生理实验十三离体小肠平滑肌的生理特性

实验十三离体小肠平滑肌的生理特性

一、实验目的

1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。

2、观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。

3、加深对消化道平滑肌生理特性的理解。

二、实验原理

消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管以及输精管等均由平滑肌组成。哺乳动物消化管平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特点对维持消化管内一定压力、保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化具有生理意义。这些特点在整体内受中枢神经系统和体液因素的调节。

家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。其作用是：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。

下面是各类药品对小肠受体的分别作用：

1、乙酰胆碱（Ach）：M受体激活剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收

缩幅度增加，蠕动加强。

2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无

作用，可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降

低。

3、肾上腺素(Ad)：α、β受体激活剂，可激活α、β受体（主要是β

2受体），α、β受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠

管舒张，小肠蠕动减弱。

4、氯化钡（Bacl

2

）：Ba2+ 进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩。Ba2+

可使细胞膜发生去极化。所以加入Bacl

2肠管会发生强直性收缩，Bacl

2

并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。

5、盐酸（HCl）：加酸可使Ca2+ 内流减少，肌浆网Ca2+ 释放减少，从而

Ca2+ 与肌钙蛋白结合减少，因此平滑肌收缩频率和幅度都降低。

6、氢氧化钠（NaOH）：加碱后[H+]降低，Ca2+ 内流增加，肌浆网Ca2+ 释放

增多，从而Ca2+ 与肌钙蛋白结合增多，因此平滑肌收缩频率和幅度都

升高。

7、磷酸组织胺：作用于静息电位较高、兴奋性也较高的Ah型神经，使其

兴奋性进一步增强，冲动发生频率增加，破坏了神经丛原有的冲动发

放频率，使得小肠平滑肌痉挛，持续收缩而不舒张。

三、动物与器材

实验动物：家兔 1只。

实验器材：恒温水浴槽、滴管、小烧杯、培养皿、张力换能器、桥式放大、细线。

实验试剂：台式液、1／10 000肾上腺素、1／100000乙酰胆碱、0.01％磷酸组胺、1mol/L的NaOH溶液、1mol/L的HCl溶液、0.5mg/ml

硫酸阿托品、1％氯化钡溶液。

四、方法与步骤

1、恒温浴档的准备：使用平滑肌槽恒温仪，浴槽用电热棒及恒温仪控制加热，

恒温工作点定在38C左右。实验前将台氏液加入4支小试管，放入浴槽水域中。开电源开关，使其加热，同时指示灯亮(若恒温控制失灵时，需用温度计随时探测浴槽中的温度)。

2、通入氧气：连接氧气管，经橡皮管送入装有台氏液的培养皿中，调整气体量

至3-5个泡/s。调整Powerlab，准备张力换能器，使其固定于营养管正上方。

3、制备标本：用木检猛击免头忱部，使其昏迷，立即剖开腹腔，找出胃幽门与

十二指肠交界处。由此取长20一30cm的肠管。先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，再将此肠管两端分别用线结扎，干结扎两端内侧剪断．取出肠段，置于古氏液中轻轻漂洗，当肠内容基本洗净后，将肠管分成数段．每段长2—3cm、两端各系一条线，保存于供氧的35℃左右的台氏液中。

4、标本安装：将小肠段一端固定于营养管钩子上，一端连于张力换能器，放入

营养管中，使肠段完全浸于台氏液中，且保证其不贴壁，液未碰到其他阻碍，

并要保证通气。调节张力感受器高度和灵敏度，稳定一段时间至出现平稳曲线。

5、依次加入下列药物1滴，观察对肠段运动的影响：

肾上腺素(1:10000) 、1%BaCl

2、1mol/L HCl 、1%CaCl

2

1mol/L NaOH 、Ach（1:100000）、0.01%磷酸组织胺。

先加入一种药品，当反应出现后，即从侧管放出营养管中的溶液，换入新鲜台氏液，更换3～4次，使肠段恢复正常节律。

五、实验记录

1、正常离体小肠平滑肌运动的曲线记录

2、加肾上腺素小肠平滑肌运动的曲线记录

3、加乙酰胆碱小肠平滑肌运动的曲线记录

4、加1 mol·L-1HCl溶液小肠平滑肌运动的曲线记录

5、加1%BaCl

溶液小肠平滑肌运动的曲线记录

2

6、加1 mol·L-1NaOH溶液小肠平滑肌运动的曲线记录

7、加0.01%磷酸组织胺溶液小肠平滑肌运动的曲线记录

8、加0.5mg/ml阿托品溶液小肠平滑肌运动的曲线记录

六、注意事项及讨论

1、不使用麻醉兔子的方法取小肠，取小肠的动作迅速，培养基中台氏液应通气

平衡。

2、标本安装好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即可开

始实验。

3、注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜38℃台氏液，每个实验项

目结束后，应立即用38℃台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。

4、每加一种药物前要有对照，每次更换台氏液后要稳定2～4min，不要出现温

度大范围的搏动。

5、实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，

但要防止一次性加药过量。

6、实验中始终要通入氧气，且气泡量不要太多。而碱不可加过多，因碱本身对

肠管平滑肌也是一种化学刺激。

7、肠道主要受副交感神经支配。小肠有一个复杂的壁内神经丛，它的终末神经

元属于胆碱能，主要与运动有关，可被阿托品阻断，从而使运动受到抑制。

阿托品对胆碱受体都有高度亲和力，都可以和受体产生可逆性结合，产生竞争性拮抗作用，阿托品与受体结合后，对节后胆碱能神经支配的效应细胞上的M受体有阻断作用，所以平滑肌收缩频率和收缩张力都减小。

8、小肠离体后，置于适宜的理化环境中，仍可记录到慢波和快波两种电活动，

慢波是平滑肌本身所具有的自发性缓慢的电变化，是一种肌源性的电活动。

慢波虽不能直接引起肌肉收缩，但可提高平滑肌的兴奋性，可使膜电位向暴发锋电位的水平移动。锋电位（快波）可引起一次肌肉收缩。