中和试验
[医学]免疫学课件——第十一章 中和试验
先将病毒稀释成每一接种计量含100空斑 单位(PFU),加等量稀释的血清,37℃1小时.每一 稀释度接种3个已形成单层细胞的空斑瓶,同时 用同样稀释的病毒加等量的Hanks液作为对照.
免疫学原理与技术
空斑减少法中和试验
病毒稀释液
100PFU/0.5毫升
免疫学课件——第十一章 中 和试验
病毒或毒素与相应的中和抗体结合后,可使 其失去致病能力,此种中和反应有严格的种,型 特异性,而且还可以定量,所以可以定性,定量检 测病毒,毒素或抗体.
中和试验是以病毒或毒素对生物系统的毒 力为基础的,所以首先根据病毒,毒素特性选择 合适的细胞,鸡胚或试验动物,测病毒,毒素对其 毒价,再测抗体中和后的毒价,如果毒价有较明 显的变化,说明抗原,抗体发生了反应,即抗体对 病毒或毒素发生了中和.而且还可以根据毒价 的变化,来判断血清中抗体中和病毒或毒素的 能力—中和价(抗体的定量)
%
数
数
10-4
6
0
100
13
0
13/13
100
10-5
5
1
83
7
1
7/8
88
10-6
2
4
33
2
5
2/7
29
10-7
0
6
0
0
11
0/11
0
注:CPE为细0-5-lgTCID50 88%-50%
=
lg10-5-lg10-6
88%-29%
lgTCID50=-5.64 TCID50=10-5.64,0.1毫升
血清中和价(lg)=L+d(S-0.5)
中和试验
中和试验中和试验是病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力的试验方法。
所属分类:免疫学概述动物受到病毒感染后,体内产生特异性中和抗体,并与相应的病毒粒子呈现特异性结合,因而阻止病毒对敏感细胞的吸附,或抑制其侵入,使病毒失去感染能力。
Y3r3X。
中和试验(Neutralization Test)是以测定病毒的感染力为基础,以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据,来判定免疫血清中和病毒的能力。
GMlpm。
两种试验方法介绍中和试验常用的有两种方法:一种是固定病毒量与等量系列倍比稀释的血清混合,另一种是固定血清用量与等量系列对数稀释(即十倍递次稀释)的病毒混合。
XNI6d。
(一) 定血清-稀释病毒法(病毒中和试验)1.病毒毒价的测定毒价单位:衡量病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD),即经规定的途径,以不同的剂量接种试验动物,在一定时间内能致全组试验动物死亡的最小剂量。
但由于剂量的递增与死亡率递增不呈线性关系,在越接近100%死亡时,对剂量的递增越不敏感。
而一般在死亡率越接近50%时,对剂量的变化越敏感,故现多改用半数致死量(LD50)作为毒价测定单位,即经规定的途径,以不同的剂量接种试验动物,在一定时间内能致半数试验动物死亡的剂量。
用鸡胚测定时,毒价单位为鸡胚半数致死量(ELD50)或鸡胚半数感染量(EID50)。
用细胞培养测定时,用组织细胞半数感染量(TCID50)。
在测定疫苗的免疫性能时,则用半数免疫量(IMD50)或半数保护量(PD50)。
shW6H。
(1) LD50的测定(以流行性乙型脑炎病毒为例)。
测定方法:将接种病毒,并已发病濒死的小鼠,无菌法取脑组织,称重、加稀释液充分研磨,配制成10-1悬液,3 000r/min离心20分钟,取上清液,以10倍递次稀释成10、10、10……10,每个稀释度分别接种5只小鼠,每只脑内注射0.03ml,逐日观察记录各组的死亡数。
中和试验
测定方法:将接种病毒,并已发病濒死的小鼠,无菌法取脑组织,称重、加稀释液充分研磨,配制成10-1悬液,3 000r/min离心20分钟,取上清液,以10倍递次稀释成10、10、10……10,每个稀释度分别接种5只小鼠,每只脑内注射0.03ml,逐日观察记录各组的死亡数。
IgLD50(或TCID50)=L+d(S-0.5)
L为病毒最低稀释度的对数,d为组距,即稀释系数,S为死亡比值的和。本例L=-4,d=-1,S=1+1+5/6+1/6=3
IgLD50=-4+(-1)×(3-0.5)
=-6.5
则LD50=10,0.03ml
注意:用本法计算稀释血清中和试验中和效价时,S应为保护比值之和。
(3)病毒的稀释按选定的病毒稀释度范围,将病毒液作10倍递次稀释,使之成为所需要的稀释度。
(4)感作将不同稀释度病毒分别定量加入两排无菌试管内,第一排每管加入与病毒等量的免疫(或被检)血清作为试验组;第二排每管加入与免疫(或被检)血清同种的正常阴性血清作为对照组;充分摇匀后放37℃感作12h。
(5)接种按“病毒价测定”中所述接种方法接种试验动物(或鸡胚、组织细胞)。观察持续时间,根据病毒和接种途径而定。
(2)EID50的测定(以新城疫病毒为例)将新鲜病毒液体10倍递次稀释法释成10-1、10-2、10-3……10-9不同稀释度,分别接种9-10日龄鸡胚尿囊腔,鸡胚必须来自健康母鸡,并且没有新城疫抗体。每只鸡胚接种0.2ml,每个稀释度接种6只鸡胚为一组,以石蜡封口,置37-38℃培养,每天照蛋,24h之内死亡的鸡胚弃掉,24h之后死亡的鸡胚置4℃保存。连续培养5天,取尿囊液作血球凝集试验,出现血凝者判阳性,记录结果,按上述方法计算EID50。
中和试验
4.病毒的中和抗体(neutralization antibody )指:针对病毒某些表面抗原的抗体,此类 抗体能与细胞外游离的病毒结合从而消除病 毒的感染能力。 5.中和抗体的作用机制:
①直接封闭病毒表面抗原,如与病 毒表面吸附蛋白(VAP)结合,从 而阻断病毒的吸附
②改变病毒表面结构
6.病毒中和试验:Neutralization of a virus is defined as the loss of infectivity through reaction of the virus with specific antibody.
• 以测定病毒感染力为基础,以病毒受免疫 血清中和后残存的感染力为依据,来判定 免疫血清中和病毒的能力。
步 骤 三
加至已长成单层 的MRC-5细胞
16h,18h,20h 所铺细胞数目要求较高,防止细胞叠层
梯度乙醇固定细胞, 封闭30min
相继用IE1单抗, 生物素标记羊抗鼠IgG,
链霉亲和素-HRP, 以及底物显色
图像采集与数据处理
步骤一 步骤二 步骤三
实验组
病毒对照
细胞对照
25μ l血清 25μ l维持液 25μ l维持液
以hcmv中和抗体效价测定为例2倍稀释血清样02ml2倍稀释血清样品终体积02ml200pfu02ml200pfuhcmv每孔02ml加到成单层mrc5细胞37孵育1h弃去液体弃去液体pbs洗三含03琼脂的维持液覆盖35天再次覆盖14天甲醛固定孵育1h甲基蓝染色中和抗体效价的测定同时设病毒对照和细胞对照病毒对照组只加病毒不加血清细胞对照组用维持液代替血清和病毒
体内中和试验也称保护试验,试验时先对实验动物接 种疫苗或抗血清,间隔一定时间后,再用一定量病毒攻 击,最后根据动物是否得到保护来判定结果。常用于疫 苗免疫原性的评价和抗血清的质量评价。
红细胞中和试验操作规程
红细胞中和试验操作规程
《红细胞中和试验操作规程》
一、实验目的
红细胞中和试验是一种用于检测体液中抗体和抗原反应的实验方法。
本实验的目的是通过红细胞中和试验来判断患者的血清中是否存在特定的抗体,并对其抗原进行鉴定。
二、实验仪器与试剂
1. 离心机
2. 玻璃试管和试管架
3. 1% 的红细胞悬液
4. 不同血型抗体
三、实验步骤
1. 取一根试管,在底部标记所需进行的血型和试验样本编号。
2. 取充分标记的血样和同等数量的1%红细胞悬液,混合均匀。
3. 在37℃孵育20分钟。
4. 用离心机离心5分钟。
5. 观察红细胞悬液下清液的混浊度,判断是否发生了红细胞中和反应。
四、实验结果判定
1. 若上清液清澈,表示未发生红细胞中和反应。
2. 若上清液混浊,表示发生了红细胞中和反应,即患者血清中含有特定抗体。
五、实验注意事项
1. 实验过程中要严格遵守无菌操作,以免污染。
2. 实验操作时要注意用手套和口罩,避免细菌感染和呼吸道排放。
3. 实验结束后,要将试管和实验仪器及时清洗消毒,以保持实验室卫生。
六、实验结果记录
实验结束后,要将实验结果准确记录在实验记录表中,并及时归档保存。
以上就是关于红细胞中和试验操作规程的详细介绍,希望能对您有所帮助。
酸碱中和实验
酸碱中和实验酸碱中和实验是化学实验中常见的一种实验方法,用于研究酸和碱之间的化学反应,测定其之间的等量点以及计算出物质的摩尔浓度。
本文将介绍酸碱中和实验的步骤和原理,以及实验中可能遇到的问题和解决方法。
一、实验步骤1. 准备实验器材和试剂:实验器材:烧杯、滴定管、酸碱指示剂、容量瓶等;试剂:酸和碱的溶液,一般选取浓度适中的酸和碱。
2. 预处理实验器材:使用洗涤剂洗净实验器材,用蒸馏水冲洗干净后晾干。
3. 配制溶液:a) 使用容量瓶准确地量取一定体积的酸和碱溶液;b) 分别将酸和碱溶液倒入两个干净的烧杯中。
4. 加入酸碱指示剂:在酸碱溶液中加入几滴酸碱指示剂,通常用酚酞或溴酚蓝。
5. 滴定:a) 用滴定管从酸溶液中取少量滴定液,滴入碱溶液中;b) 每滴加入一滴,同时轻轻搅拌溶液,直到颜色发生明显变化;c) 记录滴定的滴数。
6. 结果计算:根据滴定的滴数和酸碱溶液的浓度,可以计算出反应的摩尔比例和物质的摩尔浓度。
二、实验原理酸碱中和反应是一种酸和碱分子之间相互中和的化学反应。
在酸碱中和实验中,滴定是最常用的方法,可以通过滴定的滴数确定酸碱溶液的摩尔比例,从而计算出其摩尔浓度。
滴定实验中的酸碱指示剂是起到指示酸碱等量点的作用。
酸碱指示剂有选择性地发生颜色变化,当酸溶液和碱溶液完全中和时,酸碱指示剂的颜色也发生改变,标志着反应的等量点。
实验中,滴定液的添加量要控制得当,以免过量或不足,影响实验结果的准确性。
需要根据实验所使用的酸碱溶液的浓度进行适当的取滴,以保证实验的可靠性。
三、实验注意事项及问题解决方法1. 仪器和容器应洁净无杂质,以免影响实验结果;解决方法:洗涤剂清洗和蒸馏水冲洗,确保无杂质。
2. 滴定过程中要轻轻搅拌溶液,以保证反应均匀进行;解决方法:使用玻璃棒轻轻搅拌溶液。
3. 滴定液加入过多或不足,会导致实验结果的不准确;解决方法:滴定液加入过多时,可以再滴加酸或碱溶液至颜色变化明显,再次记录滴定液的滴数。
中和试验步骤
中和试验步骤1、测定病毒TCID100µl50/2、制备细胞悬液,使细胞浓度约为1×105个/mL,加到96孔细胞培养板中,每孔100µl。
置37℃CO2培养箱中,直至细胞长至单层。
3、血清灭活:将待检测的血清放到56℃水浴30min(此时血清中的病原菌都已被灭活)。
4、100TCID50/50µl病毒液或者200TCID50/25µl病毒液的制备,这两者是等价的。
100TCID50/50µl病毒液制备方法:计算已测定了TCID50/100µl 的病毒原液稀释至100TCID50/50µl的稀释倍数:lg100TCID50/50µl=-log100-log(100/50)=-2.30103得100TCID50/50µl=10-2.30103,假设病毒TCID50/100µl=10-6.3,则稀释倍数=(100TCID50/50µl)÷(TCID50/100µl)=106.3÷102.30103≈9976倍。
5、取一块新的96孔板,1-10列每孔加50µl待检血清原液,再用8道孔排枪加每孔100TCID50/50µl病毒液50µl,稍微吹打使血清与病毒液混均。
11列先每孔加50µl维持液,再于11列的第一孔加50µl 标准阳性血清,将标准阳性血清往下作1:2、1:22至1:28倍稀释。
12列第1孔加标准阴性血清原液50µl,再加100TCID50/50µl病毒液50µl。
用维持液将100TCID50/50µl的病毒液作4次连续10倍稀释,稀释成10TCID50/50µl、1TCID50/50µl、0.1TCID50/50µl,依次加到第12列的3到6孔,每孔加50µl,再每孔加50µl维持液。
第五节 中和试验
第十一章血清学试验第五节中和试验根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验,称中和试验(Neutralization test)。
中和试验极为特异和敏感,既能定性又能定量,主要用于病毒感染的血清学诊断、病毒分离株的鉴定、病毒抗原性的分析、疫苗免疫原性的评价、血清抗体效价的检测等。
中和试验可在体内进行也可在体外进行。
体内中和试验也称保护试验,试验时先对实验动物接种疫苗或抗血清,间隔一定时间后,再用一定量病毒攻击,最后根据动物是否得到保护来判定结果。
常用于疫苗免疫原性的评价和抗血清的质量评价。
体外中和试验是将抗血清与病毒混合,在适当条件下作用一定时间后,接种于敏感细胞、鸡胚或动物,以检测混合液中病毒的感染力。
根据保护效果的差异,判断该病毒是否已被中和,并可计算中和指数,即中和抗体的效价。
根据测定方法不同,中和试验有终点法中和试验和空斑减数法中和试验等方法。
毒素和抗毒素也可进行中和试验。
其方法与病毒的中和试验基本相同。
一、终点法中和试验终点法中和试验(Endpoint neutralization test)是滴定使病毒感染力减少至50%时,血清的中和效价或中和指数。
有固定病毒稀释血清和固定血清稀释病毒两种方法。
(一)固定病毒稀释血清法将已知的病毒量固定,血清作倍比稀释,常用于测定抗血清的中和效价。
1.病毒毒价单位病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD),但由于剂量的递增与死亡率递增的关系不是一条直线,而是呈S形曲线,在越接近100%死亡时,对剂量的递增越不敏感。
而死亡率愈接近50%时,剂量与死亡率呈直线关系,所以现基本上采用半数致死量(LD50)作为毒价单位,而且LD50的计算应用了统计学方法,减少了个体差异的影响,因此比较准确。
以感染发病作为指标的,可用半数感染量(ID50)。
用鸡胚测定时,可用鸡胚半数致死量(ELD50)或鸡胚半数感染量(EID50);用细胞培养测定时,可用组织细胞半数感染量(TCID50)。
免疫学课件-第十一章中和试验PPT课件
些难以治愈的病毒感染具有重要意义。
03
挑战与前景
目前中和抗体药物的研究与开发仍面临诸多挑战,如抗体筛选、稳定性、
生产成本等问题,但随着技术的不断进步,相信中和抗体药物将具有广
阔的应用前景。
疫苗的研究与开发
研究内容
中和试验在疫苗的研究与开发中也具有重要作用,通过检测疫苗免 疫后机体产生的中和抗体,评估疫苗的保护效果和免疫原性。
中和试验在免疫学研究中的前景
01
02
03
病毒变异研究
中和试验对于研究病毒变 异和进化具有重要意义, 有助于了解病毒变异对免 疫应答的影响。
疫苗研发
中和试验在疫苗研发中发 挥着重要作用,可用于评 估疫苗免疫效果和保护力。
抗体药物研发
中和试验在抗体药物研发 中具有关键作用,可用于 评估抗体药物的疗效和安 全性。
试验方法
将效应分子与细胞结合,观察细胞功能变化,如降低或消除即认为 被中和。
应用
细胞的中和试验可用于细胞信号转导研究、药物作用机制研究等。
03
中和试验的应用
病毒性疾病的诊断
诊断方法
中和试验常用于病毒性疾病的诊断,通过检测患者血清中 的中和抗体,判断是否感染病毒。
诊断价值
中和抗体出现较晚,病毒中和抗体滴度与病毒血症、临床 症状的消失及产生免疫力相一致,故中和试验可用来确定 病毒感染的类型、病程及预后。
免疫学课件-第十一章中 和试验
• 中和试验概述 • 中和试验的常用方法 • 中和试验的应用 • 中和试验的挑战与展望
01
中和试验概述
中和试验的定义
中和试验是一种检测抗体或抗原的试 验方法,通过加入适量的抗体或抗原 ,使原有的免疫反应被抑制或消除, 从而确定抗体或抗原的量。
中和试验原理
中和试验原理什么是中和试验中和试验是一种实验方法,用于研究化学物质之间的中和反应。
中和反应是指酸和碱之间发生的化学反应,产生盐和水。
中和试验可以用于测定酸碱溶液的浓度、酸碱中和点的确定以及酸碱反应的速率等。
中和反应的原理中和反应是一种酸碱反应,其原理基于酸和碱之间的化学反应。
在中和反应中,酸和碱的质子和氢氧根离子结合,形成水和盐。
中和反应的化学方程式可表示为:酸 + 碱→ 盐 + 水例如,硫酸和氢氧化钠之间的中和反应如下所示:H2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2H2O在这个反应中,硫酸是酸,氢氧化钠是碱,它们发生中和反应,生成硫酸钠盐和水。
中和试验的步骤中和试验通常包括以下步骤:准备试剂和仪器首先,需要准备所需的试剂和仪器。
通常情况下,需要酸和碱两种试剂,以及用于测量溶液浓度的仪器,如PH计或酸碱滴定管。
测量初始溶液浓度将待测酸和碱的浓度测量并记录下来。
这可以通过使用标准溶液、滴定法或PH计等方法来完成。
确定酸碱的滴定比例根据化学方程式确定酸碱的滴定比例。
滴定比例是指滴定过程中酸和碱反应所需的摩尔比。
例如,对于硫酸和氢氧化钠的中和反应,滴定比例为1:2。
开始滴定将酸和碱分别加入滴定装置中,并开始滴定过程。
在滴定过程中,缓慢滴入酸或碱,直到滴定剂的颜色发生明显的改变。
这表明酸碱已经完全中和。
计算酸碱溶液的浓度或酸碱中和点根据滴定过程中酸碱的滴定比例,可以计算出酸碱溶液的浓度或酸碱中和点。
通过记录滴定剂的用量和滴定比例,可以计算出酸碱溶液的浓度。
如果滴定过程中使用了酸碱指示剂,滴定剂的颜色改变可以确定酸碱中和点。
中和试验的应用中和试验在许多领域都有广泛应用,包括化学、生物化学、医学和环境科学等。
以下是一些中和试验的应用:1.测定酸碱溶液的浓度:通过中和反应,可以测定酸碱溶液的浓度。
这对于分析化学和医学诊断等领域非常重要。
2.确定酸碱中和点:中和试验可以用于确定酸碱中和点,即酸和碱完全中和的点。
中和试验步骤范文
中和试验步骤范文中和试验是一种常用的化学实验方法,用于确定酸和碱之间的化学反应。
以下是中和试验的一般步骤:步骤一:准备实验室设备和材料1.准备酸和碱的溶液:选择具有明确浓度的酸和碱,例如盐酸(HCl)和氢氧化钠(NaOH)。
2.根据需要准备酸和碱的溶液,可以通过称重称取固体酸和碱,加入定量体积的稀释水中溶解。
也可以直接使用浓盐酸和氢氧化钠溶液。
3.准备一定数量的稀释水和适当的容器来容纳试验液体和产生的废液。
步骤二:调整酸和碱的浓度1.使用草酸溶液来调整氢氧化钠溶液的浓度。
首先,使用酸碱指示剂(例如酚酞)滴加到酸溶液中,直到溶液变红。
然后,再滴加氢氧化钠溶液调整至溶液变成黄色。
2.使用氢氧化钠溶液来调整盐酸溶液的浓度。
首先,使用酸碱指示剂滴加到酸溶液中,直到溶液变红。
然后,再滴加盐酸溶液调整至溶液变成黄色。
步骤三:进行中和试验1.将一定数量的酸溶液倒入一个容器中,例如烧杯。
2.使用滴定管逐滴滴加碱溶液,同时搅拌溶液。
3.在达到中和终点时,溶液的颜色会发生改变。
可以使用酸碱指示剂来判断中和终点。
例如,使用酚酞指示剂时,终点由红变成黄。
4.记录滴加碱溶液的体积。
5.重复上述步骤2-4,直到两种溶液完全中和。
步骤四:计算酸和碱的浓度1.使用所滴加的碱溶液体积计算酸和碱的摩尔比例。
2.根据酸和碱的摩尔比例,计算酸和碱的浓度。
步骤五:清洁和处理废液1.将实验室设备清洗干净,以防止试剂残留和交叉污染。
2.将废液安全处理,例如将其倒入废液容器中,并按照当地的规定进行处理。
中和试验是一种常用的实验方法,可以用来确定酸和碱之间的化学反应。
通过按照以上步骤进行实验,可以准确测定酸和碱的浓度,并帮助理解酸碱反应的原理。
第三章中和试验(Neutralization)及中和抗体
中和抗体:
1. 快速离心中和抗体(兔抗大鼠 TNF-α)的冻干粉管, 使管盖和管壁上的粉末收集至管底; 2. 加入无菌的双蒸水 200ul,将中和抗体重悬配制成浓度为 0.25mg/ml的贮存液,4 oC可 保存 6 个月,如长期保存,则需分装冻存于 -20oC; 3. 根据细胞因子(重组TNF-α)的ED50(半数有效浓度)来确定中和抗体工作液的浓度 此细胞因子(重组TNF-α, 产品标号: 500-P72, 生产商: Peprotech)的ED50 为 0.05ng/ml, 配制的中和抗体工作液的浓度是此ED50的 10000X,5000X,2000X,1000X,500X, 200X,即 500ng/ml,250ng/ml,100ng/ml,50ng/ml和 25ng/ml和 10ng/ml。因此需将 0.25mg/ml 的中和抗体贮存液用 RPMI-1640 工作液分别作 1:500 ,1:1000 , 1:2500 , 1:5000,1:10000 和 1:25000 稀释。
[试剂配制]
细胞因子:
8. 快速离心细胞因子(重组 TNF-α)的冻干粉管, 使管盖和管壁上的粉末收集至管 底; 9. 加入无菌的双蒸水 100ul,将细胞因子重悬配制成浓度为 0.2mg/ml的贮存液, 4oC可保存 1 周,如长期保存,则需分装冻存于 -20oC; 10. 取一定量的贮存液(0.2mg/ml),用 RPMI-1640 培养液进行 1:100,000 稀释,即 获得浓度为 2.0 ng/ml 的重组 TNF-α 工作液。
实验仪器和材料:
小鼠 L929 细胞 RPMI-1640 培养液 细胞因子--重组大鼠 TNF-α,产品标号:400-14,规格:20ug,生产商:Peprotech 中和抗体--兔抗大鼠 TNF-α,产品标号:500-P72,规格:50ug,生产商:Peprotech 培养板 离心机 培养箱
中和试验
第五节中和试验抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合,因抗体主要来自血清,因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。
第一节概述免疫血清学技术按抗原抗体反应性质不同可分为:1. 凝聚性反应包括凝集试验和沉淀试验。
2. 标记抗体技术包括荧光抗体、酶标抗体、放射性标记抗体、发光标记抗体技术等。
3. 补体参与的反应补体结合试验、免疫黏附试验等。
4. 中和反应病毒中和试验、毒素中和试验。
一、血清学反应的一般特点1. 特异性与交叉性血清学反应具有高度特异性,如抗猪瘟病毒的抗体只能与猪瘟病毒结合,而不能与口蹄疫病毒结合。
这是血清学试验用于分析各种抗原和进行疾病诊断的基础。
但若两种天然抗原之间含有部分共同抗原时,则发生交叉反应。
交叉反应是区分血清型和亚型的重要依据。
2. 抗原抗体结合机理抗原和抗体的结合为弱能非共价键结合,其结合力决定于抗原决定簇和抗体的抗原结合点之间形成的非共价键的数量、性质和距离。
常规的血清学反应,如凝集反应、沉淀反应、补体结合反应等,只有在抗原与抗体呈适当比例时,结合反应才出现凝集,沉淀等可见反应,在最适比例时,反应最明显。
这种因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反应的现象,称为带现象。
二、血清学反应的影响因素1.电解质特异性的抗原和抗体具有对应的极性基(羧基、氨基等),它们互相吸附后,其电荷和极性被中和因而失去亲水性,变为憎水系统。
易受电解质作用失去电荷而互相凝聚、发生凝集或沉淀反应。
2.温度较高的温度可以增加抗原和抗体接触的机会,从而加速反应的出现。
常用37℃水浴保温。
3.酸碱度血清学反应常用pH为6-8,过高或过低的pH可使抗原抗体复合物重新离解。
第二节凝聚性试验抗原与相应抗体结合形成复合物,在有电解质存在下,复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝聚小块或沉淀物,根据此现象来测定相应抗体或抗原,称为凝聚性试验。
分为凝集试验和沉淀试验。
一、凝集试验细菌、红细胞等颗粒性抗原,与相应抗体结合,在有适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集团块,称为凝集试验。
中和试验的名词解释
中和试验的名词解释中和试验是指在化学实验中,通过将酸性物质与碱性物质混合,以达到中和反应的目的。
中和反应是指在化学中,酸性物质与碱性物质发生反应,生成盐和水,并且酸碱中和的物质的性质均发生改变。
中和试验是化学实验中常见的一种操作方法,通过该试验可以研究酸碱中和反应的性质和特点。
在中和试验中,通常使用指示剂来判断反应的终点,从而准确测定酸碱的滴定量。
中和试验的步骤通常包括以下几个方面:1. 准备试剂:首先需要准备酸性物质和碱性物质两种试剂。
酸性物质可以是硫酸、盐酸等,碱性物质可以是氢氧化钠、氢氧化钾等。
2. 混合试剂:将酸性物质和碱性物质缓慢地加入容器中,并且用玻璃棒轻轻搅拌使其充分混合。
3. 添加指示剂:在试验过程中,通常会加入一种称为指示剂的物质,用于指示反应的终点。
常用的指示剂有酚酞、酚酞红、溴噻吩兰等。
4. 测定终点:随着酸碱反应的进行,颜色会发生改变。
通过观察反应液的颜色变化,可以判断出酸碱中和的终点。
中和试验的结果通常用酸度和碱度来表示。
酸度和碱度分别指的是反应液中酸性物质和碱性物质的含量。
在中和反应中,酸度与碱度会发生相等的变化,以达到化学平衡。
除了用于测定酸碱的浓度之外,中和试验还可以用于检验物质的物理和化学性质。
例如,通过测定酸碱中和的结果,可以判断物质的酸碱性质以及化学反应的性质。
中和试验在生活中有着广泛的应用。
例如,在饮料和食品加工过程中,常常需要调整pH值以达到合适的口感和品质。
中和试验可以帮助调整饮料和食品的酸碱度,从而改善产品的口感。
此外,在制药和化妆品工业中,中和试验也被广泛应用于控制产品的酸碱性质。
总结起来,中和试验是一种常见的化学实验方法,用于研究酸碱中和反应的性质和特点。
通过该试验,可以准确测定酸碱的滴定量,并且用于调整产品的酸碱度。
中和试验在化学实验中有着广泛的应用,对于进一步深入了解酸碱中和的反应机制和应用具有重要意义。
微量细胞病变中和试验名词解释
微量细胞病变中和试验名词解释
微量细胞病变(微小的细胞病变)是指在组织、器官或细胞水平上出现的单个或少量细胞的异常变化。
这些异常细胞变化通常是由外界因素(如化学物质、病毒、细菌等)或内部因素(如代谢紊乱、遗传因素等)引起的。
微量细胞病变可以导致组织受损、器官功能异常和疾病发生。
中和试验是一种检测微量细胞病变的常用方法。
中和试验是通过向样本中引入特定的化学物质,观察这些物质对细胞的影响来确定细胞病变的存在。
这种试验通常需要使用一定浓度的化学物质,并且需要严格控制实验条件,以确保实验
结果的准确性和可靠性。
微量细胞病变和中和试验之间的联系在于,它们都与细胞和分子水平上的异常变化有关。
微量细胞病变可以通过多种方式引起,包括病毒感染、化学物质中毒、遗传因素等。
而中和试验则是通过对样本中化学物质的影响来检测微量细胞病变的存在。
因此,中和试验可以用于诊断和监测微量细胞病变,并为疾病诊断和治疗提供支持。
除了用于检测微量细胞病变,中和试验还可以应用于其他领域。
例如,在生物医学研究、药物开发、环境保护等方面,中和试验都具有重要的应用价值。
此外,中和试验还可以用于检测某些遗传性疾病、代谢性疾病等,为这些疾病的诊断和治疗提供依据。
微量细胞病变和中和试验是两种不同的细胞和分子检测方法,但它们之间的联系和应用领域非常广泛。
随着技术的发展和应用场景的不断扩大,微量细胞病变和中和试验将在生物医学研究、疾病诊断和治疗等领域发挥越来越重要的作用。
中和试验原理
中和试验原理中和试验原理一、概述中和试验是一种常见的化学实验,其原理是利用化学反应进行物质的中和。
在实验中,通常会将一种酸性或碱性物质与相应的碱性或酸性物质混合,以达到中和的效果。
本文将详细介绍中和试验的原理。
二、酸碱反应1. 酸碱定义酸和碱是化学反应中常见的概念。
在水溶液中,酸溶液呈现出酸性,而碱溶液呈现出碱性。
根据布朗斯特德定义,酸是能够捐出氢离子(H+)的物质,而碱则是能够接受氢离子(H+)的物质。
2. 酸碱指数为了描述水溶液中酸度或碱度的强度,科学家们引入了pH值作为衡量标准。
pH值越低表示溶液越酸性,而pH值越高表示溶液越碱性。
pH值可以通过以下公式计算:pH = -log[H+]其中[H+]表示水溶液中氢离子浓度。
3. 酸碱反应酸和碱在一定条件下会发生化学反应,这种反应称为酸碱反应。
在酸碱反应中,酸和碱互相中和,生成盐和水。
例如:HCl + NaOH → NaCl + H2O其中HCl是一种强酸,NaOH是一种强碱。
它们在一定条件下混合时会发生化学反应,生成NaCl(盐)和H2O(水)。
三、中和试验原理1. 中和定义在化学实验中,中和指的是将一个酸性物质与一个碱性物质混合在一起,使它们互相中和并形成盐和水。
2. 实验步骤下面是进行中和试验的基本步骤:1)准备两个溶液:一个是酸性溶液,另一个是碱性溶液。
2)使用萘酚红等指示剂来检测溶液的pH值。
3)将两个溶液慢慢混合起来,并用磁力搅拌器或手动搅拌器充分混合。
4)观察溶液变化的颜色,并记录pH值的变化情况。
5)当pH值达到7时,说明酸性和碱性物质已经完全中和,实验结束。
3. 实验原理中和试验的原理是通过化学反应来中和酸性或碱性物质。
在中和试验中,酸性物质会捐出氢离子(H+),而碱性物质会接受氢离子(H+)。
当酸性物质与碱性物质混合时,它们互相中和,并生成盐和水。
例如:HCl + NaOH → NaCl + H2O在这个反应中,HCl是一种强酸,它会捐出氢离子(H+)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
第十三章 中和试验(neutralization test)
学习要点:
毒价滴定; 终点法中和试验; 空斑减少试验。
病毒或毒素与相应的抗体结合,抗体中和了病毒或毒素,失去了对易感动物的致病力,这种试验称为中和试验。
一、简单定性中和试验——毒价滴定
主要用于鉴定病料中病毒及病毒的类型,亦可用于毒素的鉴定。
试验方法:根据病毒的易感性选定试验动物(鸡胚或细胞)及接种途径。
将动物分为对照组与实验组。
试验组:取待检病料磨碎,加生理盐水稀释,加双抗,在冰箱中作用1h或经过滤器过滤,与已知的抗血清等量混合,置于37℃中作用1h后接种动物。
对照组则用正常血清加入稀释病料,作用后,接种另一种动物。
对照组动物发病死亡,而试验组动物不死,即证实病料中含有与已知抗血清相应的病毒。
二、终点法中和试验
1、固定血清稀释病毒法
将病毒用2倍递增稀释,分置二列试管:第一列加入正常血清(对照组);第二列加入待检血清(试验组)。
二列试管分别振荡均匀,置370C中作用1h,将各管混合液分别接种试管动物,每管用3-5只动物。
接种后观察数目,并记录死亡数。
观察结束后,计算起LD50及中和指数。
2、固定病毒稀释血清法
本法用以测定抗病毒的血清中和效价。
将待检血清稀释,加等量已知毒价的病毒液,在试管内中和湖接种动物,观察动物发病及死亡情况,计算其只能中和效价。
三、空斑减少试验
在细胞培养时作中和试验可采用空斑减少法。
一种能使细胞致病变的病毒,在细胞培养上生长后,因其致病变作用使细胞单层脱落,pH与无病变地方也不一样,该处与周围明显不同的、一个局限性的变性细胞区称为空斑。
一个空斑可以当作一个病毒生长的集落,一个单位内空斑数多,病毒就多,故可测出病毒空斑形成单位。
这样,加抗血清与不加抗血清的病毒空斑形成单位之差,就称为空斑减少试验。
使空斑减少50%的血清西式度,就是该血清的中和价。
复习思考题:
1、滴定毒价的常用单位?
2、什么是中和价和中和指数?。