率值。
4. 测量样品溶液吸光度将样品容器放入光池中,并选择“Absorbance”模式。
确保样品溶液充满光池,避免气泡的存在。
开始测量后,仪器将自动测量样品的吸光度,并显示在仪器界面上。
记录下测量值,可以根据需要保存或导出数据。
5. 数据处理与分析获取吸光度数据后,可以进行相应的数据处理与分析。
比如,可以计算样品溶液的浓度、绘制吸光度曲线等。
根据实验需求,选择不同的数据处理方法,并使用相应的软件进行分析。
确保选择合适的数据处理方法和参数,以获得准确的结果。
6. 关闭仪器在使用完毕后,需要正确地关闭紫外可见分光光度计。
首先,将波长设定为较高的数值,以避免损坏检测器。
然后,关闭仪器的电源开关,将仪器断电。
紫外可见分光光度计的原理与使用方法
紫外可见分光光度计的原理与使用方法单光束分光光度计的原理是:光源发出光束通过准直系统,经过光栅
的分光作用后进入样品池,与样品发生相互作用后经过检测器,最后由显
示器显示吸光度数值。
双光束分光光度计的原理是:光源发出光束,一部分经过参比池进行
比较,另一部分经过样品池与样品相互作用,分别被检测器检测后与参比
值进行比较,最后由显示器显示吸光度数值。
使用紫外可见分光光度计的方法如下:
1.准备工作:
-检查仪器是否处于正常工作状态,确认光源、检测器和显示器的功
能正常。
-清洁样品池,确保无杂质和残留。
2.样品处理:
-准备需要测量的样品溶液,并将其转移到清洁的样品池中。
-如果样品浓度过高,可能会引起光透过度低,此时可进行适当稀释。
3.测量步骤:
-打开仪器电源,进行预热,通常需要一段时间让光源稳定。
-选择合适的波长范围和检测模式(吸光度/透过度)。
-调节仪器,使得显示器上的示数为零或基线稳定。
-将样品池放入样品室,尽量避免空气泡存在。
-记录或保存测量数据,可以进行后续数据处理和分析。
4.清洁和维护:
-测量完成后,及时清洁样品池和其他相关部件,防止污染和积累。
-关闭仪器电源,注意安全操作。
总结一下,紫外可见分光光度计是一种基于比尔-朗伯定律原理的实验仪器,主要用于测量物质溶液或气体的光吸收特性。
使用时需要进行准备工作,处理样品并进行测量,同时注意仪器的清洁和维护。
7504型-紫外可见分光光度计的使用介绍.
7504型-紫外可见分光光度计的使用介绍一、7504型-紫外可见分光光度计键盘功能1.该键为参数设定的上升键:在WL=***nm(波长改变)按此键波长参数自动增加,在仪器自检完成后,波长停在546nm,按此键可以快速进入预设波长。
2.参数设定的下降键:在WL=***nm(波长改变)按此键波长参数自动减少,在仪器自检完成后,波长停在546nm,按此键可以快速进入预设波长。
3.T/A/C显示切换键,按此键第一次,仪器自动切换测试方式吸光度ABS按此键第二次,仪器自动切换测试方式浓度CON,按此键第三次,仪器自动切换测试方式透射比%Tran。
4.OABS/100%T调试键,在A吸光度条件下,按此键仪器将参比自动调为“0.0000A”,在T透射比条件下,按此键仪器将参比自动调为“100%T”。
5.取消参数设定键,若仪器在非实时状态下按此键便返回到实时状态,仪器在设置参数的状态下,按此键便回到非设置状态。
6.设定键:设定测定参数的键。
7.确认键:确认设定一切参数有效,若不按此键,则设置无效。
二、7504A型-紫外可见分光光度计使用正文1.接通电源,开机使仪器预热20分钟,至仪器自动校正后,显示器显示“546nm,0.0000A”,仪器自检完毕,即可进行测试。
2.用<方式>键设置测试方式,根据您的需要选择,透光率(T)、吸光度(A)、浓度(C)。
3.根据要分析的波长,按设定键屏幕上显示“WL=***.*nm字样,输入想要分析的波长,然后按确认键,待显示器显示所需要的波长,并且把参比调成0.0000A,即可测试。
4.将参比溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿,打开样品室盖,将成有溶液的比色皿放入到比色槽中,盖上样品室盖。
5.将参比溶液推入到光路中,按<OABS/100%T>键调“OABS/100%T”,直至显示“100%T”或“0.0000A”为止。
6.将仪器显示器显示出“100%T”或“0.0000A” 后,将样品推入光路,这时便可以从显示器上得到样品的参数。
紫外可见分光光度计的使用方法
紫外可见分光光度计的使用方法1、电源开关,使仪器预热20分钟;仪器接通电源后,仪器即进入自检状态,自检结束后波长自动停在546nm处,测量的方式自动设定在透射比方式(%T),并自动调100%和0%T。
注意:①开机前,先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上。
光路上有东西将影响仪器自检甚至造成仪器故障。
②检查透过率模式下,挡光位置,透过率是否显示%T。
否则要调整暗电流,按“0%T”键,使透过率显示为%T。
返回对光位置时仍能显示%T,否则重新调100%T。
通过“▲”和“▼”键,设定测试波长;按“100%T”键,使透过率显示为%。
如果您要获得被测样品的透射比参数时(透射比方式):T2、按方式键“MODE”将测试方式设置为透射比方式:显示器显示“xxnm3、按波长设置键“▲”或“▼”设置您想要的分析波长,如340nm;按波长设置键“▲”或“▼”直到显示器显示“340nm xxx x%T”每当波长被重新设置后,请不要忘记调整“%T”。
4、将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米,大约25毫升。
否则,会影响测试参数的精确度。
被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。
5、打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。
一般情况下,参比样品放在样品架的第一个槽位中。
被测样品的测试波长在340nm—1000nm范围内时,建议使用玻璃比色皿,被测样品在190nm—340nm范围内时,建议适用石英比色皿。
仪器所附的比色皿,其透射率是经过测试和匹配的,未经匹配处理的,比色皿将影响样品的测试精确度。
比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。
否则,将影响样品的测试精确度。
6、将参比溶液推入光路中,按“100%T”键调整零ABS。
仪器在自动调整100%T的过程中,显示器显示“340nm Blank ...”当%T调整完成后,显示器显示“340nm %T”7、将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的透射参比数。
紫外可见分光光度计使用方法
紫外可见分光光度计使用方法紫外可见分光光度计是一种用于测量物质颜色和浓度的仪器,它的广泛应用在制药、化工、食品及其他领域。
这篇文档将详细介绍紫外可见分光光度计的使用方法。
一、仪器组成紫外可见分光光度计由光源、光栅、光路、检测器和计算机等组成。
其中,光源有白炽灯和氘灯两种,前者用于可见光区测量,后者则用于紫外光区测量。
光栅可以将白光分成不同波长的光,光路把分好波长的光导入检测器,后者又会将光信号转成电信号。
计算机会对电信号处理、分析并输出结果。
二、仪器调节使用仪器前,首先必须进行调节才能保证结果准确。
仪器调节的步骤如下:1.检查仪器各部分是否完好,保证样品架、样品池和光路径干净,无其他污染物。
2.开机,并预热一段时间,一般2-3小时即可。
预热完成后,中英文显示屏将显示“等待状态”,说明仪器可以使用了。
3.设置波长。
应根据实验需要进行选择。
波长调整可以通过旋转光栅实现。
4.校正基线值。
即调整仪器让它读取空白点时的数值为零。
5.调整吸光度值。
使用校准溶液调整吸光度上限和下限。
三、样品测试经过调节后,可以进行样品测试了。
具体步骤如下:1.将特定量的样品加入半透明样品池中。
一般加入样品的总体积为2ml-4ml之间。
2.安放样品架。
样品池应位于具有样品池位置标记的样品架上,以确保正确的对准和位置。
3.测量样品吸光度值。
在被测液样中目标波长的下方和上方各找一个吸收值。
计算吸光度可以用下列公式:吸光度=测量值-基线值。
4.计算样品浓度。
通过校正曲线可以将吸光度值转化为浓度值。
因此,在测试之前,需要根据不同样品制备合适的校正曲线。
四、结果处理测量结果会自动显示在计算机的屏幕上。
如果需要对数据进行处理,则可以使用相关软件进行统计和分析。
处理结果可以显示为图表或表格,并可以打印或导出。
总之,紫外可见分光光度计是现代实验室中经常用到的分析工具。
根据实验需要和仪器要求,本文提供了初步的使用方法,希望能帮助到科研工作者和试验人员们。
紫外可见分光光度计使用方法 光度计如何操作
紫外可见分光光度计使用方法光度计如何操作紫外可见分光光度计是什么呢?紫外可见分光光度计是引用新型技术研发而成的,接受单色器技术波长范围190—1100mm,适用范围包括市政和工业废水领域。
紫外紫外可见分光光度计是什么呢?紫外可见分光光度计是引用新型技术研发而成的,接受单色器技术波长范围190—1100mm,适用范围包括市政和工业废水领域。
紫外可见分光光度计使用方法:1、仪器预热。
打开样品室盖光门自动关闭、。
开启电源,指示灯亮,仪器预热20 min。
选择开关置于“T”旋钮,使数字显示为“00.0”。
2、旋动波长手轮,把所需波长对准刻度线。
3、将装有溶液的比色皿放置比色架中,令参比溶液置于光路。
4、盖上样品室盖,调整透光率“100%T”旋钮,使数字显示为“100.0T”。
如显示不到100%T,则可加按一次。
5、吸光度A的测量:仪器调T为0和100%后,将选择开关转换至A调零旋钮,数字显示应为“.000”。
然后拉出拉杆,使被测溶液置入光路,数字显示值即为试样的吸光度A。
6、测定完毕后,先打开样品室盖,再断电源。
比色杯应清洗干净后,再贮放保存。
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紫外可见分光光度计操作简便、使用快捷,但是用户在操作时候,同样需要了解仪器的注意事项,避开操作失误,对仪器造成损伤或者影响检测结果。
1.开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3~4/5为宜,不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。
测定时应保持比色皿清洁,池壁上液滴应用擦镜纸擦干,切勿用手捏透光面。
UV紫外-可见分光光度计操作说明
UV1801紫外-可见分光光度计操作一、打开仪器主机右侧电源开关稍等约十几秒钟,在仪器的屏幕上出现一个提示“请按键”,说明仪器可以进行自检或连接计算机自检。
二、仪器操作(1)、仪器所有操作不联接计算机1、仪器操作不连接计算机按仪器面板键盘上除“”的其他任意键,仪器进行自检(大约时间2分钟)。
蓝色液晶显示大屏幕上会出现下列图示情况仪器使用之前保证有一个平的工作台、稳定的电压,仪器后边离墙约20cm左右,开机后等仪器蓝色液晶大屏幕上五项都显示“OK”后,最好预热时间20分钟以上使用。
按任意键进入仪器操作主菜单。
2、光度测量用指垛按数字键1,进入“波长扫描”;按数字键2,进入“光度测量”;按数字键3,进入“定量分析”……依次,按数字键6,进入“系统设置”。
按仪器面板上参数设置键“F1”,进入“参数设置”比色皿校正,一般看测定要求高低,如果不高的话,可以关着,如果需要则打开。
当手形指示位置按左右键可以更改。
输入你所用除参比溶液比色皿的个数,如是1,则说明是一套2只比色皿,直接按面板上“F2”,进行比色皿套性测量;如共是4只,则按面板上“3”,再按“F2”进行比色皿套性测量;最后测完,如图显示。
继续按F2进行后边的样品测定。
(注:要求每一个比色皿都要装上相同的溶液,以第一个做参比,按照面板提示进行操作,特别提醒的是比色皿的顺序和方向在测定的过程中都不能再改变。
)其实其他的功能操作同上面的基本相似,只要按“上下”方向键可使手形指示图标到相应的位置,打开对应的标签,按照面板提示,选择或输入所需波长及其他参数,按“Enter”键进行编辑确认。
(2、仪器所有操作联接计算机打开计算机桌面上的,会出现下面的界面。
点击界面上的“设置”,选择端口、输入仪器后边编号(序列号)进行计算机和仪器的测试联接(一般仪器会自动选择连接端口,如不能连接,可检查端口连接线的联接状况、人为选择端口或重新启动计算机进行连接)。
确定后,在计算机屏幕右下方会出现一个信息窗口(如下图),会显示仪器编号(序列号),说明计算机和仪器联接已经建立。
紫外可见分光光度计的使用方法说明书
紫外可见分光光度计的使用方法说明书一、前言紫外可见分光光度计是一种常用的实验仪器,在化学、生物、药学以及其他科学研究领域中有着广泛的应用。
本说明书将详细介绍紫外可见分光光度计的使用方法。
二、仪器介绍紫外可见分光光度计是一台精密的分析仪器,它主要由光源、光栅、检测装置、显示器和控制面板等组成。
光源发出的光经过光栅的分光作用后,通过样品后的光强度变化被检测装置捕捉并转换为电信号,最终在显示器上显示出分光光度图谱。
三、前期准备在开始使用紫外可见分光光度计之前,需要做一些前期准备工作:1. 确保仪器连接电源,并检查电源是否稳定;2. 清理仪器表面和光路,保持其干净;3. 将样品液体放置在透明的样品池中,并确保样品池的干净和透明;4. 打开仪器电源,并进行预热。
四、开机与关闭1. 开机时,首先按下电源按钮,并等待仪器自检完成;2. 仪器自检完成后,进入待机状态,在这时可以调节仪器的参数;3. 调节参数前,通过菜单选择正确的操作模式;4. 操作完成后,点击确认按钮,仪器进入工作状态;5. 关闭仪器时,按下电源按钮,将其切换到待机状态,再次按下电源按钮可以完全关闭仪器。
五、测量样品1. 将经过预处理的样品液体倒入样品池中,注意不要超过指示线;2. 将样品池放入仪器的样品室中,待样品稳定后进行测量;3. 根据需要选择紫外或可见光模式,可由菜单调节对应的波长;4. 进行测量前,先进行基准校正,将空白样品以相同的方式放入并测量;5. 完成基准校正后,测量样品的光强度变化,并记录所测得的吸光度值。
六、数据处理与分析1. 根据需要,可以选择将数据导出到计算机上进行进一步处理;2. 使用相关的数据处理软件,可以分析吸光度的变化趋势,并进行样品之间、不同波长之间的比较;3. 将数据以图表的形式呈现,更直观地展示实验结果;4. 利用仪器附带的软件,还可以进行峰位、峰强、面积等数据的计算,以及更复杂的定量分析。
七、注意事项1. 在操作过程中,请遵循仪器的安全操作规范,避免任何可能导致伤害的行为;2. 仪器使用后,应及时清理和保养,避免灰尘和杂质积累;3. 长时间不使用时,应关闭仪器电源,并保持其干燥和通风良好的环境中。
紫外可见分光光度计的操作和使用
紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、药物等领域的实验仪器,它可以用来测量样品对紫外和可见光的吸收情况,从而得到样品的吸光度和浓度等重要参数。
在科研实验室和生产现场中,紫外可见分光光度计的操作和使用技巧非常重要,正确的操作可以确保实验结果的准确性和可靠性。
下面将介绍紫外可见分光光度计的操作和使用方法:一、准备工作1.1 样品的制备:首先要准备好需要测量的样品,确保样品的制备符合实验要求,并且样品溶液的浓度和透明度在光度计测量范围内。
1.2 仪器的准备:打开紫外可见分光光度计的电源,将仪器预热至稳定的工作温度,同时检查仪器的灯泡和光栅等部件是否正常。
二、测量操作2.1 校准仪器:在进行测量之前,必须对仪器进行校准,保证测量结果的准确性。
2.2 装样品:将样品溶液分别加入光度计的比色皿或石英比色皿中,注意不要留下气泡或杂质。
2.3 设定参数:根据样品的特性和测量要求,设定光度计的波长、光程和测量范围等参数。
2.4 测量数据:开始测量之后,观察样品的吸光度变化曲线,并记录下稳定的吸光度数值。
三、数据处理3.1 计算浓度:根据测得的吸光度数值,使用比色法或标样法计算出样品的浓度。
3.2 分析结果:根据测得的数据,分析样品的吸收特性和浓度变化规律,得出实验结论。
四、仪器维护4.1 清洁保养:每次使用完毕后,要及时清洁光度计的仪器和光学部件,确保仪器的稳定性和精度。
4.2 故障排除:如果在使用过程中发现仪器出现故障或异常,及时进行故障排除和维修处理。
五、注意事项5.1 防止污染:在操作过程中要注意避免样品污染或交叉污染,确保测量结果的准确性。
5.2 安全操作:使用化学药品和致癌物质时,要做好个人防护,避免对身体造成伤害。
通过以上对紫外可见分光光度计的操作和使用方法的介绍,相信大家对这一实验仪器有了更加深入的了解。
正确的操作和使用方法可以帮助科研人员和实验人员获得准确可靠的实验数据,为科学研究和生产实践提供有力支持。
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3. 吸收池 玻璃——由于吸收紫外UV光,仅适用于可见光区; 石英——适用于紫外和可见光区
4.检测器:将光信号转变为电信号的装置 ▪ 光电管 ▪ 光电倍增管 ▪ 二极管阵列检测器 5.记录装置:讯号处理和显示系统
▪ Slit 1不存在,Mirror取代了光栅grating 1
▪ Grating2 variable-pitch aberration-corrected diffraction grating
4. 用完后先关程序,再关仪器开关,关电源,关闭计算机。 5. 正确登记,将仪器及实验台擦干净。
思考题
1. 分光光度计由哪几部分组成?设计其光路图。 2. 紫外可见分光光度计对光源的要求是什么? 一般采
用哪几种光源,各光源的波长范围是什么? 3. 比色皿一般由什么材料制成?有哪几种规格?做实验
时,你是如何选择比色杯的规格及材料的? 4. 为什么测定时使用参比池?参比溶液怎么选择? 5. 在进行波长扫描与光度测定时需要设置哪些参数?
光吸收遵循朗伯-比尔定律:
A lg T lg I 0 bc
I
I0 入射光辐射强度 I 透射光辐射强度
T 透射比
a 吸光系数
ε 摩尔吸光系数
溶液对光吸收过程
仪器组成单光束分光光度计
光源
0.575
单色器
检测器 显示
吸收池
双光束分光光度计
光源 单色 器
比
光束பைடு நூலகம்裂器
值
吸收池
检测器
紫外可见分光光度计
主要内容
1、工作原理及仪器组成
2 、分光光度计的使用 ➢ 波长扫描 ➢ 定量测定
3 、注意事项
一、工作原理及仪器组成
物质的颜色与吸收光的关系: 当白光照射到物质上时,如果物质对白光中某种颜色
的光产生了选择性的吸收,则物质就会显示出一定的颜色。 物质所显示的颜色是吸收光的互补色。
选择[Spectrophotometer]菜单下Start]选项开始测量 ▪ 使用按钮方式 :按按钮 开始测量 ▪ 如果要终止扫描按按钮 。
二 分光光度计的使用-光度法
开始
方法设定
样品名输入 将空白样品分别放入参比池和样品池
进行用户基线校正 将样品放入样品池 开始测量
打印数据 开始测量
测量参数设置
在[Edit]菜单中选择[Method…]选项。出现下列设置窗口.
具体操作程序
Method:
1. general: Measurement测量方式选择Photometry(光度 计测量)
2. Quantitation定量参数设置页面:
在measure中选择波长wavelength,在Calibration中选择 “1st order”, “2st order”, “3st order”,也可以不校准。 在concertration中键入标准浓度单位。
为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收波 长的入射光。
▪ 控制吸光度A的准确的读数范围:由朗伯-比耳定律可知,吸 光度只有控制在0.2~0.7读数范围内时,测量的准确度较高.
▪ 选择参比溶液:参比溶液是用来调节仪器工作零点的。若 样品溶液,试剂,显色剂无色可用蒸馏水作参比溶液;反 之应采用不加显色剂的样品液作参比溶液。
2.单色器:包括狭缝、准直镜、色散元件 单色器是分光光度计的心脏部分,它的作用是把来自光源
的混合光分解为单色光并能随意改变波长。它的主要组成部 件和作用是:
①入射狭缝——限制杂散光进入。 ②色散元件——即棱镜或光栅,是核心部件,可将混合光 分解为单色光。 ③准直镜——把来自入射狭缝的光束转化为平等光,并把 来自色散元件的平等光聚焦于出射狭缝上。 ④出射狭缝——只让特定波长的光射出单色器。
2 运行UV Solution软件。软件将自动配置计算机的 串行口(RS 232 Port)见图
仪器在初始化过程中进行如下自检工作:
▪ ROM检测 ▪ RAM检测 ▪ 波长步进电机运转检测 ▪ 氘灯点亮检测 ▪ 钨灯点亮检测 ▪ 仪器波长校正
3 仪器主机开始初始化。见图
4 仪器主机初始化完毕,进入工作状态。
Instrument仪器参数设置页面
▪ Data mode读数显示方式,选择Abs吸光度,波长扫描的起止 范围一般为190-800,狭缝值一般为2
▪ Light一般选择“Auto”
Monitor显示页面
Processing数据处理页面
Report报告结果页面
样品名设置,备注信息及文件名输入
3. Instrument
4 standards标准参数设置 键入标系的样品浓度及名称
5 吸光度自动校零 在开始测试前,需要进行吸光度校零。在样品室参比和样
品光路中分别放入空白样品。按按钮 进行吸光度校零。 6 在wavelength中设定扫描的最大吸收波长, 7 放入标样,选中第一个标样,点measure依次测定完成 后自动给出标准曲线。 8 选择SAMPLE进行样品测定,全部测定完后点击END,此 时 自动生成一个文件,打开此文件,另存为所需的文件名。 9 关机时,先退出UVsolution,再关电脑,最后关光度计上 的power。
显
示
组成:光源、单色器、样品池、检测器
1.光源: ①能提供连续的辐射;②光强度足够大;③在整个光谱区 内光谱强度不随波长有明显变化;④光谱范围宽;⑤使用 寿命长,价格低。 钨灯——可见光区 320~2500nm 氢灯或氘灯——紫外光区 195-375nm
U3010(碘钨灯、氘灯)波长范围190-900nm
5 测量参数设置
1 在[Edit]菜单中选择[Method…]选项,或按按钮。出现下列窗口。
General:总体设置页面
▪ Measurement测量: Wavelength scan 波长扫描 Time scan 时间扫描 Photometry 定波长测量
▪ Operator操作者: 输入操作者的姓名 ▪ Instrument仪器:仪器型号由软件自动从仪器主机获得。 ▪ Use Sample Table使用样品表:选择是否使用样品表。 ▪ Comments备注:填写一些备注信息。 ▪ [Load]按钮:用于装载原来保存的方法文件。 ▪ [Save]按钮:保存当前的设置参数。 ▪ [Save As]按钮:将当前设置参数另存为一个方法文件。
基线校正
▪ 用户基线校正方法:可将scan speed 设小一些;进行样 品扫描时,可设大一些。 将空白样品分别放入样品室的 参比光路和样品光路。按按钮
▪ 系统基线校正方法。 使用空气作为参比和样品。按按钮 出对话框见图,选 择System后按[OK]按钮,进行系统基线校正。
测量
有两种方法可以开始测量: ▪ 使用菜单方式
颜
互
色 的
植物叶子呈现绿色是 因为植物中存在一种 吸收蓝紫光和红光的
补 色
产
载体——叶绿素
原
生
理
完全吸收
光谱示意 复合光 表观现象示意
完全透过 吸收黄色光
利用一定频率的紫外--可见光照射分析物,它将有选择 地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。
物质对光的选择性吸收-溶液对光的作用
溶液对光的作用示意图
▪ 旋转镜将光分成两束,分别通过参比池和样 品池,然后聚集在PMT
二 分光光度计的使用-波长扫描
开始
方法设定
样品名输入 将空白样品分别放入参比池和样品池
进行用户基线校正 将样品放入样品池 开始测量
打印数据 开始测量
启动UV Solution软件
1. 打开仪器主机电源。用鼠标点击Windows开始菜单中的 [Hitachi Applications]选项中的[UV Solutions 2.0] 选项。或 者直接在桌面上双击UV Solution图标。
三 注意事项
1. 开机预热15分钟左右。 2. 测定时应注意:
参照池和吸收池应是一对经校正好的匹配的吸收 池,材料和规格一致。
使用前后应将洗手池洗净,测量时不能用手接触 窗口。
已匹配好的比色皿不能用炉子和火焰干燥,不能 加热,以免引起光程长度上的改变。
3. 测量条件的选择: ▪ 选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收,