岛津液相色谱仪维护教材1 PPT
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液相色谱仪日常维护及常见故障解决精品PPT课件
流动相内含有空气 - 脱气处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机（在线） 3 泵（单元、二元、四元） 4 进样器（手动、自动） 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个廉价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机（在线） 3 泵（单元、二元、四元） 4 进样器（手动、自动） 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个廉价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。
岛津液相色谱仪教材课件
，采用适当 的预处理方法，如萃取、 净化、浓缩等，以去除干 扰物质，提高分离效果。
分离条件优化
根据复杂样品的性质，调 整色谱条件，如流动相组 成、流速、进样量等，实 现样品的最佳分离。
多组分分析
采用多维色谱技术，对复 杂样品中的多个组分进行 分离和检测，提高分析效 率。
instrument性能验证与评价
准确度。
应用领域拓展
环境监测
利用岛津液相色谱仪对环境中的有机污染物进行 定性和定量分析，为环境保护提供有力支持。
食品安全
应用于食品中农药残留、添加剂、毒素等有害物 质的检测，保障食品安全。
生物医药
用于药物代谢、生物标志物分析以及蛋白质、核 酸等生物大分子的分离分析。
仪器发展趋势
便携化
开发小型化、便携式的岛津液相色谱仪，方便现场快速检测和应 急响应。
04
药物分析
用于药物的分离、纯化和含量 测定，为药物研发和质量控制
提供有力支持。
食品安全
用于食品中农药残留、添加剂 、有害物质的检测，保障食品
安全。
环境监测
用于水体、土壤、空气等环境 样品中有机污染物的检测，为
环境监测提供数据支持。
生命科学
应用于生物样品中蛋白质、核 酸等大分子的分离分析，推动
生命科学研究。
与质谱仪的比较
质谱仪和液相色谱仪在样品处理和检测原理上存在较大差异。质谱仪主要通过将 样品离子化后，根据离子的质量荷比进行分离和检测，适用于对样品进行定性和 结构分析。而岛津液相色谱仪则主要用于样品的分离和定量分析。
尽管质谱仪在定性分析方面具有优势，但在定量分析方面，岛津液相色谱仪具有 更高的灵敏度和准确性。此外，岛津液相色谱仪可以与质谱仪联用，实现样品的 分离、定量和定性分析，提高了分析的全面性和可靠性。
分离条件优化
根据复杂样品的性质，调 整色谱条件，如流动相组 成、流速、进样量等，实 现样品的最佳分离。
多组分分析
采用多维色谱技术，对复 杂样品中的多个组分进行 分离和检测，提高分析效 率。
instrument性能验证与评价
准确度。
应用领域拓展
环境监测
利用岛津液相色谱仪对环境中的有机污染物进行 定性和定量分析，为环境保护提供有力支持。
食品安全
应用于食品中农药残留、添加剂、毒素等有害物 质的检测，保障食品安全。
生物医药
用于药物代谢、生物标志物分析以及蛋白质、核 酸等生物大分子的分离分析。
仪器发展趋势
便携化
开发小型化、便携式的岛津液相色谱仪，方便现场快速检测和应 急响应。
04
药物分析
用于药物的分离、纯化和含量 测定，为药物研发和质量控制
提供有力支持。
食品安全
用于食品中农药残留、添加剂 、有害物质的检测，保障食品
安全。
环境监测
用于水体、土壤、空气等环境 样品中有机污染物的检测，为
环境监测提供数据支持。
生命科学
应用于生物样品中蛋白质、核 酸等大分子的分离分析，推动
生命科学研究。
与质谱仪的比较
质谱仪和液相色谱仪在样品处理和检测原理上存在较大差异。质谱仪主要通过将 样品离子化后，根据离子的质量荷比进行分离和检测，适用于对样品进行定性和 结构分析。而岛津液相色谱仪则主要用于样品的分离和定量分析。
尽管质谱仪在定性分析方面具有优势，但在定量分析方面，岛津液相色谱仪具有 更高的灵敏度和准确性。此外，岛津液相色谱仪可以与质谱仪联用，实现样品的 分离、定量和定性分析，提高了分析的全面性和可靠性。
液相色谱仪维护培训班(岛津分析中心)PPT课件
39
8.关于ODS柱补修
40
峰的变形
根部变宽
有肩或分叉
41
峰产生有肩或分叉的原因
1.色谱柱入口处塌陷 2.柱床结构变化 3.填料表面变化 4.色谱柱污染 5.反冲处理过 6.样品劣化不稳定（生成氧化物、分解物等）
判断标准 所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化
42
柱的补修
用分析时的两倍流量定量送液
EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。 措施：1.轻微污染时,用针筒注入异丙醇，清洗样品池;
2.如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中 超声波清洗。
13
日常维护
更换氘灯（紫外检测器）
• 判断氘灯能量： 设定220nm波长，检查参比池能量，如
能量低于800，需更换氘灯。 • 操作注意点：
43
填料的取出
甲醇送液
未污染的部分
容器
44
恢复例
柱修补后
45
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
46
* 用不完,舍不得倒掉;放冰箱,能放几天?
29
5.关于脱气
30
脱气的目的
1. 防止由气泡的产生引起的故障 2. 防止由溶解（在液体中的）气体量
的变动引起的检测不稳定程度 1）示差折射率检测器 *使折射率变化 2）UV检测器（200nm以下） *溶解氧气有吸收 3）荧光检测器 *溶解氧气有消光作用
高效液相色谱仪 --维护培训班
岛津广州分析中心 詹松 Tel: Fax:
8.关于ODS柱补修
40
峰的变形
根部变宽
有肩或分叉
41
峰产生有肩或分叉的原因
1.色谱柱入口处塌陷 2.柱床结构变化 3.填料表面变化 4.色谱柱污染 5.反冲处理过 6.样品劣化不稳定（生成氧化物、分解物等）
判断标准 所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化
42
柱的补修
用分析时的两倍流量定量送液
EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。 措施：1.轻微污染时,用针筒注入异丙醇，清洗样品池;
2.如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中 超声波清洗。
13
日常维护
更换氘灯（紫外检测器）
• 判断氘灯能量： 设定220nm波长，检查参比池能量，如
能量低于800，需更换氘灯。 • 操作注意点：
43
填料的取出
甲醇送液
未污染的部分
容器
44
恢复例
柱修补后
45
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
46
* 用不完,舍不得倒掉;放冰箱,能放几天?
29
5.关于脱气
30
脱气的目的
1. 防止由气泡的产生引起的故障 2. 防止由溶解（在液体中的）气体量
的变动引起的检测不稳定程度 1）示差折射率检测器 *使折射率变化 2）UV检测器（200nm以下） *溶解氧气有吸收 3）荧光检测器 *溶解氧气有消光作用
高效液相色谱仪 --维护培训班
岛津广州分析中心 詹松 Tel: Fax:
岛津GC-MS-维护PPT课件
GCMS的仪器构造
1
GCMS-QP2010
2
MS的构造
3
接口
4
四极杆
5
离子源
6
ETP检测器
7
典型的 GCMS 问题
•灵敏度差 •污染物 •真空泄漏 •离子源污染
8
典型污染
Mass (M/Z)
Compound Classification Potential Source
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
每天都要进行老化吗？
视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。
18
色谱柱老化条件
•柱箱温度设定
• 35℃ ~ 柱子最高使用温度以下 30℃， 升温速率5℃/min。
•INJ & DET 温度
•柱箱最高温度+30℃
•老化时间
• 2 ~ 6 小时，视污染情况和色谱柱而定。
19
流路系统
•维护与检查的时期
• 结果
•M/Z 18 > M/Z 28 (无泄漏)
•M/Z 18 < M/Z 28
(泄漏)
28
MS小的真空泄漏
(用石油醚检查)
• 过程
• 监控 M/Z 18 (水) M/Z 28 (N2) 和石油醚的特征离子 43 (M/Z). • 将石油醚涂在易泄漏的部位. • 监控特征离子43 (M/Z) 的强度.
25
MS真空泄漏
•大的泄漏
•开机几分钟后机械泵排气的声音仍不消失. •分子涡轮泵启动5分钟后, 真空系统关闭.
1
GCMS-QP2010
2
MS的构造
3
接口
4
四极杆
5
离子源
6
ETP检测器
7
典型的 GCMS 问题
•灵敏度差 •污染物 •真空泄漏 •离子源污染
8
典型污染
Mass (M/Z)
Compound Classification Potential Source
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
每天都要进行老化吗？
视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。
18
色谱柱老化条件
•柱箱温度设定
• 35℃ ~ 柱子最高使用温度以下 30℃， 升温速率5℃/min。
•INJ & DET 温度
•柱箱最高温度+30℃
•老化时间
• 2 ~ 6 小时，视污染情况和色谱柱而定。
19
流路系统
•维护与检查的时期
• 结果
•M/Z 18 > M/Z 28 (无泄漏)
•M/Z 18 < M/Z 28
(泄漏)
28
MS小的真空泄漏
(用石油醚检查)
• 过程
• 监控 M/Z 18 (水) M/Z 28 (N2) 和石油醚的特征离子 43 (M/Z). • 将石油醚涂在易泄漏的部位. • 监控特征离子43 (M/Z) 的强度.
25
MS真空泄漏
•大的泄漏
•开机几分钟后机械泵排气的声音仍不消失. •分子涡轮泵启动5分钟后, 真空系统关闭.
岛津液相色谱日常维护课件PPT
❖ 产生原因：由于管路连接不好产生的额外体积 ❖ 死体积可能会引起分离度下降和重现性变差等问题
色谱柱
公螺母 死体积
好的连接
2021/3/10
管线
差的连接 7
溶剂前处理-过滤
过滤：0.45 μm或更小孔径滤膜
目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机 盐配制的缓冲液。
• 滤膜类型： 聚四氟乙烯滤膜：适用所有溶剂，酸和盐。 醋酸纤维滤膜：不适用有机溶剂，适合水基溶剂。 尼龙66滤膜：适用绝大多数的有机溶剂和水溶液，可用于强酸，不
脱气机亮错误红灯、真空度达不到，真空泵隔膜脏或者 磨损！
正常状态
2021/3/10
报警状态
大量流动相从废气 口溢出（真空脱气
腔漏）
12
LC-20AT
串联式柱塞往复泵
2021/3/10
主泵头
单向 阀
副泵头
13
LC-20AD
选配件支架 出口单向阀
进口单向阀
LC-20AD
压力传感器
泵头
泵头固 定座 进液口
❖ Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) ❖化学惰性大 ❖仅能承受 0.5 MPa压力
2021/3/10
4
管线材料
❖使用高溶解性溶剂如氯仿、THF等 当ID.0.25 mm或0.13 mm、氯仿、THF 25 %以下，10 MPa 以下的使用条件时，在实际应用中一般没有问题。 ❖特氟隆材质管路 作为废液管的时候，请勿随意增长或缩短其长度。增长管路， 会提高背压，有损坏检测器的危险；缩短管路，容易使得检 测器内产生气泡。
混合器体积
混合器不同体积的连接方法
2021/3/10
23
混合器故障处理
色谱柱
公螺母 死体积
好的连接
2021/3/10
管线
差的连接 7
溶剂前处理-过滤
过滤：0.45 μm或更小孔径滤膜
目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机 盐配制的缓冲液。
• 滤膜类型： 聚四氟乙烯滤膜：适用所有溶剂，酸和盐。 醋酸纤维滤膜：不适用有机溶剂，适合水基溶剂。 尼龙66滤膜：适用绝大多数的有机溶剂和水溶液，可用于强酸，不
脱气机亮错误红灯、真空度达不到，真空泵隔膜脏或者 磨损！
正常状态
2021/3/10
报警状态
大量流动相从废气 口溢出（真空脱气
腔漏）
12
LC-20AT
串联式柱塞往复泵
2021/3/10
主泵头
单向 阀
副泵头
13
LC-20AD
选配件支架 出口单向阀
进口单向阀
LC-20AD
压力传感器
泵头
泵头固 定座 进液口
❖ Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) ❖化学惰性大 ❖仅能承受 0.5 MPa压力
2021/3/10
4
管线材料
❖使用高溶解性溶剂如氯仿、THF等 当ID.0.25 mm或0.13 mm、氯仿、THF 25 %以下，10 MPa 以下的使用条件时，在实际应用中一般没有问题。 ❖特氟隆材质管路 作为废液管的时候，请勿随意增长或缩短其长度。增长管路， 会提高背压，有损坏检测器的危险；缩短管路，容易使得检 测器内产生气泡。
混合器体积
混合器不同体积的连接方法
2021/3/10
23
混合器故障处理
岛津液相色谱维护教材
液相色谱常见问题
压力异常（偏高、波动） 漏液 保留时间漂移 基线问题（漂移、噪声） 峰形异常
压力
压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的 压力显示值。
岛津液相色谱仪维护教材
岛津企业管理（中国）有限公司 分析中心
第一部分
液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题
液相色谱简易流程图
溶剂
进样器 输液泵
色谱柱 柱温箱
检测器 废液
数据处理
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4 手动进样器
5
色谱柱
6
检测器
7
废液瓶
1.等度系统
2.低压梯度系统
1
储液瓶
2
脱气机
3
低压梯度单元
PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 250 kgf/cm2压力 可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用于高溶解性溶剂如氯仿等
Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) 化学惰性大 能承受 5 kgf/cm2 压力
接头
不锈钢接头 / 垫圈 主要用于输液泵、进样器的连接 能承受 400 kgf/cm2压力 一旦固定，垫圈不可再动
吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题
噪音大
流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电源、地线等
液相色谱仪日常维护及常见故障ppt课件
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
6 检测器
VWD的光源—氘灯有一定的半衰期， 一般为1000小时左右，所以在没有样 品分析任务时要关闭氘灯，以延长氘 灯的使用寿命。
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺。 再生纤维素滤膜：具有蛋白质吸收低，同样适用于水溶性样品和有
机溶剂。
注意：1，每张滤膜只能用一次。 2，水相和有机相不要搞混。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
5 色谱柱
从泵来的 流动相
预柱
预柱是针对流动相来保护色谱柱 保护柱是针对样品来保护色谱柱
进样口
保护柱
分析柱 至检测器
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
色谱柱保护
过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱 仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中的缓冲液。 柱子在不使用时，两端密封保存 在适当的溶剂中保存柱子 注意色谱柱的pH值使用范围 不要高压冲洗柱子 不要高温下过长时间使用硅胶键合相
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
6 检测器
VWD的光源—氘灯有一定的半衰期， 一般为1000小时左右，所以在没有样 品分析任务时要关闭氘灯，以延长氘 灯的使用寿命。
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺。 再生纤维素滤膜：具有蛋白质吸收低，同样适用于水溶性样品和有
机溶剂。
注意：1，每张滤膜只能用一次。 2，水相和有机相不要搞混。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
5 色谱柱
从泵来的 流动相
预柱
预柱是针对流动相来保护色谱柱 保护柱是针对样品来保护色谱柱
进样口
保护柱
分析柱 至检测器
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
色谱柱保护
过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱 仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中的缓冲液。 柱子在不使用时，两端密封保存 在适当的溶剂中保存柱子 注意色谱柱的pH值使用范围 不要高压冲洗柱子 不要高温下过长时间使用硅胶键合相
相关主题
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尺寸
0.1 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.3 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.5 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.8 mmI.D. x 1.6 mmO.D.
管线材料
不锈钢 (可用于所有连接) 能承受几千 kgf/cm2 压力 酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 (尤其在pH小于2时)
岛津液相色谱仪维护教材1
第一部分
液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题
液相色谱简易流程图
溶剂
进样器 输液泵
色谱柱 柱温箱
检测器 废液
数据处理
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4 手动进样器
5
色谱柱
6
检测器
7
废液瓶
1.等度系统
2.低压梯度系统
1
储液瓶
2
脱气机
3
低压梯度单元
4
泵单元
5
混合器
6
自动进样器
7
色谱柱
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可
日常保养
-做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率 -做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命
常做的保养 —保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘） —泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期 保存在泵里） —进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 —尽量进行样品前处理 —色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命 —系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所 有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及 盐的析出。
PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 250 kgf/cm2压力 可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用于高溶解性溶剂如氯仿等
Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) 化学惰性大 能承受 5 kgf/cm2 压力
接头
不锈钢接头 / 垫圈 主要用于输液泵、进样器的连接 能承受 400 kgf/cm2压力 一旦固定，垫圈不可再动
流动相
水的等级 纯水 蒸馏水 去离子水
吸 光 率 纯水
去离子水
因为不纯物的存在，去离子的吸光率较高
波长 (nm)
纯水中去除了无机和有机的污染物
选择缓冲液的步骤
流动相
• 确定故障能否自行处理 —不要贸然拆卸不熟悉的部件
常见故障因素
仪器环境： —实验室的温度、湿度、酸度等 —实验室震动、灰尘等问题 —电源及地线问题
使用条件： —流动相（pH值、均匀度、气泡等） —样品（样品分解、氧化、样品溶剂等） —色谱柱（污染、堵塞、塌陷等）
硬件问题： —输液泵 —进样器 —检测器
PEEK接头 主要用于色谱柱、检测器的连接 易于安装 能承受 250 kgf/cm2压力 容易产生死体积
垫圈 不锈钢接头
PEEK接头
死体积
死体积可能会引起分离度变差和重现性变差等问题. 公螺母 死体积
好的连接
管线
差的连接
流动相
选择原则 1、采用 “HPLC” 级溶剂 2、避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 3、对试样有适宜的溶解度 4、溶剂粘度要小 5、与检测器相匹配
溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯
流动相
微量分析、梯度洗脱
都经过蒸馏和0.45 μm过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒） 优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂 HPLC级经过0.22 μm过滤,且除去有紫外吸收的杂质
流动相
鬼峰的出现
鬼峰
水 / 甲醇梯度 ODS 柱
1 mL/min, 10 mins 内，0-100% 甲醇， 在最高点保持5 mins.
8
检测器
9
废液瓶
1
储液瓶
3.高压梯度系统
2
脱气机
3
泵单元
4
混合器
5
自动进样器
6
色谱柱
7
检测器
8
废液瓶
液相色谱故障排除经验
• 故障的确定 —至少要重复出现两次以上
• 初步判断故障引起的原因 —方法或硬件
• 由经验或平时的积累确定故障原因 —平时做好观察和记录
• 当不能确认故障原因时 —采用排除法逐一考察可能引起故障的因素
基线漂移
流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 温度波动 系统平衡时间不够 流通池被污染或有气泡 流通池窗口破裂
死体积太大
峰形问题
柱子被污染或堵塞
色谱柱塌陷
色谱柱化学或次级保留（硅羟基效应或重金属污染）
流动相缓冲不足或不合适
样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大
液相色谱常见问题
压力异常（偏高、波动） 漏液 保留时间漂移 基线问题（漂移、噪声） 峰形异常
压力
压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的 压力显示值。
压力高
首先要确认是色谱柱堵塞还是系统堵塞
色谱柱堵时，确认可能造成堵塞的样品的性质，相应选择 合适的清洗溶剂。
系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向 前进行排除。
容易发生堵塞的部件
➢ 保护柱及色谱柱 ➢ 线路过滤器 ➢ 混合器过滤组件 ➢ 管路连接处 ➢ 进样器 ➢ 检测器流通池
压力低
样品过载（浓度或体积）
柱温过低
鬼峰
流动相被污染 进样阀残余峰 样品中未知物 色谱柱中的污染物
第二部分
日常使用注意点 硬件基础知识 容易出故障的部件及常见故障的排除
液相系统维护流程图
线路过滤器
单向阀
柱塞密封圈
吸滤头
色谱柱
检测器
手动进样器
一、输液部分
管线选择
材料
不锈钢 Teflon PEEK (聚醚醚酮)
保留时间不稳定
吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题
噪音大
流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电源、地线等
如果压力为零： 泵头中没有液体，充满气泡 单向阀完全堵死 柱塞杆折断 压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力)
如果有压力但是压力比正常时低： 漏液 单向阀堵塞
ห้องสมุดไป่ตู้力波动
压力在短时间内剧烈波动。 泵头中有气泡 单向阀脏 柱塞密封圈漏液
经常漏液的部件
泵： 柱塞密封圈 排液阀
手动进样器：转子密封圈磨损 检测器： 流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎） 接头处漏液：（接头松动，接头脏，接头磨损，部件不匹配）
0.1 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.3 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.5 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.8 mmI.D. x 1.6 mmO.D.
管线材料
不锈钢 (可用于所有连接) 能承受几千 kgf/cm2 压力 酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 (尤其在pH小于2时)
岛津液相色谱仪维护教材1
第一部分
液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题
液相色谱简易流程图
溶剂
进样器 输液泵
色谱柱 柱温箱
检测器 废液
数据处理
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4 手动进样器
5
色谱柱
6
检测器
7
废液瓶
1.等度系统
2.低压梯度系统
1
储液瓶
2
脱气机
3
低压梯度单元
4
泵单元
5
混合器
6
自动进样器
7
色谱柱
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可
日常保养
-做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率 -做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命
常做的保养 —保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘） —泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期 保存在泵里） —进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 —尽量进行样品前处理 —色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命 —系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所 有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及 盐的析出。
PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 250 kgf/cm2压力 可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用于高溶解性溶剂如氯仿等
Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) 化学惰性大 能承受 5 kgf/cm2 压力
接头
不锈钢接头 / 垫圈 主要用于输液泵、进样器的连接 能承受 400 kgf/cm2压力 一旦固定，垫圈不可再动
流动相
水的等级 纯水 蒸馏水 去离子水
吸 光 率 纯水
去离子水
因为不纯物的存在，去离子的吸光率较高
波长 (nm)
纯水中去除了无机和有机的污染物
选择缓冲液的步骤
流动相
• 确定故障能否自行处理 —不要贸然拆卸不熟悉的部件
常见故障因素
仪器环境： —实验室的温度、湿度、酸度等 —实验室震动、灰尘等问题 —电源及地线问题
使用条件： —流动相（pH值、均匀度、气泡等） —样品（样品分解、氧化、样品溶剂等） —色谱柱（污染、堵塞、塌陷等）
硬件问题： —输液泵 —进样器 —检测器
PEEK接头 主要用于色谱柱、检测器的连接 易于安装 能承受 250 kgf/cm2压力 容易产生死体积
垫圈 不锈钢接头
PEEK接头
死体积
死体积可能会引起分离度变差和重现性变差等问题. 公螺母 死体积
好的连接
管线
差的连接
流动相
选择原则 1、采用 “HPLC” 级溶剂 2、避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 3、对试样有适宜的溶解度 4、溶剂粘度要小 5、与检测器相匹配
溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯
流动相
微量分析、梯度洗脱
都经过蒸馏和0.45 μm过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒） 优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂 HPLC级经过0.22 μm过滤,且除去有紫外吸收的杂质
流动相
鬼峰的出现
鬼峰
水 / 甲醇梯度 ODS 柱
1 mL/min, 10 mins 内，0-100% 甲醇， 在最高点保持5 mins.
8
检测器
9
废液瓶
1
储液瓶
3.高压梯度系统
2
脱气机
3
泵单元
4
混合器
5
自动进样器
6
色谱柱
7
检测器
8
废液瓶
液相色谱故障排除经验
• 故障的确定 —至少要重复出现两次以上
• 初步判断故障引起的原因 —方法或硬件
• 由经验或平时的积累确定故障原因 —平时做好观察和记录
• 当不能确认故障原因时 —采用排除法逐一考察可能引起故障的因素
基线漂移
流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 温度波动 系统平衡时间不够 流通池被污染或有气泡 流通池窗口破裂
死体积太大
峰形问题
柱子被污染或堵塞
色谱柱塌陷
色谱柱化学或次级保留（硅羟基效应或重金属污染）
流动相缓冲不足或不合适
样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大
液相色谱常见问题
压力异常（偏高、波动） 漏液 保留时间漂移 基线问题（漂移、噪声） 峰形异常
压力
压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的 压力显示值。
压力高
首先要确认是色谱柱堵塞还是系统堵塞
色谱柱堵时，确认可能造成堵塞的样品的性质，相应选择 合适的清洗溶剂。
系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向 前进行排除。
容易发生堵塞的部件
➢ 保护柱及色谱柱 ➢ 线路过滤器 ➢ 混合器过滤组件 ➢ 管路连接处 ➢ 进样器 ➢ 检测器流通池
压力低
样品过载（浓度或体积）
柱温过低
鬼峰
流动相被污染 进样阀残余峰 样品中未知物 色谱柱中的污染物
第二部分
日常使用注意点 硬件基础知识 容易出故障的部件及常见故障的排除
液相系统维护流程图
线路过滤器
单向阀
柱塞密封圈
吸滤头
色谱柱
检测器
手动进样器
一、输液部分
管线选择
材料
不锈钢 Teflon PEEK (聚醚醚酮)
保留时间不稳定
吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题
噪音大
流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电源、地线等
如果压力为零： 泵头中没有液体，充满气泡 单向阀完全堵死 柱塞杆折断 压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力)
如果有压力但是压力比正常时低： 漏液 单向阀堵塞
ห้องสมุดไป่ตู้力波动
压力在短时间内剧烈波动。 泵头中有气泡 单向阀脏 柱塞密封圈漏液
经常漏液的部件
泵： 柱塞密封圈 排液阀
手动进样器：转子密封圈磨损 检测器： 流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎） 接头处漏液：（接头松动，接头脏，接头磨损，部件不匹配）