绿原酸药效学研究进展_赵金娟

绿原酸（ chlorogenic acid） ，又名咖啡鞣酸、咖啡 单宁酸，化学名 3 － O － 咖啡酰奎尼酸，是由咖啡酸 （ caffeic acid） 与奎尼酸（ quinic acid） 形成的缩酚酸 （ 图 1） ，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径 产生的一种苯丙素类化合物。它广泛存在于高等双 子叶植物和蕨类植物中，主要存在于忍冬科忍冬属、 菊科蒿属植物中，具有广泛的药理作用。近年来，针 对绿原酸的药效学方面的研究较多，许多新的药效 作用和机制被发现，这些研究成果为全面开发和利 用绿原酸提供了宝贵的资料。
1 抗氧化作用
体外实验表明绿原酸对氧自由基有抑制作用， 存在剂量效应关系，且绿原酸的效果优于橙皮苷； 绿
原酸能显著提高仔猪血浆中谷胱甘肽过氧化物酶 （ GSH － Px） 、过氧化氢酶（ CAT） 活性以及抑制羟自 由基能力［1］。 绿 原 酸 作 为 杜 仲 素 中 主 要 活 性 成 分 （ 含量为 7． 44% ） ，仅对·OH 和1，1 － 二苯基 － 2 － 苦 苯肼自由基（ DPPH 自由基） 有清除作用，对 O2－·则 无效［2］。
效，为我们开发和利用绿原酸提供重要的理论依据。
关键词 绿原酸; 药效学; 研究进展
中图分类号： Ｒ962
文献标识码： A
文章编号： 1006 － 9690（ 2013） 04 － 0001 － 05
Progress in the Pharmacodynamics of Chlorogenic Acid
图 1 绿原酸的化学结构
武雪芬等采用 β － 胡萝卜素漂白法，POV 测定 法和过氧化氢氧化百度文库考察了金银花叶提取物的抗氧 化作用，结果绿原酸粗提物对油脂的过氧化反应有 显著的抑制作用，其氧化还原容量是化学合成抗氧
收稿日期： 2013 － 01 － 11 基金项目： “十二五”支撑计划———金银花规范化种植基地优化升级及系列产品综合开发研究（ 2011BAI06B01） 作者简介： 赵金娟，山东中医药大学硕士研究生 * 通讯作者： 林慧彬，E － mail： linhuibin68@ 163． com； 林建强，E － mail： jianqianglin@ sdu． edu． cn
胡宗福等采用化学发光法研究发现，绿原酸对 O2－·、·OH 和 H2 O23 种活性氧均有清除作用，其清 除能力与浓度呈剂量关系。绿原酸溶液浓度较大 时，对 3 种活性氧的清除效果均明显而稳定，而浓度 较低时，对 O2－·和·OH 的清除效果不理想，甚至产 生一定的 促 氧 化 作 用［5］。 在 化 学 模 拟 条 件 下 绿 原 酸及其包合物都能够有效的清除 O2－·、·OH 及在高 温环 境 中 可 抑 制 猪 油 过 氧 化 值 （ POV） 以 及 酸 价 （ AV） 值的增加，并且超过阳性对照物茶多酚的作 用［6］。
3 抗病毒
研究证 明 绿 原 酸 在 浓 度 为 0． 2、2、20、200 和 2 000 μg / mL 对感染流感病毒的 MDCK 细胞中病毒 的神经氨 酸 酶 活 性 有 抑 制 作 用，对 新 城 鸡 瘟 病 毒 （ NDV） 诱生人全血细胞干扰素作用有促进作用［12］。 刘军等以 2 － 2 － 15 细胞为研究对象，通过细胞毒性 实验确定绿原酸对 2 － 2 － 15 细胞最大无毒浓度为
（ 1． 山东中医药大学，山东 济南 250014； 2． 山东省中医药研究院，山东 济南 250014； 3． 山东大学 微生物技术国家重点实验室，山东 济南 250100）
摘 要 近年来，对绿原酸的研究较多，研究证明绿原酸具有广泛的药理作用，如抗氧化、抑菌、抗病毒、抗炎、抗肿
瘤、保肝作用、抗内毒素等。对绿原酸的深入研究，将有利于在新药研发和临床应用中避开不良反应，增强临床疗
4抗炎
绿原酸在 31． 25 ～ 1 000 mg·L － 1 范围内对细胞 无抑制作用，其体外低浓度抑制 6 － 酮 － 前列腺素 F1α 生成，高浓度则诱导 6 － 酮 － 前列腺素 F1α 生 成，因而其具有体外抗炎作用，作用机制可能与抑制 肿瘤坏死因子、白细胞介素 － 6 等炎症因子的活化 以及影响花生四烯酸（ AA） 代谢有关［16］。
霍晓芳等以巨噬细胞分别用脂多糖作用和脂多 糖加绿原酸共同作用，用流式细胞术检测细胞 NF － κBp65 表达率，并分别测定培养上清中 NO 和 GSH － Pх 活性； 结果脂多糖作用 2h 后，NF － κBp65 表达 率升高，并持续至 4h，脂多糖与绿原酸共同作用后， 其表达率明显下降。NO 含量在用 LPS 作用 6h 后 仍持续上升，加绿原酸后明显下降； GSH － Px 活性 在 LPS 作用 6 h 后仍持续降低，加绿原酸作用后明 显升高，推测绿原酸抗炎机理之一，可能是通过降低 NF － κBp65 的水平来抑制 NO 的表达，另外也可能 与抗氧化酶的活性增加有关［17］。研究发现，肠黏膜 微血管内皮细胞正常状态下低水平表达细胞间黏附 分子 1，用 LPS 刺激后细胞间黏附分子 1 的表达明 显升高，而绿原酸能够抑制 LPS 诱导的肠黏膜微血 管内皮细胞强阳性表达细胞间黏附分子 1，绿原酸 的抗炎作用与其下调细胞间黏附分子 1 的表达密切 相关，为阐明其抗炎机制提供了数据［18］。
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中国野生植物资源
第 32 卷
化剂 BHA 的 2． 0 倍［3］。而通过测定芦丁与绿原酸 不同浓度组合的抗氧化活性后，发现芦丁与绿原酸 组合后比各自单独时具有更好的抗氧化活性，在三 种检测体系中二者的最大协同作用（ 实验清除率 / 理论清除率） 分 别 是 1． 21 （ DPPH） 、1． 38 （ O2－·） 、 1． 12（ 脂质过氧化） ［4］。
叶晓 林 等 为 探 讨 绿 原 酸 对 EMT － 6 乳 腺 癌 BABLc 小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响，建立 了 EMT － 6 乳腺癌荷瘤及空白对照模型，分别以高 （ 20mg / kg） 、中（ 10mg / kg） 、低（ 5mg / kg） 绿原酸，阿 霉素及重组人干扰素 α － 2b 进行干预治疗，观察每 组药物的抑瘤作用及对免疫器官的影响，结果与模 型组比较，绿原酸各剂量组（ 5 mg / kg，10 mg / kg，20 mg / kg） 肿瘤生长速度均表现缓慢，抑瘤率明显，存 在显著性差异； 绿原酸对小鼠移植性 EMT － 6 乳腺 癌具有明显抑制作用，对移植瘤荷瘤鼠胸腺系数和 脾脏系数影响不太明显［21］。
Zhao Jinjuan1 ，Dai Xuemei2 ，Qu Yongsheng2 ，Lin Huibin2* ，Lin Jianqiang3* （ 1． Shandong University of TCM，Jinan 250014，China； 2． Shandong Institute of TCM，Jinan 250014， China； 3． State Key Lab of Microbial Technology，Shandong University，Jinan 250100，China） Abstract In recent years，there are many researches of chlorogenic acid． Ｒesearches indicated that chlorogenie acid had various pharmacologic actions，such as antioxidation，antibacterial，antiviral，antiinflammatory，antitumor，liver protective effect and antiendotoxin，etc． The depth study of chlorogenie acid will help to avoid the untoward effect in the research and development of new drugs，and strengthen the clinical efficacy in the clinical application． It also offeres the important foundation for us to exploit and use chlorogenie acid． Key words chlorogenic acid； pharmacodynamics； research advance
5 抗肿瘤
孙秋艳等采用四甲基偶氮唑蓝法研究发现绿原
第4 期
赵金娟，等： 绿原酸药效学研究进展
酸对人肺癌 A549 细胞无细胞毒作用； 对 A549 肺癌 无明显抑制作用，但可明显抑制 Lewis 肺癌的生长， 联合阿霉素用药 对 抗 肿 瘤 无 增 敏 作 用［19］。 刘 馨 等 将不同浓度的绿原酸干预乳腺癌 MCF － 7 细胞； 采 用四甲基偶氮唑蓝（ MTT） 法检测绿原酸对 MCF － 7 细胞的生长抑制率，流式细胞术检测 MCF － 7 细胞 凋亡率、细胞周期及细胞周期素（ Cyclin） D1 表达发 现绿原酸可抑制 MCF － 7 细胞增殖，使细胞阻滞于 G0 / G1 期； 其 机 制 可 能 与 下 调 Cyclin D1 表 达 有 关［20］。
研究发现绿原酸对革兰氏阴性菌（ 大肠杆菌） 和革兰氏阳性菌（ 金黄色葡萄球菌） 均有抑菌活性， 但抗金黄色葡萄球菌的活性比抗大肠杆菌活性更 强［9］。而绿原酸与 LaCl3·6H2 O 反应合成的绿原酸 合镧（ Ⅲ） 配合物对大肠杆菌的抗菌活性比绿原酸 明显增强，但对金黄色葡萄球菌的抗菌活性反而比 绿原酸弱［10］。同时绿 原 酸 可 以 抑 制 铜 绿 假 单 胞 菌 的生物膜形成，并对早期和成熟生物膜具有破坏作 用，对于生物膜内 PAE 与头孢他啶有协同杀菌作 用，并且强于红霉素组［11］。
2 抑菌作用
以尼泊金乙酯为对照，发现 0． 02% 绿原酸具有 0． 03% 尼泊金乙酯相同防腐作用，表明绿原酸可以 用于制剂防腐，以消除化学防腐剂毒副作用［7］。实 验证明绿原酸对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳 链球菌、乳房链球菌、产气荚膜梭菌的最小抑菌浓度 （ MIC） 分别为 1． 58 g / L、3． 16 g / L、3． 16 g / L、6． 32 g / L、1． 58 g / L，最小杀菌浓度（ MBC） 分别为 1． 58 g / L、6． 32 g / L、3． 16 g / L、6． 32 g / L、3． 16 g / L［8］。
实验发现绿原酸在 BHK － 21 细胞上具有明显 的 抗 病 毒 作 用，绿 原 酸 对 病 毒 的 最 小 有 效 浓 度 （ MIC） 为 1． 0 μg·mL － 1 ，而且毒性低，最大无毒浓度 （ TD0） 为 200 μg·mL － 1 ，其治疗指数（ TI） 为 200； 绿 原酸浓度 1 μg·mL － 1 预处理细胞 24 h 以上能有效 抑制病毒感染； 绿原酸对 HSV － 1 病毒无直接杀伤 作用［14］。与更昔洛韦、金叶败毒及其金银花进行比 较，绿原酸细胞毒性略高于金叶败毒和金银花，但抗 人巨细胞病毒（ HCMV） 效果明显高于金叶败毒和金 银花，治 疗 指 数 最 高，具 有 抗 HCMV 的 潜 在 优 越 性［15］。
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250 μg / mL； 在最大无毒浓度（ 250 μg / mL） 时，两批 试验对 HBsAg、HBeAg 均具有明显的抑制作用； 第 4、8 d 时对 HBeAg 的平均抑制率分别为 89． 45% 、 82． 00% ，对 HBsAg 的 抑 制 率 分 别 为 86． 54% 、 88． 00% 。 ［13］
第 32 卷第 4 期 2013 年 8 月
中国野生植物资源 Chinese Wild Plant Ｒesources
doi： 10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2013． 04． 001
Vol． 32 No． 4 Aug． 2013
绿原酸药效学研究进展
赵金娟1 ，戴雪梅2 ，曲永胜2 ，林慧彬2* ，林建强3*