薄层色谱法在药物分析中的应用

薄层色谱在药物分析中的应用

摘要：随着高效液相色谱法的兴起与发展，薄层色谱法曾一度被忽略，直至高效薄层材料和预制板的出现，特别是20世纪80年代后期薄层色谱扫描仪的出现，形成现代仪器化薄层色谱法，才得到了更多的关注。TLC法被许多国家药典用于药物中杂质的检查、药物分析等方面，且是目前药典中收载最多的鉴别与有关物质检查方法之一，具有设备简单、操作简便、分离速度快，灵敏度和分辨率较高等优点。

关键词：薄层色谱，药物分析

薄层色谱法(The layer chromatography，TLC)是将固定相均匀的涂布在具有光洁表面的玻璃、塑料或金属板上形成薄层，在此薄层上进行色谱分离的方法，它属于平板色谱，是一种常用的色谱分离方法。但随着高效液相色谱法的兴起与发展，薄层色谱法曾一度被忽略，直至高效薄层材料和预制板的出现，特别是20世纪80年代后期薄层色谱扫描仪的出现，形成现代仪器化薄层色谱法，才得到了更多的关注。TLC法被许多国家药典用于药物中杂质的检查、药物分析等方面，且是目前药典中收载最多的鉴别与有关物质检查方法之一，具有设备简单、操作简便、分离速度快，灵敏度和分辨率较高等优点。

其中，薄层色谱法用于药物中杂质检查常用的方法有：杂质对照品法（适用于已知杂质并能制备得到杂质对照品的方法）、供试品溶液自身稀释对照法（适用于杂质的结构不能不能确定，或无杂质对照品的情况）、杂质对照品法和供试品溶液自身稀释对照法并用、对照药物法（前两种方法不适用时可用此方法）。

而薄层色谱在药物分析中我们则常用薄层色谱扫描法，其主要用于以下几个方面：

1.中药材与中成药的鉴别与成分分析薄层色谱扫描法在中药材与中成药上

的应用，主要是药材品种的鉴别、含量的测定、成分研究、采收期与炮制方法

等对成分与含量的影响，以及成药中药味的鉴别与含量的测定等。此方法可以

直接在薄层板上进行中药成分的定量分析，其扫描图谱也可作为中药材的质量

评价、鉴别依据。例如：用薄层扫描法可以鉴别黄连品种并对对其所含生物碱

进行定量的测定；用薄层扫描法测定土荆皮中乙酸的含量，以帮助鉴别其真伪

等。以上事例都是对中药材进行的测定。而中成药则相对复杂，不单单只包含

一味药材制剂，多数为复方制剂。因此在薄层扫描法中，依据色谱峰的归属对

中成药中各位药材的鉴别，一般是通过阴、阳双对照法进行的。

2.合成药物及其制剂分析原料药的纯度检查，以及在放置过程中产生的降解

物等的分析，均可通过薄层扫描法来完成。应用薄层扫描法，可以很容易的对

合成药物复方制剂或单方制剂进行原料分析和含量测定。扑炎痛中微量杂质的

测定可以用CS-930型薄层扫描仪，在硅胶GF254薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯

-氯仿-冰乙酸（12:5:3:2.5）为展开剂，利用双波长（λs=244nm，λr=280nm）

锯齿扫描随行外标法，测定扑炎痛中去乙酰物含量

3.药物代谢研究通过分析手段了解药物在体内数量与质量的变化，从而获得

药物动力学各种参数以及药物在体内的转变、代谢方式、途径等信息，均属体

内药物分析范畴。它对于临床合理用药、药品质量评价以及药代动力学研究具

有重要意义。在大量复杂组分中进行微量或超微量药物几代谢物的分析工作，

对于分析方法的灵敏度和选择性都具有较高的要求，而薄层扫描法在多数情况

下都可以满足其分离及灵敏度的要求，且方法简便易行，干扰小，准确度高，

适用于临床和法医快速分析。例如，多索茶碱药物代谢研究，用薄层扫描法，

测定给大鼠口服多索茶碱后，不同时间各组织和体液中多索茶碱的含量。郭辉

等按一定要求制备生物样品：血浆以及心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、肌肉、

脑等均浆。经处理后，将其点样在硅胶GF254高效薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇

（1:0.5）展开，用CS-930型薄层扫描仪在波长277nm扫描斑点，再用随行标

准法计算样品中含原形药物的绝对量，得出每克湿组织或每毫升血浆、尿中的

微克数。结果表明，多索茶碱在大鼠体内药代动力学为一室模型，并能在体内

迅速转化为其他代谢产物。

4.抗菌素分析新霉素的含量的测定可以利用薄层扫描法来完成。用硅胶60F254

高效薄层板，以甲醇-25%氨水-丙酮-氯仿（35:20:20:5）为展开剂，一维上行展

开，展开后以荧光胺进行衍生化，生成具有稳定荧光的物质，再将其浸入二氯

甲烷-三乙胺-液体石蜡中，处理后，在所得的薄层板上便可同时测定新霉素B、

C以及新霉素A。得到的荧光物在λ=365nm光照下，可在暗背景上看到浅兰色

荧光带，然后用CAM-AGⅡ型薄层扫描仪进行荧光测定。对新霉素B和C及新

霉素A的检测限为20ng/斑点。在定量分析时，需要使用对照品，而新霉素C

尚未有商品化的对照品，但发现新的新霉素C与B工作曲线是相同的。因此对

新霉素C的工作曲线可以通过使用纯度更高的新霉素B来完成。此外，用薄层

扫描法还可以检测存在于任何肉产品中的红霉素与泰乐霉素，该法可靠、灵敏，

可作为这些物质的常规检测方法。

5.中药的TLC指纹图谱鉴别色谱指纹图谱除液相色谱外，还有最常用于中药

鉴别的TLC。TLC指纹图谱是以原来中国药典的薄层色谱鉴别为依据，通过薄层

色谱扫描仪建立的。TLC分析成本低，同一TLC板上可以同时分析至少10个样

品，高效TLC色谱斑可以容纳更多的样品，色谱的彩色图像特征性强，极易在

同一TLC板上平行观察、辨认和比较。此外由于常用的是正相色谱，展开剂由

各种有机溶剂以不同配比配置，选择范围广，组成十分灵活，显色后色谱图像

的质量信息更加丰富。例如白芍总苷，它的HPLC指纹图谱共检出8个色谱特

征峰，而TLC色谱指纹图谱在香草醛-硫酸试剂显色的条件下，可见原点部位在

内的大约15个有色条斑。所以说，TLC指纹图谱库是一种很好的有利于推进我

国中药现代化进程的方法。

参考文献：《药物分析》第六版主编：刘文英人民卫生出版社

《药物分析》主编：朱景申中国医药科技出版社

《现代药物分析》编著：王道武张龙化学工业出版社

《色谱在药物分析中的应用》

编著：田颂九胡昌勤马双成等化学工业出版社《现代色谱法及其在药物分析中的应用》

主编：孙毓庆副主编：王延宗科学出版社《药物分析实验方法学》主编：傅强人民卫生出版社

《药物分析检测技术》主编：揭晶湖北科学技术出版社

《药物分析》主编：赵春杰清华大学出版社

《药学色谱技术》主编：宋航化学工业出版社

《分析化学》第七版主编：李发美人民卫生出版社