应用光子学和生物医学光子学讲义
《生物医学光子学》课件
光学相干成像技术
总结词
光学相干成像技术利用光的干涉现象，能够无损地观察生物组织的内部结构。
详细描述
光学相干成像技术利用光的干涉现象，通过测量光在生物组织内部不同路径的传播时间，重建组织内 部的折射率分布，从而观察生物组织的内部结构。这种技术具有无损、无创的优点，在眼科、心血管 等领域有广泛应用。
荧光寿命成像技术
研究内容与领域
总结词
生物医学光子学的主要研究内容、领域和应 用方向
详细描述
生物医学光子学的研究内容主要包括光与生 物组织的相互作用、光子在生物组织中的传 输和散射、生物组织的光学成像和光谱分析 等。该学科的研究领域涉及光学显微镜、光 学成像、光谱分析、激光生物学、光热治疗 和光动力治疗等。生物医学光子学的应用方 向非常广泛，包括医学诊断、治疗和基础研
详细描述
光学成像技术利用光的散射、吸收和 荧光等特性，对生物组织进行成像， 可应用于肿瘤、炎症等疾病的早期诊 断。
荧光分子成像与示踪
总结词
通过荧光标记技术对生物分子进行示 踪，研究分子在生命过程中的动态变 化。
详细描述
荧光标记技术利用荧光物质对生物分 子进行标记，通过荧光显微镜观察分 子的动态变化，有助于深入了解生命 过程和疾病发生机制。
深入研究和探索生物组织的光学特性
未来研究将更加深入地探索生物组织的光学特性，为光子检测和成像提供更准确的理论 依据和技术支持。
发展新型光子检测和成像技术
未来将发展新型的光子检测和成像技术，以提高灵敏度和分辨率，满足生物组织和细胞 层面的检测和成像需求。
拓展光子学在生物医学领域的应用范围
随着技术的不断进步和应用需求的不断增加，光子学在生物医学领域的应用范围将不断 拓展，涉及更多的疾病诊断和治疗领域。
光子学技术在生物医学工程中的应用指南
光子学技术在生物医学工程中的应用指南简介生物医学工程是将工程学的原理和方法应用于生物医学领域的交叉学科。
光子学技术在生物医学工程中的应用日益广泛，它提供了一种非常有前景的方法来研究和治疗人体内的生物系统。
本文将介绍光子学技术的基本原理、在生物医学工程中的主要应用领域，并提供一些实用的应用指南。
光子学技术的基本原理光子学是关于光与其在材料中的相互作用的研究。
光子学技术利用光的性质来研究和操作生物系统。
它主要基于三个基本原理：光的散射、吸收和发射。
光的散射可以提供组织的结构信息，吸收可以用于成像和治疗，发射则可以用于检测和诊断。
光子学技术在生物医学工程中的应用领域1.光学成像技术光学成像技术可以提供高分辨率、无创伤的图像，帮助医生观察和诊断疾病。
其中最常见的是光学相干断层扫描（OCT）技术，它通过测量光线与组织之间的反射和散射来生成显微结构图像，用于视网膜和皮肤病变的检测与诊断。
2.光学传感器光学传感器利用生物组织对光的吸收、散射和发射的特性来监测生理参数的变化。
例如，脉搏波传感器可以测量脉搏波形、心率和血氧饱和度。
此外，光学传感器还可以用于检测血糖、血液pH值和氧气分压等重要指标。
3.光声成像技术光声成像技术结合了光学成像和超声成像的优势，可以提供高对比度和分辨率的图像，并将其应用于肿瘤检测和治疗。
光声成像技术利用激光照射生物组织，组织的吸收会导致热膨胀并产生声波信号，通过检测声波信号来重建图像。
4.光动力疗法光动力疗法是一种非侵入性的治疗方法，通过激活光敏剂来破坏肿瘤细胞或有害微生物。
这种治疗方法具有选择性和精确性，可以避免对健康组织的损伤。
光动力疗法正在被用于治疗癌症、皮肤病、眼科疾病和感染性疾病等。
光子学技术的应用指南1.合适的光源选择不同的光子学技术需要不同的光源。
对于光学成像技术，激光光源是常用的选择，可以提供高强度、单色和直线传播的光线。
对于光动力疗法，光源需要具有特定的波长和功率，以激活光敏剂。
生物医学光子学
生物医学光子学运用光子学原理和技术，为医学、生物学和生物技术领域中的问题提供解决方案即构成生物医学光子学的研究内容。
生物医学光子学涉及对生物材料的成像、探测和操纵。
在生物学领域，主要研究分子水平的机理，监测分子结构与功能，在医学领域，主要研究生物组织结构与功能，能对生物体以非侵入的方式，实现宏观与微观尺度分子水平的疾病探测、诊断和治疗。
目前，生物医学光子学主要包含以下研究内容：一是生物系统中产生的光子及其反映的生命过程，以及这种光子在生物学研究、医学诊断、农业、环境、甚至食品品质检查方面的重要应用。
利用光子及其技术对生物系统进行的检测、治疗、加工和改造等也是一项重要的任务。
二是医学光子学基础和技术，包括组织光学、医学光谱技术、医学成像术、新颖的激光诊断和激光医疗机理极其作用机理的研究。
这里我主要介绍的是生物医学光子学在医学上的应用。
1.生物医学光子学的发展与战略地位生物医学光子学的内涵生物学或生命科学是光子学的一个重要应用领域。
生物学研究与医学研究、诊断和治疗涉及到的光学及其相关的应用技术，包括其中最基础性的光物理问题，均可列为生物医学光子学的研究对象。
一般认为，光学领域未来发展的重点是将各种复杂的光学系统和技术更加广泛地应用于保健和医疗。
当今世界中，与光学有关的技术冲击着人类健康领域，正在改变着药物疗法和常规手术的实施手段，并为医疗诊断提供了新方法，为生物学研究提供了新的手段，还开辟了在细胞内进行高度定位的光化学疗法。
越来越多的事实说明人们对采用生物医学光子学技术解决长期困扰人类的疑难顽疾如心血管疾病和癌症所起的作用寄予很大希望，其中的重大突破将起到类似X射线和CT技术在人类文明进步史上的重要推动作用，在知识经济崛起的时代还可能产生和带动一批高新技术产2.生物医学光子学有关医学的的主要内容（1）生物物组织中的传输理论;当前组织光学统一的理论架构体系尚未建立，生物组织的光学理论远未成熟。
需要有更精细和准确的理论来替代现有过于简化的模型，也就是要用更复杂的理论来描述生物组织的光学性质以及光在其中的传播行为。
生物医学光子学中的优化及其应用
生物医学光子学中的优化及其应用随着科学技术的不断进步和人类对健康的关注度越来越高，生物医学光子学逐渐受到人们的关注。
光子学是指对光的发射、传输、转换、控制等方面的研究，在医学领域中发挥着重大作用。
本文将介绍生物医学光子学的基本原理，以及在医学领域中的应用和优化方法。
一、生物医学光子学的基本原理生物医学光子学是一个跨学科的领域，它主要涉及光、电、磁、声、生物、医学等多学科知识和技能。
光子学的应用范围非常广泛，可以涉及医疗诊断、治疗、生物材料表征等多个领域。
在生物医学方面，光子学技术可以提供非侵入性、快速、精准、可重复的实验结果。
光子学技术在生物医学领域的应用主要有以下几个方面：1.分子生物学。
光子学技术可以用于分离、检测和定量化目标分子、抗体和细胞等。
2.成像学。
通过不同类型的光子学成像技术，可以探测不同范围的生物分子和细胞，从而对生物体内部结构进行研究。
3.疾病诊断和治疗。
光子学技术可以提供非侵入性、精准、可重复的诊断和治疗方法，如激光治疗、光动力疗法等。
二、生物医学光子学在医学领域中的应用1.生物成像。
生物成像技术可以用于对生物组织、器官和细胞进行成像。
比如，荧光成像可以用于监测肿瘤、细胞增殖、蛋白质定位等，磁共振成像可以用于生物体内部结构成像。
2.治疗方法。
光子学技术可以提供可重复、非侵入性和精准的治疗方法。
激光治疗可以用于治疗眼疾、皮肤病等，而光动力疗法可以用于治疗癌症、皮肤病等。
3.生物传感。
生物传感技术可以用于检测生物体内的信号和分子。
例如，用于检测和监测血糖、病毒、肿瘤等。
三、生物医学光子学中的优化方法1.器材优化。
器材的选择和优化是生物医学光子学中的一个重要环节。
不同的器材可以提供不同的光源和能量输出，从而影响到实验结果的准确性和可重复性。
因此，在进行生物医学光子学实验前，需要对器材进行严格的选择和优化。
2.数据分析优化。
在实验过程中，收集到的数据需要进行分析和处理。
而数据分析的准确性和可靠性对于实验结果的产生影响极大。
光子学和生物——光子学在生物学中的应用
光子学和生物——光子学在生物学中的应用近年来，随着科学技术的飞速发展，光子学作为一门新兴交叉学科，逐渐受到了越来越多的关注和重视。
作为应用光学的重要分支学科，光子学不仅在信息通信、生物医学等领域中有广泛的应用，同时也为我们深入探究生命的奥秘提供了新的思路和方法。
本文将围绕光子学在生物学中的应用展开讨论，旨在让读者了解光子学的相关概念和技术，并探究光子学在生物学中的应用前景。
一、光子学简介光子学是研究光及其相互作用的学科，是物理学、光学学科与信息科学交叉的前沿领域。
光子学是一门相对较新的学科，诞生于20世纪50年代初。
随着计算机技术、光纤通信和生物医学等领域的不断发展，光子学的应用范围不断扩大。
光子学应用的核心是围绕光的产生、传输、控制、检测、存储、处理等方面，结合纳米技术、生物技术、计算机技术、物理学、化学等其他交叉学科的成果，用光子学的方法解决各种实际问题。
二、光子学在生物学中的应用光学显微术是生命科学中常用的一种分析工具。
光学显微术依赖于可见光谱的波长，通过改变光线的折射率，形成大量的成像技术。
在生物学中，通常用于细胞的观察和操作，可以观察细胞和细胞器的形态、生理和生化过程。
而光学显微术的分辨率受到折射率的影响，导致其观测范围受到限制。
光学显微学的另一个不足，是光学能量过大，无法用于长期的生物成像。
这些仅仅优化了这种手段的光子学位。
2.2 光学超分辨显微术光学超分辨显微术是在细胞和分子水平上提高光学显微术分辨率的重要手段之一，免去了传统光学显微术的分辨率限制，具有精准成像、分辨率高、透射深度高等优点。
通过神经网络处理技术，解决了超分辨显微技术中的信号识别和定位问题，逐步实现了快速的生物成像。
光学超分辨显微技术可以应用于细胞器的结构、形态、生理和分子分布分析等领域中，提高了细胞分子分析的准确性和深入度，也为药物发现和治疗方案制定等提供了重要基础。
光学成像技术是一种适用于非接触性、无损伤性成像的工具，常常用于动态实时成像。
生物医学光子学第一章绪论
§2 光与生物组织体的相互作用
§ 2 光与生物组织体的相互作用
2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6
光与生物组织体相互作用的基本形式 组织体对光的吸收效应 组织体对光的散射效应 组织体发光 光热效应和光声效应 光化学效应
§2.1 光与生物组织体相互作用的基本形式 1.光与生物组织体相互作用的表现形式或现象
Excited electronic state S1
h S1 S0
ground state S0
§2.2 组织体对光的吸收效应
2、分子的跃迁
生物组织体原子并不是处于自由状态的，原子靠化学键聚在一 起组成分子，而且组成的是大分子，很显然分子对电磁波的吸 收与单个原子的吸收相比要复杂得多。
Chapter 1 绪论
当前的成像技术
CT
Chapter 1 绪论
无创伤检测
Chapter 1 绪论
Hitachi, 2004，无创血糖检测
掌上型血氧仪（oximeter）,测量 动脉血的含氧量
手指血氧仪
Chapter 1 绪论
激光诱导荧光检测器 （Laser Induced Fluorescence Detector，LIF）
生物医学光子学
Biomedical Photonics
1 绪论
Chapter 1 绪论
生物医学光子学？
组织光 (tissue optics)
生物医学光子学 (biomedical photonics)
生物光子学
(biological photonics）
医学光子学 (medical photonics)
Chapter 1 绪论
Chapter 1 绪论
生物医学光子学
生物医学光子学biomedical photonics 定义：运用光子学原理和技术，为医学、生物学和生物技术领域中的问题提供解决方案即构成生物医学光子学的研究内容。
生物医学光子学涉及对生物材料的成像、探测和操纵。
在生物学领域，主要研究分子水平的机理，监测分子结构与功能，在医学领域，主要研究生物组织结构与功能，能对生物体以非侵入的方式，实现宏观与微观尺度分子水平的疾病探测、诊断和治疗。
研究内容：生物医学是光子学的一个重要应用领域, 两者的交叉形成了新兴学科“ 生物医学光子学”. 主要研究内容包含: 一是生命系统中产生的光子及其反映的生命过程, 以及这种光子在物学研究、医学诊断与治疗方面的重要应用; 二 是医学光学与光子学基础和技术 , 包括组织光学、光与组织相互作用和组织工程、新颖的光诊断和光医疗技术及其作用机理的研究等. 生物医学光子学目前仅具雏形, 但其发展之快引人注目.新进展：近年来, 在国家自然科学基金、省部级基金以及其他基金项目的资助下, 我国在生物医学光子学的研究中取得了很大的进展, 尤其是2000年第152 次主题为 “ 生物医学光子学与医学成像若干前沿问题” 、第217 次主题为“ 生物分子光子学” 的香山会议后, 有许多学校和科研单位开展了生物医学光子学的研究工作, 并初步建成了几个具有代表性的、具有自己研究特色和明确科研方向的研究机构或实验室, 并在生物医学光学成像( 如optical coherence tomography, 简称OCT, 光声光谱成像, 双光子激发荧光成像, 二次谐波成像, 光学层析成像等) 、组织光学理论及光子医学诊断、分子光子学( 包括成像与分析) 、生物医学光谱、X 射线相衬成像、光学功能成像、认知光学成像、PDT 光剂量学、高时空谱探测技术及仪器研究等方面取得了显著的研究成果. 发表了许多研究论文, 申请了许多发明专利, 有些已经获得产业化. 国家自然科学基金委员会生命科学部与信息科学部联合发起并承办的全国光子生物学与光子医学学术研讨会已经举办了六届, 对我国生物医学光子学学科的发展起到了积极的推动作用. 我国近年所召开的亚太地区光子学会议中, 有关生物医学光子学的内容已大幅增加, 成为主要的研讨专题. 我国的生物医学光子学研究方兴未艾, 呈现与国际同步的态势。
生物医学光学培训课件
成为重要的基础问题，而这两方面是与组 织体的光学特性直接相关的。
生物医学光学
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生物医学光学在医学中的作用： 当今，医学正处在一个重大的变革时期。医学的重
点正由传统的基于症状治疗模式向以信息为依据 的治疗模式转变。人们已经认识到，症状仅仅是 疾病的被滞后的很粗糙的人体异常反应。当今一 些重大医学课题的研究，一开始就把着眼点放在 探索导致疾病的生物信息规律上，以控制生物逻 辑信息处于健康状态，进而达到治疗疾病的目的。 为此，人们从各个学科（磁学、声学、化学、光 学等）探索医学诊断和治疗的新方法。目前，人 们认为光子学有希望在当今医学的大变革中扮演 重要角色。认识光在生物组织中的传播规律，以 及激光为代表的高性能光源和高灵敏度光学探测 器的研制成功分别是这种认知的理论依据和物质 基础。
生物医学光学
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在医学的光诊断和治疗中,有许多理论研究需要开展， 有许多新应用需要从理论上做出满意的解释，这主要 有如下几个方面：
(1) 医学上对人体疾病的光学诊断问题。人体在不同的生理状 态下，其组织光学特性参数也不相同。光子学检测和诊断与传 统医学的方法相比较有许多优点，尤其是 600nm 至 1300nm“光 学窗”波长范围内的无损检测和诊断技术蓬勃发展，如组织血 氧和脑血氧的检测、血氧和葡萄糖含量的监测。在取像技术方 面近年发展起来的 OCT 技术也受到人们的高度重视，但由于生 物组织的多样性和复杂性，光子学检测和诊断技术在理论上尤 其是如何为医学临床提供可靠的生理参数指标尚有许多问题需 要加强研究。 （2）光治疗中各种参量的选择。在许多临床光治疗的具体应用 中,如激光手术、激光针灸、激光理疗和光子动力学治疗 （Photodynamic Therapy,简写为 PDT）肿瘤,需要预先确定光剂量, 即合理选定照射光源的几何形状、光束功率、照射时间、焦点 深度以及周围组织的光学性质和形状等以及组织内部各部分光 能流率的分布。
光子学在生物医学中的应用
光子学在生物医学中的应用光子学是研究光的一种学科，包括光的产生、传播、相互作用以及光与物质的相互作用等方面。
在生物医学领域，光子学被广泛应用于疾病的诊断和治疗。
本文将分别介绍光子学在生物医学中的两个主要应用方向：光学成像技术和光动力疗法。
一、光学成像技术1. 光学相干断层扫描技术（OCT）OCT是通过对被检测组织产生的干涉图进行分析，从而实现对组织结构和病变的研究。
因其具有无创、高分辨率等优点，已被广泛用于眼科、神经科学、皮肤科等多个领域。
例如，在眼科领域，OCT可以用于研究视网膜疾病、玻璃体疾病、屈光不正等眼部病变，帮助医生进行早期诊断和治疗。
2. 激光共聚焦显微镜技术（CLSM）CLSM 是一种高分辨率的三维成像技术，利用激光束扫描样品表面，将样品内部的信息以非破坏性方式呈现出来。
由于其能够以亚细胞水平的分辨率观察活细胞或组织的形态和功能，因此常用于生命科学中，如细胞学、癌症学、神经科学、感染病学等领域，例如可通过CLSM技术进行神经元的活体成像研究。
3. 红外光谱成像技术（IRIS）IRIS 是一种无需标记的非破坏性可视化技术，其基于光纤红外光谱和高分辨率成像技术，可以实现对生物样本进行组织学、生物分子结构解析等方面的研究。
由于其能够在细胞和组织水平上进行非破坏性的光谱成像，因此也广泛应用于癌症、心血管疾病等肿瘤医学领域。
二、光动力疗法光动力疗法是一种以光敏剂为中心的治疗技术，激活光敏剂后通过光生化反应，使得约束在某一特定区域内的细胞或组织发生损伤。
光动力疗法广泛应用于肿瘤治疗、皮肤病等领域。
1. 肿瘤治疗光动力疗法在肿瘤治疗中得到广泛应用，由于其可精准破坏癌细胞，同时避免了对健康组织的影响，因此成为治疗癌症的一种新方法。
例如在口腔颌面部肿瘤的治疗中，可使用光敏剂，先将其注射到肿瘤区域，受术区在一定程度上激活后，再施以激光照射，使得光敏剂在浸润的癌细胞处发生光化学反应，使肿瘤细胞死亡，达到治疗的目的。
光子学在生命科学和医学中的应用
光子学在生命科学和医学中的应用光子学是一门研究光与物质相互作用的学科，其研究范围涵盖了光的产生、传播、调制等方面。
在生命科学和医学中，光子学的应用日渐广泛，为生命科学和医学领域带来了巨大的变革和发展。
一、光子学在生命科学中的应用1、光谱学光谱学是一种研究物质对光的吸收、散射和发射等现象的学科。
在生命科学中，光谱学被广泛应用于分析生物分子的结构和特性。
例如，通过傅里叶变换红外光谱技术（FTIR），可以快速准确地测定蛋白质、核酸和多糖等大分子的组成和结构。
此外，Raman光谱技术也被广泛应用于细胞学和药物研究领域。
2、光学显微镜技术光学显微镜技术是生命科学研究中最重要的手段之一。
在过去的几十年里，随着成像技术的不断改进，现代生命科学研究中的显微镜成像技术也得到了飞速的发展。
例如，共焦激光显微镜（CLSM）技术可以获得高分辨率的细胞分子成像，显示了细胞分子动态过程的微距细节。
另外，通过使用荧光蛋白标记生物分子，激光扫描共聚焦显微镜（LSM）也可以显示细胞分子的三维分布和定量分析生物学过程。
3、光遗传学光遗传学是一种新兴的分子生物学技术，其在遗传学研究和神经科学研究中具有重要作用。
例如，用来控制多种生理过程的光激活离子通道可以被用来刺激或抑制细胞的活动，从而实现对生命过程的可控制性。
光遗传学技术对神经科学的贡献更为显著，例如使用光遗传工具进行成像与疾病模型生成，从神经元层面对各种疾病进行研究。
二、光子学在医学中的应用1、光疗法光疗法是一种通过光的作用来治疗疾病的方法。
在肿瘤治疗中，蒸馏水苯并蒽染料（pirarubicin）等粒子能够被搭载上去，而这些粒子在红光照射下能够释放出巨量反应氧（ROS），并将其直接传递给肿瘤细胞，从而引发肿瘤细胞的死亡。
此外，光射频热疗（PDT）也被广泛应用于临床医学领域。
该方法利用光敏感材料以及特定波长的激光光源，可以改善一系列医学应用。
2、激光手术激光手术是一种完全非侵入式的手术方法，在近几年的临床应用中受到了广泛的关注。
生物医学光子学的理论和实践
生物医学光子学的理论和实践随着科技的不断发展和进步，各个领域都得到了快速的发展，人类对于生命和健康的研究也越来越深入。
其中，光子学作为一种前沿科技，已经在生物医学领域产生了广泛的应用。
本文将对生物医学光子学的理论和实践进行探讨。
一、光子学的基础理论光子学是光学研究中的一个领域，它主要研究光的产生、传播、操控和应用等方面。
在生物医学领域，光子学的应用主要是基于光的特性来进行医学研究，其中涉及到很多基础理论。
光子学的基础理论主要包括：量子光学、光学相干性、光谱学、光电子学、非线性光学和弱光测量等方面。
这些理论充分说明了光子学在生物医学中的应用过程，比如说在光子学成像、光学治疗、生物光子学及光谱学等方面的应用。
二、生物医学光子学的应用生物医学光子学的应用非常广泛，以下将详细介绍其主要应用领域。
1、生物光子学生物光子学指的是应用光子学原理来研究生物体内发生的光学过程和现象。
在这个领域里，光的特性、传播规律和光学成像的方法被广泛应用。
其中，光学成像主要通过激光扫描显微镜、多光子显微镜、荧光显微镜等手段来实现。
这些光学成像方法可以非常清晰地看到细胞结构、生物内部不同的分子构成等细节信息，从而促进了对于生物的认识和研究。
2、光学治疗光学治疗是指利用光子学原理来进行疾病治疗的方法。
在这个领域里，主要应用激光光束来进行治疗。
激光光束可以精确定位病变区域，避免伤及健康组织。
在此基础之上，激光光束可以被用来进行病变切除、癌症治疗和疤痕修复等过程。
其治疗效果优越，且对患者没有副作用。
3、光学传感器光学传感器是指应用光子学原理来进行测量，并将获得的信息转化为电信号的传感器。
在生物医学领域，光学传感器可以通过灵敏的光学材料来接收并反映生物体内的信息，如没有针头的血糖测试器，非侵入性血糖检测装置等等。
这种技术可以更加轻便、快捷、精确地检测患者的生理指标，且由于非侵入性操作，对患者无任何危险。
4、光学诊断光学诊断是指利用光子学原理来进行疾病诊断的方法。
《生物医学光子学课件》
光学疗法
激光治疗
光动力学治疗
用于破坏肿瘤细胞和治疗眼病、白血病等。
光学生物传感
表面等离子体共振传感 器
用于检测生物分子和细胞等。
荧光共振能量转移传感 器
用于快速、灵敏地检测蛋白 质、核酸等。
光学微流控芯片
用于检测微生物、药物等。
光学显微镜
1
广义成像显微镜
光学传感技术
4
声图像等。
用于生命科学中的环境监测、分子诊断 等领域。
光学成像技术
磁共振成像（MRI）
以磁场和无线电波为基础，生成 高分辨率的影像。
X线成像
光学相干断层扫描（OCT）
通过高频电磁波在体内产生影像。
无创、无痛的成像技术，用于检 测视网膜、血管等疾病。
光学扫描技术
单光子计数显微镜
用于荧光成像和纳米颗粒大 小分析。
包括荧光显微镜、融合成像荧光显微镜
超分辨率光学显微镜
2
等。
包括结构照明显微镜、单分子荧光显微 镜等。
光子学在医学领域的未来展望
1 新型材料和技术的出现 2 生物化学和分子生物学
技术的进步
如针对性药物输送系统、血
液生物学分析技术等。
能够更加清晰地观察细胞亚
结构、分子等。
3 先进成像技术的应用
如使用光学共振透射率成像技术替代MRI进行诊断、使用超快光子学 显微镜研究神经元传递等。
生物医学光子学课件
生物医学光子学是研究光与生物体相互作用及其应用的学科，它的研究对象 包括从单个分子到组织、器官和整个生物体的光学特性。
光子学在医学领域的应用
1
光谱技术
用于生物分子结构测定、药物研究等。
光动力学治疗
光子学技术在生物医学中的应用方法
光子学技术在生物医学中的应用方法在现代生物医学领域中，光子学技术作为一种重要的工具被广泛应用于生物体内的光学成像、光学诊断和光学治疗等方面。
光子学技术以光子为信息载体，通过操纵光的传播、吸收、发射和散射等特性，实现对生物组织和细胞结构、功能的非侵入式研究和干预。
本文将介绍光子学技术在生物医学中的应用方法。
1. 光学成像技术光学成像技术是通过使用近红外光和可见光进行超声共振成像，红外或激光共振跃迁等方法，对生物组织和细胞进行高分辨率的成像。
其中，最常用的光学成像技术包括荧光成像、光声成像和光学相干成像。
荧光成像技术利用荧光分子在受激光照射下的发射特性，对生物标记物进行成像。
该技术通过特定的荧光探针与靶标分子相结合，实现对细胞、组织和生物体的非侵入式观测。
荧光成像技术在癌症早期诊断、药物分子筛选和基因表达等方面发挥着重要作用。
光声成像技术是将激光束聚焦在生物组织中，利用光声效应产生的超声波信号进行成像。
该技术不仅能够提供高空间分辨率的组织结构和功能信息，还能够提供分子浓度、血液灌注和氧合水平等生物学的功能参数。
光声成像技术在神经学、眼科学和癌症治疗等领域具有重要的应用前景。
光学相干成像技术是一种基于干涉的光学成像技术，可以实现对生物体内组织结构的高分辨率成像。
该技术通过测量光的相位差，重建出生物组织的断层图像。
光学相干成像技术在心血管学、皮肤病学和眼科学等方面具有广泛的应用，可实现对疾病的早期诊断和跟踪治疗效果的监测。
2. 光学诊断技术光学诊断技术是利用光与生物体发生的相互作用来检测、评估和监控生物体内组织和细胞的结构和功能，从而实现对疾病的早期诊断和治疗效果的跟踪。
其中，常用的光学诊断技术包括激光诱导荧光成像、光谱诊断和光学斑点采样等方法。
激光诱导荧光成像技术是通过使用激光照射生物组织，利用细胞和组织中特定的荧光分子产生荧光信号进行诊断。
该技术可以实现对生物组织的高分辨率成像，并能够提供对组织结构和功能的信息。
生物医学光子学
光子学是指研究光和其他辐射能（以光子为量子单位） 的产生和利用。 生物医学光子学：运用光子学的理论和方法解决生物 技术与医学中遇到的基础理论与应用技术等方面的问 题。 按照分属的邻域分：生物光子学和医学光子学
按照应用的目的不同分为光子医学诊断技术和光子治疗 医学技术。前者是将光子作为信息载体，进行探测和分 析，从中获取有关疾病的目的。后者是将光子作为能量 的载体，作用于发病部分达到治疗的目的。
指出微弱的紫外辐射是在细胞 分裂过程中产生的，并能促进其他细胞的分裂，即 所谓有丝分裂
但由于当时仪器条件的限制和理论不完备，解释无法证实
PE包括两类：一种是自发的生物化学发光，与生物 体的氧化代谢有关，称为自发超微弱发光。 另一中是外因诱发的发光，取决与光、电离辐射、超 声、化学药物等外界因素的作用，称为诱导超微弱发 光（又称延迟发光）
生物系统超微弱发光检测 检测需要借ห้องสมุดไป่ตู้微弱光探测器件获取信号。比如光电倍增 管（PMT）、雪崩二级光（APD）和像增强器。 对匹配的电子系统也要求高，要求系统具有高的信噪 比、高灵敏度和高稳定性。
生物系统超微弱发光的主要应用 超微弱发光与生命过程紧密联系，反应了生物体的氧化 代谢、信息传递、光合作用、细胞分裂、癌症死亡以及 生长调控等基本生命过程。
临床应用方面：用于癌症的早期诊断
血液的超微弱发光强度与供血者的年龄有关，还与其健康 程度有关，尤其是肝癌、卵巢癌患者显著。
农业方面：检测农作物对逆境的抗性能力、 判别种子的优劣、检测水果的品质，监控农 作物的生长状态
种子的超微弱发光动态变化与种胚的生理变化有 很强的相关性；在胁迫条件下，种胚萌发的受阻与 发光强度下降呈正比。特别是同种作物而抗性不同 的品种之间，尤其显著。
生物医学光子学技术的应用
生物医学光子学技术的应用生物医学光子学技术是一种前沿的技术，已经在临床医疗中得到了广泛的应用。
光子学技术是一种利用激光、光纤和高速计算机等先进设备进行诊断、治疗和研究的技术。
其在医学领域的应用可以极大地提高诊断、治疗和研究的效率和准确性。
一、生物医学光子学技术的原理和分类生物医学光子学技术是利用光子与生物体相互作用的特性，从而实现对生命体系进行分析和干预。
光子学技术分为光学影像技术和光学治疗技术两大类。
1.光学影像技术是指利用光学技术对生物体进行表征和成像，大致分为生物荧光成像、多光子成像、光学相干层析等。
例如，生物荧光成像是通过将染料注射到动物体内，利用激光激发其发光，从而获得生物体的图像和信息。
多光子成像技术是利用非线性光学效应形成3D结构的图像。
光学相干层析技术则是利用激光干涉效应对组织进行无损分层成像。
2.光学治疗技术是指利用激光或其他可见光源在生物体内进行治疗，例如激光治疗、光动力疗法和光热疗法等。
其中，激光治疗是通过将激光束聚焦到患处，利用激光能量进行手术或治疗。
光动力疗法是通过给患者注射特殊的光敏剂，待光敏剂进入患部后，再用相应波长的光进行照射，从而使光敏剂发生化学反应，达到治疗的效果。
光热疗法则是利用金属纳米颗粒吸收激光能量，产生热效应来治疗疾病。
二、生物医学光子学技术的应用1.癌症诊断和治疗生物医学光子学技术在癌症诊断和治疗中得到了广泛应用。
如生物荧光成像技术可以用来追踪癌细胞的传播和转移。
多光子显微镜在转移性癌细胞的早期检测、肿瘤的3D成像和肿瘤微环境研究方面也有了突破性进展。
光动力疗法作为癌症的一种新型治疗方法，不仅可以清除肿瘤，还可以减少对身体的损害，被广泛应用于多种实体癌的治疗。
光热疗法也是一种局部治疗手段，通过金属纳米颗粒的热效应治疗特定部位的癌症。
2.神经科学研究生物医学光子学技术在神经科学研究中也得到了广泛的应用。
如多光子成像的技术可以探测单一神经元各部位的电生理学信号，这对神经元的运作机制研究和神经系统解码都具有重要意义。
光子学在生物医学研究中的应用
光子学在生物医学研究中的应用光子学，是研究光子及其应用的学科，也是一种新兴的技术手段。
随着生物医学研究的深入，光子学在这个领域的应用也变得越来越广泛。
本文将重点介绍光子学在生物医学研究中的应用，包括与生物医学工程技术的结合，疾病的诊断和治疗、以及生物材料的研究等方面。
1. 光子学与生物医学工程技术的结合生物医学工程技术是一种整合多学科技术的领域，包括了工程学、生物学、物理学等方面，它旨在使用工程学的方法来改善人类生命质量。
而光子学在生物医学工程技术中的应用旨在不断提高技术水平，为疾病的治疗提供更多方案。
近年来，光子学在生物医学工程技术中的应用越来越广泛。
例如，光子学成像系统结合了光学成像技术和数字成像技术的优点，可以快速、准确地定位和检测肿瘤细胞等病灶。
基于此技术，科学家们可以很容易地获取生物体内的精细图像，并在不断实践过程中提高成像结果的准确性。
2. 疾病的诊断和治疗光子学在疾病的诊断和治疗方面也有很多应用。
例如，以拓展多光子相干性显微为代表的成像技术，可以在不影响生物体组织的前提下，对细胞进行高清晰度成像。
这些图像可以帮助医生发现疾病的源头，并助力制定治疗方案。
基于多光子成像技术，还可以制作光学显微镜，在观测特定蛋白质时，能够帮助医生快速找到对应目标并监测生物过程变化。
当然，光子学在疾病的治疗中也有很多应用，例如，以光动力治疗为代表。
光动力治疗可以利用光学能量通过光敏剂中的单纯氧合物化反应而杀死身体的癌细胞等，同时不会破坏周围正常组织。
这种技术对于体内低程度患癌等疾病有很好的治疗效果，而且并不影响生物体内其他部位组织的正常运作。
3. 生物材料的研究光子学在生物材料研究领域中的应用主要体现在对材料寿命及性能的测试等方面。
例如，基于有机光电材料的制备和加工技术，可以制造出高效率的光电器件，并将其广泛应用于太阳能和照明领域。
这些材料在生物医学领域中也有很多应用，如用于喇叭显微镜的制作，以及戴明眼杯的制备等。
生物光子学及其应用于生物医学领域
生物光子学及其应用于生物医学领域生物光子学是将光学和生物学相结合的一门学科，它涉及到光学、生物学、化学、物理学等多个交叉领域。
生物光子学在生物医学领域中具有很多潜在的应用。
本文将介绍生物光子学的基础知识和它在生物医学领域的应用。
一、生物光子学的基础知识生物光子学运用了光学中的原理和技术，并将其应用于生物学中。
其中一个应用就是光学显微镜。
这种显微镜可以通过通过透过或反射的方式观察或测量细胞、组织、甚至是有机体的物理和化学特征。
现在，许多生物光子学研究都与荧光探针的使用相关。
这些荧光探针在生物学、医学、药学和环境科学中都得到了广泛的应用。
此外，光谱学、光学传感和光电探测技术也是生物光子学中的一部分。
生物光子学人类健康的研究和治疗的范畴。
生物医学光子学是生物光子学的一个重要分支。
它致力于研究如何利用光学和激光技术来进行检测和治疗疾病。
生物医学光子学可以在生物组织中检测分子、细胞和组织，并可用于拍摄组织图和分析化学组成。
有证据表明，生物光子学的技术能够诊断许多疾病，如心脏病、癌症、糖尿病、中风等，并且可以为治疗提供有效的手段。
二、生物光子学在生物医学领域的应用1.纳米技术和生物医学显微镜近年来，纳米技术和生物医学显微镜在生物光子学中扮演了重要的角色。
例如，基于超分辨率生物医学显微镜的研究可以提高生物细胞的分辨率和检测敏感性。
超分辨率显微镜可以研究生物分子在细胞的表面或被植入细胞的药物中的分布情况，还可以评估药物在体内的动力学。
这些研究有助于为药物研发和治疗提供更精准和有效的数据。
2.生物标记物检测和成像发现并测量生物标记物是生物科学的重要任务之一。
生物标记物是可以指示有关疾病或身体状况的化学或分子性指标。
生物光子学允许研究人员使用低成本、灵敏度和可重复性高的传感器来检测生物标记物。
现在许多新的生物光传感技术正在研发，以实现对生物标记物的高度敏感性检测。
另一方面，生物标记物成像技术可以揭示生物标记物在活体或组织中的分布和浓度。
生物医学光子学
叶绿素a、b （高等植物）
叶绿素c、d （藻类）
类胡萝卜素 强光下逸散能量
辅助色素
（高等植物）
（吸收传递光能） 藻胆素
（藻类）
叶绿素吸收光谱
光合色素吸收光谱
5. 光照因素对光合作用的影响
光强对光合作用的影响 表观光合速率为零，称为光补偿点 开始达到光合速率最大值时，称为光饱和点 光抑制--当光合机构接受的光能超过它所能利用的
据上述实验结果，希尔(1960)等人提出双光系统 的概念，把吸收长波光的系统称为光系统Ⅰ(PSⅠ)， 吸收短波长光的系统称为光系统Ⅱ(PSⅡ)。
20世纪60年代以后，已能直接分离出PSⅠ和PSⅡ 的色素蛋白复合体颗粒。
爱默生增益效应
4.光合色素
在光合作用的反应中吸收光能的色素称为光合色素。
叶绿素 （光合作用）
折射：入射光的频率接近电子的本征振动频率时， 深入物体内部，引起电子微小振动，传能量给核， 核再使光波以原来频率透出物体。由于速度不同， 在界面处形成一个折点。雨后彩虹。
二. 光合作用
1.光合作用表达式
6CO2+6H2O 绿色植物 C6H12O6＋6O2
(1)
叶绿体
CO2+H2O
(CH2O)＋O2
2.光反应和暗反应
增大光强对光合作用的影响 闪光照射，光合效率是连续光的200%-400%
需光的光反应不需光的暗反应(碳同化反应),不绝对
3. 两个光系统
20世纪40年代，研究不同光质的量子产额时，发 现大于680nm的远红光虽然仍被吸收，但量子产额急剧 下降，称为红降现象。
1957年，爱默生观察到远红光照射时补加稍短波 长的光(如650nm的光)，则量子产额大增，比这两种波 长的光单独照射的总和还要高。这种现象被称为双光 增益效应，或爱默生增益效应。
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目 录应用光子学基础实验一 用自准法测薄透镜焦距 (1)实验二 自组显微镜 (4)实验三 自组望远镜 (7)实验四 偏振光分析 (10)实验五 阿贝成像原理和空间滤波 (14)生物医学光子学基础实验六 单光子计数与弱光检测 (17)实验七 荧光显微镜原理与使用 (23)实验八 拉曼光谱实验讲义 (27)实验九 光镊与光阱PN力的测量 (34)实验十 光谱仪与生物应用 (40)实验十一 双积分球系统测量组织光学参数 (45)实验十二 光学相干层析成像系统实验讲义 (52)实验十三 散斑显微成像系统 (59)实验十四 Nd:YAG激光器及其医学应用 (65)附录：生物医学光学实验室的一般规则 (69)实验六 单光子计数与弱光检测一. 实验目的理解光子计数器方法的基本原理，掌握单光子计用于弱光检测的基本实验方法。
二. 背景知识随着生物医学、光纤通信以及环境辐射监测技术的发展，对微弱光检测的要求越来越高。
因此光极限领域的检测技术，已成为解析更加高深现象的重要手段。
单光子计数系统在高分辨率光谱测量、散射光的测量、非破坏性物质分析、高速现象检测、环保检测、精密分析、大气测污、生物发光、光子研究、色度光度、生化仪器、激光计测、工业在线、放射探测、核医学装置、高能物理、高灵敏度探测、对月测距、天文测光等领域有着特殊的作用。
另一方面，人们在光电检测中常常遇到待测信号被噪声淹没的情况，例如，对于空间物体检测，常常伴随着强烈的背景辐射，即使是对较强的光信号，为了提高信号抗干扰能力、实现精确的检测，也都需要从噪声中提取、恢复和增强被测信号的技术措施。
所以无论是工程应用方面还是信号变换技巧方面，弱光的探测都是非常重要的。
单光子技术是一门崭新的、鲜为人知的技术，虽然当前还处于兴起、发展阶段但在本世纪必将会有重大创新和迅速崛起。
单光子计数器方法利用弱光下光电倍增管输出电流信号自然离散的特征，采用脉冲高度甄别和数字计数技术将淹没在背景噪声中的弱光信号提取出来。
与锁定放大器等模拟检测技术相比，它基本消除了光电倍增管高压直流漏电和各倍增极热噪声的影响，提高了信噪比；受光电倍增管漂移，系统增益变化的影响较小；有比较宽的线性动态范围；它输出的是脉冲信号，不用经过A/D 变换，可直接送到计算机处理。
采用单光子计数技术，可以把淹没在背景噪声中的弱光信息提取出来。
目前一般的光子计数器的探测灵敏度优于10－17 w ，这是其它探测方法所不能比拟的。
三. 实验原理1. 光子流量和光流强度：光是由光子组成的光子流，单个光子的能量ε与光波频率γ的关系是hc h =εγλ＝ （1-1）光子流量可用单位时间内通过的光子数R 表示，光流强度是单位时间内通过的光能量，用光功率P 表示．单色光的光功率P 与光子流量R 的关系是：P=R ε （1-2）在本次试验中使用的是波长λ＝500nm 的单色光，其光子能量ε为：34819hc 76.610310410J 510λε−−−×××===×× 式中h ＝6.6*10-34 J*s 为普朗克常数，c 为光速。
2. 光子计数器的组成光子计数器的原理方框图如图6-1所示，各部分的功能和主要要求如下：1）光源 用高亮度发光二极管作为光源，波长中心500nm ，带宽60nm 。
为了提高入射光的单色性，该仪器配有窄带滤光片，带宽为36nm 。
2）光路 实验系统的光路如图6－2所示：为了减少杂散光的影响和降低背景计数，在光电倍增管之前设置了一个光阑筒，内设光阑三片。
另外在筒的另一端有用来连接减光片的螺纹接口，可根据实验需要放置减光片，窄带滤光片。
本系统配有减光片5组，窄带滤光片一块，参数如下：名称透过率 备注 窄带滤光片 88％ 中心波长500nm AB 2 2 ％AB 5 5 ％AB 1010 ％ 半反半透镜 35 %3）探测器 探测器采用的是光电倍增管。
它必须具有适合于实验中工作波段的光谱响应，要有适当的阴极面积，量子效率高，暗计数率低，时间响应快，并且光阴极的稳定性高。
为了获得较高的稳定性，除尽量采用光阴极面积小的管子外，还采用致冷技术来降低管子的环境温度，以减少各倍增极的热电子发射。
试验采用半导体致冷器和水循环制冷器相结合的办法来达到降温的目的，使用中可根据具体需要选用。
光电倍增管的工作原理是，当弱光照射到光阴极时，每个入射光子以一定的概率（即量光阑减光片图6－1 光子计数器方框图子效率）使光阴极发射一个电子。
这个光电子经倍增系统的倍增后，在阳极回路中形成一个电流脉冲，通过负载电阻形成一个电压脉冲，这个脉冲称为单光子脉冲。
除光电子脉冲外，还有各倍增极的热发射电子在阳极回路中形成的热发射噪声脉冲。
热电子受倍增的次数比光电子少，因而它在阳极上形成的脉冲幅度较低。
此外还有光阴极的热发射形成的脉冲。
噪声脉冲和光电子脉冲的幅度的分布如图6－3所示。
脉冲幅度较小的主要是热发射噪声信号，而光阴极发射的电子（包括光电子和热发射电子）形成的脉冲幅度较大，出现“单光电子峰”。
用脉冲幅度甄别器把幅度低于V h的脉冲抑制掉。
只让幅度高于V h的脉冲通过就能实现单光子计数。
4）放大器放大器的作用是将光电倍增管阳极回路输出的光电子脉冲(连问其他噪声脉冲)线性地放大。
放大器的增益可根据单光电子脉冲的高度和甄别器甄别电平的范围来选定。
例如本实验采用的甄别电平（也称为阈值电平）为0～2.56V（10mV/档，可调）。
另外还要求放大器具有较宽的线性动态范围，上升时间＜3ns (即通频带宽度达到100MHz)，噪声系数小，暗电流小（它直接关系到管子的探测灵敏度）等等。
光电倍增管与放大器的连线应尽量短，以减少分布电容，有利于光电脉冲的形成与传输。
5）脉冲高度甄别器脉冲高度甄别器有连续可调的阈值电平，称甄别电平。
只有当输入脉冲的幅度大于甄别电平时，甄别器才输出一个有一定幅度和形状的标准脉冲。
在用于光子计数时，可以将甄别电平调节到图6-3 中单光电子峰的第一个波谷处。
这时各倍增极所引起的热噪声脉冲因小于甄别电平而不能通过。
经甄别器后只有光阴极形成的光电子脉冲和热电子脉冲的输出。
对甄别器的要求是甄别电平稳定，灵敏度高，死时间小（死时间是指一个电脉冲触发甄别器的输入端以后，在它恢复原状并能接受后续脉冲所需的时间），用于光子计数的甄别器的死时间要求小于10n s，以保证不漏计。
图6－3光电倍增管阳极输出脉冲幅度速率分布6）计数器计数器(或称定标器)的作用是将甄别器输出的脉冲累计起来并予以显示。
用于光子计数的计数器要满足高计数率的要求，即要能够分辨时问间隔为10n s的两个脉冲，因此相应的计数率为100MHz。
不过当光子计数器用于微弱光的测量时，它的计数率一般很低。
这部分还有控制计数时间（积分时间）的功能。
3.单光电子峰光电倍增管和鉴别器阈值可以用实验获得的脉冲高度分布图来选择决定。
图6－3是一个典型光电倍增管及放大器响应脉冲高度—速率分布图。
鉴别器阈值（水平轴）从低电平到坐标的满刻度，而纵轴是每个鉴别阈值下每个计数时间段测得的脉冲数。
对于一个好的光电倍增管，有一个由光电倍增管倍增极噪声和放大器噪声产生的峰值，中间有一个谷值，接着又会出现一个峰，该峰相应于从光阴极的单光子－电子的脉冲高度。
光阴极发射的电子(包括光电子和热发射电子)所形成的各脉冲的幅度近于一致，造成图中的“单光电子蜂”。
形成这种分布的原因是：（1）光阴极发射的电子，包括光电子和热发射电子，都受到了所有倍增电极的增益． 因此它们的幅度大致接近。
（2）各倍增极的热发射电子经受倍增的次数要比光阳极发射的电子经受的少，因此 前者在阳极上形成的脉冲幅度要比后者低．所以图中脉冲幅度较小的部分主要是热噪声脉冲。
（3）各倍增极的倍增系数不是一个定值，而是满足统计分布，大体上遵守泊松分布。
所以．如果用脉冲高度甄别器将幅度高于上图所示第一个谷点的脉冲加以甄别、输出并计数显示，就可实现高信噪比的单光子计数，大大提高检测灵敏度。
4. 光子计数器的误差及信噪比测量弱信号最关心的是探测信噪比(能测到的信号与测量中各种噪声功率的比值)。
因此，必须分析光子计数系统中各种噪声的来源。
（1）泊松统计噪声 用光电倍增管探测热光源发射的光子，相邻的光子打到光阴极上的时间间隔是随机的，对于大量粒子的统计结果服从泊松分布。
即在探测到上一个光子后的时间间隔t 内，探测到n 个光子的几率P （n,t ）为:()()n -R tn -N n ,t R t e N e P ==n !n !ηη 式中η是光电倍增管的量子计数效率，R 是光子平均流量(光子数／s)，N=Rt η，是在时间间隔tσ来表示 =σ。
计算得出：σ。
这种不确定度是一种噪声，称为统计噪声。
所以，统计噪声使得测量信号中固有的信噪比SNR 为可见，测量结果的信噪比SNR 正比于测量时间间隔t 的平方根。
（2） 暗计数实际上，光电倍增管的光阴极和各倍增极还有热电子发射即在没有入射光时，还有暗计数(亦称背景计数)。
虽然可以用降低管子的工作温度、选用小面积光阴极以及选择最佳的甄别电平等使暗计数率Rd降到最小，但相对于极微弱的光信号，仍是一个不可忽视的噪声来源。
假如以Rd表示光电倍增管在无光照时测得的暗计数率，则在测量光信号时，按上述结果，，信噪比SNR 下降为：这里假设倍增极的噪声和放大器的噪声已经被甄别器消除了。
对于具有高增益的第一倍增极的光电倍增管，这种近似是可取的。
（3） 累积信噪比 当用扣除背景计数工作方式时，在两个相同的时间间隔t 内，分别测量背景计数(包括暗计数和杂散光计数)N p 和信号与背景的总计数N t 。
设信号计数为N p ，则p t d d d N =N -N =Rt, N =R t η按照误差理论，测量结果的信号计数N p 中的总噪声应为测量结果的信噪比：N 当信号计数N p 远小于背景计数N d ，测量结果的信噪比可能小于1，此时测量结果无意义，当SNR ＝1时，对应的接收信号功率P 0min 即为仪器的探测灵敏度。
由以上的噪声分析可见，光子计数器测量结果的信噪比SNR 与测量时间间隔的平方根成正比。
因此在弱光测量中，为了获得一定的信噪比，可适当增加测量时间间隔，这也是光子计数能够获得很高的检测灵敏度的原因。
（3）脉冲堆积效应 光电倍增管具有一定的分辨时间t R 。
当在分辨时间t R 内相继有两个或两个以上的光子入射到光阴极时(假定量子效率为1)，由于它们的时间间隔小于t R ，光电倍增管只能输出一个脉冲，因此，光电子脉冲的输出计数率比单位时间入射到光阴极上的光子数更少；另一方面，电子系统(主要是甄别器) 有一定的死时间t d ，在t d 内输入脉冲时，甄别器输出计数率也要受到损失。