紫外可见吸收光谱仪原理及使用
紫外可见吸收光谱法基本原理
ε 2bc
式中:Io1、Io2分别为λ1、λ2 的入射光强度;
It1、It2分别为λ1、λ2 的透射光强度;
ε1、ε2分别为λ1、λ2的摩尔吸光系数; 因实际上只能测总吸光度A总,并不能分别测得A1和A2,故
A总 = lg(Io总/It总 ) =lg(Io1+Io2)/(It1+It2) -ε1bc -ε2bc = lg(Io1+Io2)/(Io110 +Io210 ) 令: ε2 –ε1 = ; Io1 =Io2 A总 = lg(2Io1)/It1(1+10- bc ) = A1 + lg2 - lg(1+10- bc )
是非单色光作为入射光引起的偏离。
非单色光作为入射光引起的偏离
假设由波长为λ1和λ2的两单色光 组成的入射光通过浓度为c的溶液,则: A 1 = lg(Io1 /It1 )=ε1bc A 2 = lg(Io2 /It2 )=ε2bc
故:
I t1 I O1 10
ε 1bc
; I t 2 I O1 10
讨论如下:
讨论:
A总 =A1 + lg2 - lg(1+10
-εbc
)
(1) = 0; 即: 1= 2 =
则: A总 =lg(Io/It)= bc
(2) ≠0 若 <0 ;即 2< 1 ; - bc>0,
lg(1+10
- bc
)值随c值增大而增大,则标准曲线偏离直线向
bc
)
(4)为克服非单色光引起的偏离,首先应选择比较好的单色器。
此外还应将入射光波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线 较平坦处。
(2) 化学性因素
紫外可见光谱仪的使用方法
紫外可见光谱仪的使用方法紫外可见光谱仪是一种用于分析物质的仪器,它能够通过测量样品在紫外可见光波段的吸收和反射来确定其成分和结构。
在化学、生物、药物等领域,紫外可见光谱仪被广泛应用于定量分析、质量控制和研究工作中。
本文将介绍紫外可见光谱仪的使用方法,帮助用户正确、高效地操作该仪器。
1. 样品准备。
在使用紫外可见光谱仪之前,首先需要准备好待测样品。
样品应尽量纯净,避免杂质和杂散光的干扰。
对于液体样品,通常需要将其置于透明的石英或玻璃容器中,以确保光线能够透过样品。
对于固体样品,可以将其制成薄片或溶解后进行测试。
2. 仪器调试。
在进行测试之前,需要对紫外可见光谱仪进行适当的调试。
首先检查仪器的光源和检测器是否正常工作,调整光路使其处于最佳状态。
同时,还需要对仪器进行基准校准,以确保测试结果的准确性和可靠性。
3. 测量操作。
在进行测量操作时,需要按照以下步骤进行:将样品装入样品室,并关闭室门,确保样品处于稳定状态。
选择合适的波长范围和光谱扫描速度,根据样品的特性进行调整。
启动光源,开始进行光谱扫描。
在扫描过程中,可以观察样品的吸收曲线,并记录下相应的数据。
测量结束后,关闭光源,取出样品,并对仪器进行清洁和维护工作。
4. 数据处理。
在得到光谱数据后,需要进行相应的数据处理和分析工作。
可以利用专业的光谱软件进行数据处理,绘制吸收曲线、计算吸光度等参数。
同时,还可以进行定量分析和结构推断等工作,以获得更多有用的信息。
5. 注意事项。
在使用紫外可见光谱仪时,需要注意以下事项:避免样品污染和光路污染,保持仪器的清洁和整洁。
注意光源的使用寿命和稳定性,及时进行更换和维护。
根据样品的特性和要求,选择合适的测量条件和参数,以获得准确可靠的测试结果。
总结。
紫外可见光谱仪是一种重要的分析仪器,正确使用和操作对于获得准确的测试结果至关重要。
通过本文介绍的使用方法,希望能够帮助用户更好地掌握紫外可见光谱仪的操作技巧,提高工作效率和测试准确性。
紫外可见吸收光谱法原理_概述解释说明
紫外可见吸收光谱法原理概述解释说明1. 引言1.1 概述紫外可见吸收光谱法是一种广泛应用于化学分析、生物医药和材料科学等领域的分析技术。
它通过检测样品吸收紫外或可见光的能力,可以确定样品中存在的化合物或物质的浓度。
紫外可见吸收光谱法基于原子、离子或分子在特定波长范围内对电磁辐射的选择性吸收现象,利用这种吸收现象可以获得样品所具有的信息。
本文将对紫外可见吸收光谱法的原理进行详细介绍,并探讨其在化学分析、生物医药和材料科学中的应用。
1.2 文章结构本文共分为五个部分:引言、紫外可见吸收光谱法原理、紫外可见吸收光谱应用领域、实验方法与操作步骤以及结论和展望。
1.3 目的本文旨在向读者介绍紫外可见吸收光谱法的基本原理以及其在不同领域中的应用。
通过阐述紫外可见吸收光谱法的操作方法和实验步骤,希望能为初学者提供一份清晰的指南,使其能够准确、有效地应用该技术进行分析。
同时,我们将对紫外可见吸收光谱法的局限性进行讨论,并展望其未来在科学研究和实际应用中的发展方向。
2. 紫外可见吸收光谱法原理:2.1 光谱的基本概念:光谱是指将某物质在不同波长范围内对电磁辐射的吸收、发射或散射进行分析和测量的方法。
根据电磁辐射的能量不同,可将光谱分为紫外光谱、可见光谱和红外光谱等。
其中,紫外可见吸收光谱法利用物质对紫外及可见光区域(200-800 nm)的吸收特性进行定量和定性分析。
2.2 紫外可见吸收光谱的原理:紫外可见吸收光谱法是通过物质吸收特定波长范围内电磁辐射而产生的能级跃迁来进行分析。
当样品受到入射光线照射后,样品中的某些化学成分会吸收特定波长范围内的能量,并转为高能态。
这些化学成分在高能态时可能会跃迁至更高能级或离子化状态,从而使入射光线中特定波长的能量被吸收,形成明显的吸收峰。
根据琴斯定律(Lambert-Beer定律),光的吸收与样品中物质浓度成正比。
因此,通过测量入射光和透射光之间的吸收差异,可以推算出样品中特定化合物的浓度。
紫外可见光谱仪的原理
紫外可见光谱仪的原理
紫外可见光谱仪是一种用于分析物质的仪器,它利用物质对紫外可见光的吸收和散射特性来确定物质的组成和性质。
其工作原理如下:
1. 光源:紫外可见光谱仪通常采用钨灯或氘灯作为光源。
钨灯可以发射可见光和一部分紫外光,而氘灯则可以发射更高能量的紫外光。
2. 光路:通过反射、折射等光学元件,使光线准确地传递至样品。
3. 样品:待测物质溶液或气体会与传递至样品的光发生相互作用。
物质的分子结构和化学性质决定了它们对特定波长的光的吸收程度。
4. 分光器:分光器将光按波长进行分解,使不同波长的光分别达到检测器。
5. 检测器:光谱仪通常使用光电二极管或光电倍增管作为检测器。
这些检测器能够测量不同波长的光的强度。
6. 计算和分析:计算机通过对检测器接收到的光的强度进行处理和分析,在显示器上显示出样品对不同波长光的吸收或透过率的图谱,即紫外可见光谱。
通过分析这些光谱,可以确定样品中所含物质的组成、浓度和化学状态,并进行定性和定量的分析。
[说明]紫外可见吸收光谱仪原理及使用
紫外可见吸收光谱仪分光光度法分析的原理是利用物质对不同波长光的选择吸收现象来进行物质的定性和定量分析,通过对吸收光谱的分析,判断物质的结构及化学组成。
本仪器是根据相对测量原理工作的,即选定某一溶剂(蒸馏水、空气或试样)作为参比溶液,并设定它的透射比(即透过率T)为100%,而被测试样的透射比是相对于该参比溶液而得到的。
透射比(透过率T)的变化和被测物质的浓度有一定函数关系,在一定的范围内,它符合朗伯—比耳定律。
T=I/Io A=KCL=‐㏒I/Io其中T 透射比(透过率) A 吸光度 C 溶液浓度K 溶液的吸光系数L 液层在光路中的长度I 光透过被测试样后照射到光电转换器上的强度Io 光透过参比测试样后照射到光电转换器上的强度1. 液晶显示器:用于显示测量信息、参数及数据。
2. 键盘:共有八个触摸式按键,用于控制和操作仪器3. 样品室:用于放置被测样品。
基本操作步骤:连接仪器电源线,确保仪器供电电源有良好的接地性能。
接通电源,使仪器预热30分钟。
若要实现精确测试或作全性能检查,请再执行一次自动校正功能。
在仪器与电脑非连接状态时,按<方式>键5秒左右,待显示器显示“SELFTESTING FILTER”后松手,至仪器自动校正后,显示器显示“XXX..Xnm 0.000A”即可进行测试。
用<方式>键设置测试方式,透射比(T),吸光度(A)用<设置>键和<∧>键或< ∨>键设置您想要的分析波长。
如没有进行上步操作,仪器将不会变换到您想要的分析波长。
根据分析规程,每当分析波长改变时,必须重新调整0ABS/100%T。
UV-2102C/PC/PCS型紫外可见分光光度计根据这一规程,特别设计了防误操作功能:当波长改变时,显示器第二列会显示“WL=×××.×nm”字样,(设置波长)与第一列左侧显示“×××.×nm”(当前波长)不一致时,提示您下步必须按<确认>键,显示器第一列右侧会显示“BLANKING”,即仪器变换到您所设置的波长及调0ABS/100%T。
紫外光谱仪的原理及应用
紫外光谱仪的原理及应用一、基本原理利用紫外-可见吸收光谱来进行定量分析由来已久,可追溯到古代,公元60年古希腊已经知道利用五味子浸液来估计醋中铁的含量,这一古老的方法由于最初是运用人眼来进行检测,所以又称比色法。
到了16、17世纪,相关分析理论开始蓬勃发展,1852年,比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液层厚度相等时,颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例,从而奠定了分光光度法的理论基础,这就是著名的朗伯-比尔定律。
紫外-可见吸收光谱的形成吸光光度法也称做分光光度法,但是分光光度法的概念有些含糊,分光光度是指仪器的功能,即仪器进行分光并用光度法测定,这类仪器包括了分光光度计与原子吸收光谱仪(AAS)。
吸光光度法的本质是光的吸收,因此称吸光光度法比较合理,当然,称分子吸光光度法是最确切的。
紫外-可见吸收光谱是物质中分子吸收200-800nm光谱区内的光而产生的。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级跃迁(原子或分子中的电子,总是处在某一种运动状态之中。
每一种状态都具有一定的能量,属于一定的能级。
这些电子由于各种原因(如受光、热、电的激发)而从一个能级转到另一个能级,称为跃迁。
)当这些电子吸收了外来辐射的能量就从一个能量较低的能级跃迁到一个能量较高的能级。
因此,每一跃迁都对应着吸收一定的能量辐射。
具有不同分子结构的各种物质,有对电磁辐射显示选择吸收的特性。
吸光光度法就是基于这种物质对电磁辐射的选择性吸收的特性而建立起来的,它属于分子吸收光谱。
跃迁所吸收的能量符合波尔条件:二、应用范围紫外-可见分光光度计可用于物质的定量分析、结构分析和定量分析。
而且还能测定某些化合物的物理化学参数,如摩尔质量、配合物的配合比例和稳定常熟、酸碱电离常数等。
1.定性分析紧外-可见分光光度法对无机元素的定性分析应用较少,无机元素的定性分析可用原子发射光谱法或化学分析的方法。
紫外可见吸收光谱法
-C-C- 如:乙烷: max=135nm C-H 如: 甲烷: max= 125nm
2) n * 跃迁
分子中未共用n电子跃迁到* 轨道
化合物种类:凡含有n电子的杂原子的饱和化合物
特点:跃迁所需要的能量较高
位置:远紫外光区和近紫外光区
150-250nm
ε=100 ~ 1000 L·cm-1 ·mol-1
Mn+-Lb- M(n+1)+-L(b+1)- (hν) [Fe3+-SCN-]2+ [Fe2+-SCN]2+ (这就是配合物λmax=490nm为血红色原因)
金属配合物的电荷转移吸收光谱,有三种类型:
1. 电子从配体到金属离子: 相当于金属的还原; 2. 电子从金属离子到配体; 产生这种跃迁的必要条件是金属离子容易被氧化
白炽光源: 热辐射光源:可见光区,340-2 500nm,影响因素:灯电压
如 钨丝灯和卤钨灯; 气体放电光源: 气体放电发光光源:紫外光
否相同。 在进行紫外光谱法分析时,必须正确选择溶剂。
三、紫外-可见分光光度计
光源 λ1、 λ2、 λ3、 …、 λn
分光系统
λmax
调制放大 记录系统→显示A
检测系统 光→电
I0→样品池→ It
紫外-可见分光光度计主要组成部件
光源
分光系统
样品池
检测系统
记录系统
1、光源
1.光源:提供入射光的元件。
3.电子从金属到金属
配合物中含有两种不同氧化态的金属时,电子可在其间转移,
这类配合物有很深的颜色,如普鲁士蓝 (磷、砷)钼蓝 H8 [SiMo2O5(Mo2O7)5 ]
紫外可见光谱连续吸收谱的原理
紫外可见光谱连续吸收谱的原理
紫外可见光谱连续吸收谱的原理是基于分子在电磁波作用下发生电子跃迁的现象。
当分子受到一定波长的电磁辐射时,能量被吸收,电子从基态跃迁到激发态,使分子从低能级到高能级跃迁,形成吸收峰。
吸收峰的强度与分子吸收的光的强度成正比。
连续吸收谱是指在一定范围内的波长内,分子吸收的光的强度是连续变化的。
这是因为分子的电子能级是连续的,吸收光的波长也是连续的。
因此,在连续吸收谱中,吸收峰之间是连续的,呈现出一条平滑的曲线。
通过对样品的连续吸收谱进行分析,可以确定样品的化学结构和含量等信息。
同时,连续吸收谱也可以用于研究分子的电子能级和电子跃迁等量子力学现象。
紫外可见光谱法基本原理与应用
红移 使生色基的吸收峰向长波移动的现象 红移一般是由于共轭体系延长或增加了助色基引起。 蓝移(紫移)
取代基或溶剂作用使生色基的吸收峰向短波方向移动的现象
增色效应 使吸收带强度增加的作用 减色效应 使吸收带的强度降低的作用
2.谱带分类:
(1) R带 (德文Radikalartin基团型) n→π*跃迁引起的吸收带
实际常见的电子跃迁:
σ→σ* 、 n → σ*、 π → π*、n → π*
紫外光谱的产生:
1. 几乎所有的有机分子的紫外-可见吸收光谱是 由π→π*或n→π*跃迁所产生的 ; 2. 含S、I等元素时的n→σ* 3. 电荷转移跃迁 4. 配位体场的d →d*跃迁
常用光谱术语及谱带分类
1. 光谱术语
苯环的特征峰,苯环被取代后,精细结构消失或部分消 失, 常用来识别芳香族化合物。
★ E带(分为E1和E2带)
E1带: λmax 184 nm左右,lgε > 4。 E1带为苯环的特征谱带, 吸收强度较大。苯环上有助色
团时,向长波方向移至200 ~ 220 nm。
E2带: λmax 203 nm左右,εmax约为7400。 苯环中共轭二烯引起的π→π* 跃迁。该带相当于K带。 苯环引入发色团与苯环共轭,E2带移至220 ~ 250 nm, ε>
生色基
由于分子中某一基团或体系 的存在而使分子产生吸收出 现谱带 生色基的结构特征:π电子。 常见的生色基:羰基、羧基、 酯基、硝基、偶氮基及芳香 体系等
助色基
某一基团或体系在紫外—可 见光区内不一定有吸收,但 与生色基相连时能使生色基 的吸收带红移,且强度增加。 助色基的结构特征:通常都 含有n电子 常见的助色基:羟基、胺基、 硝基、巯基、卤素等
紫外可见分光光度法的原理及应用
物质颜色和吸收光颜色的关系
物质颜色
黄绿 黄 橙 红
紫红 紫 蓝
绿蓝 蓝绿
吸
颜
色
紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 绿 红
收 波
光 长(nm)
400 ~ 450 450 ~ 480 480 ~ 490 490 ~ 500 500 ~ 560 560 ~ 580 580 ~ 600 600 ~ 650 650 ~ 750
用经过分光后的不同波长的光依次透过该物质,通过测 量物质对不同波长的光的吸收程度(吸光度), 以波长为横 坐标,吸光度为纵坐标作图,就可以得到该物质在测量波长 范围内的吸收曲线。这种曲线体现了物质对不同波长的光的 吸收能力,称为吸收光谱。
吸收光谱
透射光 检测器
入射光 不同波长光
紫外-可见分光光度法的原理
2.分子吸收光谱的分类:
分子吸收光谱涉及三种跃迁能级,所需能量大小顺序
? E电 ? ? E振 ? ? E转
? E电 ? 1 ~ 20ev ? ? ? 0.06 ~ 1.25?m ? 紫外 ? 可见吸收光谱 ? E振 ? 0.05 ~ 1ev ? ? ? 25 ~ 1.25?m ? 红外吸收光谱 ? E转 ? 0.005 ~ 0.05ev ? ? ? 250 ~ 25?m ? 远红外吸收光谱
比耳定律实验
当一束平行的单色光通过液层厚度一定的溶液时,在入射光波长、
强度和溶液温度等不变时,吸光度A与溶液浓度 c 关系:A=k c
3.紫外-可见吸收光谱的产生 由于每个电子能级上耦合有许多的振-转能级,所以处
于紫外 -可见光区的电子跃迁而产生的吸收光谱具有 “带状吸收” 的特点。
紫外可见光谱仪的原理及应用
紫外可见光谱仪的原理及应用1. 紫外可见光谱仪的简介紫外可见光谱仪是一种常见的分析仪器,广泛应用于化学、生物、制药等领域。
它能够测量样品在紫外和可见光波长范围内的吸收和透射特性,从而获得样品的光谱信息。
紫外可见光谱仪基于分子吸收光谱的原理工作,通过测量光的强度来确定样品吸收的程度。
2. 紫外可见光谱仪的工作原理紫外可见光谱仪的工作原理基于分子的电子跃迁。
当光通过样品时,样品中的分子会吸收特定波长的光。
吸收的能量引起电子的跃迁,从低能级跃迁到高能级。
光谱仪通过测量样品吸收后的光强度变化来获得光谱信息。
具体来说,紫外可见光谱仪由以下四个主要组件组成:2.1 光源光源产生特定波长的光,通常使用氘灯或钨灯作为紫外和可见光谱仪的光源。
2.2 光分束器光分束器将来自光源的光分成两束,一束作为参比光经过样品并与样品光进行比较,另一束作为参考光直接进入检测器。
2.3 样品室样品室用于容纳待测样品。
样品可以是固体、液体或气体。
2.4 检测器检测器测量参比光和样品光的强度差异,并将其转换为电信号。
常用的检测器包括光电二极管(photodiode)和光电倍增管(photomultiplier tube)。
3. 紫外可见光谱仪的应用紫外可见光谱仪在许多领域都有广泛的应用。
以下列举了一些典型的应用:3.1 化学分析在化学分析中,紫外可见光谱仪可以用于测定物质的浓度、识别物质、分子结构等。
例如,可以用紫外可见光谱仪来测定水中的溶解氧、测定药物的含量等。
3.2 环境监测紫外可见光谱仪可以用于环境监测,测量大气中的污染物浓度,如臭氧、大气颗粒物等。
3.3 生物科学在生物科学中,紫外可见光谱仪可以用于测量核酸和蛋白质的浓度,研究酶催化反应等。
3.4 药物研发紫外可见光谱仪在药物研发中有着重要的应用。
可以用于药物的纯度分析、稳定性研究等。
3.5 食品安全紫外可见光谱仪可以用于食品安全监测。
可以检测食品中的农药残留、添加剂等有害物质。
紫外吸收光谱的原理和应用
紫外吸收光谱的原理和应用1. 紫外吸收光谱的原理紫外吸收光谱是一种分析方法,利用样品对紫外光的吸收来推测样品的分子结构和浓度。
其原理可以归结为以下几点:•电子跃迁:紫外光谱是通过测量溶液或气体对紫外光吸收的强度来分析样品的。
在这个过程中,分子的电子从基态跃迁到激发态,吸收光能量。
电子跃迁主要会发生在分子中π电子轨道上。
•吸收谱:在紫外光谱中,通常用吸收系数(Absorbance)来表示样品对不同波长光的吸收能力。
吸收系数与吸收的光的强度成正比。
•兰伯特-比尔定律:兰伯特-比尔定律是紫外光谱中的基本定律之一。
它表明了溶液或气体中吸光度与溶液或气体浓度之间的关系。
根据该定律,吸光度与溶液或气体浓度成正比。
2. 紫外吸收光谱的应用2.1. 分子结构分析通过紫外吸收光谱,可以推测样品中分子的结构信息。
根据不同基团和官能团的吸收峰位置和特征,可以得出样品中存在的官能团的类型和位置。
紫外吸收光谱常用于有机物和无机物的结构分析。
2.2. 物质浓度分析紫外吸收光谱还可以用于测定物质的浓度。
当分子在紫外光波长范围内发生吸收时,其吸收强度和物质浓度呈正相关。
利用兰伯特-比尔定律,可以通过测量吸光度来计算样品中物质的浓度。
这种方法广泛应用于药物分析、环境监测和生化分析等领域。
2.3. 生化分析紫外吸收光谱在生化分析中有着广泛的应用。
如在蛋白质分析中,通过测量蛋白质的吸收光谱,可以获得蛋白质的含量和结构特征;在核酸分析中,可以通过测量核酸的吸收光谱,了解其浓度和双链结构等信息。
此外,还可以通过紫外吸收光谱来研究生物分子的相互作用、稳定性和折叠状态等方面的问题。
2.4. 化学反应分析紫外吸收光谱也常用于化学反应分析中。
例如,反应物在反应过程中的浓度变化和生成物的特性变化可以通过紫外吸收光谱得到定量分析,来研究反应动力学、反应速率和反应机理等问题。
3. 紫外吸收光谱的局限性紫外吸收光谱虽然在许多领域有着广泛的应用,但也存在一些局限性:•选择性:紫外吸收光谱对分析物的选择性较差,因为许多物质在紫外波长范围内都会发生吸收。
紫外可见分光光度计原理及操作
处理方法
这些项目的初始化失败需要 通过岛津制作所或其指定代 理商来处理。
关闭光度计和电脑,再次开 始启动过程。观察灯是否亮 ,如果不,则此灯应更换。 碘钨灯可使用2000小时,氘 灯可使用500小时间。 更换后重新启动。
去掉杂物重新初始化。
纠正样品室门,重新初始化 。
.
31
故障修理
2、扫描故障
1)扫描或数据杂乱(不在指定的范围内)
成正比,即
Ak bc
k 为比例系数,与溶液性质、温度和入射波长有关。 当浓度以 g/L 表示时,称 k 为吸光系数,以 a 表示,即
Aabc
当浓度以mol/L表示时,称 k 为摩尔吸光系数,以 表示,即
Abc
比a更常用。越大,表示方法的灵敏度越高。与波长有关,因
此, 常以表示。
.
7
二、紫外-可见分光光度计 结构及类型
紫外 可见
红外
微波 无线电
真空紫外
近红外
核磁共振
波长越短,能量越高
.
4
原理
1)分子吸收光谱的形成过程:
运动的分子外层电子----吸收外来外来辐射----产生电子能级跃迁---分子 吸收谱。
2)由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸 收 光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的 吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或 测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。
.
24
保养
二、工作台要求 1、可承受压力 35Kg+25Kg(PC) 2、最小尺寸 :长:1120mm,宽:710mm,高:520mm
三、电源要求 1、供电电压:100/120/220/230/240V 交流±5% 50/60Hz 2、功率消耗:约190VA 3、保险丝使用:100 - 120V供电,5A ;220 - 240V供电,3.15A 4、安装地点具备可靠的仪器接地端子
紫外可见光谱仪的应用和原理
紫外可见光谱仪的应用和原理引言紫外可见光谱仪是一种常见的分析仪器,广泛应用于化学、生物、医药等领域。
它通过测量样品对紫外可见光的吸收和散射来分析样品的结构、成分和浓度等信息。
本文将介绍紫外可见光谱仪的应用领域和原理。
应用领域紫外可见光谱仪在以下领域有着广泛的应用: - 化学分析:紫外可见光谱仪可以用于定量分析化学物质的浓度,例如研究溶液的物质浓度、反应动力学等。
- 生物领域:紫外可见光谱仪可以用于测定蛋白质、核酸和其他生物分子的含量和结构,如DNA测序、蛋白质定量等。
- 环境监测:紫外可见光谱仪可以测定环境中有害物质的浓度,如水质污染、大气污染等。
- 药物分析:紫外可见光谱仪可以用于药物研究和药物质量控制,如药物的纯度、含量等。
原理紫外可见光谱仪的工作原理基于样品对特定波长的光的吸收现象。
以下是紫外可见光谱仪的原理的详细解释。
1.光源:紫外可见光谱仪通常使用汞灯、氙灯、钨灯等作为光源。
这些光源能够提供一定波长范围内的连续光谱。
2.光路系统:光源发出的光经过反射镜、准直系统和单色器等光学器件进行分光,使得仪器只能通过特定波长的光。
3.样品室:样品室是放置样品的部分,通常使用光学玻璃制成的样品池。
样品池的长度可以根据需要调整,以控制样品吸收光的程度。
4.探测器:紫外可见光谱仪使用光电二极管或光电倍增管作为探测器。
当光通过样品时,探测器会测量样品吸收的光的强度。
5.数据处理:通过计算测量到的吸光度和已知的标准曲线,可以得到样品的浓度等相关信息。
紫外可见光谱仪的工作流程紫外可见光谱仪通常遵循以下步骤进行工作: 1. 设置仪器:选择合适的光源和单色器波长,并调整准直系统。
2. 标定仪器:通过测量已知浓度的标准溶液来建立标准曲线。
3.放置样品:将待测样品放置在样品室中,可以根据需要调整样品池的长度。
4.测量样品:打开光源,通过样品室的样品测量吸光度。
5.数据分析:通过测量得到的吸光度值,使用已建立的标准曲线计算样品的浓度或其他所需信息。
紫外可见光谱仪原理
紫外可见光谱仪原理紫外可见光谱仪利用物质与光的相互作用来研究物质的性质和测定物质的组成。
其原理可以简单概括为:将一束连续的电磁辐射(通常是可见光或紫外光)通过待测物质,衍射或透射后得到一个连续的光谱。
这个光谱包含了波长范围内所有的颜色。
紫外可见光谱仪主要由光源、样品室(或光谱池)、光栅或光波导、光电转换器和检测器等几个重要部分组成。
其工作过程如下:1. 光源:紫外可见光谱仪通常使用不同波长的灯(如氘灯、钨灯等)作为光源。
这些灯发出的连续电磁辐射覆盖了紫外到可见光的波长范围。
2. 样品室:样品室中放置着待测物质,可以是液体或固体样品。
样品室内部设计成光密封,以避免干扰光谱的生成。
3. 光栅或光波导:光栅是一种光学元件,可以将入射光按照不同波长进行衍射,从而形成光谱。
光波导则是一种直接将光导入光电转换器的管道。
4. 光电转换器:光电转换器接收衍射后的光,并将其转换为电信号。
光电转换器通常由光敏元件(如光电二极管)和放大电路组成。
5. 检测器:检测器接收从光电转换器输出的电信号,并将其转换为可见的光谱图形或数值数据。
通过以上步骤,紫外可见光谱仪可以得到样品吸收或透射的光谱图像。
根据光的波长和强度的变化,可以推断样品的化学成分和性质。
例如,从光谱图中可以观察到特定波长处的吸收峰,这些峰对应于样品中特定化学物质的吸收。
从光谱的强度还可以计算出样品的吸收光强度或透射光强度,进而推断样品的浓度或透过率。
总之,紫外可见光谱仪利用光的衍射和吸收特性来研究物质的性质和组成。
通过测量光谱图,可以确定样品中化合物的种类、浓度以及反应的进程等信息。
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紫外可见吸收光谱仪实验原理
分光光度法分析的原理是利用物质对不同波长光的选择吸收现象来进行物质的定性和定量分析,通过对吸收光谱的分析,判断物质的结构及化学组成。
本仪器是根据相对测量原理工作的,即选定某一溶剂(蒸馏水、空气或试样)作为参比溶液,并设定它的透射比(即透过率T)为100%,而被测试样的透射比是相对于该参比溶液而得到的。
透射比(透过率T)的变化和被测物质的浓度有一定函数关系,在一定的范围内,它符合朗伯—比耳定律。
T=I/Io A=KCL=‐㏒I/Io
其中T 透射比(透过率) A 吸光度 C 溶液浓度K 溶液的吸光系数L 液层在光路中的长度
I 光透过被测试样后照射到光电转换器上的强度
Io 光透过参比测试样后照射到光电转换器上的强度
仪器外形、结构
1. 液晶显示器:用于显示测量信息、参数及数据。
2. 键盘:共有八个触摸式按键,用于控制和操作仪器
3. 样品室:用于放置被测样品。
基本操作步骤:
连接仪器电源线,确保仪器供电电源有良好的接地性能。
接通电源,使仪器预热30分钟。
若要实现精确测试或作全性能检查,请再执行一次自动校正功能。
在仪器与电脑非连接状态时,按<方式>键5秒左右,待显示器显示“SELFTESTING FILTER”后松手,至仪器自动校正后,显示器显示“XXX..Xnm 0.000A”即可进行测试。
用<方式>键设置测试方式,透射比(T),吸光度(A)用<设置>键和<∧>键或< ∨>键设置您想要的分析波长。
如没有进行上步操作,仪器将不会变换到您想要的分析波长。
根据分析规程,每当分析波长改变时,必须重新调整0ABS/100%T。
UV-2102C/PC/PCS型紫外可见分光光度计根据这一规程,特别设计了防误操作功能:当波长改变时,显示器第二列会显示“WL=×××.×nm”字样,(设置波长)与第一列左侧显示“×××.×nm”(当前波长)不一致时,提示您下步必须按<确认>键,显示器第一列右侧会显示“BLANKING”,即仪器变换到您所设置的波长及调0ABS/100%T。
根据设置的分析波长,选择正确的光源。
光源的切换位置在340.0nm处。
正常情况下,仪器开机后,钨灯和氘灯同时点亮。
为延长光源灯的使用寿命,仪器特别设置了光源灯开关控制功能,当您的分析波长在340.0nm-1000nm时,应选用钨灯。
将您的参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中,打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。
一般情况下,参比样品放在第一个槽位中。
仪器所附的比色皿,其透射比是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。
比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹,被测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品测试的精度。
将参比样品推(拉)入光路中,按<0ABS/100%T>键调0ABS/100%T。
此时显示器显示的“BLANKING”,直至显示“100.0”%T或“0.000A”为止。
当仪器显示器显示出“100.0%T”或“0.000A”后,将被测样品推(或拉)入光路,这时,您便可以从显示器上得到被测样品的测试参数。
根据您设置的方式,可得到样品的透射比或吸光度参数。