动力学分光光度法的基本原理及测定方法

动力学分光光度法的基本原理及测定方法

动力学分光光度法是利用反应速率与反应物，产物，催化剂浓度间的定量关系，通过测量吸光度对被测组分定量的一种方法。下面测定反应体系中催化浓度为例，介绍动力学分光光度法的基本原理及测定方法。

设一个在催化剂（F）的作用下进行的显色反应：

若D为有色化合物，则D的生成速率（显色反应速率）可表示为：

在反应进行的初期，A,B的浓度较大，反应小号的A和B可忽略不计，则可视为常数：

由CF变化也很小，可视为常数，上式积分得：

将上式代入朗伯比尔定率，有：

此式即为动力学分光光度法的基本关系式。

测定催化剂（F）的方法通常有固定时间法，固定浓度法和斜率法三种，固定时间发是让反应进行一固定时间后终止，然后测量反应体系的吸光度（A）:

不同的催化剂浓度(cF)测得相应反应体系的A值，做出校准曲线，然后由加入试样的反应体系的A值求出试样中F的浓度。

固定浓度法是测量产物(D)达到一定浓度所需的时间，此时式中的CD为常数，则：

同样地可以作出校准曲线，由试样体系的t值求出催化剂（F）的含量。

斜率法是根据吸收光度(A)随反应时间的变化速率来测定CFO根据关系在不同的CD下测得A-t曲线，分别求出其斜率值。作出KCF-CF校准曲线。斜率法的校准曲线由更多的实验数据获得，因而其准确度较高。

动力学分光度法具有灵敏度高，选择性好，应用范围较广等等特点，主要缺点是影响因素多，不宜严格控制，测定的误差较大。