单胺氧化酶酶活测试
血清单胺氧化酶活性测定在肝病患者诊断中的应用价值
有助于肝病的诊断和鉴别诊断 ， 对肝硬化 、 急性肝坏死有重要诊断价值 。
【 关键 词 】 单胺 氧 化 酶 ； 肝 硬 化 ； 肝 炎 ； 肝 疾 病
维普资讯
国际检验医学杂志 ２０ 年 １月第 ２ 卷第 ｌ期 ｌｔ ａ ｄＪｎａｙ２０ 。 ｏ．７Ｎ ． （６ ３ ７ ｎ Ｊｌ ｂＭｅ ， ｕｒ ０６Ｖ １ 。 ｏ１ ａ ２
・
８ ・ ９
・
经 验 交 流
・
血清单胺氧化酶活性测定在肝病 患者诊断 中的应用价值
的扭 曲相 关 密 切 ， 酶 的 测 定 对 肝 坏 死 性 肝 病 患 者 肝 纤 维 化 状 此
２ １ 各 类 肝 病 患 者 与 正 常 对 照 组 ＭＡＯ 检 测 结 果 的 比 １例 较 ， 表 １ 见 。
况 具 有 临床 监 测 意 义 ［ 。慢 性 迁 延 性 肝 炎 阳 性 率 为 ４ ． ； ３ ］ ４１
诊和住院肝病患者 ， ２ ０ 按 ０ ０年 ９月西 安会议 中华 医学 会传 染 病、 肝病 学分会联 合修订 的病毒性肝 炎防治方案的标准诊断与
分 析 ， 硬化 按 Ｃ ｉ ｌｇ 肝 ｈｌ Ｐｕ ｈ标 准 分级 。 ｄ
２ 方法和仪器 ：１标本 采集 ． （） 抽取空腹静脉血 ３ ０ 分离 ． ｍ１ 血清待检 。（ ） ２ 检测试剂及方法 ： 采用 中美 合资 苏州艾 杰生 物
科 技 有 限 公 司 生 产 的 血 清 单胺 氧 化 酶 测 定 试 剂 盒 ， 格 按 试 剂 严
活性 明 显增 高 。 在 ２ 中 有 ２ ５例 ２例 Ｍ Ａ ） 显 增 高 ， 性 率 达 ｒ明 阳
肝病患者血清单胺氧化酶活性测定及临床意义
李福 刚， 吾柏铭． 冠心病患者血小 板活化状 态的观察 ［ Ｊ ］ ．
中华 内科 杂 志 ， １ ９ ９ ３ ， ３ ２ （ １ ） ： １ ７ － ２ ０ ．
髓 中 巨核 细 胞 的增 生 及 生 成 血 小板 的情 况 ， 并 与 循 环 中血 小板 寿命 、 功 能 密 切 相 关 。在 血 栓 形 成 过 程 中 消 耗 血 小 板 ， 引 起 血 小 板 数 目下 降 ； 另一方面 ， 骨 髓 巨核 细胞 紧 急 动 员 ， 释 放 较 大 的 新 生 血 小 板 至血 液 ， 使 血 液 中血 小 板 大 小 不 等 ， 进而导致 Ｐ Ｄ Ｗ 增大［ ５ 。 ］ 。 这说 明 血 小 板 体 积 变 化 和 活 化 直 接 参 与 了 急性 心 肌 梗 死 的 发病 的 过 程 ］ 。因 此 监 测 冠 心 病 患 者 血 小 板 参 数 的 变 化 对冠 心 病 的 防 治 具 有 重 要 的 临 床 意 义 。
５ ２１１ ．
循 环 中 的 血 小 板 主 要 来 源 于 骨 髓 成 熟 的 巨 核 细 胞 。 体 积 大的血小板为新生血小板 ， 比正常血小 板更具 活性 ， 代 谢 和 功 能更 旺 盛 ， 极 易 形 成 血 栓 。随 着 血 小 板 存 活 时 间 延 长 ， 血 小 板
曹铭华 ， 李 秀松 ， 沈 志祥． ３ ５例 急 性 白血 病 患 者 化 疗 期 平
ＭＰ Ｖ 是评 价 血 小 板 功 能 和 活 性 的指 标 ； ＭＰ Ｖ 大小 反 映ｕ ｔ ｔ ｅ ｒ ｗｏ ｒ ｔ ｈ Ｒ Ｊ ．Ｐ ｌ ａ ｔ ｅ ｌ ｅ ｔ ｓ ｉ ｚ ｅ ： ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｍｅ ｎ ｔ ，
单胺氧化酶(MAO)—生化检测项目
单胺氧化酶（MAO）
一、检测原理
基质中的苄胺在血清MAO作用下产生NH3，NH3在谷氨酸脱氢酶作用下与a-酮戊二酸和NADH反应，在340nm波长处，通过测定NADH吸光度的变化，从而求得样品中MAO 的活性。
二、参考区间
血清：小于12U/L
三、临床意义
1、单胺氧化酶含有铜离子，分布在肝、肾等组织的线粒体中，其含量依次为肝、心、肾、脑、肺、骨骼肌，血小板和胎盘中也含有单胺氧化酶。
2、病理性增高
（1）肝炎急性肝炎单胺氧化酶活性可正常或稍增高，而当有大块肝坏死，血液中单胺氧化酶会明显增高；慢性肝炎在无活动性肝细胞损害的情况下，单胺氧化酶多属正常，但当
有活动性肝细胞损害时，单胺氧化酶亦增高。
（2）肝硬化70%～80%重症肝硬化患者单胺氧化酶增高，而且与肝硬化结节程度呈正相关，但对早期肝硬化并不敏感。
（3）肝外疾病如甲状腺功能亢进症、系统性硬化症、慢性充血性心力衰竭、糖尿病，单胺氧化酶也可升高。
3、病理性降低常见于：烧伤、高尿酸血症。
血清单胺氧化酶(MAO)的检测及临床意义
血清单胺氧化酶（MAO）的检测及临床意义一、概述单胺氧化酶(monoamine oxidase，MAO)是一组催化多种单胺类化合物氧化脱氨的酶，广泛分布于肝、肾、胃、小肠和脑等组织中及细胞线粒体内，主要参与生物活性胺类物质的代谢灭活。
MAO催化胺类物质氧化脱胺，进而生成醛而灭活，进而被醛脱氢酶或醛还原酶催化生成酸或醇排出体外。
血清中MAO和结缔组织中的MAO性质相似，能促进结缔组织的成熟。
在胶原形成过程中，参与胶原成熟的最后阶段架桥的形成，使胶原和弹性硬蛋白相结合。
二、检测方法1、血清MAO测定有化学比色法、速率法等，目前应用较多的是速率法。
2、速率法原理：血清MAO催化苄胺的氧化反应，生成苄醛、过氧化氢和氨，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下与α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，同时转化NADH为NAD+，通过监测340nm波长处NADH吸光度的下降速率测定MAO活性。
三、参考区间血清MAO：12～40U/L。
不同方法测定结果可能有一定差异。
四、临床意义1、血清单胺氧化酶对诊断肝硬化和肝纤维化有一定的价值。
肝硬化时，MAO活性升高的阳性率可以高达80%以上，且活性升高与肝表面结节形成的进程相平行。
如果肝癌患者MAO增高，表明该患者同时伴有肝纤维化。
2、各型肝炎急性期患者的血清MAO活性多不升高，但急性重型肝炎时，因肝细胞坏死，线粒体释放大量MAO，可导致血清MAO活性升高。
3、肢端肥大症、结缔组织病、严重脂肪肝、慢性右心衰竭伴肝淤血等，血清MAO均会增高。
4、MAO增高还见于阻塞性黄疸、甲状腺功能亢进症、糖尿病、心功能不全及各种胶原性疾病等。
5、精神分裂症患者MAO明显降低，服用避孕药、肾上腺皮质激素、左旋多巴肼类等药物可引起MAO活性降低。
五、注意事项1、溶血不影响酶的测定结果2、标本在4℃时可稳定3d。
3、样本中氨浓度大于50umol/L，可能导致血清MAO检测结果假阳性4、个体血清MAO活性较易波动，故应多次测定5、若MAO活性超过80U/L，应将样品稀释后重新测定。
单胺氧化酶检测方法
单胺氧化酶检测方法嘿，朋友们！今天咱来聊聊单胺氧化酶检测方法。
你说这单胺氧化酶啊，就好像是身体里的一个小“侦探”，它的情况能透露出好多健康的秘密呢！那怎么检测这个小“侦探”呢？咱先说说酶活性检测吧。
这就好比是要抓住这个“小调皮”，看看它有多活跃。
通过一些特定的化学反应，观察反应的快慢呀、产物的多少呀，就能大致知道单胺氧化酶的活跃程度啦。
这就像是你观察一个孩子玩游戏，看他玩得有多起劲儿，就能知道他对这个游戏有多感兴趣一样。
还有一种检测方法是检测单胺氧化酶的含量。
这就像是数数家里有多少个特定的玩具一样，直接知道数量的多少。
用专门的试剂和仪器，就能把单胺氧化酶的量给测出来啦。
你想想啊，要是能准确知道单胺氧化酶的情况，那医生们不就像有了一双“透视眼”，能更好地了解我们身体的状况啦？这多重要啊！就好像你知道自己的车子哪里出了问题，才能更好地去修理它呀。
检测的时候可不能马虎哦！就像做饭一样，调料放错了或者火候不对，那做出来的菜可就不好吃啦。
检测也是一样，每一个步骤都要认真对待，不然得出的结果可就不准确了。
而且啊，不同的检测方法都有各自的特点和适用情况呢。
这就跟不同的工具一样，有的适合拧螺丝，有的适合敲钉子。
咱得根据具体的需求来选择合适的检测方法。
咱再说说检测的环境和条件。
这就好比植物生长需要合适的阳光、温度和水分一样，检测也需要合适的环境和条件。
要是温度不对啦，试剂过期啦，那结果能准吗？那肯定不行啊！总之呢，单胺氧化酶检测方法可真是个大学问。
咱得重视起来，让它为我们的健康服务。
可别小看了这个小小的检测哦，它说不定能在关键时刻发挥大作用呢！它能帮医生更好地诊断疾病，帮我们更好地了解自己的身体。
所以啊，大家一定要认真对待单胺氧化酶检测呀！。
单胺氧化酶的制备及活性测定
２ 江南大学食 品学 院／ 品科学与技术 国家重点实验室 ， ． 食 江苏无锡 ２ ４ ２ ） １ １２
摘要 ： 利用 经改 良的低温差速离心法 ， 老龄 雄性大 鼠肝组 织 内提 取单胺 氧化酶 。通过该 方法所 制备 的肝组织 从
学 试 剂 公 司 ） 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
肝脏 ， 在预冷 的磷酸钾缓冲液 （ ． ｏ Ｌ，Ｈ值 ７ ６ 中洗 涤 ０ ２ｍ ｌ ｐ ／ ．） 后， 贮存于 一８ ５℃待用。肝 组织 （ ） １ｇ： ０ ｍ ５ｇ 以 ４ Ｌ的 比例 在 ０ ３ｍ ｌＬ蔗糖溶液 中匀浆 ， ． ｏ ／ 采用低 温差速 离心法分 离线 粒体 ： 将匀浆置于低温高速离心机 １００ｇ离心 １ ｉ， ０ ０ ｍｎ 弃沉 淀， 上清液 经 １ ０ 心 ３ ｉ， ００ ０ｇ离 ０ｍｎ 沉淀 即为提取 的肝脏粗线 粒体 ， 整个 过程 温 度控 制 在 ０～４℃ 。将沉 淀 重 悬 于 ４ ｍ Ｌ
－－—
—
３ ２． ７ ． — —
江苏农业科学
２ １ 年第 ３ ０１ ９卷第 ３期
王
豪， 周凌华 ， 徐致远 ， 等．单胺氧 化酶的制备及 活性测定 ［］ Ｊ ．江苏农业科 学， １ ， （ ） ３２— ７ ２ １３ ３ ： ０ ９ ７ ３３
单胺 氧化酶 的制备 及活性测定
王 豪 ，周凌 华 ，徐 致远 ，王荫榆 ，郭本 恒 ，陈 卫
方法 并加 以改 进 ， 大 鼠 的肝 组 织 匀 浆 中 分 离 得 到 初 级 纯 化 从 的 ＭＡ 。Ｗｉａ 雄性 老年 大 鼠通 过 断 髓 致 死 ， 菌 操 作 取 出 Ｏ ｓｒ ｔ 无
单胺氧化酶活性测定方法及单胺氧化酶诊断试剂盒[发明专利]
![单胺氧化酶活性测定方法及单胺氧化酶诊断试剂盒[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a4e02ff852d380eb63946d71.png)
专利名称：单胺氧化酶活性测定方法及单胺氧化酶诊断试剂盒专利类型：发明专利
发明人：王尔中
申请号：CN200410066191.8
申请日：20041213
公开号：CN1789429A
公开日：
20060621
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及单胺氧化酶活性的测定方法及其诊断试剂盒，以苄胺、对苯甲胺－β－偶氮萘酚、丁基胺、戊基胺、β－苯乙基胺、酪胺等胺类化合物作为底物，与单胺氧化酶反应生成相应醛类产物，再偶联醛脱氢酶，将氧化型辅酶反应成还原型辅酶，通过测定主波长340nm处吸光度的上升速度定量反映出样品中单胺氧化酶的活性大小。
该方法特异性高，不受内、外源物质的污染，测试结果精确、准确性好。
将诊断试剂盒制成双剂或三剂可减少各成分的交叉影响，保持试剂的稳定性，便于长期储存。
该方法在普通紫外/可见光分析仪或者半自动/全自动生化分析仪上便可快速检测，不需要特殊或额外仪器，测试成本低廉，便于行业内推广应用。
申请人：苏州艾杰生物科技有限公司
地址：215021 江苏省苏州市工业园区科技园(机场路328号122B)
国籍：CN
代理机构：南京苏科专利代理有限责任公司
代理人：姚姣阳
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血清单胺氧化酶(MAO)活性测定及意义
血清单胺氧化酶（MAO）活性测定及意义单胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO），为催化单胺氧化脱氨反应的酶，作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺，也作用于长链的二胺。
对所谓生物胺，即酪胺、儿茶酚胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素等也有作用。
此酶多见于脊椎动物的各种器官，特别是分泌腺、脑、肝脏，但在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在。
在细胞内存在于线粒体外膜上，是不溶性酶。
含FAD。
1-异烟酰-2-异丙基肼（iproniazid）、β-苯基异丙基肼（pheniprazine）等药物对此酶有强烈的竞争性的阻抑作用，称为MAO抑制剂，但如果给动物，则可提高脑中去甲肾上腺素和5-羟色胺等单胺的浓度，造成行动的刺激。
所以认为单胺氧化酶具有调节生物体内胺浓度的功能。
MAO有MAO-Ⅰ、MAO-Ⅱ及MAO-Ⅲ三型，血清MAO-Ⅰ活性升高常见于器官纤维化，特别是肝硬化和肢端肥大症；血清MAO-Ⅱ活性升高常见于大面积肝坏死。
1．正常参考值：健康成人血清MAO活性小于36 U/L。
2．临床意义：MAO为广泛分布于肝、肾、胃、小肠及脑组织中的酶，在细胞内定位于线粒体膜外。
血清MAO活性测定是检查肝纤维化病变的重要指标。
纤维化发生在汇管区之间或汇管中心区之间时，MAO活性明显增高，阳性率在80%以上；在假小叶周围有广泛纤维化形成时，则几乎全部增高，且升高同幅度最大。
纤维化病变侵入肝实质内时，升高率仅为30%。
血清MAO-Ⅰ活性升高主要见于肝硬化和肢端肥大症；而MAO-Ⅱ升高则主要见于大面积肝坏死。
器官纤维化患者血清MAO活性升高与结缔组织代谢亢进有关；爆发性肝炎患者血清MAO活性升高与MAO从坏死的肝细胞线粒体上脱落有关。
因此，爆发性肝炎、重症肝细胞坏死时，线粒体的MAO释放，血清中该酶活性增高，阳性率可达73%以上。
SERS光谱检测单胺类氧化酶活性
第４０卷，第１０期 光谱学与光谱分析Ｖｏｌ．４０，Ｎｏ．１０，ｐｐ１１７－１１８２ ０ ２ ０年１ ０月 Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ ａｎｄ Ｓｐｅｃｔｒａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｏｃｔｏｂｅｒ，２０２０ ＳＥＲＳ光谱检测单胺类氧化酶活性刘亚文，马 昊，韩晓霞，赵 冰＊吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室，吉林长春 １３００１２摘 要 单胺类氧化酶是动物体内一类重要的含有黄素腺嘌呤二核苷酸（ＦＡＤ）的线粒体外膜蛋白，可以降解儿茶酚、血清素等单胺类神经递质，其表达水平和活性的高低与一些纤维化疾病、抑郁症、老年精神疾病等有关。
对氨基苯硫酚（ＰＡＴＰ）作为探针分子在表面增强拉曼散射（ＳＥＲＳ）光谱研究中被广泛地使用。
ＭＡＯ可以将单胺类底物氧化成醛，进而与ＰＡＴＰ的氨基发生席夫碱反应。
通过自组装方法得到了银（Ａｇ）纳米粒子－ＰＡＴＰ芯片，用以检测ＭＡＯ催化产生的醛基产物，以达到体外甚至临床检测ＭＡＯ酶活力水平的目的。
关键词 ＭＡＯ；ＳＥＲＳ；ＰＡＴＰ；Ａｇ纳米粒子；酶活力文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－０５９３（２０２０）１０－０１１７－０２ 收稿日期：２０２０－０３－３０，修订日期：２０２０－０７－１０ 基金项目：国家自然科学基金项目（２１７７３０８０，２１７１１５４０２９２，２１７７３０７９）资助 作者简介：刘亚文，１９９３年生，吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室博士研究生＊通讯联系人 ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｏｂ＠ｊｌｕ．ｅｄｕ．ｃｎ 单胺类氧化酶（ｍｏｎｏａｍｉｎｅ ｏｘｉｄａｓｅ，ＭＡＯ）有Ａ和Ｂ两种亚型［１－２］，属于同工酶，有接近７０％相同的氨基酸序列，各自特异性以及相同的底物，与两种酶独特的活性位点有关。
我们选用色胺（ｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ，ＴＡ）作为两种酶共同的底物，ＴＡ可以被ＭＡＯ氧化成吲哚－３－乙醛。
采用经典的Ｌｅｅ和Ｍｅｉｓｅｌ的方法［３］制备了Ａｇ纳米粒子，并通过ＰＤＤＡ组装到羟基化的玻璃片上，随后将Ａｇ组装膜浸泡在一定浓度的ＰＡＴＰ中４ｈ，得到Ａｇ ＮＰＳ－ＰＡＴＰ芯片。
中元单胺氧化酶检测方法
中元单胺氧化酶检测方法中元单胺氧化酶（MAO-B）是一种在人体内广泛存在的酶，它参与了许多生理和病理过程。
因此，MAO-B检测成为了一种重要的临床检查手段，下面我们来详细介绍一下MAO-B检测的方法。
一、MAO-B检测方法介绍1、酶测法酶测法是MAO-B的检测常见方法之一。
它基于MAO-B对特定底物的催化作用，测定底物的反应物质生成量来确定MAO-B的含量和活性。
其中，活性MAO-B的含量通常是用比较其与内标物之间的信号强度来计算的。
2、免疫测法免疫测法是一种依靠特异性抗体与MAO-B结合的检测方法。
首先，利用特定的免疫反应从样品中纯化或富集MAO-B，再通过ELISA（酶联免疫吸附试验）或western blot（蛋白质免疫印迹）等方式来检测分离出的MAO-B。
这种方法具有高度的特异性和灵敏性，常用于MAO-B的检测。
二、MAO-B检测的研究进展近年来，随着科技的发展，MAO-B检测方法不断得到更新和发展。
其中，基于质谱技术的MAO-B检测方法已成为重要的研究领域。
1、多反应监测（MRM）法MRM法是一种能够同时检测多种MAO-B底物的质谱方法。
通过选择不同的MAO-B底物和内标，可以从复杂的样品中提取出MAO-B，进而进行定量的分析。
相比传统的ELISA等方法，MRM法更加灵敏和准确，可用于MAO-B的高灵敏度检测。
2、大规模分析方法对于现代分析技术的需求，大规模分析方法成为了研究热点之一。
利用大规模分析方法，可同时对多个样品中的MAO-B进行高通量筛查，并挖掘更多MAO-B的相关信息。
三、MAO-B检测的应用价值MAO-B检测在多种疾病的诊断和预后中具有重要应用价值。
如早期的帕金森病和阿尔茨海默病等，MAO-B活性的检测可以帮助确定初期病理变化并进行治疗性干预；另外，MAO-B的检测还可以预测某些疾病的风险和预后，如风湿性关节炎等。
总之，MAO-B检测是一种重要的临床检查手段，在现代医学领域中具有广泛的应用前景。
用Modular生化分析仪测定单胺氧化酶活性
用Modular生化分析仪测定单胺氧化酶活性靳仙宝;邵贝贝;李向东;崔晓风【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2010(031)009【摘要】@@ 单胺氧化酶(MAO,EC 1,4,3,4)是机体内参与单胺类物质代谢的主要酶类,主要存在于机体细胞内线粒体外膜上[1].由于单胺类物质在机体内具有重要的生理活性.因此,MAO的作用表现得十分重要.研究表明,MAO活性异常,可引起机体多种功能障碍,形成疾病状态,但目前该酶在临床上的应用还主要是通过检测血清MAO活性辅助诊断肝硬化,其他方面报道甚少.MAO活性的测定方法有速率法和终点比色法[2],前者可以通过生化分析仪实现自动化分析,后者只能通过手工操作来完成.因罗氏公司的Modular生化检测系统未提供MAO的试剂及程序,其他厂商的MAO试剂盒也未提供有关Modular生化分析仪的试验参数.为此,根据工作需要,我们建立起了Modular生化分析仪MAO活性测定程序,经验证完全满足临床实验诊断和基础研究的要求.【总页数】2页(P1032-1033)【作者】靳仙宝;邵贝贝;李向东;崔晓风【作者单位】山东省千佛山医院检验科,济南,250014【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.罗氏Modular全自动生化分析仪测定血尿素氮、肌酐及尿酸的性能评价 [J], 龚燕;卢仁泉;郭林2.Roche Modular PPI全自动生化分析仪测定Glu的性能评价 [J], 李倩珺n;吴晓宾;柯培锋3.Roche Modular DPP全自动生化分析仪与Vitros350干片式生化仪测定心肌酶结果的比对与校正 [J], 段厚全4.酶学指标检测验证罗氏Modular P800全自动生化分析仪性能的分析 [J], 雷忠英; 张梅香; 李春梅; 张露; 焦梅5.罗氏Modular P800全自动生化分析仪使用低密度脂蛋白胆固醇试剂对载脂蛋白A1检测比色杯携带污染的干扰效应 [J], 刘冬冬;徐建华;张嘉琪;宋莹;胡剑;尚陈宇;石文;林莉;林海标;黄译乐因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
单胺氧化酶(MAO)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-5117
单胺氧化酶（MAO）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-5117规格：50T/48S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体60mL×1瓶2-8℃保存提取液二液体60mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体110mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体6mL×1瓶2-8℃保存产品说明：MAO（EC1.4.3.4）包括MAO-A和MAO-B，是一种结合在线粒体外膜上的黄素蛋白，可催化神经递质和生物胺氧化脱氨。
单胺氧化酶与机体老化有关，被认为是衰老的标志，其主要存在于脊椎动物的各种器官，特别是分泌腺、脑、肝脏，在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在催化单胺类物质代谢，含量较低，具有重要的生理功能。
MAO催化单胺类底物脱氨生成相应的醛，进一步氧化成酸，底物在360nm处有特征吸收峰，通过测定360nm处光吸收下降的速率，可计算MAO活性。
Monoamine Substrate(360nm)MAO Acids注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱中、可调式移液器、1mL石英比色皿、震荡仪、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、临用前根据实验用量取出部分提取液一、提取液二和试剂一置于4℃预冷30min。
2、组织：按照样本质量（g）：提取液一体积（mL）为1:5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液一）加入提取液一，冰浴匀浆；1000g4℃离心10min，取上清，将上清液转移至预冷的离心管，于10000g，4℃离心30min。
弃上清，沉淀中加入1mL预冷的提取液二，振荡混匀，于16000g，4℃离心40min，弃上清，加入1mL试剂一，振荡混匀，置冰上待测。
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单胺氧化酶酶活的测试
作者：陈志坚
1 准备工作
0.2M pH=7.6的缓冲液的制备：A：B=87：13（抽滤冰箱后使用）
0.2M Na2HPO4：35.82g Na2HPO4于500mL蒸馏水溶解（A）
0.2M NaH2PO4：15.605g NaH2PO4于500mL蒸馏水溶解（B）
0.3M蔗糖：10.268g蔗糖，加入100mL缓冲液
2 酶液制备
将1只雄性wista大鼠脱颈椎处死，取出其肝脏，用预冷的磷酸缓冲液冲洗肝脏表面。
将肝脏剪碎，用磷酸缓冲液(pH=7．6)洗涤数次以冲洗去血水，待洗涤干净后，加入20 mL，0．3 M蔗糖缓冲液进行匀浆，充分匀浆后，各取10 mL倒入两个50 mL离心管中。
用20 mL，o．3 M蔗糖缓冲液洗涤匀浆器后，各取10 mL倒入前面所述的离心管中。
经托盘天平配平(误差不能超过0．01 g)后进行低温差速离，在-4℃下，1000×g离心10 min。
吸取上清液，将上清液配平，1200×g离心15 min，吸取上清液，将上清液配平，10000Xg离心30 min，弃去上清液，沉淀加4 mL的磷酸缓冲液混匀，得到Wistar大鼠肝脏线粒体浓缩物，即为实验用单胺氧化酶。
3 酶活性抑制测试
所提取的酶液按照1:3倍稀释（体积比），并进行超滤。
（2只小鼠肝脏，最后我们拿到4mL 酶原液，那我们就稀释到12mL使用）
3.1 配药液
配药液（浓度为100μmol/L）= (Mw *10-7 g/ml）：x/(10-7*M)=Y 【X】克晶体，用【X*107/MW】ml溶剂溶解x为晶体质量，M为晶体的相对分子质量，Y为溶剂的体积。
例如：称出晶体质量为0.0010g，M=341，则溶解它的溶剂（DMSO:水=1:1）Y就为
Y=0.0010/（10-7*341）=29ml，用29ml的（DMSO:水=1:1）溶剂溶解0.0010g的晶体。
3.2 底物、显色液
底物：2.5mM酪胺，0.2M pH=7.6的PBS配制；
显色液：1Mm香草酸，0.5mM 4-氨基安替吡啉，4U/mL辣根过氧化物酶，0.2M pH=7.6的磷酸缓冲液配制。
3.3 酶活测试
3.3.1 空白时间测定
在96孔酶标板中加入25uL酶液，25uL缓冲液，37℃孵育1h，后加入160uL底物，再加入40uL显色液，开始计时，37℃孵育30-60min后，用酶标仪在490nm波长下测定其吸光度值，重复该过程直至吸光度值保持不变（或者溶液变为红色），记录时间为T空白。
3.3.2 样品测试
在96孔酶标板中依次加入25uL待测样品药液，25uL酶液，37℃孵育1h，后加入160uL底物，再加入40uL显色液，开始计时，37℃孵育30-60min，用酶标仪在490nm波长下测定其吸光度值，看其到达空白对照吸光度值时所用的时间为T样品。
实验时加一组阴性对照：把25uL药液换成25UlDMSO:H2O=1:1。
据下式计算抑制率：
抑制率=（T样品-T空白）/T样品*100%
注：空白组用25uL磷酸缓冲液(pH=7.6)代替25uL样品溶液。
当样品组的吸光度值达到跟空白组一致时即为样品终点。