饲草试样制备及常规成分检测技术规程：酸性洗涤木质素(ADL)测定
纤维素、半纤维素、木质素测定
纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%）酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分（硅酸盐,%）酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定的优化：把酸性洗涤纤维置于50ml烧杯中，加入5ml 72%硫酸，20℃水解3h，然后加水45ml，室温过夜，次日用已称恒重的3号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至pH6.5，于60℃烘干，称重。
把剩余残渣在马福炉中550℃经2.5h灰化，测得灰分重量。
洗涤优化：经过实际试验，发现中性洗涤纤维测定和酸性洗涤纤维测定中用丙酮冲洗这步效果不大，测量精度要求不高时，可省略。
方法一：化学滴定法（我们测定出来的结果较文献报道偏低）（一）纤维素含量的测定1.0.1N2.K（2）（3）（4）（5）（6）（7）定，用去（8）（9）1. 0.5%淀粉，2.（1）（2）5min （3）（4）（5）（6）（7）（8）（9）移液管吸取10mL滤液，加入10mL碱性铜试剂，盖好在沸水中煮15min（10）冷却，加入5mL草酸-硫酸混合液，加入0.5mL 0.5%淀粉，用0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去b mL（11）取10mL碱性铜试剂，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL滤液，加入0.5mL 0.5%的淀粉，0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去a mL（12）生物质中半纤维素的含量计算公式x% = 0.9×100 [ 248－（a－b）]（a－b）/10000×10×n（三）木质素含量的测定1. 所需溶液1%醋酸，丙酮，73%硫酸，10%氯化钡溶液，0.5N重铬酸钾溶液，浓硫酸，0.1 N硫酸亚铁铵溶液，试亚铁灵指示剂。
2. 实验步骤（1）标定新配的0.1N硫酸亚铁铵溶液, 滴定度为K（2）称取自然风干的生物质粉末0.05-0.1g，数值为n（3）装入离心管，加入10mL 1％醋酸，摇动5min混匀（4）离心，用5mL 1％醋酸洗沉淀（5）加丙酮3-4mL，在摇荡的情况下浸泡3min，洗三次（6）用玻璃棒将沉淀沿管壁分散开，将离心管放热水中使沉淀充分干燥（7）在干燥沉淀中加入73％硫酸3mL，用玻璃棒搅匀，挤压成均匀的浆液（8）室温下放置一夜（9）加入10mL蒸馏水，搅匀，置沸水中5min（10）冷却，加入0.5mL 10%氯化钡溶液，搅匀，离心，倒出清液，分别用10mL蒸馏水冲洗沉淀两次，每次要混匀原理：生物质（浒苔、锯末和玉米秸秆）在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。
饲料分析与检测实验：（VanSoest）中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定方法
实验六、（Van Soest）中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定方法【学习目标】了解饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定意义，掌握饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）检测的原理、实验方法，并注意对测定结果的分析和讨论。
一、目的传统的粗纤维测定方法存在着明显的缺点，即所测得的结果包括部分半纤维素和纤维素，以及大部分木质素在内的一组复合物，又因为有部分半纤维素和少量纤维素、木质素溶解于酸碱溶液中，被计算到无氮浸出物中去了。
因此，传统方法测得的饲料中粗纤维和无氮浸出物的含量均不能反映出饲料本身被家畜利用的真实情况。
而范氏洗涤纤维分析法则能弥补这些不足，可以准确地获得植物性饲料中所含的半纤维素、纤维素、木质素以及酸不溶灰分的含量，这在纤维素的分析测定中是一项非常重要的改革。
二、原理植物性饲料如一般饲料、牧草的粗纤维经中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）分解，则大部分细胞内容物溶解于洗涤剂中，其中包括脂肪、糖、淀粉和蛋白质，统称为中性洗涤剂溶解物（NDS），而不溶解的残渣为中性洗涤纤维（NDF），这部分主要是细胞壁部分，如半纤维素、纤维素、木质素、硅酸盐和极少量的蛋白质。
酸性洗涤剂可将中性洗涤纤维（NDF）中各组分进一步分解。
植物性饲料可溶于酸性洗涤剂部分称为酸性洗涤剂溶解物（ADS），主要有中性洗涤剂溶解物（NDS）和半纤维素，剩余的残渣称为酸性洗涤纤维（ADF），其中含有纤维素、木质素和硅酸盐。
此外，由中性洗涤纤维（NDF）与酸性洗涤纤维（ADF）值之差即可得到饲料中半纤维素的含量。
酸性洗涤纤维经72.0%的硫酸消化，则纤维素被溶解，其残渣为木质素和硅酸盐，所以，从酸性洗涤纤维（ADF）值中减去72.0%硫酸消化后残渣部分即为饲料中纤维素的含量。
将经72.0%硫酸消化后的残渣灰化，灰分则为饲料中硅酸盐的含量。
而在灰化中逸出的部分即为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
酸性洗涤纤维和木质素测定的国际标准
外 都小 于 １％ ０ 这些 数据可 与 Ｎ Ｆ法获得 的数 据 Ｄ
相 比。这可能 是小麦 Ａ Ｆ含量低 的原 因。表 １中 Ｄ
定 人员拿 到 的样 品 ， 号从 １ １ ． 盲重 复 的 ． 标 ～２是 不 用识 别样 品种类 ２ ２个 参 与研 究 的实 验 室 中 ．８个 用 Ｆ ｓ １ ｏｓ的
最 近 已 由 国际 分 析 师 协会 （ Ｏ Ｃ） 国际 标 准 化 Ａ Ａ 、
组 织 （ ｏ） 欧洲标 准化 委员会 （ Ｅ 联合 发布 。 ｉ 及 ｓ Ｃ Ｎ）
（ ） 次分 析 ６个 样 品 的萃取 和过 滤 系统 是 ２一
集成 的
（） ３ 用抗凝 结 的快速真 空过 滤系统 。 （ ） 系统 同时 加 热 和 加试 剂 与 水 时 ． 试 ４当 与 剂 的接 触最小 （ ） 剂加 入 系统 也可 简单 地 冲洗 粘 在仪 器 ５试
壁 的样 品
青贮料 青贮料
了。这个 标准也认 为 Ｆｂ ｒ ｃ系统是 一个 有效选 ｉｅ ｅ ｔ
择 。与 常规 的手 工操 作 （ 在烧 杯 中回流 ） 比较 ， 相 Ｆｂ ｒ ｃ 置 的优 点可 以总结 如下 ： ｉｅｔ 装 ｅ （ ） 转 移 样 品 可 改 进 准 确 和精 确度 ； 样 １不 称 品人 钳锅并 保 留到整个分 析过 程 。
Ｎ Ｆ测 定 国 际 标 准 化 方 法 （ Ｎ ＩＯ １ ９ ６２ ０ ） Ｄ Ｅ Ｓ ３ ０ ： ８ ０
１ 材 料 和 方 法
图 １ Ｖ ｎ Ｓ ｅ ｔ 洗 涤 纤维 体 系 ａ ｏｓ 的
１ 样 品 和 实验 室 ． １
选 择 用 作 研 究 的 样 品是 ： 末 、 麦 、 饲 锯 小 牛 料、 豆粕 粉 、 叶草 青贮 料和青 草青 贮料 。分析 三
纤维素、半纤维素、木质素测定
原理采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
试剂的配制中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2?2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7?10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）； 1N 硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。
范氏中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维测定的实验方案1(修改)
饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）和木质素（ADL）的测定实验方案实验原理纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）。
植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
2 所需试剂十二烷基硫酸钠溶液（中性洗涤剂）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）、四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）、磷酸氢二钠、乙二醇乙醚、十六烷基三甲基溴化铵、硫酸、丙酮，无水亚硫酸钠，十氢化萘，95%乙醇3 所需仪器分析天平：感量0.0001 g、容量瓶、锥形瓶、滴定管、移液管、洗瓶、洗耳球、滴管、量筒。
粗纤维测定仪（SLQ-6）、古氏坩埚、干燥器（以氯化钙或变色硅胶为干燥剂）、酸度计4 试剂的配制4.1 30g/L十二烷基硫酸钠（中性洗涤剂）溶液。
称取18.61g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）和6.81g四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）和10mL已二醇乙醚同放入1000mL烧杯中，加入少量水加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠。
称取11.9644g磷酸氢二钠（含12水），置于另一烧杯中，加入少量水，微微加热溶解后倾入第一个烧杯，稀释至1000mL。
此溶液PH在6.9-7.1 .4.2 20g/L十六烷三甲基溴化铵（酸性洗涤剂）溶液。
称取20g十六烷三甲基溴化铵，溶于1000mL已经标定过的0.5mol/L硫酸溶液中，搅动溶解，必要时过滤。
4.3 0.5 mol/L硫酸溶液。
称取49g（27.87mL）浓硫酸，慢慢加入已有500mL水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶中，定容，标定。
（4.3.1标定硫酸的方法：称量1.6g在270-300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠，称准至0.0001g。
溶解50mL水中，加入10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液有绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。
范氏纤维素测定方法
原理：采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理:植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
溶剂配制：中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2•2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；1N硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml 蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；操作步骤：准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100 ml 酸性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。
牛羊类反刍动物饲料的营养成分评定
牛羊类反刍动物饲料的营养成分评定1 饲料营养成分评定方法1.1 常规成分分析法我国目前沿用的饲料成分常规分析法是德国人Hennebery和Stohmann于1862年在Weende实验站提出的概略养分分析方法。
该方法将饲料成分划分为水分、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、无氮浸出物6大营养成分来评定饲料的营养价值。
由于每一类都可细分且结构复杂，所以称为“粗养分”。
Weende分析方法是饲料营养价值评定的基础，自诞生以来就在饲料的营养价值评定中起着十分重要的作用，但该方法对纤维成分的划分很不明确，不能很好地区分纤维素、半纤维素和木质素。
1.2 范式纤维分析法范氏（Van Soest）分析方法是在Weende分析方法的基础上建立起来的，对粗纤维和无氮浸出物这两个指标进行了修正和重新划分。
对于反刍动物来讲，仅用常规营养成分来评价粗饲料的营养价值是不够的，因为粗饲料的消化率与纤维物质关系密切，而粗纤维并不能完全代表所有的纤维物质，粗纤维除了包含所有的纤维素外，还包含部分半纤维素和木质素。
在评定饲草和纤维性饲料时，一旦测出饲料的NDS（中性洗涤可溶物）、ADF（酸性洗涤纤维）、NDF（中性洗涤纤维）、ADL（酸性洗涤木质素），就可以单独或配合使用这些测定值来评定饲料的营养价值。
邓卫东等研究表明，饲料干物质体外消化率与NDF呈极显著负相关(P<0.01)，与CP含量呈显著正相关，而且粗饲料干物质体外消化率（IVDMD）与CP、ADF和ADL含量之间存在显著的回归关系，回归方程分别为：Y=103.678-1.981×ADF+2034×ADL(R2=0.897)；Y=18.083+1.650×CP(R2=0.813)。
VanSoest分析方法对动物纤维性物质营养研究和高产奶牛饲料营养价值评定的发展和进步作出了历史性贡献。
但是由于反刍动物具有特殊的消化道结构及消化生理，因此仅根据化学分析很难说明反刍动物对饲料的消化和利用情况，因而不能较好地反映饲料的营养价值，在使用过程中存在一定的局限性。
饲料中木质素含量的测定
饲料中木质素含量的测定
时间：2014-03-05 11:47:59 来源：作者：
(一)原理
木质素(1ignin)构成覆盖在植物细胞壁纤维结晶上的包被或网状组织的高分子芳香族聚合物，又名木素。
它在细胞壁内与纤维素、半纤维素结合成强有力的化学键，是一组对植物起支撑作用的化学官能团，也是基本上不能被动物消化吸收的有机物。
(二)测定
常规饲料分析方法中木质素分别存在于粗纤维及无氮浸出物的含量中，是由碳氢氧组成，但与碳水化合物的结构完全不同，测定方法有浓硫酸(72％)法、发烟盐酸(40％～42％)法、酶-硫酸水解法及酸性洗涤剂法等。
因测定方法不同，凡在“木质素”前冠以状语者，系指在特定条件下测出的含量。
如“浓硫酸木质素”、“胃蛋白酶水解木质素”、“发烟盐酸木质素”、“酸
性洗涤木质素”等。
各自的内在质量均不同，无可比性。
是一组极少能被动物消化的抗营养因子或称为“非营养性物质” (nonnutritional matter，NNM)。
饲料中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)快速测定方法在生产中的应用
表 3 饲料原料的 DE 估测值和实测值
饲料 名称
干物质 （%）
（粗白%蛋质）
消（蛋化%白）率
可（蛋消%白）化
粗脂肪 （%）
粗灰分 （%）
中洗纤维 （%）
酸洗纤维 （%）
中性性碳（洗水%涤化）可合溶物
（KD估cEa测l值/kg）
（KD实cEa测l值/kg）
玉米 86
8.7
87
7.57 3.6
1.4
9.3
小麦麸和次粉： - ， ME=3501.1 44.78NDF % ， ， 。 n=48 P<0.01 r=0.9992
年第 卷 2021 42
表 1 原料的 NDF 含量及其变异范围
项目 批次数（n） 范围（%） 平均数（%） 变异系数（%）
玉米 小麦次粉 细麦麸 粗麦麸
20
20
12
28
6.3~10.1 18.4~35.3 32.9~37.9 32.9~56.0
测定。
关键词：中性洗涤纤维；酸性洗涤纤维；快速测定
中图分类号：S816.9
文献标识码：B
文章编号： （ ） 1007-1733 2021 07-0020-05
饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维 （ADF）含量是饲料营养成分的重要指标，它是 饲料中的纤维成分，NDF 和 ADF 指标与饲料质 量密切相关，它越来越广泛地应用到饲料营养价 值评定中，在近几年颁布的《中国饲料成分和营 养价值表》中均有 NDF 和 ADF 指标。NDF 的测 定是饲料用中性洗涤剂煮沸处理 1 h 后，试样中 的蛋白质、脂肪、淀粉和糖等溶解，再用石油 醚、丙酮除去脂肪，剩余不溶解的残渣称为 NDF，它包括试样中全部的半纤维素、纤维素、 木质素及少量硅酸盐等杂质。ADF 的测定是饲料 样品经酸性洗涤剂煮沸处理 1 h 后，饲料中的脂 肪、蛋白质、淀粉和半纤维素等成分被溶解，再 用石油醚、丙酮除去脂肪，剩余的不溶性残渣称 为 ADF，其中包括试样中全部的纤维素、木质素 和少量的酸不溶灰分等成分。NDF 和 ADF 的区 别是前者含有半纤维素，半纤维素含量等于 NDF % 减去 ADF % 含量，因此，NDF 和 ADF 的测定还可以进一步准确地测定出饲料中半纤维 素、纤维素和木质素成分的含量，准确测定饲料 中的各种纤维成分对评定饲料营养价值具有重要 意义。
不同类型酒糟营养成分组成差异的比较研究
收 稿 日 期 ：２０１７ － １１ － ２２ 基金项目：四川省科技支撑计划：牦牛、肉牛专用补饲料研发与示范（ ２０１６ＮＺ０００８） ；国家现代农业（ 肉牛 ／ 牦牛） 产业技术体系（ ＣＡＲＳ⁃３８） 作者简介：李 倩（ １９９１—） ，女，河北石家庄人，硕士研究生，从事反刍动物营养研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ： １５４９８００５７７＠ ｑｑ．ｃｏｍ ∗同等贡献作者 ∗∗通信作者：王之盛，教授，博士生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ： ｚｓｗａｎｇｓｉｃａｕ＠ １２６．ｃｏｍ
酱香型高粱酒糟 Ｍ⁃ＳＤＧ
青稞酒糟 ＨＢＤＧ
玉米酒糟 ＣＤＧ
啤酒糟 ＢＢＧ
容重 Ｂｕｌｋ ｄｅｎｓｉｔｙ ／ （ ｇ ／ Ｌ） ｐＨ 初水 Ｉｎｉｔｉａｌ ｍｏｉｓｔｕｒｅ ／ ％
４４５．９６±２６．６２ｃ ３．６５±０．１８ｃ
５８．４２±４．１７ｃ
５２４． ５０ ± １５． ６１ ａｂ ３．９４±０．１４ｂ
６期
李 倩等：不同类型酒糟营养成分组成差异的比较研究
２３７１
表 １ 不同类型新鲜酒糟物理特性 Ｔａｂｌｅ １ Ｐｈｙｓｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｆｒｅｓｈ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ’ ｇｒａｉｎｓ
项目 Ｉｔｅｍｓ
浓香型高粱酒糟 Ｌ⁃ＳＤＧ
测定；淀粉（ ｓｔａｒｃｈ） 含量参照 ＡＯＡＣ（ ９９６．１１） 标准 方法，使用淀粉含量检测试剂盒测定；ｐＨ 用 ｐＨ 计 测定［９］ 。 矿物 元 素 铁 （ Ｆｅ） 、铜 （ Ｃｕ） 、锰 （ Ｍｎ） 、 锌 （ Ｚｎ） 采用原 子 吸 收 法 测 定； 单 宁 （ ｔａｎｎｉｎ） 含 量 采 用 ＧＢ ／ Ｔ ２７９８５—２０１１ 分光光度法测定；硅（ Ｓｉ） 含 量参照戴伟民等［１０］ 的方法进行测定；霉菌毒素含 量采用酶 联 免 疫 吸 附 测 定 试 验 （ ＥＬＩＳＡ） 试 剂 盒 测定。 １．３ ＣＮＣＰＳ 组分计算方法 ＣＮＣＰＳ 组分计算参照 Ｓｎｉｆｆｅｎ 等［１１］ 提出的计 算方法。 １．４ 数据统计与分析 用 ＳＰＳＳ ２２．０ 进行单因素方差分析以及 Ｄｕｎ⁃ ｃａｎ 氏法多重比较检验，以 Ｐ ＜ ０．０５ 表示为差异显 著，结果以平均值±标准差表四川省（ 成都、宜宾、泸州和乐山）、青 海省（海北、海东和合作）、云南省（ 昆明和临沧）、 河南省（ 郑州） 以及河北省（ 石家庄） 共采集酒糟样 品 ２４ 个， 其 中 浓 香 型 高 粱 酒 糟 （ Ｌｕｚｈｏｕ⁃ｓｏｒｇｈｕｍ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ’ ｇｒａｉｎｓ，Ｌ⁃ＳＤＧ） 样品 ８ 个，酱香型高粱酒 糟（ Ｍａｏｔａｉ⁃ｓｏｒｇｈｕｍ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ’ ｇｒａｉｎｓ，Ｍ⁃ＳＤＧ） 样品 ４ 个， 青 稞 酒 糟 （ ｈｉｇｈｌａｎｄ ｂａｒｌｅｙ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ’ ｇｒａｉｎｓ， ＨＢＤＧ） 样 品 ４ 个， 玉 米 酒 糟 （ ｃｏｒｎ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ ’ ｇｒａｉｎｓ，ＣＤＧ） 样 品 ３ 个， 啤 酒 糟 （ ｂａｒｌｅｙ ｂｒｅｗｅｒｓ’ ｇｒａｉｎｓ，ＢＢＧ） 样品 ５ 个（ 均为大麦啤酒糟） 。 本试验采用几何采样法进行样品采集，将新 鲜酒糟装入密封袋后用保鲜盒带回实验室。 在 ６５ ℃ 烘箱烘干制成风干样，粉碎过 ４０ 目筛用于营 养成分测定，密封保存于 ４ ℃ 备用。 １．２ 测定指标及方法 酒糟样品的容重及初水、干物质（ ＤＭ） 、粗纤 维（ ＣＦ） 、粗蛋白质（ ＣＰ） 、粗脂肪（ ＥＥ） 、中性洗涤 纤维（ ＮＤＦ） 、酸性洗涤纤维（ ＡＤＦ） 、酸性洗涤木质 素（ ＡＤＬ） 、粗灰分（ Ａｓｈ） 、钙（ Ｃａ） 、总磷（ ＴＰ） 含量 等常规营养成分依据《 饲料分析及饲料质量检测 技术》 ［５］ 的标准方法进行测定；无氮浸出物（ ＮＦＥ） 含量通过计算得到；中性洗涤不溶蛋白（ ｎｅｕｔｒａｌ ｄｅ⁃ ｔｅｒｇｅｎｔ ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＮＤＩＰ） 和酸性洗涤不溶蛋 白（ ａｃｉｄ ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ， ＡＤＩＰ） 的 含 量 按照 Ｖａｎ Ｓｏｅｓｔ 氏法进行测定；可溶性蛋白（ ＳＣＰ） 的含量按照 Ｋｒｉｓｈｎａｍｏｏｒｔｈｙ 等［７］ 的方法进行测定； 非蛋白氮（ ＮＰＮ） 的含量参照 Ｌｉｃｉｔｒａ 等［８］ 方法进行
范氏测定纤维素含量法
范氏测定纤维素含量法原理采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理:植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
试剂的配制中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2•2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；1N硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；仪器及试剂试剂仪器操作步骤中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。
范氏测定纤维素含量法.doc
范氏测定纤维素含量法原理采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
试剂的配制中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2•2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和10ml 乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；1N硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml 容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；操作步骤中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。
范式纤维素测定法
附录Ⅱ Van Soest法测定物料中纤维素、半纤维素和木质素的含量原理:植物性样品经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性样品经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
材料：烘干至恒重粉碎并过筛（40目）的水葫芦及其它植物样品试剂：十二烷基硫酸钠（AR）、乙二胺四乙酸二钠(AR)、无水磷酸氢二钠(AR)、硫酸(AR)、十六烷三甲基溴化铵(AR)、乙二醇乙醚(AR)、十氢化萘、无水亚硫酸钠(AR)、丙酮(AR)。
一、实验内容（一）溶剂的配制1、中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）的配制：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2•2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30.0g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；2、1N硫酸溶液的配制：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml 蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；3、酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）的配制：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；4、72%硫酸溶液的配制：（浓硫酸：水=36:13）（二）测定过程详细操作步骤1.中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂。
纤维素、半纤维素、木质素测定
原理采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
试剂的配制中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2•2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）； 1N 硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。
酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维的测定
附：饲料中中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定（附纤维素、木质素的测定）（一）原理饲料养分的常规测定法中存在的重要缺点之一，是测得饲料的粗纤维与无氮浸出物的数值不能反映饲料的真实情况。
测定时粗纤维不是一种纯化合物，而是几种化合物的混合物，其中主要组成是纤维素、半纤维素与木质素。
纤维素与半纤维素具有相似的营养价值，它们的营养价值对反刍家畜较单胃家畜为高。
木质素对全部家畜均不能被消化，但用常规法测定饲料的粗纤维时，饲料中仅有一部分半纤维素和木质素量包括在粗纤维的数值内，其余部分都被计算在无氮浸出物的数值中，且都被认为与糖和淀粉具有同样的消化性能。
由此可见，常规法测得粗纤维的数值不能全部反映饲料中大部分的不消化成分。
由于上述原因，Van Soest氏与其伙伴提出测定饲料中中性洗涤纤维与酸性洗涤纤维的方法，原理为：植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
（二）试剂1．中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠和6.8g四硼酸钠均放入1000mL刻度烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加30克十二烷基硫酸钠和l0mL乙二醇乙醚，称取4.56克无水磷酸氢二钠置于另一烧杯中，加少量蒸馏水微热溶解后倾入第一个烧杯中，再转入容量瓶中稀释至1000mL，此溶液PH值在6.9-7.1左右(PH值一般不需要调整)。
2．酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）制备称取20g十六烷三甲基溴化铵溶于1000mL2.0 mo l·L-1硫酸溶液中，搅拌溶解，必要时过滤。
饲料常规检测方法流程
饲料中粗蛋白（CP ）的测定方法原理各种饲料的有机物质在催化剂的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和氨态氮都转变成氨气，并被浓硫酸吸收变为硫酸铵；其他非含氮物质则以二氧化碳、水、二氧化硫的气体状态逸出。
消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出氨气，通过蒸馏随汽水顺着冷凝管流入硼酸吸收液中，并与其结合成硼酸铵，然后以甲基红—溴甲酚绿作混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定，求出氮的含量，再乘以一定的换算系数（通常用6.25系数计算），得出样品中粗蛋白质的含量。
1．试剂（1）分析纯98％无氮浓硫酸（2）催化剂：OSS 公司成品催化剂（3）400 g/L 氢氧化钠溶液（4）0.1 mol/L 盐酸标准溶液：量取8.3 mL 盐酸定容至1000 mL 水中。
盐酸浓度的标定：称取已恒重（270～300℃，2 h ）的无水碳酸钠0.2 g （精确至0.0001g ）溶于50 mL 水，加入10滴混合指示剂，用新配置好的盐酸滴定至紫红色，煮沸2min 冷却后继续滴定至暗红色，消耗盐酸体积记为V 1（保留小数点后两位）。
同时做空白实验，消耗盐酸体积记为V 0。
10()0.05299m c V V =-⨯（结果保留小数点后四位） （6）混合指示剂：1.0 g/L 甲基红乙醇溶液与等体积5.0 g/L 溴甲酚绿乙醇溶液混合。
（7）磷酸二氢铵（参比物）或硫酸铵（8）硼酸吸收液：1000 mL 10.0 g/L 硼酸溶液溶液中，加入1.0 g/L 甲基红—乙醇溶液7 mL ，5.0 g/L 溴甲酚绿—乙醇溶液10 mL 。
2．仪器（1）实验室用样品粉碎机或研钵（2）感量0.0001 g 的分析天平（3）消煮炉或电炉（4）250 mL 消煮管（5）定氮仪3. 操作步骤（1）试样的选取和制备。
取有代表性试样用四分法缩减至200 g ，粉碎过40目筛，装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质。
液体或膏状黏液试样应注意取样的代表性。
苜蓿干草质量分级产品技术标准要求2023年
苜蓿干草质量分级1 范围本文件规定了苜蓿干草的术语和定义，质量要求，检测方法，检验规则，标签、包装、储存和运输。
本文件适用于本公司采购苜蓿干草的验收质量分级。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本 (包括所有的修改单) 适用于本文件。
GB 13078 饲料卫生标准GB/T 6432 饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法GB/T 6435 饲料中水分的测定GB/T 6438 饲料中粗灰分的测定GB/T 20806 饲料中中性洗涤纤维(NDF)的测定NY/T 1459 饲料中酸性洗涤纤维的测定NY/T 2129 饲草产品抽样技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1苜蓿干草捆 bale of alfala hay苜蓿草经刈割、摊晒、搂草和打捆后形成的草捆。
3.2杂草weed苜蓿干草捆中除苜蓿以外的其他植物。
3.3异物 other material苜蓿干草捆中除苜蓿及杂草之外的其他物质，如铁块、石块、塑料、土块等。
3.4中性洗涤纤维 neutral detergent fiber(NDF)用中性洗涤纤维剂去除饲料中的脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分后，残留的不溶解物质的总称。
3.5酸性洗涤纤维 acid detergent fiber(ADF)用酸性洗涤纤维剂去除饲料中的脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分后，残留的不溶解物质的总称。
4 质量分级4. 1 感官指标应符合表1的规定。
表 1 感官指标4.2 理化指标应符合表2的规定。
表 2 理化指标4.3 卫生标准应符合GB 13078的要求。
5 检测方法5. 1 感官指标检验5. 1. 1 气味将样品解开后嗅其气味。
5. 1.2 色泽将样品平铺在白色背景平面上，用目测法观察色泽。
5. 1.3 形态将样品解开后，目测样品表层和内层中干草形态。
饲料粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维残渣中各成分的研究
饲料粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维残渣中各成分的研究刘磊;李福昌;杨鹏程;张崇玉【摘要】The present experiment was conducted to study the components in residues of crude fibers (CF),neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) in feed.The contents of CF,NDF and ADF in rice bran,wheat bran,white clover,citron leaves,whole corn,whole wheat,Vicia villosa,rabbit feed,sorghum,oat straw,alfalfa,rice straw,triticalehay,Pennisetum hydridum,reed,peanut seedling,soybean stalk and rice husk powder were determined via polyester fiber mesh bag method,and determined the content and recovery of hemicellulose,cellulose,acid detergent lignin and acid insoluble ash in CF residue offeed,meanwhile,also determined the content ofhemicellulose,cellulose,acid detergent lignin and acid insoluble ash in NDF and NDF residues of feed,to research the composition and the relationship between CF and ADF in CF,NDF and ADF residues.The results showed that the recovery of cellulose in CF residue was the highest (71.28％ to105.03％).There was a highly positive correlation between ADF content (y1) and CF content (x1):y1=1.507 1+1.211 5x1(r=0.979 2,RSD=1.863 4,P＜0.01).There was a more correlation between the ADF without acid insoluble ash (Y2) content in ADF residue and CF content (x2) in ADF:y2=2.406 3+ 1.077 0x2(r=0.990 5,RSD=0.962 4,P＜0.01).We propose the accurate calculation method of hemicellulose and cellulose content:hemicellulosecontent =NDF content (without acid insoluble ash)-ADF content (without acid insoluble ash) and cellulose content=ADF content (without acid insoluble ash)-ADL content.%本试验旨在研究饲料粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维残渣中各成分.试验采用聚酯纤维筛网袋法测定了米糠、小麦麸、白三叶、枸树叶、全株玉米、全株小麦、毛苕子、兔配合饲料、高粱、燕麦秸、苜蓿、稻秸、小黑麦干草、皇竹草、芦苇、花生秧、大豆秸和稻壳粉18种饲料的粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量,测定了饲料CF残渣中半纤维素、纤维素、酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量及回收率,同时测定了NDF和ADF残渣中半纤维素、纤维素、酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量,研究了饲料中的CF、NDF和ADF残渣中各成分含量及CF和ADF之间的相互关系.结果表明:所测18种饲料中的纤维素在CF残渣中的回收率最高(71.28％～ 105.03％);饲料ADF含量(y1)和CF含量(x1)之间呈高度正相关:y1 =1.507 1+1.211 5x1(r=0.979 2,RSD=1.863 4,P＜0.01);饲料ADF残渣中去除酸不溶灰分后的ADF含量(y2)和CF含量(x2)之间的相关性更高:)2=2.406 3+1.077 0x2(r=0.990 5,RSD=0.962 4,P＜0.01).由此提出饲料中半纤维素和纤维素含量的准确测定计算方法,即半纤维素含量等于NDF含量(无酸不溶灰分)减去ADF含量(无酸不溶灰分);纤维素含量等于ADF含量(无酸不溶灰分)减去酸性洗涤木质素含量.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2018(030)003【总页数】8页(P1044-1051)【关键词】粗纤维;中性洗涤纤维;酸性洗涤纤维;酸性洗涤木质素【作者】刘磊;李福昌;杨鹏程;张崇玉【作者单位】山东农业大学动物科技学院,山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271000;山东农业大学动物科技学院,山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271000;山东农业大学动物科技学院,山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271000;山东农业大学动物科技学院,山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271000【正文语种】中文【中图分类】S816饲料中粗纤维(CF)含量已被广泛地应用于饲料原料和配合饲料产品标签中的产品成分分析保证值中[1]。
《烟草及烟草制品 中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸洗木质素的测定 洗涤剂法》(报批稿)
100.00
0.01
0.01
样品一
24.09
8.39
31.58
89.29
17.24
8.36
25.08
93.82
1.65
8.32
1.72
0.80
样品二
18.47
8.78
27.38
101.44
12.54
8.46
20.69
96.28
1.56
8.29
1.55
-0.11
注1：酸洗木质素的标样无法获取；
6.6 四硼酸钠（Na2B4O7·10H2O）。
6.7 无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
6.8 乙二醇乙醚（C4H10O2）。
6.9 正辛醇（C8H18O，消泡剂）。
6.10 丙酮（CH3COCH3）。
6.11 98％浓硫酸（质量分数）。
6.12 十六烷基三甲胺溴（C19H42BrN）。
6.13-高温淀粉酶（活性50kU/g）
7.2.4.2 加热结束后，立即进行抽滤，并用（90～100）℃水冲洗管壁和剩余物，直至滤出液无泡沫。
7.2.4.3将热浸提后的试样和坩埚放在纤维分析仪的冷浸提单元上，用丙酮(6.10)冲洗剩余物3次，确保剩余物与丙酮充分混和，至滤出液无色为止。
7.2.4.4抽干后将坩埚和剩余物放入（105±2）℃烘箱中烘干3～4h至恒量。在干燥器中冷却后称量。再烘干30min，冷却，称量，直至两次称量之差小于0.002g。记录坩埚和剩余物的总重为m5。
烟草及烟草制品中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸洗木质素的测定
洗涤剂法
11
12
本标准规定了烟草及烟草制品中中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸洗木质素含量的洗涤剂测定方法。
饲料粗纤维测定资料ppt课件
自1996年以来，在世界上75个国家广泛的应用（美 国、法国、加拿大、意大利、澳大利亚等）。
.
9
自动纤维测定仪（NDF、ADF） ——美国产
.
10
滤袋技术分析纤维的优点
采用滤袋技术分析粗纤维时，省去了抽滤，而且 可批量进行测定。归纳以下优点：
加少量经过处理的石棉，方便抽滤。
.
26
五、溶液的配制
1、氢氧化钠（NaOH）分析纯：
﹡配制100ML 0.313N NaOH—称固体NaOH多少 克？
称12.5克NaOH溶于100ML蒸馏水中。
﹡标定NaOH（用0.1NHCL反滴定）
量取20ML上述 配制的NaOH溶液—加2滴
0.1%甲基红指示剂—用0.1NHCL溶液滴定ML
，所余量称为粗纤维。 ◆粗纤维它不是一个确切的化学实体，只是在公认强
制规定条件下测出的概略成分，其中是以纤维素为 主，但还有少量的半纤维素和木质素。
.
15
酸、碱处理的目的
1、用0.255N稀硫酸处理： 1）硫酸可水解饲料中全部淀粉和大部分半纤维素； 2）硫酸并可水解饲料中部分蛋白质； 3）硫酸并可溶解部分碱性物质和全部植物碱；
溶解物 （纤维素）
烧尽（逸出） 酸性洗涤木质素（ADL） .
残渣 （灰分、硅酸盐）
Van Soest纤维素 分析方案
8
滤袋技术在纤维测定中的应用
滤袋技术（FBT）是20世纪90年代初发展起来的一 种简便易行，高效准确分析技术。
该项技术目前主要应用于饲料和食品中粗纤维 （CF），中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维 （ADF）的测定。
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饲草试样制备及常规成分检测技术规程：酸性洗涤木质素
（ADL）测定
1范围
本文件规定了饲草中酸性洗涤木质素（ADL）的测定。
本文件适用于草捆、草粉、草颗粒、草块、鲜草和青贮饲料等饲草产品。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中：注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T14699.1饲料采样
NY/T2129饲草产品抽样技术规程
DB37/T2969—2017饲草中酸性洗涤纤维（ADF）的测定
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
酸性洗涤木质素（ADL）aciddetergentlignin
经酸性洗涤剂和浓酸处理，剩余的残留物去除灰分，即为酸性洗涤木质素（ADL）。
4原理
饲草试样脱脂后在规定温度下分别经酸性洗涤剂和浓酸处理,分解脂肪、蛋白质、糖类、半纤维素、纤维素等大部分物质，并经灰化去除剩余残留物中的灰分，获得酸性洗涤木质素（ADDo
5试剂或材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水符合GB/T6682三级水的规定。
5. 1丙酮（CH3COCH3）o
5.2 硫酸溶液C（1/2H2SO4）：1mol∕L,按照GB/T601配制，并标定。
5.3 12.0mol∕L硫酸（H2SO4）洗涤溶液：取66
6.0mL浓硫酸缓缓倒入30OmL水中，冷却后用水定容至1OoomLo
5. 4酸性洗涤剂:称取20g十六烷基三甲基浪化钱（CJigNBnCTAB）溶解于1OOomL1mol/L硫酸溶液C（1/2H2SO4）中,适当加热搅拌溶解。
5.5 滤袋：孔径小于45μm,可封口，并能迅速渗透的特制无纺布滤袋。
5.6 干燥袋：内置干燥剂的拉口密封袋。
注：十六烷基三甲基溟化钺对黏膜有刺激，丙酮是高挥发可燃试剂，置入干燥箱干燥前，确保其已完全挥发。
6仪器设备
6. 1电子分析天平：感量0.0001go
6.5 干燥箱。
6.6 全自动纤维分析仪：能自动加入洗涤溶液，并排除废液，消煮温度控制在100C±
0.5℃,压强保持68.95KPa〜172.375KPa0
6.7 高温炉。
6.8 手压式封口机。
7样品
鲜草应按GB/T14699.1规定，其它饲草应按YY/T2129规定，并按照本标准第1部分进行试样制备。
8试验步骤
已按照DB37/T2969要求酸洗后的样品，从8.5开始操作。
未经酸洗的样品，则从8.1开始操作。
8.1 称样
平行做两份试验。
用标记笔给滤袋编号，称滤袋重（m1,精确至0.000lg）O称取试样0.45g〜0.55g（叱，精确至0.0001g）,小心倒入滤袋底部，避免样品粘在封样线以上。
同时称取空白滤袋重（血，精确至0.0001g）。
8.2 封口
用封口机在距滤袋口4mm处封口。
8.3 脱脂
将装有样品的滤袋放入250InL的烧杯中，加入足量的丙雨直至覆盖滤袋，浸泡并振荡10min,倒出，重免3次。
脱脂脱色过程在通风橱中进行。
8.4 酸性洗涤剂处理
按照DB37/T2969—2017中第8章规定。
8.5 浓酸处理
将经酸性洗涤剂处理后的干燥剩余物连同滤袋一起放入干燥的2L烧杯中，加入12.0mol/L硫酸洗涤溶液（5.3）至漫过滤袋，搅拌。
将25OmL干燥的锥形瓶放入2L烧杯内，多次提压，使硫酸溶
液充分浸润滤袋内样品，取出锥形瓶，消解3h。
取出滤袋，用热水淋洗至中性。
注：滤袋、烧杯及锥形瓶必须完全干燥。
8.6 烘干
将滤袋放入103°C干燥箱中烘干4h,取出滤袋,装入干燥袋,放置干燥器中冷却至室温，称量
（m3,精确至0.0001g）。
8.7 灰化
将滤袋放入已恒重并称重（m1,精确至0.00Olg）的蛆烟（30πιL）中，在550℃的高温炉中灼烧
3h,取出后在干燥器内冷却至室温，称量（叱，精确至0.0001g）。
9数据处理
试样中酸性洗涤木质素（ADL）的含量以质量分数3计，数值以%表示，按式（1）计算：
Γ（m,-m,×c.）-（m s-m4）］
3=^~!~__i<l×100%...........................................................................
m2
式中：
IDi-- 滤袋的质量，单位为克（g）；
叱-- 试样的质量，单位为克（g）；
叱一一硫酸洗涤后滤袋烘干质量，单位为克（g）；
Hii-- 蛆埸质量，单位为克（g）;
ms -- 灰化后生埸和灰分质量，单位为克（g）;
G^一一校正因子，空白滤袋因素（硫酸消煮后空白滤袋烘干质量/原空白滤袋质量加）。
结果以平行测定值的算术平均值表示，保留小数点后2位有效数字。
10精密度
在重复性条件下，两次平行测XX果的绝对差值不大于这两次测XX果算术平均值的10%。