高中生物 稀释涂布平板法课件 苏教版选修1
合集下载
苏教版高中生物选修一 边做边学 大肠杆菌的接种与分离培养 (共20张PPT)
用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可 开始倒平板。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养 基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使 培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖 上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？
3．尝试说说天然培养基和合成培养基的优缺点？ 二者共有 水 、 碳源 、 氮源 、无机盐 四类
营养成分。此外需要根据拟培养的微生物的不同需 要，有时要加入 维生素 等特殊营养物质，并调 节 PH 。
【开拓视野】有机营养成分及其作用
（1）碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等含碳有机物， 构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 （2）氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋 白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢 物等。 （3）生长因子：某些微生物正常生长代谢中必 须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨 基酸、碱基、维生素等。 （4）琼脂：是从红藻中提取的多糖，在配制培 养基中用作为凝固剂。 其中，含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源， 又可以作为氮源，如氨基酸等。
划线结束后仍然要灼烧接种环，能及时杀死接种环上 残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行 划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是 从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少， 每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着 划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌 繁殖而来的菌落。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养 基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使 培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖 上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？
3．尝试说说天然培养基和合成培养基的优缺点？ 二者共有 水 、 碳源 、 氮源 、无机盐 四类
营养成分。此外需要根据拟培养的微生物的不同需 要，有时要加入 维生素 等特殊营养物质，并调 节 PH 。
【开拓视野】有机营养成分及其作用
（1）碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等含碳有机物， 构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 （2）氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋 白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢 物等。 （3）生长因子：某些微生物正常生长代谢中必 须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨 基酸、碱基、维生素等。 （4）琼脂：是从红藻中提取的多糖，在配制培 养基中用作为凝固剂。 其中，含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源， 又可以作为氮源，如氨基酸等。
划线结束后仍然要灼烧接种环，能及时杀死接种环上 残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行 划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是 从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少， 每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着 划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌 繁殖而来的菌落。
2016_2017学年高中生物第1章无菌操作技术实践第1节微生物的分离和培养课件苏教版选修-文档资料
3.培养基类型的划分
选择培 养基
用 途
鉴别培 养基
培养基中加入某种化 学物质，以抑制不需 要的微生物的生长， 促进所需要的微生物 的生长
培养、分离出特定微生物(如 培养酵母菌和霉菌，可在培养 基中加入青霉素；培养金黄色 葡萄球菌，可在培养基中加入 高浓度食盐)
鉴别不同种类的微生物，如可 根据微生物的代谢特 用伊红—美蓝培养基鉴别饮用 点，在培养基中加入 水或乳制品中是否有大肠杆菌 某种指示剂或化学药 (若有，菌落呈现黑色，并带 品 有金属光泽)
1．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处 理方法，这些方法可分别用于杀灭哪些部位的杂菌( ) 【导学号：67850004】 A．接种针、手、培养基 C．培养基、手、接种针 B．高压锅、手、接种针 D．接种针、手、高压锅
【解析】 培养基通常用高压蒸汽灭菌，常用酒精擦拭对手进行消毒，接种 环、接种针等用火焰灼烧的方法进行灭菌。
【解析】
题表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营
养物质。若该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即 可判断培养的微生物是自养型微生物。若该培养基中加入了过量食盐，就可以培 养耐盐的金黄色葡萄球菌，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基还需 要加入有机碳源。该培养基若加入(CH2O)，培养基中就有了碳源，但除去成分 ②，却使培养基中没有了氮源，这时就只能用于培养固氮微生物了。微生物生长 需要一定的pH，所以培养基装瓶前需要调节pH。培养基中各成分含量要根据微 生物的生长需要来确定。对于菌种鉴定，往往用的是固体培养基，而表中没有凝 固剂，故需要加入常见的凝固剂——琼脂。
2．下图显示微生物的接种实验中的一些步骤，回答问题：
2020—2021学年高中生物选修一复习课件：专题二 微生物培养与应用 高中生物精品公开课
4.平板划线时不能划破培养基，为什么？ 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿 着划破处生长，会形成一个条状的菌落。
思 考:
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与 系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
答：应从操作的各个环节保证“无菌”。 1.酒精灯与培养皿的距离要合适； 2.吸管头不要接触任何其他物体； 3.要在火焰周围迅速操作。
将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到 370C的恒温箱中，培养12～24h后进行观察并记录结果。
二、纯化大肠杆菌——稀释涂布平板法
a.梯度稀释菌液：1ml Biblioteka ml 1ml 1ml 1ml 1ml
重复以上操作，在三、四、五区域内划 线。注意不要将最后一区的划线与第一 区相连。
左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，
划___3__至__5___条平行线，盖上皿盖。
注意不要划破培养基。
将入培平养板箱_倒_中_置_培_放
养。
将已_冷___却__的接种环伸
.
入菌液中蘸取一环菌液
微量移液器
101
102
103
104
105
106
菌液
注意：
6支试管，分别加入9ml无菌水
1.移液管需要经过灭菌
2.操作时，试管口和移液管应在离火焰1-2CM处
二、纯化大肠杆菌——稀释涂布平板法
b.涂布平板：
1、从酒精中取出涂布器时，要让其上多余的酒精滴 尽，然后 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃
2、所有操作都应在火焰附近进行
较为温和理化方法， 强烈的理化方法，
思 考:
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与 系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
答：应从操作的各个环节保证“无菌”。 1.酒精灯与培养皿的距离要合适； 2.吸管头不要接触任何其他物体； 3.要在火焰周围迅速操作。
将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到 370C的恒温箱中，培养12～24h后进行观察并记录结果。
二、纯化大肠杆菌——稀释涂布平板法
a.梯度稀释菌液：1ml Biblioteka ml 1ml 1ml 1ml 1ml
重复以上操作，在三、四、五区域内划 线。注意不要将最后一区的划线与第一 区相连。
左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，
划___3__至__5___条平行线，盖上皿盖。
注意不要划破培养基。
将入培平养板箱_倒_中_置_培_放
养。
将已_冷___却__的接种环伸
.
入菌液中蘸取一环菌液
微量移液器
101
102
103
104
105
106
菌液
注意：
6支试管，分别加入9ml无菌水
1.移液管需要经过灭菌
2.操作时，试管口和移液管应在离火焰1-2CM处
二、纯化大肠杆菌——稀释涂布平板法
b.涂布平板：
1、从酒精中取出涂布器时，要让其上多余的酒精滴 尽，然后 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃
2、所有操作都应在火焰附近进行
较为温和理化方法， 强烈的理化方法，
高中生物苏教版高二选修1课件：第一章_第一节_微生物的分离和培养
一分耕耘一分收获
2．培养基的成分
营养物质 作用
功能
主要来源
碳源
能为微生物 代谢提供碳 元素
构成生物体的细 胞物质和一些代 谢产物，有些是 异养生物的能源 物质
无机碳源：CO2、 NaHCO3等；有机碳 源：糖类、脂肪酸、
花生粉饼、石油等
氮源
能为微生物 的代谢提供 氮元素
合成蛋白质、核 酸以及含氮的代 谢产物
(5)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底 之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的 微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
(6)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。
一分耕耘一分收获
2．几种常用的划线方法及注意事项 (1)划线方法：
一分耕耘一分收获
(2)交叉划线中的注意事项： 从操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰 灼烧灭菌，划线操作结束后，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的见
一分耕耘一分收获
(3)倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大 于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基。
(4)平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会 凝结水珠，培养基表面的温度也较高，平板倒置后，既可使培养 基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基， 造成污染。
一分耕耘一分收获
3．平板划线分离和培养大肠杆菌 (1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作： ①在酒精灯火焰旁一只手拿着装有培养基 的锥形瓶，另一只手 拔出瓶塞，使瓶口迅速通过 火焰 2～3次，并转动瓶口，确保瓶口被 灭菌。 ②再取无菌培养皿 ，在火焰 旁用拇指和食指将培养皿打开一条 稍大于锥形瓶瓶口的缝隙，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿中。 ③等平板 冷却凝固 后，将平板倒置备用。
2．培养基的成分
营养物质 作用
功能
主要来源
碳源
能为微生物 代谢提供碳 元素
构成生物体的细 胞物质和一些代 谢产物，有些是 异养生物的能源 物质
无机碳源：CO2、 NaHCO3等；有机碳 源：糖类、脂肪酸、
花生粉饼、石油等
氮源
能为微生物 的代谢提供 氮元素
合成蛋白质、核 酸以及含氮的代 谢产物
(5)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底 之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的 微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
(6)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。
一分耕耘一分收获
2．几种常用的划线方法及注意事项 (1)划线方法：
一分耕耘一分收获
(2)交叉划线中的注意事项： 从操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰 灼烧灭菌，划线操作结束后，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的见
一分耕耘一分收获
(3)倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大 于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基。
(4)平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会 凝结水珠，培养基表面的温度也较高，平板倒置后，既可使培养 基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基， 造成污染。
一分耕耘一分收获
3．平板划线分离和培养大肠杆菌 (1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作： ①在酒精灯火焰旁一只手拿着装有培养基 的锥形瓶，另一只手 拔出瓶塞，使瓶口迅速通过 火焰 2～3次，并转动瓶口，确保瓶口被 灭菌。 ②再取无菌培养皿 ，在火焰 旁用拇指和食指将培养皿打开一条 稍大于锥形瓶瓶口的缝隙，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿中。 ③等平板 冷却凝固 后，将平板倒置备用。
苏教版高中生物选修一 1.1微生物的培养和应用 (1)(共15张PPT)
营养要素
来源
功能
碳源
无机碳源 CO2、NaHCO3等无机碳源
有机碳源
糖有类机、石油、花生粉饼等
__________碳源
能为微生物的代谢提供碳元素 的物质
无机氮源 N2、NH3、NO3-、NH4+等
氮源
牛肉膏 蛋白胨
有机氮源
维蛋白生质素、氨基酸、碱尿基素、
________、________等
能为微生物的代谢提供氮元素 的物质
2．培养基分类和应用
划分标准 培养基种类
特点
用途
液体培养基 不加凝固剂
物理
琼脂
性质 半固体培养基 加凝固剂，如__________
固体培养基
工业生产
观察微生物的运 动、分类、鉴定
微生活物分菌离计、数鉴
定、________
化学 成分
天然培养基 合成培养基
用途
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
管号 苯酚浓度(mg/L)
1
2
3
4
5
6
1
一轮复习之专题：
考纲要求：1.微生物的分离与培养（B）
考查内容：1.培养基的制备 2.微生物的接种技术 3.微生物的分离
考查形式：多结合微生物代谢的 特点,考查微生物的分离 与培养的相关内容
活动一：培养基
1.培养基的营养要素：碳源、氮源、无机盐、水、生长因子等。
（4）分离培养酵母菌通常使用_麦___芽__汁__琼_ 脂（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或 “程麦中无无芽需汁保琼证脂充”）足培的养营基养，和步氧骤__⑤气_中__，_为__使_酵供母应数。量迅速增加，培养过
中，对环境有严
苏教版高中生物选修一 微生物的实验室培养(共29张PPT)
如草履虫、单细胞藻类等
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又
可答以：防 通高止过压皿灼盖烧蒸上灭的菌汽水，灭珠防落止菌入瓶培口锅养的基微的，生使造物成污用污染染培步。养骤基。：
依Na配cl方1计、算5g各加成分水的：用量使用前加人适量的水
请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭 f、试管口和接种环过火灭菌
f、试管口和接种环过火灭菌
菌。如果需要，请选择合适的方法。 你用什么办法来估计培养基的温度？
分离
鉴定
吸管头不要接触任何其他物体、
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 70~75℃、30min
稀释涂布法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
6.搁置斜面或倒平板：
温度冷却至50℃左右将试管枕在1cm的木条上，斜面长度不超 过试管总长的1/2
约50℃
倒平板
灼烧灭菌，
防止瓶口的微生物污染培养基
防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才 能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。
盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生 物吗？为什么？
答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的
培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微
生物。
二.斜面接种和培养大肠杆菌：
1、斜面接种大肠杆菌的目的： 菌种转移、扩大培养、保存纯净菌种等
2、步骤： a、点燃酒精灯
b、灭菌接种环
苏教版高中生物选修一 1.1微生物的培养和应用 (共51张PPT)
根据细胞生存所需物质的 种类和数量，用人工方法模 拟合成的。
合成培养基主要成分是 氨基酸、维生素、碳水化合 物、无机盐和其它一些辅助 物质。
优点：标准化生产，组分 和含量相对固定;成本低
缺点： 缺少某些成分，不 能完全满足体外细胞生长需 要。
天然培养基：
天然培养基有血清、 血浆、和组织提取液 （如鸡胚和牛胚浸 液）。 优点：营养成分丰富， 培养效果好 缺点：来源受限;成分 复杂，影响对某些实 验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支 原体污染;
操作步骤
1．计算 2．称量 3．溶化 4．灭菌 5．倒平板
倒平板技术
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
菌落
单个或少数 细菌在固体 培养基上大 量繁殖时， 就会形成一 个肉眼可见 的，具有一 定形态结构 的子细胞群 体。
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素， 其中2/3是由放线菌产生的
碳源:
凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质 来源：周围环境中的有机物质，常用的有糖类等
氮源：凡能为微生物提供所必需氮元素的营养物质
来源：周围环境中得有机无机含氮物质 作用:主要用于合成蛋白质，核酸以及含氮的代谢产物
能源:
能为微生物生命活动提供最初能源来源的营养物质 或辐射能
生长因子：微生物生长不可缺少的微量有机物
合成培养基主要成分是 氨基酸、维生素、碳水化合 物、无机盐和其它一些辅助 物质。
优点：标准化生产，组分 和含量相对固定;成本低
缺点： 缺少某些成分，不 能完全满足体外细胞生长需 要。
天然培养基：
天然培养基有血清、 血浆、和组织提取液 （如鸡胚和牛胚浸 液）。 优点：营养成分丰富， 培养效果好 缺点：来源受限;成分 复杂，影响对某些实 验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支 原体污染;
操作步骤
1．计算 2．称量 3．溶化 4．灭菌 5．倒平板
倒平板技术
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶， 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
菌落
单个或少数 细菌在固体 培养基上大 量繁殖时， 就会形成一 个肉眼可见 的，具有一 定形态结构 的子细胞群 体。
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素， 其中2/3是由放线菌产生的
碳源:
凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质 来源：周围环境中的有机物质，常用的有糖类等
氮源：凡能为微生物提供所必需氮元素的营养物质
来源：周围环境中得有机无机含氮物质 作用:主要用于合成蛋白质，核酸以及含氮的代谢产物
能源:
能为微生物生命活动提供最初能源来源的营养物质 或辐射能
生长因子：微生物生长不可缺少的微量有机物
(教师用书)高中生物 第1章 第2节 分离特定的微生物并测定其数量同步备课课件 苏教版选修1
2．如果要分离厌氧菌，应在什么条件下培养？ 【提示】 在无氧条件下培养。
观察各种微生物形成的菌落
1.菌落的概念 单个微生物在适宜的 固体 培养基表面或内部生长、繁 殖到一定程度，形成 肉眼 可见的、有一定形态结构的子细 胞生长群体。 2．菌落的特征 不同微生物在 特定 培养基上生长形成的菌落一般都具 有
菌落 。
琼脂固体 培养基。 涂抹平板 法
3．实验室中最常用的两种平板分离法是 和
混合平板
法。
1 ．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细 菌吗？
【提示】
标准的单个菌落中只含有一种细菌。
选择培养分离
1.原理 (Βιβλιοθήκη )不同的微生物有特殊的 营养 需求或对某种化学物质 有不同的
敏感性
。
(2)针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之 特别 适合 这种微生物的生长，而 抑制 其他微生物的生长。 2．目的 采用选择培养分离的方法，经过一定时间的培养后，使 这种微生物在群落中的 数量 不断增加，再通过 平板稀释法 等进行纯培养分离。
第二节
分离特定的微生物并测定其数量
教师用书独具演示
●课标要求
1 ．结合涂抹平板法或混合平板法分离细菌的知识掌
握涂抹平板法或混合平板法操作技术。 2 ．结合选择培养分离的实验，掌握选择培养基的选 择作用。
●课标解读 1．掌握涂抹平板法或混合平板法。
2．掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。
3．观察各种微生物形成的菌落。 ●教学地位 本节内容涉及了涂抹平板法或混合平板法分离细菌、 选择培养分离、观察各种微生物形成的菌落，仅以尿素为 氮源的土壤微生物的分离、培养与数量测定、分离土壤中 能分解纤维素的微生物等内容，属于微生物利用的一些基
高中生物 稀释涂布平板法 苏教版选修1
稀释涂布法纯化大肠杆菌
精品课件
稀释涂布平板法
1、概念 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液 分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。当稀释倍数 足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作
涂布平板操作
精品课件
系列稀释操作
菌液
1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按 101~106的顺序编号。精品课件
系列稀释操作
菌液
2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用
手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分
混匀。
精品课件
系列稀释操作
菌液
3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释
的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后
一支试管的稀释。
精品课件
系列稀释操作
注意： 移液管需要经过灭菌。操作
时，试管口和移液管离火焰1~2cm 处.
精品课件
涂布平板操作
涂布器
注意： ①酒精浓度为70%。
1.将涂布器浸在盛有酒精 的烧杯中。
精品课件
涂布平板操作
3.将沾有少量酒精的涂布 器在火焰上引燃，待酒精 燃尽后，冷却8~10s
精品课件
涂布平板操作
4.用涂布器将菌液均匀地涂布 在培养基表面。涂布时可以转 动培养皿，使菌液分布均匀。
精品课件
涂
104
105
稀 释 106
精品课件
结果与评价
1：培养未接种培养基的作用是什么？若有菌落形成，说
明什么？
对照
培养基灭菌不彻底
2：在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？ 呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐
精品课件
稀释涂布平板法
1、概念 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液 分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。当稀释倍数 足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作
涂布平板操作
精品课件
系列稀释操作
菌液
1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按 101~106的顺序编号。精品课件
系列稀释操作
菌液
2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用
手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分
混匀。
精品课件
系列稀释操作
菌液
3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释
的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后
一支试管的稀释。
精品课件
系列稀释操作
注意： 移液管需要经过灭菌。操作
时，试管口和移液管离火焰1~2cm 处.
精品课件
涂布平板操作
涂布器
注意： ①酒精浓度为70%。
1.将涂布器浸在盛有酒精 的烧杯中。
精品课件
涂布平板操作
3.将沾有少量酒精的涂布 器在火焰上引燃，待酒精 燃尽后，冷却8~10s
精品课件
涂布平板操作
4.用涂布器将菌液均匀地涂布 在培养基表面。涂布时可以转 动培养皿，使菌液分布均匀。
精品课件
涂
104
105
稀 释 106
精品课件
结果与评价
1：培养未接种培养基的作用是什么？若有菌落形成，说
明什么？
对照
培养基灭菌不彻底
2：在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？ 呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐
2019_2020学年高二苏教版生物选修一课件：章末整合提升：第一章 无菌操作技术实践
第一章 无菌操作技术实践章末整合提升内容索引知识系统构建规律方法整合热点考题集训知识系统构建基础鉴别固体液体调节pH 灭菌必背要语1.细菌培养基的配制过程：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。
2.消毒和灭菌的实质不同：前者只杀死绝大多数微生物，后者则杀死所有的微生物。
3.微生物的接种方法有穿刺接种、斜面接种、涂布平板接种和平板划线接种。
4.用涂布平板法形成的细菌菌落通常仅在平板表面生长，而混合平板法形成的细菌菌落出现在平板表面及内部。
5.微生物分离的原理是提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长。
方法是使用选择培养基。
6.统计菌落数目的方法可分为活菌计数法和显微镜直接计数法。
前者的原理是涂布平板法接种，一个菌落代表一个单细胞；后者的原理是利用血球计数板，在显微镜下计数。
8.生长素、细胞分裂素是启动生长、细胞分裂、脱分化、再分化的关键激素。
进行组织培养时要配备三种培养基，分别是愈伤组织形成培养基、诱导生根培养基和诱导生芽培养基。
9.天竺葵的组织培养过程：准备(器具准备、试剂准备)→配制培养基→灭菌→取材与接种→观察与记录→转接培养。
规律方法整合整合一 微生物的纯培养技术与无菌操作技术1.微生物的纯培养技术(1)自然环境中的微生物是混杂在一起的，因此分离获得纯培养物的基本原理：首先采用一定方法将单个的细胞与其他细胞分离开，进而提供细胞合适的营养和条件，使其生长成为可见的群体。
(2)微生物的分散主要采用稀释的方法，而固体培养基能够使分散的细胞固着于一定的位置，与其他的细胞分离，从而生长成为一个单细胞来源的群体即纯培养物。
①平板划线法：将合适的无菌培养基倒入无菌培养皿中，冷却后制备成平板。
平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中，产生的单个细胞在培养基表面生长的后代就是纯培养物。
②涂布平板法：该法用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，最常用的液体稀释方法为10倍系列稀释，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。
高中生物苏教版选修1课件：第一章 第三节 植物组织培养技术
养基
%
乙培
0.02
0.02% 0.02%
0.01% 0.5% — —
养基
%
A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异 养型自生固氮菌
B．甲培养基适于分离异养型自生固适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌 D．甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养
解析：(1)选择能降解苯酚的微生物，需要在培养基中加入苯酚作 为唯一碳源，可用涂布平板法来测定②中活菌数目。(2)④为对照 组，微生物不生长，因此④中没有加入苯酚作为碳源，而⑤中微 生物可以生长，说明其中加入苯酚作为碳源。要在⑥上获得单菌 落，常用的方法有平板划线法和涂布平板法。为避免培养皿盖上 凝结的水珠落在培养基上造成污染，所以平板要倒置。(3)用不同 的微生物分解同浓度的苯酚溶液，处理相同时间后测量培养液中 的苯酚含量，可以比较不同菌株降解苯酚的能力。
表1 培养基的组成
液体培 蛋白 牛肉 养基 胨 膏
氯苯
氯化 硝酸 无机盐 蒸馏 钠 铵 (无碳) 水
Ⅰ号 10 g 5 g
5 mg
5g －
－
1L
Ⅱ号 － － 50 mg 5 g 3 g 适量 1 L
Ⅲ号 － － 20～80 mg 5 g 3 g 适量 1 L
(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应 添加适量的_______。 (2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_______________。 (3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________培 养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的 成分是________________________________________________。
(教师用书)高中生物 第1章 第1节 微生物的分离和培养同步备课课件 苏教版选修1
玻璃刮铲 。
大肠杆菌的接种与分离培养
1.牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤 ①配制 培养液 ；②调节 pH 至 7.2 ；③分装：培养基 的高度约为试管长度的 1/5 ；④包扎；⑤灭菌：高压蒸汽灭 菌是常用的 灭菌 方法；⑥搁置斜面：待试管冷却至 50 ℃ 左右，斜面长度不超过试管总长的 1/2 。
3．牛肉膏蛋白胨能培养病毒吗？为什么？ 【提示】 活。 不能，因为病毒只能进行活细胞寄生生
【精讲精析】 选项 A B C D 分析判断 操作顺序为配制培养液―→调节pH―→分 装―→包扎―→灭菌―→搁置斜面 固体培养基在配制时需添加琼脂作凝固剂 待试管冷却至50 ℃左右，将试管口部枕在 高约1 cm的木条上，使其自然倾斜 根据实际情况用质量分数为3%的HCl或 NaOH溶液调节培养基的pH
第一节
微生物的分离和培养
教师用书独具演示
●课标要求 1．结合灭菌知识理解无菌操作技能。 2．结合配制培养基的知识，理解微生物培养基的配制方 法。
●课标解读 1．学会微生物的分离与培养。 2．掌握无菌操作技能。 ●教学地位 本节内容介绍了实验室常采用的灭菌方法，配制培养
基的方法，接种微生物的方法以及微生物的分离培养技
2．斜面接种和培养大肠杆菌 (1)斜面接种的主要目的 有 菌种 转移、 扩大 培养、保存 纯净菌种 (2)具体操作步骤 准备接种―→ 接种环 灭菌―→ 试管口 灭菌―→挑取少 许菌体―→ 划线接种 ―→培养大肠杆菌―→低温保存。 等。
4．通常在酒精灯火焰附近接种微生物的原因是什么？
【提示】 存活。 酒精灯火焰附近的局部高温使得微生物不能
不仅是优良的溶剂，而 且可维持生物大 分子结构的稳定 细胞内的组成成分，生 理调节物质；某 些化能自养菌的能源， 酶的激活剂
平板划线分离法和稀释涂布法优缺点
平板划线分离法和稀释涂布法优缺点学⽣问题：选修1《微⽣物的应⽤》教学中，什么时候⽤平板划线分离法？什么时候⽤稀释涂布法？
1．平板划线分离法
把混杂在⼀起的微⽣物或同⼀微⽣物群体中的不同细胞⽤接种环在平板培养基，通过分区划线稀释⽽得到较多独⽴分布的单个细胞，经培养后⽣长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微⽣物的纯种。
优点：可以观察菌落特征，对混合菌进⾏分离。
缺点：不能计数，⼀般⽤于从菌种的分离纯化。
例如：筛选⼤肠杆菌菌种。
2．稀释涂布平板法
将菌液进⾏⼀系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表⾯，进⾏培养。
在稀释度⾜够⾼的菌液⾥，聚集在⼀起的微⽣物将被分散成单个细胞，从⽽能在培养基表⾯形成单个的菌落。
优点：可以计数，可以观察菌落特征。
缺点：吸收量较少，较⿇烦，平板不⼲燥效果不好，容易蔓延。
⼀般⽤于平板培养基的回收率计数。
例如：测定纯净⽔中⼤肠杆菌的含量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
ppt精选
8
涂布平板操作
4.用涂布器将菌液均匀地涂布 在培养基表面。涂布时可以转 动培养皿，使菌液分布均匀。
ppt精选
9
涂布平板操作
稀
稀
释
释
104
105
ppt精选
稀 释 Байду номын сангаас06
10
结果与评价
1：培养未接种培养基的作用是什么？若有菌落形成，说
明什么？
对照
培养基灭菌不彻底
2：在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？ 呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐
稀释涂布法纯化大肠杆菌
ppt精选
1
稀释涂布平板法
1、概念 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液 分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。当稀释倍数 足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作
涂布平板操作
ppt精选
2
系列稀释操作
菌液
1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按
3：培养12h和24h后的菌落大小？菌落分布位置？原因？ 大小不同，位置相同
时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落
的位置不动，但菌落数增多。
ppt精选
11
感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络， 如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！
一支试管的稀释。
ppt精选
5
系列稀释操作
注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，
试管口和移液管离火焰1~2cm处.
ppt精选
6
涂布平板操作
涂布器
注意： ①酒精浓度为70%。
1.将涂布器浸在盛有酒精 的烧杯中。
ppt精选
7
涂布平板操作
3.将沾有少量酒精的涂布 器在火焰上引燃，待酒精 燃尽后，冷却8~10s
101~106的顺序编号。ppt精选
3
系列稀释操作
菌液
2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用
手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分
混匀。
ppt精选
4
系列稀释操作
菌液
3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释
的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后