层析柱使用方法
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法
层析柱原理是一种常用的色谱技术，可以分离复杂混合物中的各个组分。
层析柱是一个长管状结构，内部填充有吸附剂或离子交换树脂等材料。
根据组分在填料中的亲和性差异，不同组分会以不同的速度通过填料，从而实现分离。
层析柱的使用方法如下：
1. 样品预处理：将混合物中的目标组分溶解或悬浮于合适的溶剂中，并进行必要的样品处理（如pH调整、过滤等）。
2. 建立实验条件：选择合适的填料材料、填料粒径和填充方法，并确定适当的溶剂体系和流动相条件。
3. 装填填料：将选择好的填料装入柱中。
填料的打包密度和均匀性对色谱分离效果有重要影响，因此要确保填料的均匀性和紧密度。
4. 平衡柱：用流动相预浸柱，使填料均匀吸附流动相，并达到平衡状态。
平衡时间根据填料种类和样品性质而定。
5. 注射样品：将样品以适当的体积注射到柱中，并控制注射速度和压力。
6. 运行分析：启动流动相，控制流动相速度和温度，使样品组分逐渐分离，并记录结果。
7. 数据分析：根据检测器的信号，对分离出的目标组分进行定性和定量分析。
层析柱的使用注意事项：
1. 填料选择：根据被分离组分的性质选择合适的填料。
2. 流动相选择：要确保流动相对目标组分具有足够的分离能力。
3. 注射量控制：注射量应根据柱容量和检测器灵敏度进行合理
控制。
4. 柱温控制：柱温对于某些温度敏感性样品的分离效果有重要影响，可以根据需要进行柱温控制。
5. 柱保养：正确使用和保养层析柱，避免杂质吸附和填料破碎等情况的发生。
6. 数据分析：及时记录和分析实验结果，确保实验数据的准确性和可靠性。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法层析柱是一种常用的分离技术，它基于化合物在不同相（固相和液相）之间的分配系数不同而实现分离。
层析柱广泛应用于化学、生物、药物等领域，是一种非常有效的分离和纯化方法。
本文将介绍层析柱的原理和使用方法，帮助读者更好地了解和掌握这一技术。
层析柱的原理主要是利用化合物在固相和液相之间的分配系数不同而实现分离。
当混合物通过固定在柱子中的吸附剂时，不同成分因其在吸附剂上的亲和力不同而在柱子中以不同速度移动，从而实现了混合物的分离。
在层析柱中，固相是固定在柱子中的吸附剂，液相是混合物溶解在的溶剂。
使用层析柱的第一步是选择合适的固相。
固相的选择应根据待分离化合物的特性来确定，例如极性、分子大小等。
选择合适的固相可以提高分离效率和纯度。
常见的固相包括硅胶、氨基硅胶、C18等。
第二步是装填柱子。
在装填柱子时，需要先将柱子底部封闭，然后依次加入固相和液相，确保固相均匀分布在柱子中。
装填后，需要进行适当的压缩，以确保固相不会因为柱子振动而移动。
第三步是样品加载。
将待分离的混合物溶解在适当的溶剂中，然后通过柱子，让混合物在固相上分配。
不同成分会根据其在固相和液相之间的分配系数不同而以不同速度通过柱子，从而实现分离。
第四步是洗脱和收集。
洗脱是指用洗脱剂将化合物从固相中洗出，收集不同时间点洗出的溶液，可以得到不同成分的纯度较高的化合物。
层析柱是一种非常有效的分离和纯化方法，它可以根据不同的固相和液相组合，实现对不同化合物的分离。
在实际应用中，需要根据待分离化合物的特性和需要纯度来选择合适的固相和液相，并严格按照操作步骤来进行操作，以确保分离效果和纯度。
总之，层析柱是一种重要的分离技术，它基于化合物在不同相之间的分配系数不同而实现分离。
掌握层析柱的原理和使用方法，对于化学、生物、药物等领域的研究和生产都具有重要意义。
希望本文能够帮助读者更好地了解和掌握层析柱技术，促进科研和生产的进步和发展。
层析柱使用方法
层析柱使用方法(总3页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--层析柱使用方法层析柱使用方法柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要。
常见的例子是：在柱层析时，由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀（没有填严实），使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花，导致分离效果不好。
更常见的例子是：层析柱虽然装得不错，但是由于淋洗剂选择不恰当，结果导致几十毫克产品，用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。
分离同样的东西，熟手可能只需要半个小时，而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。
由此可见，这两项技术掌握与否，对于提高工作效率，减轻工作量，减少有机溶剂的使用，从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。
而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。
这里要指出的一点是：TLC的作用除了跟踪反应进程，检测试剂和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
首先谈柱层析： 1：装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱：是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱：则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法
层析柱原理是一种物质分离和分析方法，其基本原理是通过样品溶液在静态相和动态相之间的分配行为，利用不同组分在两相之间的分配系数不同实现物质的分离和分析。
层析柱的使用方法主要包括以下几个步骤：
1. 准备样品：将需要分离和分析的样品溶解在适当的溶剂中，以得到待测物质的溶液。
2. 选择合适的层析柱：根据待测物质的化学性质和分离效果的要求，选择合适的层析柱。
层析柱可以有不同的填料，如吸附剂、离子交换剂等。
3. 装填填料：将选择好的填料装入层析柱中，并将填料压实以确保充填度均匀。
4. 预洗层析柱：在使用层析柱之前，通常需要使用适当的溶剂对层析柱进行预洗，以去除可能的杂质和残留物。
5. 样品加载：将准备好的样品溶液注入到层析柱中，注意控制注射的速度和样品的量，避免过载。
6. 洗脱：根据物质的亲水性或亲油性特性，通过适当的溶剂梯度洗脱层析柱中
的待测物质。
不同的组分会在不同的洗脱条件下分离出来。
7. 监测和收集：在洗脱过程中，可以使用适当的检测方法（如紫外可见光谱、荧光光谱等）监测待测物质的浓度，以确定其洗脱时间。
根据需要，可以分别收集不同组分的洗脱液。
8. 分析：收集到的洗脱液可以进行进一步的分析和鉴定，如质谱分析、气相色谱分析等。
整个层析柱的使用方法需要仔细调控各个步骤，合理选择条件，以获得准确和可重复的实验结果。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法层析柱是一种常用的色谱分离技术，它通过不同物质在固定相和移动相之间的分配系数差异来实现物质的分离和纯化。
在实际应用中，层析柱广泛应用于生物制药、化工、环境监测等领域。
本文将介绍层析柱的原理和使用方法，希望能为相关领域的研究人员提供一些参考和帮助。
层析柱的原理。
层析柱分离的原理主要是基于物质在固定相和移动相之间的分配系数不同而实现的。
固定相是填充在柱子内部的吸附剂，而移动相则是通过柱子内部的物质分离。
当样品混合物通过固定相时，不同成分会因为其与固定相的亲和力不同而在柱子内部发生分离。
这种分离过程可以通过控制移动相的流速和组成来实现，从而达到对混合物中不同成分的分离和纯化。
层析柱的使用方法。
1. 样品预处理，在进行层析柱分离之前，需要对样品进行预处理，包括溶解、过滤、稀释等步骤。
这些步骤能够保证样品的纯度和稳定性，有利于后续的分离过程。
2. 选择固定相，根据待分离物质的特性和分离要求，选择合适的固定相。
固定相的选择对于分离效果至关重要，不同的固定相对于不同的物质具有不同的亲和力，因此需要根据具体情况进行选择。
3. 封闭层析柱，在将固定相填充到柱子内部之后，需要进行封闭处理，以保证固定相的稳定性和均匀性。
这一步骤能够提高分离效果和保证实验的准确性。
4. 选择移动相，根据待分离物质的特性和固定相的选择，确定合适的移动相。
移动相的选择直接影响到分离的效果，因此需要进行仔细的考虑和实验验证。
5. 层析柱分离，将经过预处理的样品混合物通过封闭的层析柱，通过控制移动相的流速和组成，实现待分离物质的分离和纯化。
在分离过程中，需要密切关注柱子内部的情况，及时调整操作参数以保证分离效果。
6. 收集纯化物质，经过层析柱分离后，可以根据需要收集不同成分的纯化物质。
这些物质可以用于后续的实验研究或者工业生产中。
总结。
层析柱作为一种常用的色谱分离技术，具有分离效果好、操作简便等优点，在生物制药、化工、环境监测等领域有着广泛的应用。
柱层析使用技巧汇总
柱层析使用技巧汇总柱层析就是通常所说的过柱子，又叫柱色谱，属于色谱法中使用最广泛的一种方法。
对于含有多种有机物的混合样品，用重结晶无法提纯时，柱层析法可以说是有机实验中最有效的分离手段。
实验室中常用的是以硅胶和氧化铝做固定相的吸附柱。
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
1、硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了，有时还会有大量的硅胶剩余，浪费硅胶，这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。
柱层析用的硅胶一般是100-200目，100毫升硅胶的质量在47克左右，如果装一个直径是2.8 厘米的柱子，可以装18厘米高。
为了避免浪费硅胶和溶剂，最初学习装柱时最好对实验室中各种不同规格的柱子摸摸底。
方法很简单：用量筒量出100毫升干硅胶，直接倒入各种规格的柱子中，敲实，用刻度尺量出硅胶在柱子中的高度，这样就可以做到心中有数了。
一般在装柱的时候可以根据实验所需柱子的高度来调整硅胶的使用量，这样就可以大大地节省硅胶的使用，避免造成没有必要的浪费。
称量硅胶时一般称30~70倍于上样量，如果极难分，也可以用100倍量以上的硅胶。
2、洗脱剂的使用洗脱剂的极性可用薄层层析来确定，一般以待分离样品Rf 值为0.2-0.3为宜。
选择的洗脱剂应该使两相邻物质Rf 值之差最大化。
不要认为在板上爬得高分离的效果就比较好，如果Rf 在0.6，即使相差0.2 也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的过程，可以通过公式的比较：0.6/0.8 一次的分离度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。
有时虽然在薄层板上看到分离的效果很好，但过柱层析时还是很难分开。
这主要的原因就是薄层层析用硅胶比柱层析用硅胶要细得多，所以分离效果好。
解决的办法就是降低洗脱剂的极性，一般柱层析用洗脱剂比薄层层析用的展开剂极性要再降低一倍可以达到比较好的分离效果。
柱层析法的原理和方法
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二、操作
1.装 柱
湿法
1.将溶剂装入管 内， 2.将吸附剂和溶 剂 调成浆状，倒入 管 中， 3.使溶剂流出， 吸附剂下沉
干法
1. 管上端放一 漏斗
2.将硅胶装入 3.轻敲管壁使之
填装均匀
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吸附剂
种类：氧化铝、硅胶，氧化镁、碳酸钙和活性炭等 。 ➢ 氧化铝有酸、碱、中性。适用于不同类型化合物 的分离。 ➢ 硅胶没有酸碱性之分，可适用于各类有机物的分 离。
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吸附剂的选择
a.与被吸附物及展开剂均无化学作用（首要 ）
b.吸附能力的大小（颗粒大小） c.吸附剂的活性（含水量） d.分子极性
增加淋洗剂的流动 速度，减少产品收
集的时间
分离效果最好
减少硅胶的使用量， 但是由于大量的空 气通过硅胶会使溶 剂挥发
降低分离效果，减 少产品的塔板数
分离时间过长，效 率过差
有些比较易分解的 东西可能得不到而 且还必须同时使用 水泵抽气
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5.收集
• 根据样品中各组分的吸附能力判断流出 的各组分
• 洗脱剂的选择：根据点板的比移值（简称Rf值）。
Rf
值
原点到所需要点的中距心离 原点到溶剂前沿的距离
洗脱剂极性比较：
己烷、石油醚<环己烷<四氯化碳<三氟乙烯 <二硫化碳<甲苯<苯<二氯甲烷<三氯甲烷< 乙醚<乙酸乙酯<丙酮<丙醇<乙醇<甲醇<水< 吡啶<乙酸
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4.分类
分类
层析柱 操作规程
层析柱操作规程
《层析柱操作规程》
层析柱是一种分离和纯化化合物的工具，它在实验室和工业生产中都得到广泛应用。
为了正确、高效地运用层析柱进行实验操作，必须严格按照规程进行操作。
1. 准备工作
在开始操作层析柱之前，首先需要检查仪器设备和试剂是否准备就绪。
确保层析柱、柱子和柱底都是干净的，没有杂质和残留物。
同时，检查溶剂和流动相的浓度和pH值是否符合实验要求。
2. 样品预处理
样品在进入层析柱之前，需要进行适当的预处理。
通常包括溶解、过滤或稀释等步骤，以确保样品的纯度和浓度符合层析柱的使用要求。
3. 层析条件选择
根据样品的特性和分离要求，选择合适的层析柱和流动相。
流动相的选择包括了溶剂的种类、比例和流速等参数，需要根据实验要求进行合理选择。
4. 样品加载
将经过预处理的样品通过适当的方法加载到层析柱中。
可以采用重力流动、压力注入或者其他方法，确保样品均匀地进入层析柱。
5. 层析过程监控
在样品加载后，需要监控层析过程并进行记录。
包括流出液的收集、色谱图谱的观察等，以便及时发现异常情况并进行调整。
6. 收集和分析分离物
根据层析过程中的监控数据，及时收集目标物质，并进行分析和检测。
可以通过色谱、质谱等技术进行分析，得到分离物的纯度和产率数据。
7. 层析柱的清洗和保养
在操作完毕后，及时清洗和保养层析柱。
包括流动相的冲洗、柱子和柱底的清洗以及存放，以保证下次使用时的质量。
在实验操作层析柱时，严格按照规程进行操作，能够确保实验的准确性和重复性，同时也保证了仪器设备的长久使用。
层析柱的使用技巧
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过柱的技巧
过柱的技巧
40
柱层析按过柱时的压力可以分为：加压， 常压， 减压。压力可 以增加淋洗剂的流动速
柱层析按过柱时的压力可以分为：加压， 常压， 减压。压力可以增加淋洗剂的 流动速度， 减少产品收集的时间， 但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相 同的时候，常压柱是效率最高的， 但是时间也最长， 例如一些天然化合物的分 离，有时一个柱子过几个月也有可能。
层析柱的使用技巧
演讲人
2021-01-08
01
层析柱是层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据 样品混合物中各组分在固
层析柱是层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各 组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。选柱子：有玻 璃柱和不锈钢柱两种，实验室常用玻璃柱。径高比一般在1:5-10。根据吸附剂 用量（体积)确定柱子大小，一般吸附剂应填充到柱子体积的1/4-1/5。
10
选择吸附剂：200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难 分，也可以用
选择吸附剂：200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果 极难分，也可以用100倍量的硅胶。干硅胶的视密度在0.4左 右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
11
推荐硅胶量是样品量的30-40倍，具体的选择要具体分析。如果 所需组分和杂质分的
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装柱子的技巧
装柱子的技巧
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柱层析的装柱非常重要，装柱的效果会直接影响层析分离效果。 有湿法装柱和干法装柱等
柱层析的装柱非常重要，装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干 法装柱等两种方法。湿法装柱很简单，使用也最普遍， 就是先用比固定相多一 倍的洗脱剂将固定相活成匀浆，柱子底部先用脱脂棉塞紧， 然后倒入洗脱剂将 脱脂棉中气泡赶出。
层析柱操作规程
层析柱操作规程
《层析柱操作规程》
一、前言
层析柱操作是化学分离和纯化技术中常用的一种手段，它能够对混合物中的成分进行有效的分离。
为了确保操作过程的顺利进行和分离效果的最大化，需要制定一套严格的操作规程。
二、设备准备
1. 确认层析柱和相关设备是否完好，无污染；
2. 准备好使用的溶剂，保证纯度和新鲜度；
3. 根据实验需求，准备好实验所需的各种样品和标准物质；
4. 准备好密封垫和管接头等辅助器材。
三、操作步骤
1. 将层析柱连接至固定相泵；
2. 实验前先进行层析柱的扫表，观察并记录基础数据；
3. 使用实验样品进行预洗柱操作，确保固定相表面无污染；
4. 将样品溶解于溶剂中，装入进样瓶，连接至固定相泵；
5. 开始进行层析分离操作，收集分离出的目标成分，并记录各分离组分的流出时间；
6. 根据实验需求，对分离得到的目标物质进行进一步的纯化操作；
7. 实验结束后，对层析柱进行清洗消毒，保持设备的卫生和使用寿命。
四、实验注意事项
1. 操作过程中要随时检查设备状态，及时处理出现的故障和异常；
2. 严格遵守操作规程，不得随意更改操作步骤；
3. 对固定相、流动相、样品等各项实验条件进行严格控制，确保实验的准确性和可重复性；
4. 清洗消毒后的层析柱应储存于干燥通风的地方，避免细菌污染。
五、结语
层析柱操作规程的制定和执行对于保证实验的顺利进行和分离效果的最大化具有重要意义。
实验人员在操作过程中需严格遵守规程，不得有过失。
同时，定期检查和维护层析柱设备，确保设备处于良好状态，也是保证实验顺利进行的重要环节。
柱层析操作流程
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在进行柱层析操作之前，要做好充分的准备。
柱层析的实验方法和技巧
柱层析的实验方法和技巧柱层析法（Column chromatography）是一种常用的化学分离和纯化技术，可以用于从混合物中分离出多种化合物。
本文将介绍柱层析法的实验方法和一些实验技巧。
一、实验方法：1.准备工作：a.准备固定相：将固定相填充到柱中，并充填好；可以使用硅胶、氧化铝或C18等材料作为固定相；b.准备混合物：将待分离化合物溶解在适当的溶剂中；c.准备洗脱剂：根据实验需求选择合适的洗脱剂；2.柱层析操作步骤：a.将固定相填充到柱中。
b.添加适量的固定相保护剂：一般使用不溶于溶剂的物质作为固定相保护剂，以避免固定相的挤压；c.向柱中加入样品溶液，可使用注射器或滴管将样品缓慢滴入；d.加入适量的洗脱剂，使样品溶液通过柱时能够清除杂质；e.收集落下液：通过检测进样后的溶液，根据待分离化合物的特点来控制洗脱剂的加入；f.收集洗脱液：通过改变洗脱剂的性质和量，逐渐改变洗脱液中化合物的组成，实现化合物的分离；g.检测：对收集的液体进行分析和检测，确认化合物的纯度。
二、实验技巧：1.选择合适的固定相：根据待分离物质的性质选择合适的固定相。
一般来说，伯胺、硅胶C（C18）适用于一般的分离，而硅胶S（C2），硅胶A（C4）适用于疏水性化合物的分离，氧化铝适用于酸性物质的分离。
2.控制流速：流速过快会导致分离不彻底，流速过慢则浪费时间。
一般来说，柱床高度不同，流速也会有所不同，对于较长的柱床应采用较快的流速。
3.控制样品量：样品量过多可能会使分离效果不理想，样品量过少则浪费固定相。
应根据待分离化合物的性质和固定相的吸附容量来选择适当的样品量。
4.控制洗脱剂的pH值和溶度：柱层析中的选择性很大程度上取决于洗脱剂的pH值和溶度。
应根据待分离物质的性质和固定相的特点选择合适的洗脱剂。
5.收集洗脱液：在开始柱层析实验时，收集过程中的溶液可能是混合物，因此从开始收集时就需要根据所得的混合物变清的时间点调整洗脱剂的性质和量。
层析柱使用方法
层析柱使用方法
哇塞，层析柱可是个很重要的实验工具呢！它在很多领域都有着广泛的应用。
那咱就来好好说说层析柱的使用方法哈。
首先得准备好层析柱，检查是否完好无损。
然后就是装柱啦，这可是关键步骤哦！要将填料慢慢倒入柱中，同时用适当的溶剂冲洗，注意不能有气泡产生呀，这就好比盖房子得根基牢固一样重要呢！接着就是上样啦，把样品小心地加到柱子上，可别弄撒了哦。
再进行洗脱，控制好洗脱液的流速，就像把握好节奏一样重要呢。
在整个过程中，要注意保持操作环境的清洁，不然杂质混入可就麻烦啦！还有呀，使用的溶剂要合适，不然也达不到好的效果呀。
在使用层析柱的过程中，安全性和稳定性那也是相当重要的呀！就像走钢丝一样，稍有不慎可能就前功尽弃啦。
要确保实验装置的稳固，避免倒塌啥的危险情况发生。
同时呢，操作过程要规范，可不能马虎大意，这是对自己和实验结果负责呀！只有这样，才能保证实验的顺利进行，得到可靠的结果呢。
层析柱的应用场景那可多了去了呀！在生物化学、制药、食品等领域都能看到它的身影呢。
它的优势也很明显呀，比如能高效分离混合物，让我们更清楚地看到各种成分呢。
这就好像是在一堆混乱中找出秩序一样神奇呀！而且它还可以重复使用，多经济实惠呀！
给你们讲个实际案例哈。
有一次在一个生物实验中，我们就是用层析柱来分离蛋白质的。
哇，效果那叫一个好呀！很清晰地就把不同的蛋白质分离开了，为后续的研究提供了重要的数据支持呢。
这就充分说明了层析柱在实际应用中的强大呀！
总之呢，层析柱真的是个超棒的实验工具呀，只要我们正确使用它，就能发挥出它巨大的作用呀！。
层析柱使用标准操作方法
层析柱使用标准操作方法层析柱是一种分离和分析化合物的常用仪器，其操作方法一般包括以下几个步骤：1. 样品预处理：首先，将待测样品进行预处理，如样品溶解、稀释或提取等。
确保样品的浓度适合进行层析分离。
2. 选择合适的层析柱：根据待测物的性质和分离需求，选择合适的层析柱。
不同的层析柱具有不同的吸附材料和分离机制，因此，选择合适的层析柱对于成功的层析分离非常重要。
3. 装填样品：将预处理好的样品注入层析柱，一般通过注射器或其他装置进行。
注意，样品注入量应根据待测物浓度、柱子尺寸和分离需求合理确定。
4. 进行层析分离：根据选择的层析柱类型和设备的操作要求，进行层析分离。
可以通过重力层析、气相层析、高效层析等方式进行。
需要注意的是，层析分离的过程中需保证流速适中，以避免样品在柱子中滞留太久或过快通过，影响分离效果。
5. 收集分离物：将分离得到的组分收集起来，一般通过分数收集器或其他收集装置进行。
根据实验需求，可以选择不同的收集方式，如按时间间隔收集、按流量收集等。
6. 进行分析：收集到的分离物可以进行后续的分析和测定，如质谱分析、紫外可见光谱等。
根据需求，可以选择适宜的分析方法进行进一步的表征和确定。
7. 清洗层析柱：在层析分离结束后，需要仔细清洗层析柱以去除残留的样品和其他污染物。
不同的层析柱有不同的清洗方法，一般可以使用适当的洗涤剂和溶剂进行清洗。
需要注意的是，层析柱的操作方法可能因不同的仪器和实验要求而有所差异，因此，在使用层析柱前，应详细阅读仪器说明书，并按照说明书中的操作要求进行操作。
此外，操作过程中应注意安全，佩戴个人防护装备，避免化学品直接接触皮肤和眼睛。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法层析柱是一种常见的分离技术，它通过物质在固定相和移动相之间的分配来实现分离和提纯。
层析柱广泛应用于化学、生物化学、制药等领域，是一种非常重要的实验技术。
本文将介绍层析柱的原理和使用方法，帮助读者更好地理解和应用这一技术。
首先，让我们来了解一下层析柱的原理。
层析柱的分离原理基于不同物质在固定相和移动相之间的分配系数不同。
固定相通常是一种多孔的固体材料，如硅胶、纤维素等，而移动相则是一种液体溶剂，如甲醇、乙醇等。
当混合物通过层析柱时，不同成分会根据其在固定相和移动相中的分配系数而被分离开来。
这样，我们就可以通过适当选择固定相和移动相的性质，来实现对混合物中目标成分的选择性提取和纯化。
接下来，我们将介绍层析柱的使用方法。
首先，选择合适的层析柱和填料。
根据待分离物质的性质和分离要求，选择合适的层析柱规格和固定相填料。
其次，装填层析柱。
将固定相填料均匀地装填到层析柱中，并确保填充密实，避免出现空隙。
然后，平衡层析柱。
用适当的移动相预先平衡层析柱，使固定相充分吸附移动相。
接着，样品进样。
将待分离的混合物样品缓慢地加入层析柱顶部，并逐步加入移动相。
最后，收集分离物。
根据不同成分在层析柱中的分配情况，逐步收集分离出的目标成分。
在使用层析柱的过程中，需要注意一些常见的问题和注意事项。
首先，要注意层析柱的操作流程和条件，避免操作失误导致分离效果不佳。
其次，要选择合适的移动相和流速，以确保分离效果和纯度。
另外，要注意层析柱的维护和保养，定期清洗和更换固定相填料，确保层析柱的分离效果和使用寿命。
总之，层析柱作为一种重要的分离技术，在化学、生物化学和制药等领域有着广泛的应用。
通过本文的介绍，相信读者对层析柱的原理和使用方法有了更清晰的认识，希望能够帮助读者更好地应用这一技术，提高实验效率和成果质量。
玻璃层析柱使用方法
玻璃层析柱使用方法玻璃层析柱是一种常用的分离和纯化技术工具，广泛应用于生物化学、药物研发、环境监测等领域。
它的使用方法相对简单，但需要掌握一定的实验技巧和注意事项。
首先，在使用玻璃层析柱之前，需要选择合适的柱子尺寸和填料材料。
柱子的尺寸应根据待分离物质的大小和样品量来确定，一般较小的分子可选用较小的柱子，而大分子或大样品量则需要较大的柱子。
填料材料的选择应根据待分离物质的性质和分离需求，常见的填料材料有硅胶、脱水硅胶、脱水硅胶凝胶等。
其次，在使用玻璃层析柱时，需要将填料均匀地填充到柱子里。
填料的使用量应根据柱子的尺寸和需要分离的物质量来确定，一般填充到柱子的1/4至1/2处即可。
填料的填充应均匀、紧密，避免出现空隙和结块的情况。
接下来，将待分离的混合物溶液加载到柱子上。
首先，将混合物溶液注入到柱子顶部，并让其缓慢地渗透到填料中。
为了保持分离效果，应避免过快地注入溶液，以免造成溶液通道的形成。
可以通过使用滴液漏斗、加压泵等工具来控制注液速度。
在加载完溶液后，可以根据需要选择不同的洗脱溶剂进行分离。
洗脱溶剂的选择应根据待分离物质的性质和亲疏水性来确定，常用的洗脱溶剂有水、乙酸乙酯、甲醇等。
在洗脱过程中，可以根据需要逐渐改变溶剂的组成和浓度，以实现对不同成分的分离和纯化。
最后，根据洗脱的结果，可以收集不同组分的溶液，并进一步进行分析或后续处理。
收集时应注意避免交叉污染和混杂，可以使用不同的收集容器或提前标记好。
需要注意的是，玻璃层析柱在使用过程中需要注意安全，避免剧烈震动和碰撞，以免柱子破裂。
同时，在填充和洗脱过程中应注意避免气泡的产生，可以使用气泡去除器或震荡装置来辅助去除。
总之，玻璃层析柱是一种方便、有效的分离和纯化工具，掌握其使用方法和技巧能够帮助实验人员更好地进行分离和纯化操作。
通过合理的选择柱子尺寸和填料材料，并注意实验细节和安全事项，可以获得高效的分离纯化效果。
柱层析使用方法
柱层析使用方法柱层析（原理与装置）利用层析柱将混合物各组分分离开来的操作过程称为柱层析。
柱层析是层析技术中的一类，依据其作用原理又可分为吸附柱层析(原理见第97～100页和第101～102页)、分配柱层析(原理见第91～92及94～95页)和离子交换柱层析等。
其中以吸附柱层析应用最广。
以下只介绍吸附柱层析的相关问题，其操作方法也可作为其他类型柱层析的参考。
1.吸附柱层析的器材(1)层析柱图3-35 层析柱实验室中所用的玻璃层析柱有两种形式：一是下部带有活塞的玻璃管，如图3-35a所示，活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的，这样可以不涂真空油脂，以免污染产品。
如果使用普通的玻璃活塞，则真空油脂要小心地涂薄涂匀。
另一种是将玻璃管下端拉细，套上一段弹性良好的管子。
这段管子必须是不能被淋洗剂溶解的，普通橡皮管一般不可充作此用，因为橡皮易被氯仿、苯、THF等溶剂溶胀，而聚乙烯管子对大多数溶剂是惰性的，所以常常使用。
用一只螺旋夹控制流速，如图3-35b所示。
此外，薄膜塑料柱如图3-35c，因使用方便、节省淋洗剂、减少蒸发量等优点，应用日趋广泛。
薄膜塑料柱总是以扁平成卷保存的，两侧常有很深的折痕。
使用前需将裁取的一段薄膜管一端扎紧，另一端套在一段玻璃管上并用棉线扎紧。
将这段玻璃管穿过一个单孔塞。
然后将薄膜管放进一根又粗又长，下端拉细了的玻璃管内，使塞子塞紧大玻璃管的口。
用水泵自大玻璃管下端抽气，薄膜柱即因内部压强大于外部而自行展圆。
待装入吸附剂后在其下部扎几个小孔即可使用。
层析柱的尺寸根据被分离物的量来确定，其直径与高度之比则根据被分离混合物的分离难易而定，一般在1∶8到1∶50之间。
柱身细长，分离效果好，但可分离的量小，且分离所需时间长；柱身短粗，分离效果较差，但一次可以分离较多的样品，且所需时间短。
如果待分离物各组分较难分离，宜选用细长的柱子，如果要处理大量的较易分离的或对分离纯度要求较低的混合物，则可选用粗而短的柱子。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法层析柱是一种常用的色谱技术，它通过样品在固定相和流动相之间的分配来实现分离和纯化。
层析柱原理和使用方法对于化学、生物、制药等领域的研究和生产具有重要意义。
接下来，我们将详细介绍层析柱的原理和使用方法。
层析柱的原理主要包括分配平衡和分离过程。
分配平衡是指样品在固定相和流动相之间达到平衡分配的过程，而分离过程则是指在分配平衡的基础上，通过不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，实现样品中组分的分离。
层析柱的分离效果受到固定相、流动相、样品性质等多种因素的影响，因此在使用时需要根据具体情况进行调整。
层析柱的使用方法主要包括样品加载、洗脱和分离三个步骤。
首先是样品加载，将待分离的混合物按照一定的顺序加入到层析柱中，使其均匀分布在固定相上。
然后是洗脱步骤，通过流动相的不断通过，将未结合的成分从固定相上洗脱下来，使其通过柱床。
最后是分离步骤，利用不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，实现样品中组分的分离。
在使用层析柱时，需要注意一些操作技巧和注意事项。
首先是选择合适的固定相和流动相，根据样品的性质和需要分离的组分来选择最佳的分离条件。
其次是控制流速和压力，流速过快或者压力过大都会影响分离效果。
另外，还需要注意样品的加载量和洗脱条件的控制，以及柱温的控制等方面。
总的来说，层析柱原理和使用方法是化学、生物、制药等领域研究和生产中不可或缺的重要技术。
通过深入理解层析柱的原理和灵活运用其使用方法，可以实现对复杂混合物的分离和纯化，为相关领域的研究和生产提供有力支持。
希望通过本文的介绍，能够对层析柱的原理和使用方法有更深入的了解，为相关领域的工作者提供帮助。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法层析柱是一种常用的色谱分离技术，它基于物质在不同固定相上的分配系数不同而实现分离。
层析柱的原理可以简单概括为，样品混合物在移动相的作用下，通过固定相的柱床，根据各组分在固定相和移动相之间的分配系数不同而分离出来。
下面将详细介绍层析柱的原理和使用方法。
首先，层析柱的原理是基于分配作用。
当样品混合物通过层析柱时，各组分会在固定相和移动相之间发生分配，分配系数不同的组分会在柱床中以不同速率移动，从而实现分离。
这一原理是层析柱分离的基础，也是其高效分离的关键。
其次，层析柱的使用方法包括样品预处理、填充柱床、平衡柱床、样品进样、洗脱和检测等步骤。
在样品预处理阶段，需要对待测样品进行适当的处理，如溶解、过滤等，以保证样品的纯度和稳定性。
填充柱床时，需选择合适的固定相和移动相，并将柱床填充均匀，以确保分离效果。
平衡柱床是为了使固定相和移动相达到平衡状态，这一步骤至关重要。
样品进样后，需要根据实际情况选择合适的洗脱条件，将目标组分从柱床中洗出，并进行检测分析。
最后，层析柱的应用范围非常广泛，包括但不限于生物化学、药物分析、环境监测等领域。
在生物化学中，层析柱常用于蛋白质、核酸等生物大分子的纯化和分离；在药物分析中，层析柱可用于药物成分的分离和检测；在环境监测中，层析柱可用于水质、大气等环境样品的分离和分析。
由于层析柱具有高效、精密、灵敏等特点，因此在科学研究和工程实践中得到了广泛应用。
综上所述，层析柱作为一种重要的色谱分离技术，其原理和使用方法对于科研工作者和实验人员来说都是至关重要的。
通过深入了解层析柱的原理和使用方法，可以更好地应用该技术进行实验研究，为科学研究和工程实践提供更可靠的数据支持。
希望本文所述内容能够对您有所帮助，谢谢阅读！。
玻璃层析中压柱
玻璃层析中压柱玻璃层析中压柱是色谱分析和纯化领域中的一种重要工具，主要用于生物化学、药物化学、有机合成等领域对样品进行分离和纯化。
这类柱子由高质量的玻璃材质制成，能够承受一定的中等压力（通常比低压柱能承受更高的压力），适合在高压下操作，从而实现更快的流速和更高效的分离。
玻璃层析中压柱的特点包括：1. 耐压性强：相比于普通层析柱，中压柱设计能够承受较高的工作压力，这样可以在保证柱床稳定性的前提下使用较高流速，缩短实验时间。
2. 精确控制：可以通过精密调节进样速度和流动相的压力来精确控制分离过程。
3. 透明可视：由于采用玻璃材质，可以观察到柱内填充物的状态以及样品在柱中的移动情况，便于实时监控分离进程。
4. 适用范围广：适用于多种类型的色谱填料，如硅胶、凝胶（如琼脂糖、葡聚糖）、离子交换树脂、亲和介质等，并广泛应用于蛋白质、核酸、多肽、小分子化合物等各种生物大分子和有机小分子的分离纯化。
在实际操作中，为了达到最佳分离效果，需根据目标物性质选择合适的固定相和流动相，合理设计洗脱程序，并确保正确装填柱子，以形成均匀且紧密的柱床结构。
此外，还应按照要求进行预处理和清洗，确保无杂质干扰实验结果。
中压玻璃层析柱是一种常见的色谱分离装置，广泛应用于化学、生物化学、药学等领域。
它利用不同物质在层析填料上的分配系数差异实现分离。
填料通常是固体微粒，具有大比表面积和特定的亲水性或亲油性。
样品在填料上与流动相进行分配，在不同的分配系数作用下，样品成分会以不同的速率通过填料层而发生分离。
中压玻璃层析柱的结构包括玻璃柱筒和内径大小不同的玻璃柱。
柱筒通常由硬质玻璃制成，具有良好的透明度、耐压性和化学稳定性。
柱筒内部填充有层析填料，如硅胶、氧化铝、活性炭等。
中压玻璃层析柱的优点包括高分离效能、低成本、易于操作等。
中压玻璃层析柱的使用方法包括以下步骤：1.安装柱子：将玻璃层析柱固定在支架上，确保柱子垂直。
2.装填层析填料：将适量的层析填料加入柱子中，用少量流动相浸润。
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层析柱使用方法层析柱使用方法柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要。
常见的例子是：在柱层析时，由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀（没有填严实），使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花，导致分离效果不好。
更常见的例子是：层析柱虽然装得不错，但是由于淋洗剂选择不恰当，结果导致几十毫克产品，用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。
分离同样的东西，熟手可能只需要半个小时，而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。
由此可见，这两项技术掌握与否，对于提高工作效率，减轻工作量，减少有机溶剂的使用，从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。
而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。
这里要指出的一点是：TLC的作用除了跟踪反应进程，检测试剂和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
首先谈柱层析：1：装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱：是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱：则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。
解决的办法是：第一、硅胶一定要天结实；第二、一定要用较多的溶剂“走柱子”，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。
也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。
但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。
2：上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。
如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。
干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。
湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加入。
然后用少量溶剂洗涤后，再加入。
湿法较方便，熟手一般采用此法。
上样完毕后，接着即用淋洗剂淋洗。
淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
由于层析柱和薄板的不同，即使两者使用的硅胶都相同，但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时，也显得极性偏大，所以要稀释一倍，但又不能稀释太多，否则成了靠扩散作用来分离，效果也不会好。
谈TLC，需要切记的是：第一、某种样品在这种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。
因此在寻找展开剂时，多尝试几种比例不同，成分不同的展开剂。
展开剂的极性太小，点分不开，极性太大，也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右为最佳。
第二、点不能点得太浓,否则容易重叠,不易判断,因为如果两个点相近的话,一浓就变成一个点第三、板上点的展开的清晰程度和溶剂的极性和物质在该溶剂中的溶解性有关，只有两者比较合适了，才能有一个交好的分离效果。
选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，常用的溶剂组合有：Petroleumether/Ethyl acetate, Petroleum ether/Acetone, Petroleum ether/Ether, Petroleum ether/CH2Cl2, CH2Cl2/ethyl acetate, ethyl acetate/ MeOH, CHCl3/ ethyl acetate展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。
很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。
我在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了所有的溶剂用来两两组合后，最后才找到petroleum ether/THF这类不常见的混合溶剂。
一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例,达到最佳效果，如果没有分开的迹象，最好是换溶剂。
对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质，在展开剂里往往加一点点三乙胺，氨水，吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸性。
当然，选择所添加的碱性物质，还必须考虑容易从产品中除去，氨水无疑是较好的选择。
极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统极性较大的用甲醇：氯仿系统极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸，产品中含有羧基的基团，也可加点冰醋酸来调整拖尾。
这里要特别强调的一点是：分离效果的好坏和所用硅胶和溶剂的质量很有关系。
不同厂家生产的硅胶可能含水量以及颗粒的粗细程度，酸性强弱不同，从而导致产品在某个厂家的硅胶中分离效果很好，但在另一个厂家的就不行。
溶剂的含水量和杂质含量对分离效果都有明显的影响。
温度对分离效果影响也很明显。
我们实验室没有空调，我在实验过程发现，在夏天分离相同的产品，所需的淋洗剂极性要比在冬天小很多，这一点大家也是可以理解的鉴于此，使用的硅胶，不用时一定要密封，防止吸潮。
TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面，或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。
在利用TLC跟踪反应时，在点板的时候往往是反应体系的混和溶液点一个点A，每种难挥发的原料各点一个点B,C, D等等，然后所有的原料和反应体系的混合溶剂再共同点一个混合点X，这些点在板上的位置如图所示：A XBC D这样的好处是展开后可以清楚地看见每个点的位置，把A这个点展开后的各个层份的点与B,C,等原料比较，从而判断原料消失没有，点混合点X的目的在于，方便观察，因为有时候，板展开后，各点的位置有些变形，或者由于边缘效应等等，使得判断不易。
利用TLC判断物质的纯度时，往往要和NMR相结合，因为某种样品在这种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。
但有趣的是，由于H NMR可鉴别的纯度也就在95%左右，有时候H NMR现示较纯的东西，一点板就会发现有几个点。
所以，两者要结合使用。
但是自己以前的样品，则可以只通过点板来判断纯度。
补充一下层析柱硅胶的用量一般是每分离1g产品使用30-100g硅胶柱子的形状比例一般是内径:高度=1:8~10展开剂尽量使用能够分开的极性最低的溶剂还有，湿法装柱子的时候本人认为最好是先在底部装有石英砂的柱子中预加溶剂再按湿法加料这样能保证一开始加入的填料处于全湿状态,杜绝气泡刚装的柱子在一段时间内可能会有长度变短的现象所以可以给它一个稳定时间后再投入使用硅胶柱层析原理硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析惯用方法1.称量。
200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。
干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
2.搅成匀浆。
加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。
氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。
如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
3.装柱。
将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。
4.压实。
沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。
柱床约被压缩至9/10体积。
无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
5.上样。
干法湿法都可以。
海沙是没必要的。
上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。
6.过柱和收集。
柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。
收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g 上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。
7.检测。
要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
8.送谱。
收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。
如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。
可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。