纤维素、半纤维素、木质素测定
纤维素、半纤维素、木质素测定
纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%）酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分（硅酸盐,%）酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定的优化：把酸性洗涤纤维置于50ml烧杯中，加入5ml 72%硫酸，20℃水解3h，然后加水45ml，室温过夜，次日用已称恒重的3号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至pH6.5，于60℃烘干，称重。
把剩余残渣在马福炉中550℃经2.5h灰化，测得灰分重量。
洗涤优化：经过实际试验，发现中性洗涤纤维测定和酸性洗涤纤维测定中用丙酮冲洗这步效果不大，测量精度要求不高时，可省略。
方法一：化学滴定法（我们测定出来的结果较文献报道偏低）（一）纤维素含量的测定1.0.1N2.K（2）（3）（4）（5）（6）（7）定，用去（8）（9）1. 0.5%淀粉，2.（1）（2）5min （3）（4）（5）（6）（7）（8）（9）移液管吸取10mL滤液，加入10mL碱性铜试剂，盖好在沸水中煮15min（10）冷却，加入5mL草酸-硫酸混合液，加入0.5mL 0.5%淀粉，用0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去b mL（11）取10mL碱性铜试剂，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL滤液，加入0.5mL 0.5%的淀粉，0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去a mL（12）生物质中半纤维素的含量计算公式x% = 0.9×100 [ 248－（a－b）]（a－b）/10000×10×n（三）木质素含量的测定1. 所需溶液1%醋酸，丙酮，73%硫酸，10%氯化钡溶液，0.5N重铬酸钾溶液，浓硫酸，0.1 N硫酸亚铁铵溶液，试亚铁灵指示剂。
2. 实验步骤（1）标定新配的0.1N硫酸亚铁铵溶液, 滴定度为K（2）称取自然风干的生物质粉末0.05-0.1g，数值为n（3）装入离心管，加入10mL 1％醋酸，摇动5min混匀（4）离心，用5mL 1％醋酸洗沉淀（5）加丙酮3-4mL，在摇荡的情况下浸泡3min，洗三次（6）用玻璃棒将沉淀沿管壁分散开，将离心管放热水中使沉淀充分干燥（7）在干燥沉淀中加入73％硫酸3mL，用玻璃棒搅匀，挤压成均匀的浆液（8）室温下放置一夜（9）加入10mL蒸馏水，搅匀，置沸水中5min（10）冷却，加入0.5mL 10%氯化钡溶液，搅匀，离心，倒出清液，分别用10mL蒸馏水冲洗沉淀两次，每次要混匀原理：生物质（浒苔、锯末和玉米秸秆）在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。
纤维素半纤维素木质素含量测定
纤维素半纤维素木质素含量测定
纤维素半纤维素木质素测定是研究木材结构和生理性质重要方面，也是该分析行业最常用的测定之一。
木材中纤维素，半纤维素和木质素是木质工程材料的重要组成部分，它们的特性影响着材料的性能，因此知道它们的相对含量是非常重要的。
纤维素、半纤维素和木质素的测定可以采用雷蒙德-福特法，也是众多分析实验中最常用的方法。
该方法的原理是用蒸馏水分解木材组成，将得到的溶液浓缩时间控制和酸处理，然后测定残余物中含有的有机物，从而计算纤维素、半纤维素和木质素的百分含量。
实验步骤如下：
（1）首先，将2 g木材样品用一定量（常用容量为50ml）清水加热（离心搅拌），搅拌30min；
（2）离心中滤，50mL SuperECO 设备或阿诺德滤筒滤液，收集滤液并浓缩大约1/10；（3）用蒸馏水冲洗滤滤器上的残渣，加水至20 ml；
（4）将1N HCl或硝酸注入反应槽，增加滤液中的酸，保持恒定的pH值；
（5）将溶液加热至90℃，维持此温度15min；
（6）放置冷却，把所有有机物沉淀，并将浓度提高至20 mL；
（7）将沉淀物抽滤，用烘干后放入110℃高温烘箱烘干，直至恒定重量。
最后，用烘干的物质的重量和木材样品的重量来计算储存集的百分率。
实验得出的数据一般可用于研究木材的结构和组成，分析不同木材品种的差异，以及确定木材结构变化后其用途和性能上的影响。
以上是纤维素半纤维素木质素含量测定原理和步骤。
通过精心实施，可以得到准确准确的数据，为以后应用提供基础性数据，提高分析效率和可靠性。
美国能源部NREL-测三素标准
NREL法测定纤维素、半纤维素及木质素的含量（版本日期：2008-4-25）一、准备工作1、72 %（w/w）硫酸的配制（100 g）98 %的浓硫酸：72 / 98 % = 73.5 g水：100 −73.5 = 26.5 g注意：先加水后加硫酸！2、器皿125 mL白口瓶（72 %硫酸）水解瓶（配橡胶盖、铝盖）G3玻砂漏斗二、测定步骤1、称取0.3000 ± 0.001 g的绝干原料加入水解瓶，标记，做平行样；2、加入3.00 ± 0.01 mL的72 %硫酸，搅拌至原料充分混合。
混匀后置于30 ± 3 ℃的水浴中保温60 ± 5 min，每5~10 min搅拌一次；3、取出加入84 ± 0.04 mL去离子水稀释到4 %，盖紧旋钮，颠倒混匀；4、做sugar recovery standards （SRS）校正糖在酸解时的损失。
配制糖溶液，包括：葡萄糖，木糖（浓度越接近酸解样品中的糖浓度越好）。
称取各种糖精确至0.1 mg至水解瓶，加入10 mL去离子水，加入348 μL的72 %硫酸，旋紧旋钮。
和酸解样品灭菌锅121 ℃，1 h，取出冷却后打开；5、酸水解后使用G3玻璃器皿真空过滤，取50 mL滤液测量酸溶木质素，纤维素和木聚糖含量；6、使用热的去离子水洗涤过滤后残渣到中性，在烘箱105 ± 3 ℃，干燥至绝干，称量记录。
干燥后转移到马弗炉中，575 ± 25 ℃灼烧24 ± 6 h测量灰分。
取出冷却至室温后称重记录。
每个样品取平行对照。
由此得到酸不溶木质素的含量：酸不溶木素含量(AIL %) = (G2−G1) × (1−Extra%) / [ G (1−W) ] × 100 %其中：G2为过滤后残渣和玻璃滤器的绝干重量g，G1为灼烧后的灰分和玻璃滤器的重量g，G为水解样品质量g，W为水分含量，Extra %代表抽提物的含量。
纤维素、半纤维素、木质素测定
半纤维素含量的测定
1.1实验仪器及试剂
100ml烧杯一只、电炉、离心机、玻棒、球形玻盖、分光光度计、80%的Ca（NO3）2溶液、2mol/L盐酸、6%苯酚、浓硫酸
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1.2实验步骤
称取黄姜粉0.2g装入100ml烧杯，加入80%的Ca（NO3）2溶液15ml，加热至沸，在微沸的条件下加热5min。稍冷后离心，用10ml热水洗涤，共洗涤离心3次。向装有沉降物的离心管中加入2mol/L盐酸10ml，盖好带有玻棒的球形玻盖，沸水中煮沸45min，同时要定时进行搅拌，随后过滤，收集滤液，待测。取待测样品和对照各2ml（含糖10~50μg），分别加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml，静止10min摇匀，室温放置20min后550nm测光密度。用预先以葡聚糖做好的标准曲线即可计算出样品中总糖的重量，再用下面的公式计算半纤维的百分含量（%）
X：纤维素百分含量（%）K：Na2S2O3滴定度W:黄姜粉的重量（g）
a：滴定10ml K2Cr2O7-H2SO4对照液所用去Na2S2O3的体积（ml）
b：测定纤维素所用去Na2S2O3的体积0.675：纤维素的滴定度乘100
木质素含量的测定
3.1实验仪器及试剂
离心机、电炉、玻棒、量筒、1%HAc、丙酮、72%的H2SO4溶液、10%的BaCl2、0.25mol／L K2Cr2O7-H2SO4溶液、0.1mol／LKI溶液、淀粉溶液。
2.2实验步骤
称取黄姜粉0.1g，装入离心管中，加入HAc和HNO3混合液10ml，盖上带有玻棒的球形玻盖，置沸水中煮沸25min，同时要定期进行搅拌。冷却后离心，弃上清。而后向沉降中加0.25mol/LK2Cr2O7-H2SO4溶液10ml，搅匀，将离心管放入开水中10min，并定时搅拌。冷却后将溶液倒入250ml烧杯中，同时用15ml蒸馏水冲洗沉淀。待溶液冷却后加入0.25mol/LK2 K2Cr2O7-H2SO4溶液50ml和几滴淀粉溶液，用0.05mol/L的Na2S2O3体积。按下面的公式计算纤维素的百分含量（%）
玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素的测定
（ ． ｓｉ ｔ ｆ ｅ ｉｉｅａ ｄＬ ｆ ｃｅ ｃ ｓ Ｕｎｖ ｒｉ ｆ ｉａ ， ｉａ ５ ０ ２ Ｃｈｎ ； １Ｉ ｔ ｕｅｏ ｄｃｎ ｎ ｉｅＳ ｉｎ ｅ， ｉｅｓｔ ｏ ｎ ｎ Ｊｎ ｎ２ ０ ２ ， ｉ ａ） ｎ ｔ Ｍ ｙ Ｊ
（ ． ｈ ｎ ｏ ｇＺ ｏ ｇ ｉ Ｒ ｅｔｒ ｆ ｏ ｄＡ ｄｔ ｅ， ｉ ｎ２ ０ １， ｈｎ ） ２ Ｓ ａ ｄ ｎ ｈ ｎ ｘｅ ＆Ｄ Ｃ ｎｅ Ｆ ｏ ｄ ｉｖ ｓＪ ａ ５ ０ ３ Ｃ ｉａ ｏ ｉ ｎ
能 源 。怎 样充 分 利 用秸 秆 就 成 了迫 切 要解 决 的问
题 。玉 米秸 秆 主 要 由植 物 细胞 壁 组 成 ，基 本 成 分
和 聚木 糖 硫 酸 酯 ；木 质 素是 由 四种 醇单 体 （ 香 对
豆醇、松柏醇 、５羟基松柏醇、芥子醇 ）形成 的 一
一
种 复 杂 酚类 聚合 物 ，可用 作 混凝 土减 水剂 、 陶
ｃ ｌｕ ｏ ｅ ｈ ｍｉｅ ｌ ｏ ｅａ ｄ ｌｇ ｉ ｏ ｔ ｎ ｓ３２ ， ７．２％ ａ ４ ｅｌｌｓ ， ｅ ｃ ｌ ｕｌ ｓ ｉ ｎ ｎ ｃ ｎ ｅ ｔｉ ％ ２ ８ ｎ ｎｄ １ ２％，Ｓ ｈａ ｏ ｌ ｍａ ｕｌ ｕ ｅｏ ｏ ５。 ｏ ｔ ｔｗｅｃ ｕ ｄ ｋｅｆ ｌ ｓ ｆｃ ｒ ｎ ｓａ ｋ ． ｔ ｌ ｓ
摘 要 为 了解决大量玉米秸秆被 焚烧或堆砌在 田头，既污染环境又浪 费能源的Ｉ￣ ，对原有的测定纤维素、半纤维素和 ＇ － － １ 木质 素含 量的方法进行试验创新 ，得 出 了更准确 、 简便的测定方 法；测得 玉米秸秆 中纤维素 半纤 维素和木质素含量 的
质 量 分数 分 别 为 ３％、 ２ ．２ 和 １ ．２ ２ ７ ８ ％ ４％，进 而 能充 分 利 用 玉 米 秸秆 。 ５
秸秆中纤维素_半纤维素和木质素的几种测定方法对比
秸秆中纤维素/半纤维素和木质素的几种测定方法对比陈贤情 商晋 宋慧芳 郭康权（西北农林科技大学机械与电子工程学院，陕西杨凌西农路22号，712100）摘 要：农作物秸秆的基本物理化学特性是的其综合利用重要依据。
秸秆的主要成分是纤维素、半纤维素和木质素，其测定方法各有利弊。
本文对比了几种不同测试方法和测试手段，从耗时、操作难易程度和数据可靠性等方面对纤维素、半纤维素和木质素的测定方法进行综合比较，给出了各测试方法的优缺点，并对几种改进方法作了介绍。
其中，Van Soest方法比较简单实用，一般实验室都能进行，但结果准确性低并且过滤困难；王玉万法可以同时进行多个试样的分析，但测定纤维素含量偏高，半纤维素含量偏低；高效液相色谱法数据可靠，重复性好，但仪器贵，测试成本较高。
关键词：秸秆，纤维素，半纤维素，木质素0 引 言中国秸秆资源丰富，但是大部分被当作肥料直接还田或者被当作燃料烧掉，随着科技的发展，一些较深层次的秸秆加工技术应运而生，如秸秆生物质气化技术、颗粒炭化技术、秸秆纤维的生物转化等。
农作物秸秆的基本物理化学特性是的其综合利用重要依据，秸秆的基本组织是纤维素、半纤维素和木质素，其含量的多少为其综合利用提供重要依据。
纤维素、半纤维素和木质素的测定方法有多种。
Van Soest于1967年提出纤维素、半纤维素、木质素的测定程序，得到研究学者的普遍应用； 1987年王玉万等提出了木质纤维素固体基质发酵物中半纤维素、纤维素和木质素的定量测定分析程序；Van Soest于1991年对其方法进行了改进；李华针对Van Soest法进行了进一步改进，取得了良好的效果；国际可再生能源实验室发布了高效液相色谱法测定纤维素、半纤维素、木质素，测定结果比较可靠。
本文对纤维素、半纤维素、木质素的几种测定方法进行了对比分析，旨在为测定秸秆中的纤维素、半纤维素、木质素提供方法参考，为不同检测目的的学者提供选择依据。
1 方法原理1.1 Van Soest法Van Soest法在国内又称范式法，它是将样品经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、酸不溶木质素和硅酸盐。
玉米秸秆中纤维素_半纤维素和木质素的测定
前言我国是一农业大国，随着玉米产量提高，产生了大量的秸秆，除了一部分被应用于沼气发酵、养蘑菇外，过剩的玉米秸秆[1]，被农民为了赶农时、抢播种、图省事，而集中焚烧掉或堆砌于田头烂掉，既严重污染了环境又浪费了宝贵的能源。
怎样充分利用秸秆就成了迫切要解决的问题。
玉米秸秆主要由植物细胞壁组成，基本成分为纤维素、半纤维素和木质素等。
纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖，不溶于水及一般有机溶剂，是重要的造纸原料。
以纤维素为原料的产品广泛用于塑料、炸药、电工及科研器材等方面。
食物中的纤维素（即膳食纤维）对人体的健康也有着重要的作用；半纤维素主要由木糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖组成，是木浆的主要成分之一，水解后提取的木糖可以制成木糖醇、木糖酸和聚木糖硫酸酯；木质素是由四种醇单体（对香豆醇、松柏醇、5-羟基松柏醇、芥子醇）形成的一种复杂酚类聚合物，可用作混凝土减水剂、陶瓷、耐火材料、选矿浮选剂和冶炼矿粉粘结剂等。
纤维素、半纤维素和木质素的应用范围越来越广，其开发利用一直以来就是热点，所以对其玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素的测定（1.济南大学医学与生命科学学院 山东 济南 50022）（2.山东省中协食品添加剂研发中心 山东 济南 250013）摘要 为了解决大量玉米秸秆被焚烧或堆砌在田头，既污染环境又浪费能源的问题，对原有的测定纤维素、半纤维素和木质素含量的方法进行试验创新，得出了更准确、简便的测定方法；测得玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素含量的质量分数分别为32%、27.82%和15.42%，进而能充分利用玉米秸秆。
关键词 玉米秸秆 纤维素 半纤维素 木质素 测定王金主1 王元秀1 李峰2 高艳华2 徐军庆2 袁建国2Determination of Cellulose, Hemicellulose and Lignin in Corn Stalk WANG Jin-zhu1; WANG Yuan-xiu1; LI Feng2; GAO Yan-hua2; Xu Jun-qing2;YUAN Jian-guo2（1.Institute of Medicine and Life Sciences, University of Jinan, Jinan 250022, China;）（2. Shandong Zhongxie R&D Center of Food Additives, Jinan 250013, China) Abstract：To solve the problem that is a large number of corn stalks are burned or disorderly piled , both environmental pollution and waste of resources, on the basis of method of determination cellulose, hemicellulose and lignin, we have innovative out a more accurate and simple method. In corn stalk, the mass fraction of cellulose, hemicellulose and lignin content is 32%, 27.82% and 15.42%, So that we could make full use of corn stalks.Keywords：corn stalk; cellulose; hemicellulose; lignin; determination测定方法总结创新，以便更好的利用三种物质。
703-《烟草与烟草制品中纤维素、半纤维素、木质素的测定洗涤剂法》
《烟草与烟草制品中纤维素、半纤维素、木质素的测定洗涤剂法》试验报告一. 概述纤维素、半纤维素和木质素是构成植物细胞壁的主要物质，占植物所有多糖的50%以上，以往的研究表明，各等级烟叶总细胞壁物质含量在20％～30％左右，在烟梗和烟草薄片中甚至要占到总质量的三分之一以上。
他们对于烟叶的燃烧性能和烟丝的填充值以及卷烟的香吃味都有很直接的影响，例如，纤维素会对卷烟燃吸品质产生副作用，会产生一种尖刺的刺激性和一种“烧纸”的气味。
另外，对他们的测定为进一步加强对烟草及其制品的认识，对提高烟叶原料品质评价水平、加强对卷烟、梗丝和造纸法薄片制造工艺研究等具有较大的指导意义。
对于纤维素、半纤维素和木质素的分析测定工作大致可以分为三个阶段：粗纤维法、纤维洗涤剂法和酶法，当然还有其他一些方法和最新的方法，各国各行业采用的标准主要还是这三类方法。
这三类方法有一个共同点，就是它们的基本原理都是基于纤维素、半纤维素和木质素的化学性质，使其与试样中的其他物质分离而进行测定。
100多年前德国科学家Henneberg和Stohmann提出的粗纤维法，是采用稀酸稀碱的一系列浸提、干燥后得到的纤维总量，由于通过这种方法测定出来的粗纤维是一个比较模糊的概念，里面包含着大部分的纤维素以及部分的半纤维素和木质素，是一个“粗”的总量。
但由于其分析过程较为简单，所以一些行业现在仍然也还在使用粗纤维法。
1963年，美国人V an Soest提出了纤维洗涤剂法，也叫凡氏方法，提出了中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）及酸性洗涤木质素（ADL）的概念，一般认为，用中性洗涤剂洗涤已被有机溶剂提取过的样品，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为NDF，主要包括几乎全部的纤维素、半纤维素和木质素和少量的蛋白质。
在酸性洗涤剂的作用下，除NDF 体系被除去的物质以外，半纤维素亦被去除得到ADF，ADF经过72％硫酸消化得到的不溶物即为ADL。
最新版-纤维素、半纤维素和木质素的分析步骤
Source: 周同惠. 国际标准常规分析方法大全[M]. 北京: 科学出版社, 1998Source: 大连轻工业学院等. 食品分析[M]. 中国轻工业出版社,1994. ISBN:7-5019-1719-1 美国谷物化学家协会（AACC）纤维素、半纤维素和木质素的分析步骤总体流程：AD = acid detergentADF = acid detergent fiber CE = celluloseCS = cell soluble HC = hemicelluloseND = neutral detergentNDF = neutral detergent fiber1、取※g湿样（颗粒度＜10mm＝在烘箱70℃下烘干48hr。
制得干样。
研碎（一般用20~30目为宜），备用。
2、取※g干样在烘箱103℃下烘干24hr。
减重法计算含水率。
将上述样品与坩埚一起在马弗炉550℃下烘24hr（至少6hr）或600℃，2hr。
减重法计算总固体TS和灰分ASH。
3、取0.5 g风干粉碎样品测量NDF（中性洗涤纤维）分析原理：样品经热的中性洗涤剂（硫酸月桂脂纳）浸煮后，细胞内容物被溶出，残渣用热蒸馏水充分洗涤，除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质，然后加入α-淀粉酶溶液以分解结合态淀粉，再用蒸馏水、丙酮洗涤，以除去残存的脂肪、色素等，洗脱后烘干测定其残渣。
该法又叫中性洗涤剂纤维素法。
（包括全部纤维素、半纤维素和木质素的总量，但不包括水溶性非消化性多糖）。
缺点：对于蛋白质、淀粉含量高的样品，易形成大量泡沫，粘度大，过滤困难。
A．试剂的制备1）1/15mol/l磷酸盐缓冲液（pH：6.8）：①取23.88 g AR级Na2HPO4.12H2O，定容至1L，配成1/15mol/L溶液；②取9.072g AR级KH2PO4，定容至1L，配成1/15mol/l溶液；③取9份磷酸氢二纳溶液和10份磷酸二氢钾溶液混合，配成pH = 6.8的缓冲溶液。
纤维素半纤维素木质素含量测定方法
实验结果：
标准单糖回收率葡萄糖
. .
1.034 标准单糖回收率木糖
. .
1.149
标准单糖回收率阿拉伯糖
. .
1.084
纤维素含量 . / .
. .
. . 35.61% (其中 0.9673 为稀释倍数)
半纤维素含量 .
.
.
.
.
.
. . 21.68% (其中 0.9673 为稀释倍数)
木质素含量=酸溶性木质素+酸不溶性木质素=3.67%+23.56%=27.23%
5. 醇抽：（水抽后将水倒干净后加入 95% 乙醇进行醇抽）醇溶性物质有叶绿素；蜡类或其 他微量组分，用索氏抽提法抽提 16‐24 h。（5g：200mL，看物料密度和抽提器高度）
6. 抽提完成后风干物料（如果湿，40℃同前条件预干燥） 7. 将物料加入带盖的管中（20mL 具塞试管），加入 3.00±0.01mL 的 72% 硫酸溶液并搅拌
保留时间/min 8.857 9.472
单糖类别 葡萄糖 木糖
10.404 样品 2：
阿拉伯糖
MV
38.00 36.00 34.00 32.00 30.00 28.00 26.00 24.00 22.00 20.00 18.00 16.00 14.00 12.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 0.
能力，可查）
单糖浓度 C
CHPLC 稀释倍数 .
标准单糖平均回收率 Rave.sugar=稀 稀酸 酸处 处理 理前 后糖 糖液 液浓 浓度 度
纤维素%=C1g0l0u0
86.73 L 0.90 W 物料重量
100%
半纤维素%=（Cxyl100C0araW）物料86重.7量3L 0.88 100%
秸秆中纤维素半纤维素和木质素含量的测定
秸秆中纤维素半纤维素和木质素含量的测定纤錐素、半纤维崇与木质素是组成亦作物桔秆原料的二牛主蚩爼分.在以秸秆等纤维材料为原料底物生产乳醱,乙醇、丁疲等发酵产物的过程中・纤维素与半纤维素含撬的赛少与降解后绘糖的蕊得率和发酵产物产量直接相关：三个组分含量的变ft更是作为预处理、酶降解叹及发酵工艺等评价的重耍依据.因此.准确测定农作物秸秤中纤维索、半纤維索匀木顾嘉的會尿显燃星I 吩必翌.本章采用NREL方法测定t«花.玉米、高粱*小麦.大豆和谷子六种农作物秸秆中三个主娈组分的含量,为以后测定纤维材料的降解率奠定驰础.3.1试验材料秸秆原料选取桶花.玉米、高粱、小麦、大豆和谷子六种农作物秸秆（地上全株〉. 原料珂干后粉碎.过4小」稱・干煤后保仔备Hh3” 2试验方法秸fi中纤维盍、半纤维盍和木质盍含址的测定选择关国個求可再生他源实验宝（NREL）泌 &3*2.1试验步曝3.241秸秆中含水量的测定fi-105±3 1C预干燥铝箔称凰碟5h・祎确称吊并记录.观匀样品井精确称斌仏记录称虽碟加样品的总电吊：.一式卿份•将样品敬入干燥箱1頤±3€干燥！ih・干燥结束后转移至干燥器内.冷却至帘温后称曲…将样品返［-1IO5 + 3 'C干慄綽织线干燥至慎巫.阿枕秋电的差不超过（LI mg rr，］・3. 2. 1.2桔秆中色臺，脂类等杂质的提取农作物秸秆中含有的色盍、脂肪和壷白质等朵质会电响到高效液相色谱法测定纤维素和半纤维素的含虽的准确性，而且这些杂质辻会对色谱柱造成损害.所以应该将其去除.除去秸秆中的这些杂质采用两步抽提法.去离子水抽提和乙醇抽提.将索氏提起器Z1U05 至少12h,立训转移至干烘器内冷却.恒墮.第一步上离子总抽捉：特确称収2體样品.用谑纸包好后故入提取管中.注意滤祇筒髙度不超过虹吸进高度使得抽提效果更好.然后商提取烧版中加入去离子水190±5 mL,安装盍氏提取仪器装置,用电炉加热.保证每小时4・5次虹吸.回流1() h左右.回流完毕，停止加热. 使仪器冷却至空温。
稻壳中纤维素_半纤维素和木质素的测定
40 检测分析2005,No.8粮食与饲料工业CEREAL &FEED I N DUST RY收稿日期:2005-06-09作者简介:熊素敏(1980-),女,硕士研究生,主要从事谷物资源开发与低聚糖的研究。
稻壳中纤维素、半纤维素和木质素的测定熊素敏,左秀凤,朱永义(河南工业大学粮油食品学院,河南郑州 450052)摘 要:阐述了几种不同的测定稻壳中纤维素、半纤维素和木质素含量的方法。
最终选定测定稻壳中纤维素、半纤维素和木质素含量的方法分别为72%浓硫酸水解法、2mol/L 盐酸水解法和浓硫酸法。
结果测得纤维素、半纤维素、木质素含量分别为21.9%、19.0%、17.8%。
关键词:稻壳;纤维素;半纤维素;木质素;测定中图分类号:TS210.1 文献标识码:A 文章编号:1003-6202(2005)08-0040-02D eter m i n a ti on of Cellulose,He m i 2Cellulose and L i g i n i n R i ce HullABSTRACT:D ifferent methods for deter m inati on of cellul ose,he m i 2cellul ose and ligin in rice hull were intr oduced .The finally se 2lected methods for deter m inati on of cellul ose,he m i 2cellul ose and ligin in rice hull were the hydr olysis of 72%H 2S O 4,the hydr olysis of 2mol/L HCl and the method of concentrated sulfuric acid res pectively .The deter m inati on results indicated that the contents of cellu 2l ose,hem i -cellul ose and ligin were 21.9%,19.0%and 17.8%res pectively .KE YWO R D S:rice hull;cellul ose;he m i 2cellul ose;ligin;deter m inati on 稻壳是碾米工业的主要副产品之一,约占稻谷质量的20%。
纤维素、半纤维素、木质素测定
原理采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
试剂的配制中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2•2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）； 1N 硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。
纤维素_半纤维素_木质素等植物组成成分的测定
纤维素测定：纤维素是植物细胞壁的主要成分之一，纤维素含量的多少，关系到植物细胞机械组织发达与否。
因而影响作物的抗倒伏，抗病虫害能力的强弱。
测定粮食、蔬菜及纤维作物产品中纤维素含量是鉴定其品质好坏的重要指标。
一、原理纤维素（cellulose）为β－葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热能分解成β－葡萄糖。
β－葡萄糖在强酸作用下，可脱水生成β－糠醛类化合物。
β－糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合，生成黄色的糠醛衍生物。
颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
二．材料、仪器设备及试剂（一）材料：烘干的米、面粉或风干的棉、麻纤维。
（二）仪器设备：1. 小试管；2. 量筒；3. 烧杯；4. 移液管；5. 容量瓶；6. 布氏漏斗；7. 分析天平；8. 水浴锅；9. 电炉；10. 分光光度计。
（三）试剂：1. 60％H2SO4溶液；2. 浓H2SO4（AR）；3. 2％蒽酮试剂：将2g蒽酮溶解于100ml乙酸乙酯中，贮放于棕色试剂瓶中；4. 纤维素标准液：准确称取100mg纯纤维素，放入100ml量瓶中，将量瓶放入冰浴中，然后加冷的60％H2SO460～70ml，在冷的条件下消化处理20～30min；然后用60％H2SO4稀释至刻度，摇匀。
吸取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加蒸馏水稀释至刻度，则每ml含100μg纤维素。
三.实验步骤（一）求测纤维素标准回归方程1. 6支小试管，分别放入0，0.40，0.80，1.20，1.60，2.00ml纤维素标准液，然后分别加入2.00，1.60，1.20，0.80，0.40，0ml蒸馏水，摇匀，则每管依次含纤维素0，40，80，120，160，200μg。
2. 向每管加0.5ml2％蒽酮，再沿管壁加5.0ml浓H2SO4，塞上塞子、摇匀，静置1min。
然后在620nm下，求测不同含量纤维素溶液的吸光度。
3. 以测得的吸光度为Y值，对应的纤维素含量为X值，求得Y随X而变的回归方程。
纤维素_木质素_半纤维素含量的测定-用
参考文献：
王金主, 王元秀, 李峰, 高艳华, 徐军庆, 袁建国. 玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素的测定[J]. 山东食品发酵, 2010,(03)
半纤维素含量的测定
所需试剂：
质量分数为8 0％ 硝酸钙溶液、蒸馏水、2 mo l／L 的HC I、酚酞、NaOH、葡萄糖溶液、DNS（3，5 一 二硝基水杨酸）
1 ． 1 ． 2测定
取烘干样加入混合液 ( 溶液中硫酸的质量分数为1 0 ％；重铬酸钾的浓度为0 .1 mol ／ L)1 0 ml ， 摇匀后沸水浴1 5 mi n ，全部转入干净的三角瓶中冷却后滴定。加入质量分数为2 0 ％ KI 溶液5 ml ， 用0 .2 mo l ／ L 的硫代硫酸钠滴定至溶液刚显蓝色且 半分钟内不变色，另作一未加秸秆的空白。 纤维素含量按下式计算：
纤维素含量测定
所需试剂：
醋酸和硝酸混合液 ( 体积比1 ： 1 )、蒸馏水、硫酸和重铬酸钾的混合液（硫酸的质量分数为1 0 ％；重铬酸钾的浓度为0 .1 mol ／ L）、质量分数为20%碘化钾、0.2mol/L硫代硫酸钠
所需仪器：
离心机、刻度试管、刻度离心管、烘箱、三角瓶、滴定管 于刻度试管 ( 容量为 1 5 ml )中，加人醋酸和硝酸混合液 ( 体积比1 ： 1 ) 5 ml ，盖上盖于沸水浴中加热3 0 mi n ，全部转至塑料刻度离心管 ( 容量为5 0 ml )中，加蒸馏水稀释 至4 5 ml刻度线，冷却后以8000转每分的转速离心 1 5mi n ，去除上清液，再加蒸馏水至4 5 ml刻度线然 后离心去上清夜，以同样的方法再洗两次后于烘 箱8 0℃烘干。
X = k ( a — b ) ／ ( n ×2 4 )
新三大素测定方法
半纤维素百分含量=
木质素百分含量=
式中:m0为取样量；L为试液体积；
三大素测量方法
1、测量原理：
用72%的浓硫酸和4%的稀硫酸两步水解试样，使木质纤维素中的组分水解成易定量物质。其中，纤维素和半纤维素水解为单糖，用高效液相色谱法进行定量，而木质素采用灼烧法定量。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ2、具体操作步骤：
（1）将物料烘干至固形物含量大于90%，物料粉碎至粒径<2mm。
（2）称取300±10.0mg样品，小心放入压力管底部，记为M0
（9）用真空泵过滤水解产物，得到过滤后的水解液和滤渣。
（10）残渣:用热蒸馏水洗涤至洗液呈中性后，105℃烘干，称重M1后，在550℃下灰化，得灰分与漏斗总重M2，计算木质素含量。
（11）吸取5mL水解液，将液体过0.2um针孔膜，进HPLC测定。根据色谱结果计算纤维素、半纤维素含量，对于葡萄糖等六碳糖转化为纤维素需乘以系数0.9，木糖等五碳糖转化至木聚糖需乘以系数0.88。
（6）准备SRS样品，用来校正单糖被稀酸水解引起的损失。将10mL的SRS溶液加到压力管里,再加348.4uL 72%的H2SO4。
SRS溶液配制：葡萄糖:3g/L,木糖:0.8g/L,阿拉伯糖: 0.4g/L。
（7）将含有样品和SRS的试管放入灭菌锅中，121℃下，处理1h。
（8）使水解后的样品慢慢冷却至接近室温。
（注：操作时尽量避免样品粘壁）。
（3）加入3.00mL 72%浓硫酸到试管中，使用玻璃棒充分搅拌，确保所有的样品都被浸湿。
（4）将压力管放在30℃的水浴锅中反应60min，每5-10min用玻璃棒搅拌一次，同时保证试管浸在水浴中。
（5）水解60 min后，将压力管从水浴中取出，加入纯水84mL，使硫酸稀释至4%，将盖子盖好，翻转充分混匀。
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原理采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。
植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。
将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。
试剂的配制中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2?2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7?10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）； 1N 硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。
用20ml丙酮冲洗二次，抽滤。
将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。
酸性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100 ml酸性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。
趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。
用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。
将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。
?酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定?????? 将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，在20℃消化3h后过滤，并冲洗至中性。
消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。
结果计算中性洗涤纤维含量的计算：NDF（%）=（W1－W2）/ W×100式中：W1—玻璃坩埚和NDF重（gW2—玻璃坩埚重（g） W—试样重（g）酸性洗涤纤维含量的计算：ADF（%）=（G1－G2）/G×100式中：G1—玻璃坩埚和ADF重（g） G2—玻璃坩埚重（g） W—试样重（g）半纤维素含量的计算：半纤维素（%）=NDF（%）－ADF（%）纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%）酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分（硅酸盐,%）酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定的优化：把酸性洗涤纤维置于50ml烧杯中，加入5ml 72%硫酸，20℃水解3h，然后加水45ml，室温过夜，次日用已称恒重的3号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至pH6.5，于60℃烘干，称重。
把剩余残渣在马福炉中550℃经2.5h灰化，测得灰分重量。
洗涤优化：经过实际试验，发现中性洗涤纤维测定和酸性洗涤纤维测定中用丙酮冲洗这步效果不大，测量精度要求不高时，可省略。
方法一：化学滴定法（我们测定出来的结果较文献报道偏低）（一）纤维素含量的测定1. 所需溶液硝酸和醋酸的混合液，0.5N重铬酸钾溶液，试亚铁灵指示剂0.1N硫酸亚铁铵溶液，浓硫酸，0.1N重铬酸钾溶液。
2. 实验步骤（1）??配制所需的各种溶液，硫酸亚铁铵溶液在使用的一周内准备，并在使用当天测定其滴定度K。
用该硫酸亚铁铵溶液滴定25mL 0.1N的重铬酸钾溶液，用去m mL。
K= 25×0.1/m（2）??称取自然风干的生物质粉末0.05-0.06g，数值为n（3）??装入离心管内，加入硝酸和醋酸的混合液5mL（4）??塞住离心管，在沸水中煮沸25min，并定期搅拌（5）??离心，倒去清液，加入蒸馏水离心洗涤沉淀，共洗三次（6）??加入10mL 0.5N的重铬酸钾溶液和8mL浓硫酸，搅匀，放入开水中10min，并定期搅拌（7）??冷却，倒入锥形瓶中，用少许蒸馏水冲洗沉淀，滴入3滴试亚铁灵试剂，用0.1N的硫酸亚铁铵溶液滴定，用去b mL，由黄色经黄绿色至红褐色为终点（8）??用0.1N的硫酸亚铁铵溶液单独滴定加入8mL浓硫酸和10mL 0.5N重铬酸钾溶液，用去a mL （9）??生物质中纤维素的含量计算公式x% = 0.675×K（a－b）/n（二）半纤维素含量的测定1. 所需溶液80%硝酸钙溶液，2N盐酸，酚酞指示剂，2N氢氧化钠溶液，碱性铜试剂，草酸-硫酸混合液，0.5%淀粉，0.01N硫代硫酸钠溶液。
2. 实验步骤（1）??称取自然风干的生物质粉末0.1-0.2g，数值为n（2）??装入小烧杯中，加入15mL 80%的硝酸钙溶液，盖好加热至沸腾，在慢慢沸腾的情况下加热5min （3）??分步离心，分别用10mL热水洗涤沉淀三次（4）??在沉淀中加入10mL 2N的盐酸，搅匀，沸水浴中搅拌情况下微沸45min（5）??离心，残渣分别用10mL蒸馏水冲洗三次，冲洗后的水溶液合并在离心液中（6）??加入1滴酚酞，用2N氢氧化钠溶液中和到显橙红色（7）??转入100mL的容量瓶，稀释到刻度（8）??用干燥滤纸过滤到干燥烧杯中（9）??移液管吸取10mL滤液，加入10mL碱性铜试剂，盖好在沸水中煮15min（10）??冷却，加入5mL草酸-硫酸混合液，加入0.5mL 0.5%淀粉，用0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去b mL（11）??取10mL碱性铜试剂，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL滤液，加入0.5mL 0.5%的淀粉，0.01N 硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去a mL（12）??生物质中半纤维素的含量计算公式x% = 0.9×100 [ 248－（a－b）]（a－b）/10000×10×n （三）木质素含量的测定1. 所需溶液1%醋酸，丙酮，73%硫酸，10%氯化钡溶液，0.5N重铬酸钾溶液，浓硫酸，0.1 N硫酸亚铁铵溶液，试亚铁灵指示剂。
2. 实验步骤（1）??标定新配的0.1N硫酸亚铁铵溶液, 滴定度为K（2）??称取自然风干的生物质粉末0.05-0.1g，数值为n（3）??装入离心管，加入10mL 1％醋酸，摇动5min混匀（4）??离心，用5mL 1％醋酸洗沉淀（5）??加丙酮3-4mL，在摇荡的情况下浸泡3min，洗三次（6）??用玻璃棒将沉淀沿管壁分散开，将离心管放热水中使沉淀充分干燥（7）??在干燥沉淀中加入73％硫酸3mL，用玻璃棒搅匀，挤压成均匀的浆液（8）??室温下放置一夜（9）??加入10mL蒸馏水，搅匀，置沸水中5min（10）??冷却，加入0.5mL 10%氯化钡溶液，搅匀，离心，倒出清液，分别用10mL蒸馏水冲洗沉淀两次，每次要混匀（11）??沉淀中加入10mL 0.5N的重铬酸钾溶液和8mL浓硫酸，放入沸水不时搅拌15min（12）??冷却，倒入锥形瓶中，用少许蒸馏水冲洗沉淀，滴入3滴试亚铁灵试剂，用0.1N的硫酸亚铁铵溶液滴定，用去b mL，由黄色经黄绿色至红褐色为终点（13）??用0.1N的硫酸亚铁铵溶液单独滴定加入8mL浓硫酸的10mL 0.5N重铬酸钾溶液，用去a mL（14）??生物质中木质素的含量计算公式x% = 0.433×K （a－b）/n半纤维素含量的测定<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />p??????方法原理?????用沸腾的80％硝酸钙溶液使淀粉溶解，同时将干扰测定半纤维素的溶于水的其它碳水化合物除掉。
将沉淀用蒸馏水冲洗以后，用较高浓度的盐酸，大大缩短半纤维素的水解时间，水解得到的糖溶液，稀释到一定体积，用氢氧化钠溶液中和，其中的总糖量用铜碘法测定半纤维素含量的测定所需溶液（1）80%硝酸钙溶液（2）2?mol/l盐酸（3）酚酞指示剂（4）2?mol/l氢氧化钠溶液（5）碱性铜试剂（配置方法：称取无水Na2CO3?40g，溶于100ml蒸馏水中,溶后加酒石酸7.5g若不易溶解可稍加热，冷却后移入1000ml的容量瓶中。
另取纯结晶CuSO4?4.5g溶200ml蒸馏水中，溶后再将此溶液倾入上述容量瓶内，加蒸馏水至1000ml刻度，放置备用）（6）草酸-硫酸混合液?（7）0.5%淀粉???（8）0.1mol/l?硫代硫酸钠溶液p??????实验步骤（3个平行）（1）称取自然风干的生物质粉末0.1-0.2g，数值为n（2）装入10ml?离心管中，加入10mL?80%的硝酸钙溶液，盖好加热至沸腾，在慢慢沸腾的情况下加热5min （3）分步离心，分别用10mL热水洗涤沉淀3次，之后加5ml丙酮再洗3次。
（4）在沉淀中加入10mL?2?mol/l的盐酸，搅匀，沸水浴中不停搅拌情况下微沸45min（5）离心，残渣分别用10mL蒸馏水冲洗三次，冲洗后的水溶液合并在离心液中。
（注意：离心液千万别倒掉了，要倒在三角瓶中）（6）加入1滴酚酞，用2?mol/l氢氧化钠溶液中和到显橙红色(或者成为玫瑰色)（7）转入100mL的容量瓶，稀释到刻度（8）用干燥滤纸过滤到干燥烧杯中（注：抛弃最初滤出的少量滤液）（9）移液管吸取10mL滤液装入大试管中，加入10mL碱性铜试剂，盖好在沸水中煮15min（10）冷却，加入5mL草酸-硫酸混合液（加酸混合的时候必须在不断搅拌的情况下加入），再加入0.5mL?0.5%淀粉，用0.1?mol/l硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去b?mL（11）取10mL碱性铜试剂，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL滤液，加入0.5mL?0.5%的淀粉，0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去a?mL（做空白对照）（12）生物质中半纤维素的含量计算公式????????????x%=0.9×100×[248－（a－b）]（a－b）/（1000×n）纤维素的测定方法原理：??????生物质（浒苔、锯末和玉米秸秆）在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。