血痕检验(预实验及种属实验)
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一、血痕预试验——联苯胺试验
〈一〉实验目的
从提供的6个未知检材中排除不是血痕的检材,筛选出可能是血的检材,以待进一步检验。
〈二〉实验原理
血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有过氧化物酶活性,能将过氧化氢分解,释放出新生态氧,使无色的联苯胺氧化成有色的联苯胺蓝,本实验是依据此原理检验检材中是否具有氧化物酶作用的物质。
〈三〉实验步骤
1、分别剪取或刮取各检材少许,按顺序置于滤纸上;或将滤纸折叠,以折角擦拭斑痕,展开滤纸。(检材只需取少量)
2、分别往检材上滴加冰醋酸、联苯胺无水乙醇饱和液各一滴,此时应不出现蓝色。〔若出现蓝色能否说明原因?)
3、再加3%双氧水一滴。(按次序滴加试剂)
4、立即呈现翠蓝色为阳性反应,反之为阴性反应。
5、实验结果记录
“十”表示阳性反应,“一”表示阴性反应
〈四〉结果分析
1、哪些检材为阳性反应?是否能判断其一定是血,为何?有哪些情况还可能出现阳性反应?分析原因?
2、阴性结果的检材有哪些?阴性结果是否一定能排除是血?为何?
3、判断此实验的特异性和灵敏度如何?
二、血痕的种属试验(抗人Hb金标试纸试验)
〈一〉实验目的
从预试验阳性的检材中确定出哪些是人血痕。
〈二〉实验原理
抗原、抗体具有表面结合的特异性,当二者比例合适时,组成复合物,出现明显的沉淀带。抗人血红蛋白血清,只与人的血红蛋白发生反应,因此用它与被检血痕的生理盐水浸出液作沉淀反应。可确证检材是否为人血。
〈三〉实验步骤
1、取预试验阳性的检材少许(约1cm大小)剪碎,分别置于不同小试管中;
2、往小试管中加入适量生理盐水,约lml,以刚好浸没检材为宜,浸泡时间长短以浸出液出现颜色为准。
3、用另一支小试管把浸出液倒出,若浸出液浓度太高可滴加生理盐水进行释稀。
4、再用一支小试管取稀释好的浸出液少许。
5、把试剂条从包装袋中取出,于带有MAX标志一端入到浸出液中(注意液面勿及MAX线)
6、5min内观察结果。
7、抗人Hb金标试纸条上出现两条明显紫红色线的为阳性反应,说明该检材上血为人血,若为一条紫红色线即为阴性反应。
8、实验结果
“十”为阳性反应,“一”为阴性反应
其中检材a、检材b、检材c为预试验中阳性反应的检材号。
〈四〉结果分析
通过实验确定哪些检材上的血为人血?哪些检材上的血不是人血?为何?