土壤铵态氮的测定

土壤铵态氮的测定A 纳氏试剂比色法1方法提要土壤样品中的NH4+用氯化钾溶液提取，在碱性条件下与纳氏试剂络合生成黄色络合物，进行比色测定。

2适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定。

3主要仪器设备3.1 分光光度计；3.2 往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；3.3 塑料瓶，200mL。

4试剂4.1氯化钾提取液［c(KCl)=2mol·L-1］：称取149.1g氯化钾溶于水，稀释至1L；4.2酒石酸钠溶液［ρ(Na2C4H4O4·2H2O)=250g·L-1］：称取25g酒石酸钠（Na2C4H4O4·2H2O）溶于水，稀释至100mL；4.3 纳氏试剂：称取10.0g碘化钾溶于5mL水中，另称取3.5g二氯化汞溶于20mL水中（加热溶解），将二氯化汞溶液慢慢地倒入碘化钾溶液中，边加边搅拌，直至出现微红色的少量沉淀为止。

然后加70mL 300g·L-1氢氧化钾溶液，并搅拌均匀，再滴加二氯化汞溶液至出现红色沉淀为止。

搅匀，静置过夜，倾出清液贮于棕色瓶中，放置暗处保存；4.4 阿拉伯胶溶液［10g·L-1］：称取1g阿拉伯胶溶于100mL沸水中，加入2滴氯仿作为防腐剂（混浊时使其澄清后，倾出上部清液），备用；4.5 铵态氮标准贮备溶液［ρ(N)=500μg·mL-1］：称取1.910g氯化铵（优级纯，经90℃干燥2h）,溶于水中，加入氯仿1mL,定容至1L；4.6 铵态氮标准溶液［ρ(N)=10μg·mL-1］：测定当天吸取铵态氮标准贮备溶液10.00mL，加水定容至500mL。

5分析步骤：称取10.0g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50.0mL 2mol·L-1氯化钾提取液，盖紧瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃～25℃振荡30min（振荡频率：180r/min±20r/min），立即过滤于50mL 三角瓶中。

吸取滤液5.0mL ～10.0mL 于25mL 容量瓶中，加水稀释至20mL 左右，加1mL 250 g ·L -1酒石酸钠溶液，充分摇动后静置5min ，使其与钙、镁离子络合。

加入5滴1%阿拉伯胶，摇动后加1mL 纳氏试剂，边加边摇动，然后定容至刻度。

5min 后在分光光度计上用490nm 波长比色。

铵态氮校准曲线绘制：吸取10μg ·mL -1铵态氮标准溶液0，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50mL 于25mL 容量瓶中，加入10mL 氯化钾浸提剂，加水稀释至20mL 左右，与待测液相同步骤进行显色，以标准系列溶液的零浓度调节仪器零点进行比色，即为0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0μg ·mL -1铵态氮标准系列。

绘制校准曲线或计算回归方程。

6.结果计算铵态氮（N ），mg ·kg -1 =100010m 3⨯⨯⋅⋅DV ρ式中：ρ——查校准曲线或求回归方程而得测定液中NH 4+-N 的质量浓度，μg ·mL -1； V ——显色液体积，mL ；本试验为25mL ；D ——分取倍数，50/（5～10）；103和1000——分别将μg 换算成mg 和将g 换算为kg ；m ——试样质量，g 。

平行测定结果以算术平均值表示，结果取整数。

7.精密度平行测定结果允许相对相差≤10%.8.注释1）土壤铵态氮含量一般用新鲜样品测定，如需以硝态氮加铵态氮反映无机氮含量，则可用过2mm 筛的风干样品测定，但需标明为风干基。

2）待测液中有硫化物时，可加盐酸煮沸，赶除至无气味为止；有机质的颜色可加无铵活性碳在酸性条件下过滤除去。

3）为了除去酒石酸钠中铵盐杂质，应将其置于80～90℃的烘箱中干燥数小时，再检查是否有铵离子。

4）加纳氏试剂前，待测液必须调至中性，如果呈酸性时，则产生红色的碘化汞沉淀，或出现其他各种颜色干扰测定。

5）加阿拉伯胶保护剂量要准确，否则影响黄色的深浅（多加时色浅，少加时色深）。

6）比色时若溶液出现桔红色沉淀，应减少吸液量，重做。

7）显色时黄色稳定时间在30min左右，不能放置过久，否则有沉淀或黄色变浅的现象。

B 靛酚蓝比色法[土壤农化分析方法，次氯酸钠标定]1方法提要土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05μg·mL-1～0.5μg·mL-1范围内，其深浅与NH4+-N 含量成正比。

反应体系的pH应为10.5～11.7之间。

硝普钠[硝基铁氰化钠，或称亚硝酰基五氰基合铁（III）酸钠，Na2Fe(CN)5NO]是此反应的催化剂，能加速显色，增强蓝色及其稳定性。

在20℃左右室温时一般须放置1h后比色，完全显色约需2h～3h。

生成的蓝色很稳定，24 h内吸收值无显著变化。

比色时在625nm处测量吸收值。

待测液中如有干扰的金属离子，可用EDTA 等螯合剂掩蔽。

2适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定3.主要仪器设备3.1 分光光度计；3.2 往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；3.3 塑料瓶，200mL。

4.试剂4.1酚溶液：10g苯酚（C6H5OH）和100mg硝普纳[Na2Fe(CN)5NO·2H2O]溶于1L水中。

此试剂不稳定，须贮于棕色瓶，存放在4℃冰箱中，用时须温热至室温；注意硝普钠有剧毒！！！4.2次氯酸钠碱性溶液：10g氢氧化钠（NaOH），7.06g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）,31.8g 磷酸钠（Na3PO4·12H2O））和10mL次氯酸钠[ω(NaOCl)=5.25%,即含有效氯5%的漂白剂溶液]溶于1L水中。

此试剂应与酚溶液同样保存；4.3掩蔽剂：酒石酸钾钠溶液[ρ(KNaC4H4O6·4H2O)=400g·L-1]与EDTA二钠溶液[ρ(C10H14O8N2Na2)=100g·L-1]等体积混合，每100mL混合液中加0.5mLNaOH溶液[c (NaOH) =10mol·L-1],即得清亮的掩蔽剂溶液；4.4铵态氮标准贮备溶液［ρ(N)=100μg ·mL -1］：称区0.4717g 烘干的硫酸铵 [（NH 4）2SO 4,优级纯]溶于水，定容至1L ；4.5铵态氮标准溶液［ρ(N)=5μg ·mL -1］：测定当天将铵态氮标准贮备溶液用水准确稀释20倍（例如5.00mL 稀释至100mL ）；4.6氯化钾提取液［c (KCl)=2mol ·L -1］：称取149.1g 氯化钾溶于水中，稀释至1L ； 5分析步骤称取10.00g 土壤样品放入200mL 塑料瓶中，加入50.0mL 2mol ·L -1氯化钾提取液，盖紧瓶盖，摇匀，在振荡器机于20℃～25℃振荡30min （振荡频率：180r/min ±20r/min ），过滤于50mL 三角瓶中。

吸取滤液2.0mL ～10.0mL （含NH 4+-N 2μg ～25μg ），放入50mL 容量瓶中，用氯化钾浸提剂补足至总体积为10mL ，然后用水稀释至30mL ，依次加入5mL 酚溶液和5mL 次氯酸钠碱性溶液，摇匀，在20︒C 左右室温下放置1h 后，加入1mL 掩蔽剂以溶解可能生成的沉淀物，然后用水定容，用1cm 比色皿在625nm 波长处进行比色。

校准曲线绘制：分别吸取铵态氮标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL ，放入50mL 容量瓶中，各加氯化钾浸提剂10 mL ，同上法显色、定容。

各甁标准液的浓度相应地为0、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg ·mL -1。

用标准系列溶液的零浓度调节仪器零点进行比色，测定吸收值，绘制校准曲线或计算回归方程。

6结果计算铵态氮（N ），mg ·kg -1 =100010m 3⨯⨯⋅⋅D V ρ式中：ρ——查校准曲线或求回归方程而得测定液中NH 4+-N 的质量浓度，μg ·mL -1；V ——显色液体积，mL ；本方法为25mL ；D ——分取倍数， 50/（2～10）；103和1000——分别将μg 换算成mg 和将g 换算为kg ；m ——土样质量，g 7注释1）土壤铵态氮含量一般用新鲜样品测定，如需以硝态氮加铵态氮反映无机氮含量，则可用过2mm 筛的风干样品测定，但需标明为风干基。

2) 掩蔽剂应在显色后加入。

如加入过早，会使显色反应很慢，蓝色偏低；加入过晚，则生成的氢氧化物沉淀，可能老化而不易溶解。

在20℃左右时放置1h即可加掩蔽剂。

3) 次氯酸钠不太稳定，配制前需标定NaOCl含量。

所需试剂：碳酸氢钠溶液[ρ（NaHCO3）=96 g·L-1]：称取96g碳酸氢钠，稍加热促进其溶解定容到1L；淀粉溶液[10g·L-1]：称取1g淀粉在60℃下加热使之溶解，定容到100mL；碘化钾溶液[ρ（KI）=10g·L-1]：称取1g碘化钾溶解后定容到100mL。

标定方法吸取10mL待标定的次氯酸钠溶液于250mL三角瓶中，加入10g·L-1淀粉溶液2mL 和96 g·L-1碳酸氢钠溶液50mL，用10g·L-1碘化钾滴定，终点时溶液呈蓝色。

做3次平行，取平均值。

计算：次氯酸钠，mol·L-1 = V（滴定用碘化钾体积，mL）×1.25（常数）。