肝癌细胞免疫治疗进展_杨帆

［Key words］ Hepatocellular carcinoma； Cellular immunotherapy； Progress
原 发 性 肝 细 胞 癌 （ 肝 癌，hepatocellular cell carcinoma，HCC） 是我国常见的恶性肿瘤之一，目前 主要治疗方 法 有 手 术 治 疗、放 疗、化 疗 及 综 合 治 疗 等。由于肝癌起病隐匿，缺乏有效的早期诊断方法， 确诊时已达晚期或发生远处转移，即使是手术切除 后也容易复发，缺乏有效的治疗药物和手段，总的治 疗效果并不理想。生物治疗作为继手术、放疗、化疗 后肿瘤治疗的第四种模式，已显示出了良好的应用
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Surgical Ｒesearch and New Technique Vol． 2No． 4 Dec． ，2013
第二种方法为嵌合抗原受体 （ chimeric antigen receptor，CAＲ） 修饰 TCＲ，将 T 细胞表面 TCＲ 改造 为 CAＲ。CAＲ 技术的基本原理是通过基因工程技 术将识别肿瘤相关抗原（ TAA ） 的单链抗体（ scFv ） 和 T 细胞的活化序列在体外进行基因重组，形成重 组质粒，在体外通过转染技术，转染经纯化与大规模 扩增后的 T 细胞，称之为 CAＲ-T 细胞，使淋巴细胞 能通过非 M HC 限制性的方式识别特定抗原，增强 其识别和杀伤肿瘤的能力。CAＲ 的基本骨架包括 胞外区、跨膜区和胞内区 3 部分，胞外区主要是单克 隆抗体的单链可变区序列（ scFv ） ，抑或激素的信号 肽细胞因子膜受体的胞外区等； 胞内区为信号转导 部分，主要是 T 细胞受体（ TCＲ） / CD3 的链免疫球 蛋白 Fc 受体 Fc Ｒ I 的链或 CD3-链； 而跨膜区可来 源于同一分子或为 1 型跨膜蛋白，如 CD4，CD8 或 CD28［15］。随着技术的不断改进，CAＲ 现已有三代， 第一代 CAＲ 并不能延长 T 细胞的生存时间； 第二 代 CAＲ 增 加 了 共 刺 激 信 号 如 CD28、CD137 （ 41BB） 、CD134（ OX40） 、ICOS 等，以刺激 T 细胞的增 殖，体内外实验表明第二代 CAＲ- T 细胞的功能较 第一代明显增强； 第三代 CAＲ 整合了 2 个以上的 共刺激分子以期望能进一步增强 T 细 胞 的 活 化［16，17］为了研究表达有乙肝病毒（ hepatitis B virus， HBV） 特异性受体的 T 细胞能否直接杀伤 HBV 病 毒，将 CD8 + T 细胞表面 TCＲ 改造成连有 HBV 膜 蛋白嵌合抗原受体，并将改造后的 CD8 + 细胞回输 HBV 感染小鼠，发现能够很好地抑制 HBV 的复制， 同时对于小鼠肝脏的损伤小，这种 CAＲ 改造的 T 细胞能够不仅仅能有效清除 HBV，同时有助于防止 肝癌的进展。
2． Key Laboratory of Clinical ＆ Translational Ｒesearch on Biotherapy for Liver Disease of Guangdong Higher Education； 3． Department of Hepatic Surgery，The 3rd Affiliated Hospital of
提高 TIL 杀伤功能的方法主要通过对 T 细胞 进行改造，具体方法有如下两种。第一种方法是利 用转基因技术对 T 细胞进行改造，克隆抗原特异性 TCＲ 基因，通过病毒转染使其在 T 细胞表面高表 达，改变抗原特异性 T 细胞受体的 α 及 β 链，可有 效提高 其 识 别 和 杀 伤 肿 瘤 细 胞 的 能 力。 Gehring 等［13］为了研究是否 TCＲ 基因的改变能够重新建立 慢性 HBV 患者的特异性的 T 细胞免疫，同时探讨 HBV-DNA 整合的 HCC 细胞能否被基因改造的 T 细胞识别。应用载体介导的，HBV 特异性的 TCＲ 插入到 T 细胞表面，研究结果表明经过改造的 T 细 胞能够靶向杀伤 HBV 相关性 HCC。由于利用病毒 载体来插入外源性的 HBV 特异性的 TCＲ 到 T 细胞 在临床试验中比较复杂且昂贵，同时对于 HBV 持 续感染的患者有插入突变及潜在毒性的风险。Koh 等［14］研 发 出 一 种 更 加 安 全 实 用 的 方 法 来 治 疗 HCC，他 们 利 用 电 转 染 编 码 抗 HBV 的 TCＲ 的 mＲNA，24 h 后，80% 的 CD8 + T 细胞表达出 HBV 的 TCＲ，表达 的 效 率 明 显 高 于 通 过 逆 转 录 病 毒 转 导 （ 18% ） 。在 HCC 异种移植物模型中，TCＲ 电转的 T 细胞有效的防止肿瘤的增殖及抑制肿瘤的生长。
疗和进展作一综述
［关键词］ 肝癌； 细胞免疫治疗； 进展
［中图分类号］ Ｒ735． 7
［文献标识码］ A
［文章编号］2095-378x（ 2013） 04-0262-05
Cellular immunotherapy of hepatocellar carcinoma
YANG Fan1，，ZHANG Qi1，2 ，CHEN Gui-hua2，3 1． Department of Biotherapy Center，Lingnan Hospital，The 3rd Affiliated Hospital of Sun Yat-sen Univesity；
3． 中山大学附属第三医院肝脏外科，广州 510630
［摘 要］ 肝癌的治疗目前采用手术为主的综合治疗，但是由于原发性肝癌起病隐匿，多数患者在临床诊断时
已失去了手术治疗的机会，即使是手术切除后也容易复发，缺乏有效的治疗药物和手段，总的治疗效果并不理想。
生物治疗作为继手术、放疗、化疗后肿瘤治疗的第四种模式，已显示了良好的应用前景。该文就肝癌的细胞免疫治
项 目 基 金： 国 家 十 二 五 科 技 重 大 专 项 课 题 资 助 项 目 （ 2012ZX10002016 － 023） ； 国家自然科学基金资助项 目（ 81372243）
作者简介： 杨帆（ 1982 － ） ，男，主要研究肿瘤生物治疗。
前景。目前生物治疗主要包括肿瘤非特异性小分子 化合物免疫治疗、过继免疫治疗、肿瘤疫苗治疗、肿 瘤单克隆抗体的免疫治疗、分子靶向治疗和基因治 疗等［2］。细胞免疫治疗是指根据免疫学原理，利用 细胞治疗肝癌，它是生物治疗的重要组成部分，受到 越来越多的关注。细胞免疫治疗按其作用机制又分 为 两类： （ 1） 给患者回输经过体外激活和扩增至一 定数量后具有内在抗肿瘤活性的自体免疫细胞，在 体内发挥杀伤肿瘤，ACT 的治疗方法属于被动细胞 免疫治疗； （ 2） 给患者回输能在体内激发患者的特 异性抗肿瘤免疫反应的细胞如回输树突状细胞的树 突状细胞，属于主动细胞免疫治疗。本文就肝癌常 用的细胞免疫治疗研究现状和进展作一概述。
血 T 淋 巴 细 胞 的 亚 型，发 现 CD3 + 、CD4 + 、CD4 + CD8 + 及 CD3 + CD4 + T 细胞均高于未进行 CIK 细 胞治疗组。
2 肿 瘤 浸 润 淋 巴 细 胞 （ tumor infiltrating lymphocyte，TIL）
1986 年 Ｒosenberg 等［9］描述了一类从肿瘤组织 中分离出来的具有杀肿瘤细胞特性的淋巴细胞，为 CD3 + CD56 － CD8 + 的免疫表型，具有抗癌活性的 T 淋 巴细胞，并命名为肿瘤浸润淋巴细胞。TIL 细胞是 从手术切下肿瘤组织、肿瘤引流淋巴结、癌性胸腹水 中获得淋巴 细 胞，经 加 IL-2 培 养 后，具 有 高 效、特 异、副作用小等优点，对肿瘤细胞的杀伤有 M HC 限 制 性，杀 伤 活 性 较 淋 巴 因 子 激 活 的 杀 伤 细 胞 （ lymphokine-activated killer cells，LAK 细胞） 强［10］。 国内外学者一系列研究表明 HCC 患者 TIL 浸润的 预后明显优于没有明显 TIL 浸润［11］。HCC 术后易 于复发，为了探讨术后的 TIL 免疫治疗是否降低癌 症的复发，Takayama T 等［12］通过对 150 名手术切 除 HCC 患者进行过继免疫治疗，研究结果表明免疫 治疗明显延长患者的生存期，同时减少 HCC 复发。
Sun Yat-sen Univesity，Tianhe Ｒoad 600，Guangzhou 510630，China
［Abstract］At present，surgery-based comprehensive therapy plays a dominant role in the treatment of hepatocellular carcinma （ HCC） ． How ever，the majority of patients had no opportunity to undergo surgical treatment w hen diagnosis w as confirmed． Furthermore，there is a high risk of tumor recurrence for patients w ith HCC even after surgical resection． The overall curative effect of HCC is far from satisfaction． Cancer biotherapy has now truly matured into the fourth modality of cancer treatmnet and proved to be useful in conjunction w ith surgery，chemotherapy and radiotherapy． The purpose of this article is to review the current status and progress of cellular immunotherapy for HCC